МУК 4.1.1143-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций тиаметоксама методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе. Методические указания

(утв. Минздравом России)

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ ТИАМЕТОКСАМА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ И АТМОСФЕРНОМ ВОЗДУХЕ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

1. Методические указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).

2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.

3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

4. Введены впервые.

1. Вводная часть

Фирма-производитель: НОВАРТИС АГРО АГ (Швейцария).

Торговое название: АКТАРА.

Действующее вещество: тиаметоксам (ЦГА 293343).

3-(2-хлор-тиазол-5-илметил)-5-метил-[1,3,5]оксадиазинан-4-илиден-N-нитроамин (ИЮПАК).

Структурная формула (не приводится).

    C H  ClN O S                                       М. м. 291,7
     8 10   5 3

Белый кристаллический порошок без запаха.

Температура плавления: 139,1 °C. -9

    Давление паров при 25 °C: 6,6 x 10   Па.
    Коэффициент распределения н-октанол/вода: К log P   = -0,13.

                                                 ow

Растворимость при 25 °C (г/л): ацетонитрил — 78, ацетон — 42,5, дихлорметан — 43, метанол — 10,2, этилацетат — 5,7, толуол — 0,6, вода — 4,1.

Стабильность к гидролизу при 25 °C: DT более 1 года (pH 5 и 50 7), 4,2 дня (pH 9).

В присутствии света в водных фотолитических условиях тиаметоксам быстро деградирует с периодом полураспада 2,3 дня.

Может присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде аэрозоля.

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность (LD ) для крыс — 1560 мг/кг; 50 острая дермальная токсичность (LD ) для крыс — более 2000 мг/г; 50 острая ингаляционная токсичность (LC ) для крыс — 3720 мг/куб. м 50 воздуха. Тиаметоксам не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз кролика. LC для рыб — более 100 мг/л 50 (96 ч).

Гигиенические нормативы

ОБУВ в воздухе рабочей зоны — 0,4 мг/куб. м.

ОБУВ в атмосферном воздухе — 0,01 мг/куб. м.

Область применения препарата

Тиаметоксам является системным инсектицидом. Он воздействует на никотиново-ацетилхолиновый рецептор нервной системы насекомых, обладает быстрой желудочной и контактной активностью. Вещество обладает широким спектром активности против сосущих, грызущих и почвенных насекомых на овощных, зерновых и цветочных культурах, фруктовых и цитрусовых деревьях, хлопчатнике и рисе.

2. Методика измерения концентраций тиаметоксама в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором.

Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры «синяя лента». Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

2.1.2 Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы.

2.1.3 Метрологическая характеристика метода (P = 0,95)

Число параллельных определений              6
Предел обнаружения в                        1 нг

хроматографируемом объеме

Предел обнаружения в воздухе 0,005 мг/куб. м при отборе 20 куб. дм воздуха

Диапазон определяемых концентраций          0,005 - 0,05 мг/куб. м
Среднее значение определения                95,0%

Стандартное отклонение (S)                  6,85%

Относительное стандартное отклонение (DS)   2,96%

Доверительный интервал среднего             7,61%

Суммарная погрешность измерения не превышает 23%

2.2. Реактивы и материалы

Тиаметоксам с содержанием д.в. 99,3% (Новартис, Швейцария)

Ацетон, чда ГОСТ 2603-79

Ацетонитрил для жидкостной хроматографии ТУ 6-09-4326-76

Вода дистиллированная, деионизованная или перегнанная над KMnO 4

Спирт метиловый, хч                                ГОСТ 6995-77

Бумажные фильтры "синяя лента", обезболенные,      ТУ 6-09-2678-77

ацетонитрилом

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором фирмы Altex (США) или аналогичный

Хроматографическая колонка стальная длиной 20 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Лихросорбом Р8, зернением 7 мкм

Хроматографическая колонка стальная длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Диасорбом-130-С16 Т или Диасорбом-130-С8 Т, зернением 7 мкм (АО БиоХимМак, РФ; 119899, Москва, Ленинские горы)

Микрошприц для жидкостного хроматографа вместимостью 50 — 100 мкл

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М ТУ 25-11-917-76 или аналогичный

Весы аналитические типа ВЛА-200                   ГОСТ 34104-80Е
Насос водоструйный                                ГОСТ 10696-75
Аспирационное устройство типа ЭА-1                ТУ 25-11-1414-78

или аналогичное

Барометр                                          ТУ 2504-1797-75
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2,             ГОСТ 215-73Е

цена деления 1 °C, пределы измерения 0 — 55 °C

Колбы мерные вместимостью 100 и 1000 мл           ГОСТ 1770-74
Цилиндры мерные вместимостью 10, 25 и 500 мл      ГОСТ 1770-74Е
Колбы грушевидные со шлифом вместимостью 100 мл   ГОСТ 10394-72

Пробирки центрифужные ГОСТ 25336-82Е

Стаканы химические вместимостью 100 мл ГОСТ 25336-82Е

Пипетки вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл ГОСТ 20292-74

Воронки химические конусные ГОСТ 25336-82Е диаметром 34 — 40 мм

Груша резиновая

Фильтродержатели

Стеклянные палочки

2.4. Отбор проб

Отбор проб воздуха рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны» или ГОСТ 17.2.4.02-81 «ОПА. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест».

Воздух со скоростью 4 л/мин. пропускают через фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации вещества на уровне 0,005 мг/куб. м следует отобрать 20 л воздуха.

Фильтры с отобранными пробами, помещенные в герметически закрываемые склянки, можно хранить в морозильной камере при температуре -12 °C в течение 30 дней, в холодильнике при 4 — 6 °C — в течение 7 дней.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1 Очистка растворителей

и  перегоняют  в  соответствии  с типовыми методиками. Ацетонитрил
сушат   над   пентоксидом   фосфора   и   перегоняют;   отогнанный
растворитель  повторно  перегоняют  над  углекислым калием. Ацетон
очищают  перегонкой  над  перманганатом  калия  и  поташом (на 1 л
ацетона 10 г KMnO  и 2 г K CO ).
                 4        2  3

2.5.2 Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

Отмеряют 330 мл метанола, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, добавляют 670 мл бидистиллированной или деионизованной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

2.5.3 Кондиционирование колонки

Промыть колонку для ВЭЖХ смесью метанол-вода (33:67 по объему) в течение 30 — 45 мин. при скорости подачи растворителя 0,7 мл/мин. Включить детектор и подождать стабилизации базовой линии (5 — 15 мин.).

2.5.4 Приготовление стандартных растворов

Основной стандартный раствор тиаметоксама с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 99,3% д.в., в метаноле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в морозильной камере при -12 °C не более месяца.

Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,02; 0,04; 0,1 и 0,2 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора тиаметоксама соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.2). Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре не выше 4 °C не более 2 дней.

2.5.5 Построение калибровочного графика

Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 50 мкл рабочего стандартного тиаметоксама с концентрацией 0,02; 0,04; 0,1 и 0,2 мкг/мл.

Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации тиаметоксама в растворе в мкг/мл.

2.6. Описание определения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл ацетонитрила, помещают на встряхиватель на 10 — 12 минут. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетонитрила объемом 10 мл.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 5 мл подвижной фазы для ВЭЖХ (п. 2.5.2), фильтруют или центрифугируют для удаления взвеси и хроматографируют.

2.7. Условия хроматографирования

2.7.2 Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США)

Колонка стальная длиной 20 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Лихросорбом RP8, зернением 7 мкм

    Температура колонки             комнатная
    Подвижная фаза                  метанол-вода (33:67 по объему)
    Скорость потока элюента         0,7 мл/мин.
    Рабочая длина волны             255 нм
    Чувствительность                0,01 ед. абсорбции на шкалу
    Объем вводимой пробы            50 мкл
    Время удерживания               5,14 - 5,62 мин.

тиаметоксама

Линейный диапазон 110 нг детектирования

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,2 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.2).

Альтернативные неподвижные фазы:

• Хроматографическая колонка стальная (15 см x 4 мм), заполненная Диасорбом-130-С8 Т (5 мкм).

Условия хроматографирования те же.

Время удерживания тиаметоксама: около 5 мин. 30 с.

• Хроматографическая колонка стальная (15 см x 4 мм), заполненная Диасорбом-130-С16 Т (7 мкм).

Условия хроматографирования те же.

Время удерживания тиаметоксама: около 5 мин.

2.8. Обработка результатов анализа

Содержание тиаметоксама рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                                W

X = C -, V

где:

X — содержание тиаметоксама в пробе воздуха, мг/куб. м;

C — концентрация тиаметоксама в хроматографируемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;

W — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;

V — объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °C), куб. дм.

3. Требования техники безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.

4. Разработчики

Дубовая Л.В., Макеев А.М., к. биол. н.

ВНИИ фитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел.: 592-92-20.