---
title: "\"МУК 4.1.1146-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств фамоксадона в воде, почве, клубнях картофеля, зеленой массе, соломе и зерне зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.1146-02"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-1146-02"
---

## "МУК 4.1.1146-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств фамоксадона в воде, почве, клубнях картофеля, зеленой массе, соломе и зерне зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.1146-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств фамоксадона в воде, почве, клубнях картофеля, зеленой массе, соломе и зерне зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Минздравом России)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения (утв. Россельхознадзором 30.07.2009 N 02-03-48/563).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 января 2003 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации

</div>

**Г.Г.ОНИЩЕНКО**


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФАМОКСАДОНА В ВОДЕ,**
**ПОЧВЕ, КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ, СОЛОМЕ И ЗЕРНЕ**
**ЗЕРНОВЫХ КОЛОСОВЫХ КУЛЬТУР МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.1146-02**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

1 января 2003 года

1. <a id="p100006"></a>Методические указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).
2. <a id="p100007"></a>Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.
3. <a id="p100008"></a>Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
4. <a id="p100009"></a>Введены впервые.


## 1. <a id="p100010"></a>Вводная часть


<a id="p100011"></a>Фирма-производитель: Дюпон, США.
<a id="p100012"></a>Торговое название: Танос.
<a id="p100013"></a>Синонимы: JE-874.
<a id="p100014"></a>Название действующего вещества по ИСО: Фамоксадон.
<a id="p100015"></a>Название действующего вещества по IUPAC: 3-анилино-5-метил-5-(4-феноксифенил)-2,4-оксазолидиндион.
<a id="p100016"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100017"></a>    C  H  N O                                          М. м. 374,4
     22 18 2 4
<a id="p100018"></a>    Химически   чистый   фамоксадон   представляет  собой  светлый
кремовый порошок.
                                -7             8
<a id="p100019"></a>    Давление  паров:  6,4  x  10   Ра (4,8 x 10  мм Hq) при 20 °C.
<a id="p100020"></a>    Температура плавления: 140,3 - 141,8 °C.
<a id="p100021"></a>    Коэффициент распределения н-октанол-вода: 4,8 (pH 5); 4,65 (pH
7); 5,55 (pH 9).
<a id="p100022"></a>    Растворимость в воде зависит от кислотности среды и составляет
         -6                            -6
243  x 10    г/л   при pH 5;   111 x 10   г/л при pH 7,  при  pH 9
вещество  быстро  гидролизуется.  Растворимость   в   органических
растворителях (г/л при 20 °C):   ацетон - 274,  ацетонитрил - 125,
гексан - 0,0476, дихлорметан  - 239, метанол - 10,  толуол - 13,3,
этилацетат - 124, н-октанол - 1,78.
<a id="p100023"></a>Фамоксадон не стабилен в водных растворах. Гидролиз наблюдается в диапазоне pH 5 - 9, и время полураспада составляет 41 день, 2 дня и 93 минуты при pH 5,0; 7,0 и 9,0 соответственно. Период полураспада при фотолизе составляет 4,6 дня и 3,9 часа при pH 5 и 7,75 соответственно.
<a id="p100024"></a>Краткая гигиеническая характеристика
<a id="p100025"></a>    Фамоксадон относится к малоопасным соединениям по острой (ЛД
                                                                50
для  крыс  - более 5000 мг/кг)  и дермальной токсичности (ЛД   для
                                                            50
крыс  -  более  2000  мг/кг) и  умеренно  опасным по ингаляционной
(ЛК   (4 часа)   -   5300 мг/куб. м)  токсичности,   не   вызывает
   50
раздражения глаз  и  кожи.
<a id="p100026"></a>В РФ установлены следующие гигиенические нормативы:
<a id="p100027"></a>ДСД - 0,01 мг/кг массы человека;
<a id="p100028"></a>ОДК в почве - 0,1 мг/кг;
<a id="p100029"></a>ПДК в воде водоемов - 0,01 мг/куб. дм;
<a id="p100030"></a>ВМДУ в картофеле - 0,05 мг/кг.
<a id="p100031"></a>Область применения
<a id="p100032"></a>Фамоксадон (JE-874) - фунгицид из группы оксазолидиндионов контактного действия с глубинным эффектом. Является ингибитором митохондриального дыхания, специфически связываясь с активным центром убихинол-цитохром С оксидоредуктазы. Используется в заводских смесях с цимоксанилом и флусилазолом в антирезистентных системах применения фунгицидов.
<a id="p100033"></a>Высокоэффективен против возбудителей из класса оомицетов, в т.ч. против рас возбудителей, устойчивых к фениламидам. Зарегистрирован в России под названием Танос (DPX - КР 481), диспергируемые в воде гранулы, 50% (25% фамоксадона + 25% цимоксанила) на картофеле с нормой расхода 0,6 кг/га, трехкратная обработка за сезон, проходил испытания на огурцах открытого и закрытого грунта.


## 2. <a id="p100034"></a>Методика определения фамоксадона в воде, почве, клубнях картофеля, зеленой массе, соломе и зерне пшеницы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии



### <a id="p100035"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100036"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100037"></a>Методика основана на определении фамоксадона методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, концентрирования экстракта упариванием в вакууме и очистки на колонках с флоризилом. Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

##### <a id="p100038"></a>2.1.2 Метрологическая характеристика метода

<a id="p100039"></a>Метрологическая характеристика метода представлена в табл. 1 - 2.

<div align="right">

<a id="p100040"></a>Таблица 1

</div>


<a id="p100041"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА**


<table>
<colgroup><col width="22%"><col width="12%"><col width="23%"><col width="14%"><col width="12%"><col width="17%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>предел обнаружения, мг/кг (мг/л)</td><td>диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/л)</td><td>среднее значение определения, %</td><td>стандартное отклонение, S</td><td>доверительный интервал среднего результата, %, +/-</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,0002</td><td>0,0002 - 0,002</td><td>84,3</td><td>3,37</td><td>1,58</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>80,1</td><td>1,24</td><td>2,60</td></tr>
<tr><td>Клубни картофеля</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>82,3</td><td>6,420</td><td>3,00</td></tr>
<tr><td>Пшеница (зеленая масса)</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>83,0</td><td>2,46</td><td>1,15</td></tr>
<tr><td>Пшеница (зерно)</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>82,3</td><td>4,46</td><td>2,09</td></tr>
<tr><td>Пшеница (солома)</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>73,4</td><td>3,0</td><td>1,24</td></tr>
</table>


<div align="right">

<a id="p100049"></a>Таблица 2

</div>


<div align="center">

<a id="p100050"></a>**ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФАМОКСАДОНА В ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ, СОЛОМЕ**

</div>

**И ЗЕРНЕ ПШЕНИЦЫ (5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ)**


<table>
<colgroup><col width="15%"><col width="20%"><col width="20%"><col width="22%"><col width="23%"></colgroup>
<tr><td>Среда</td><td>Добавлено, мг/кг (мг/л)</td><td>Обнаружено, мг/кг (мг/л)</td><td>Доверительный интервал, +/-</td><td>Полнота определения, %</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,0002</td><td>0,00164</td><td>0,0059</td><td>81,7</td></tr>
<tr><td></td><td>0,0004</td><td>0,003392</td><td>0,0226</td><td>84,8</td></tr>
<tr><td></td><td>0,001</td><td>0,008554</td><td>0,0309</td><td>85,5</td></tr>
<tr><td></td><td>0,002</td><td>0,01699</td><td>0,0743</td><td>85,0</td></tr>
<tr><td>среднее</td><td></td><td></td><td></td><td>84,3</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,02</td><td>0,0174</td><td>0,001</td><td>87,0</td></tr>
<tr><td></td><td>0,04</td><td>0,0314</td><td>0,003</td><td>78,5</td></tr>
<tr><td></td><td>0,1</td><td>0,0772</td><td>0,0020</td><td>77,2</td></tr>
<tr><td></td><td>0,2</td><td>0,1556</td><td>0,0021</td><td>77,8</td></tr>
<tr><td></td><td>0,1</td><td>0,0846</td><td>0,0103</td><td>84,6</td></tr>
<tr><td>среднее</td><td></td><td></td><td></td><td>81,0</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Клубни картофеля</td><td>0,02</td><td>0,0166</td><td>0,0011</td><td>83,0</td></tr>
<tr><td>0,04</td><td>0,0342</td><td>0,0043</td><td>85,5</td></tr>
<tr><td></td><td>0,1</td><td>0,0762</td><td>0,0020</td><td>76,2</td></tr>
<tr><td></td><td>0,2</td><td>0,1686</td><td>0,0121</td><td>84,8</td></tr>
<tr><td>среднее</td><td></td><td></td><td></td><td>82,3</td></tr>
<tr><td>Зеленая масса пшеницы</td><td>0,05</td><td>0,04</td><td>0,001</td><td>84,4</td></tr>
<tr><td></td><td>0,1</td><td>0,08</td><td>0,002</td><td>81,8</td></tr>
<tr><td></td><td>0,2</td><td>0,16</td><td>0,002</td><td>80,3</td></tr>
<tr><td></td><td>0,5</td><td>0,42</td><td>0,01</td><td>84,6</td></tr>
<tr><td>среднее</td><td></td><td></td><td></td><td>83,0</td></tr>
<tr><td>Зерно пшеницы</td><td>0,05</td><td>0,04</td><td>0,003</td><td>74,0</td></tr>
<tr><td></td><td>0,1</td><td>0,08</td><td>0,003</td><td>80,8</td></tr>
<tr><td></td><td>0,2</td><td>0,17</td><td>0,005</td><td>86,1</td></tr>
<tr><td>среднее</td><td></td><td></td><td></td><td>82,3</td></tr>
<tr><td>Солома пшеницы</td><td>0,05</td><td>0,04</td><td>0,002</td><td>74,0</td></tr>
<tr><td></td><td>0,1</td><td>0,07</td><td>0,002</td><td>73,2</td></tr>
<tr><td></td><td>0,2</td><td>0,15</td><td>0,007</td><td>73,2</td></tr>
<tr><td></td><td>0,4</td><td>0,29</td><td>0,008</td><td>71,8</td></tr>
<tr><td></td><td>0,5</td><td>0,39</td><td>0,017</td><td>77,9</td></tr>
<tr><td>среднее</td><td></td><td></td><td></td><td>73,4</td></tr>
</table>



##### <a id="p100083"></a>2.1.3 Избирательность метода

<a id="p100084"></a>В прилагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых при выращивании пшеницы.


### <a id="p100085"></a>2.2. Реактивы, растворы, материалы и оборудование



##### <a id="p100086"></a>2.2.1 Реактивы, материалы и растворы

<a id="p100087"></a>Фамоксадон, аналитический стандарт с
содержанием д.в. 99,6%, фирма Дюпон
<a id="p100088"></a>Ацетонитрил                                ТУ 6-09-3534-87
<a id="p100089"></a>Бумага индикаторная универсальная
<a id="p100090"></a>Вода бидистиллированная [<*>](#p100103), ГОСТ 7602-72
деионизированная
<a id="p100091"></a>н-Гексан, ч                                ТУ 6-09-3375
<a id="p100092"></a>Гелий газообразный очищенный марки "А"     ТУ 51-940-80

<a id="p100093"></a>Кислота ортофосфорная, хч ГОСТ 6552-80
<a id="p100094"></a>Калий марганцово-кислый, чда ГОСТ 20490-75
<a id="p100095"></a>Натрий серно-кислый, безводный, хч [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100096"></a>Натрий хлористый, хч
<a id="p100097"></a>Подвижная фаза для ВЭЖХ:                   ацетонитрил - 650 мл +
                                           3,1 мМ
                                           ортофосфорная кислота
                                           (H PO ) в воде - 350 мл
                                             3  4
<a id="p100098"></a>Флоризил для колоночной хроматографии,
60 - 100 меш, фирма Мерк
<a id="p100099"></a>Фильтры бумажные "красная лента" ТУ-6-09-1678-86
<a id="p100100"></a>Фильтры для очистки растворителей
диаметром 20 мм с отверстиями 20 мкм,
фирма Уотерс
<a id="p100101"></a>Этиловый эфир уксусной кислоты
(этилацетат)

<a id="p100102"></a>

---

<a id="p100103"></a><*> Бидистиллят кипятят в течение 6 часов с марганцово-кислым калием, добавленным из расчета 1 г/л, и затем перегоняют.


##### <a id="p100104"></a>2.2.2 Приборы и оборудование

<a id="p100105"></a>Хроматограф жидкостный Уотерс 510  с
ультрафиолетовым детектором, с изменяемой
длиной волны и чувствительностью не выше 0,0025
единиц адсорбции на шкалу или другой
аналогичного типа
<a id="p100106"></a>Колонка хроматографическая стальная
длиной  250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм,
содержащая Zorbax SB С18, зернением 2 мкм
<a id="p100107"></a>Ванна ультразвуковая
<a id="p100108"></a>Весы аналитические ВЛА-200 или аналогичные         ГОСТ 34104-80Е
<a id="p100109"></a>Весы лабораторные общего назначения с ГОСТ 19491-74
наибольшим пределом взвешивания до 500 г
и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г
<a id="p100110"></a>Воронки делительные на 250 и 500 мл ГОСТ 25336-82Е
<a id="p100111"></a>Воронки конические стеклянные диаметром 30 - 33 мм ГОСТ 25336-82Е
<a id="p100112"></a>Встряхиватель механический или аналогичный         ТУ 64-673М
<a id="p100113"></a>Колбы конические, плоскодонные на 250 и 500 мл     ГОСТ 9737-70
<a id="p100114"></a>Колбы мерные на 25, 50 и 100 мл                    ГОСТ 1770-74
<a id="p100115"></a>Концентраторы грушевидные КТУ-100-14/19            ГОСТ 10394-72
<a id="p100116"></a>Микрошприц для жидкостного хроматографа
на 50 - 100 мкл
<a id="p100117"></a>Насос водоструйный                                 ГОСТ 10696-75
<a id="p100118"></a>Пипетки мерные на 0,2; 1,0; 5,0; 10,0 и 25,0 мл [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74)
<a id="p100119"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М             ТУ 25-11-917-74
или аналогичный
<a id="p100120"></a>Стаканы стеклянные на 100 - 500 мл                 ГОСТ 25366-80Е


### <a id="p100121"></a>2.3. Подготовка к определению



##### <a id="p100122"></a>2.3.1 Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии

<a id="p100123"></a>Колонку Zorbax SB C18 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при t° = 25 °C и скорости потока подвижной фазы 1 мл/мин. в течение 3 - 4 часов.

##### <a id="p100124"></a>2.3.2 Приготовление стандартных растворов

<a id="p100125"></a>Взвешивают 50 мг фамоксадона в мерной колбе объемом 50 мл. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом (стандартный раствор N 1, концентрация фамоксадона 1 мг/мл). Затем методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 1,0; 0,5; 0,2; 0,1 мг/мл вещества, и используют эти растворы для построения калибровочного графика и фортификации образцов.

##### <a id="p100126"></a>2.3.3 Приготовление растворов для жидкостной хроматографии

<a id="p100127"></a>Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегнанные ацетонитрил и дистиллированную воду.
<a id="p100128"></a>    В  плоскодонную колбу объемом 1 л помещают 650 мл ацетонитрила
и 350 мл 3,1 мМ H PO  в воде <*>.  Смесь  тщательно  перемешивают,
                 3  4
затем   пропускают  через  нее  газообразный  гелий  со  скоростью
20 мл/мин. в течение 5 минут, после чего помещают в ультразвуковую
ванну для удаления растворенного гелия  на  1  минуту.  Полученный
раствор используют в качестве подвижной фазы.

<a id="p100129"></a>

---

<a id="p100130"></a><*> Для приготовления 3,1 мМ ортофосфорной кислоты прибавляют к 4 л воды 840 мкл концентрированной ортофосфорной кислоты.


##### <a id="p100131"></a>2.3.4 Построение калибровочного графика

<a id="p100132"></a>Для построения калибровочного графика вводят в хроматограф последовательно по 5 раз по 20 мкл каждого из полученных четырех растворов, измеряют высоту или площадь пиков, рассчитывают среднее значение высоты пика или его площади для каждой концентрации и строят график зависимости высоты пика или площади от концентрации фамоксадона мкг/мл.

##### <a id="p100133"></a>2.3.5 Подготовка колонки для очистки экстракта

<a id="p100134"></a>В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 4 г флоризила, дезактивированного путем добавления 5% очищенной воды. Сверху на флоризил насыпают 1 г безводного сульфата натрия. Перед использованием колонку промывают 10 мл смеси гексан-этилацетат в соотношении 3:1, избыток растворителя с колонки удаляют путем продавливания воздуха. Затем колонку дополнительно промывают 10 мл гексана. Перед внесением образца колонку увлажняют 5 мл гексана.
<a id="p100135"></a>*Примечание.* Для дезактивации вначале флоризил выдерживают в сушильном шкафу при температуре 120 °C в течение 4 часов, а затем при постоянном перемешивании в стеклянной колбе с притертой пробкой к 95 г флоризила (60 - 100 меш, Merck) добавляют постепенно 5 г очищенной воды.


##### <a id="p100136"></a>2.3.6 Проверка хроматографического поведения фамоксадона на колонке

<a id="p100137"></a>В круглодонную колбу объемом 50 мл вносят 1 мл стандартного раствора фамоксадона с концентрацией 1 мкг/мл и упаривают досуха при температуре не выше 30 °C. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл этилацетата, затем добавляют в колбу 5 мл гексана и полученную смесь вносят на колонку. Затем промывают колонку 15 мл смеси гексан-этилацетат 10:1 и элюат отбрасывают. Фамоксадон элюируют с колонки последовательно 6-ю порциями объемом 5 мл смеси гексана с этилацетатом в соотношении 3:1, каждую порцию собирают отдельно в концентраторы и упаривают досуха при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100138"></a>Сухой остаток каждой фракции растворяют в 1 мл ацетонитрила и 20 мкл пробы вводят в хроматограф.
<a id="p100139"></a>Рассчитывают содержание вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюата.
<a id="p100140"></a>*Примечание.* Хроматографическое поведение фамоксадона на колонке обязательно проверяют при отработке методики и каждый раз при использовании новой партии флоризила.


### <a id="p100141"></a>2.4. Отбор проб


<a id="p100142"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79). Пробы зеленой массы пшеницы и клубней картофеля хранят в морозильной камере при температуре -18 °C. Для длительного хранения пробы почвы, соломы и зерна подсушивают при комнатной температуре в отсутствии прямого солнечного света. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм, зерно и солому размалывают на лабораторной мельнице.


### <a id="p100143"></a>2.5. Описание определения



##### <a id="p100144"></a>2.5.1 Вода

<a id="p100145"></a>2.5.1.1. Экстракция. Пробу воды объемом 500 мл помещают в делительную воронку емкостью 1000 мл и трижды экстрагируют хлористым метиленом порциями по 50 мл, встряхивая каждый раз воронку в течение 1 - 2 мин. После разделения фаз в воронке нижний слой сливают в концентратор, пропуская его через безводный сульфат натрия. Объединенный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100146"></a>2.5.1.2. Очистка экстракта на колонке. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл этилацетата, обмывая стенки концентратора, затем в концентратор прибавляют 5 мл гексана, тщательно перемешивают и полученную смесь вносят на колонку. Затем колонку промывают последовательно 15 мл смеси гексан-этилацетат в соотношении 10:1 и 10 мл смеси гексан-этилацетат в соотношении 3:1 и элюат отбрасывают. Фамоксадон элюируют с колонки 20 мл смеси гексан-этилацетат в соотношении 3:1, собирают в концентратор и упаривают досуха при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100147"></a>Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетонитрила и 20 мкл раствора вводят в хроматограф.

##### <a id="p100148"></a>2.5.2 Почва

<a id="p100149"></a>2.5.2.1. Экстракция. Образец почвы массой 10 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл, добавляют 10 мл дистиллированной воды и дают выстояться в течение 10 минут. Затем в колбу прибавляют 30 мл смеси ацетонитрила с водой в соотношении 8:2 и встряхивают колбу на механическом встряхивателе в течение 30 мин. Экстракт переносят в центрифужный стакан и центрифугируют при 2500 об./мин. 5 мин. Супернатант фильтруют в делительную воронку объемом 250 мл через фильтр "красная лента". Фамоксадон экстрагируют еще 2 раза, используя по 30 мл смеси ацетонитрил-вода 8:2, встряхивая в течение 0,5 часа. Экстракты объединяют и переносят в делительную воронку объемом 250 мл.
<a id="p100150"></a>2.5.2.2. Предварительная очистка экстракта. К полученному экстракту в делительной воронке добавляют 5 г хлорида натрия, интенсивно встряхивают и оставляют на 10 минут. По истечении этого времени и после разделения слоев в делительной воронке нижний водный слой с остатком нерастворившегося хлорида натрия отбрасывают. К оставшемуся в делительной воронке ацетонитрильному экстракту прибавляют 40 мл гексана и воронку интенсивно встряхивают в течение 2 мин. После разделения слоев нижнюю ацетонитрильную фракцию собирают в концентратор, пропуская через 10 г безводного сульфата натрия. Затем осушитель промывают 10 мл ацетонитрила. Объединенный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100151"></a>Сухой остаток растворяют в 5 мл ацетонитрила, добавляют в концентратор 50 мл дистиллированной воды и полученную смесь переносят в делительную воронку. Фамоксадон экстрагируют хлористым метиленом трижды, используя по 20 мл растворителя и интенсивно встряхивая смесь в течение 2 мин. Нижний метиленхлоридный слой объединяют в концентраторе, пропуская через 10 г безводного сульфата натрия. Экстракт упаривают досуха на роторном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100152"></a>Затем проводят очистку образца на колонке с флоризилом, как указано в [п. 2.5.1.2](#p100146).

##### <a id="p100153"></a>2.5.3 Картофель (клубни)

<a id="p100154"></a>Навеску 10 г измельченных клубней картофеля помещают в плоскодонную стеклянную колбу на 250 мл, добавляют 30 мл ацетонитрила и встряхивают смесь в течение 0,5 часа. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя 30 мл и 10 мл ацетонитрила и встряхивая смесь 30 и 5 мин соответственно. Экстракт фильтруют и объединяют в делительную воронку. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя по 50 мл ацетонитрила. Экстракты объединяют в делительной воронке. Далее поступают, как описано в [п. 2.5.2.2](#p100150).

##### <a id="p100155"></a>2.5.4 Зеленая масса пшеницы

<a id="p100156"></a>Навеску 10 г измельченной зеленой массы пшеницы помещают в плоскодонную стеклянную колбу на 250 мл, добавляют 100 мл ацетонитрила и встряхивают смесь в течение 0,5 часа. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя по 50 мл ацетонитрила и встряхивая смесь каждый раз по 15 мин. Экстракты фильтруют и объединяют в делительной воронке.
<a id="p100157"></a>К полученному экстракту в делительной воронке добавляют 5 г хлорида натрия, интенсивно встряхивают и оставляют на 10 минут. По истечении этого времени и после разделения слоев в делительной воронке нижний водный слой с остатком нерастворившегося хлорида натрия отбрасывают. К оставшемуся в делительной воронке ацетонитрильному экстракту прибавляют 50 мл гексана и воронку интенсивно встряхивают в течение 2 мин. После разделения слоев нижнюю ацетонитрильную фракцию собирают в концентратор, пропуская через 10 г безводного сульфата натрия. Затем осушитель промывают 10 мл ацетонитрила. Объединенный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C. Далее проводят очистку экстракта на колонке, как указано в разделе [2.5.1.2](#p100146).

##### <a id="p100158"></a>2.5.5 Солома пшеницы

<a id="p100159"></a>Навеску 5 г измельченной соломы помещают в плоскодонную стеклянную колбу на 250 мл, добавляют 100 мл ацетонитрила и встряхивают смесь в течение 0,5 часа. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя по 50 мл ацетонитрила и встряхивая смесь каждый раз по 15 мин. Экстракты фильтруют и объединяют в делительной воронке.
<a id="p100160"></a>К полученному экстракту в делительной воронке добавляют 50 мл гексана и воронку интенсивно встряхивают в течение 2 мин. После разделения слоев нижнюю ацетонитрильную фракцию собирают в концентратор, пропуская через 10 г безводного сульфата натрия. Затем осушитель промывают 10 мл ацетонитрила. Объединенный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100161"></a>Затем проводят очистку образца на колонке с флоризилом, как указано в [п. 2.5.1.2](#p100146).

##### <a id="p100162"></a>2.5.6 Зерно

<a id="p100163"></a>Навеску 10 г измельченного зерна помещают в плоскодонную стеклянную колбу на 250 мл, добавляют 50 мл ацетонитрила и встряхивают смесь в течение 0,5 часа. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя по 50 мл ацетонитрила и встряхивая смесь каждый раз по 15 мин. Экстракты фильтруют и объединяют в делительной воронке.
<a id="p100164"></a>К полученному экстракту в делительной воронке добавляют 50 мл гексана и воронку интенсивно встряхивают в течение 2 мин. После разделения слоев нижнюю ацетонитрильную фракцию собирают в концентратор, пропуская через 10 г безводного сульфата натрия. Затем осушитель промывают 10 мл ацетонитрила. Объединенный экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
<a id="p100165"></a>Затем проводят очистку образца на колонке с флоризилом, как указано в [п. 2.5.1.2](#p100146).


### <a id="p100166"></a>2.6. Условия хроматографирования и обработка результатов



##### <a id="p100167"></a>2.6.1 Условия хроматографирования

<a id="p100168"></a>Хроматограф "Waters" или другой с аналогичными характеристиками с ультрафиолетовым детектором с измеряемой длиной волны
<a id="p100169"></a>    Колонка стальная Zorbax SB-C18      4,6 мм x 25 см
<a id="p100170"></a>    Температура колонки                 25 °C
<a id="p100171"></a>    Подвижная фаза                      ацетонитрил-3,1 мМ H PO
                                                            3  4
                                        в воде в соотношении 65:35
<a id="p100172"></a>    Скорость потока элюента             1 мл/мин.
<a id="p100173"></a>    Рабочая длина волны                 255 нм
<a id="p100174"></a>    Чувствительность                    0,0025 ед. оптической
                                        плотности на шкалу
<a id="p100175"></a>    Объем вводимой пробы                20 мкл
<a id="p100176"></a>    Время удерживания фамоксадона       9,9 мин.
<a id="p100177"></a>    Линейный диапазон детектирования    2 - 20 нг

##### <a id="p100178"></a>2.6.2 Обработка результатов анализа

<a id="p100179"></a>    Содержание фамоксадона рассчитывают по формуле:

                          S   x A x V
                           пр
<a id="p100180"></a>                      X = -----------,
                          100S   x m
                              ст

<a id="p100181"></a>    где:
<a id="p100182"></a>    X - содержание фамоксадона в пробе, мг/кг или мг/л;
<a id="p100183"></a>    S   - высота (площадь) пика стандарта, мм;
     ст
<a id="p100184"></a>    S   - высота (площадь) пика образца, мм;
     пр
<a id="p100185"></a>    A - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;
<a id="p100186"></a>    V - объем  экстракта, подготовленного для хроматографирования,
мл;
<a id="p100187"></a>    m - масса анализируемого образца, г (мл);

<div align="center">

<a id="p100188"></a>    P - содержание фамоксадона в аналитическом стандарте, %.

</div>



## 3. <a id="p100189"></a>Требования техники безопасности


<a id="p100190"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.


## 4. <a id="p100191"></a>Разработчики


<a id="p100192"></a>Калинин В.А., профессор, к. с-х. н.; Калинина Т.С, к. с-х. н.; Довгилевич Е.В., к. биол. н.; Довгилевич А.В., к. хим. н.; Устименко Н.В., к. биол. н.
<a id="p100193"></a>Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева. 127550, Москва, Тимирязевский пр., 2, кафедра химических средств защиты растений. Телефон: 976-43-26.



<a id="p100194"></a>

---