---
title: "\"МУК 4.1.1142-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств тиаметоксама и его метаболита (ЦГА 322704) в воде, почве, картофеле, зерне и соломе зерновых колосовых культур, яблоках, огурцах, томатах, перце, баклажанах, горохе и сахарной свекле методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.1142-02"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-1142-02"
---

## "МУК 4.1.1142-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств тиаметоксама и его метаболита (ЦГА 322704) в воде, почве, картофеле, зерне и соломе зерновых колосовых культур, яблоках, огурцах, томатах, перце, баклажанах, горохе и сахарной свекле методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.1142-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств тиаметоксама и его метаболита (ЦГА 322704) в воде, почве, картофеле, зерне и соломе зерновых колосовых культур, яблоках, огурцах, томатах, перце, баклажанах, горохе и сахарной свекле методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Минздравом России)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения (утв. Россельхознадзором 30.07.2009 N 02-03-48/563).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 января 2003 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ТИАМЕТОКСАМА**
**И ЕГО МЕТАБОЛИТА (ЦГА 322704) В ВОДЕ, ПОЧВЕ, КАРТОФЕЛЕ,**
**ЗЕРНЕ И СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ КОЛОСОВЫХ КУЛЬТУР, ЯБЛОКАХ, ОГУРЦАХ,**
**ТОМАТАХ, ПЕРЦЕ, БАКЛАЖАНАХ, ГОРОХЕ И САХАРНОЙ СВЕКЛЕ**
**МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.1142-02**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

1 января 2003 года

1. <a id="p100006"></a>Методические указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).
2. <a id="p100007"></a>Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.
3. <a id="p100008"></a>Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
4. <a id="p100009"></a>Введены впервые.


## 1. <a id="p100010"></a>Вводная часть


<a id="p100011"></a>Фирма-производитель: Сингента Агросервисиз АГ (Швейцария).
<a id="p100012"></a>Торговое название: АКТАРА.
<a id="p100013"></a>Действующее вещество: тиаметоксам (ЦГА 293343).
<a id="p100014"></a>3-(2-хлор-тиазол-5-илметил)-5-метил-[1,3,5]оксадиазинан-4-илиден-N-нитроамин (ИЮПАК).
<a id="p100015"></a>3-[(2-хлор-5-тиазолил)метил]тетрагидро-5-метил-N-нитро-4H-1,3,5-оксадиазин-4-имин (С.А.).
<a id="p100016"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100017"></a>    C H  ClN O S                                       М. м. 291,7
     8 10   5 3
<a id="p100018"></a>Белый кристаллический порошок без запаха.
<a id="p100019"></a>Температура плавления: 139,1 °C.
                                      -9
<a id="p100020"></a>    Давление паров при 25 °C: 6,6 x 10   Па.
<a id="p100021"></a>    Коэффициент распределения н-октанол/вода: K   log P = -0,13.
                                               ow
<a id="p100022"></a>Растворимость (г/л) при 25 °C: ацетонитрил - 78, ацетон - 42,5, дихлорметан - 43, метанол - 10,2, этилацетат - 5,7, толуол - 0,6, вода - 4,1.
<a id="p100023"></a>    Стабильность  к гидролизу при 25 °C: DT   больше 1 года при pH
                                           50
5 и 7; 4,2 дня при pH 9.
<a id="p100024"></a>В присутствии света в водных фотолитических условиях тиаметоксам быстро деградирует с периодом полураспада 2,3 дня.
<a id="p100025"></a>Краткая токсикологическая характеристика
<a id="p100026"></a>    Острая  пероральная токсичность (LD  ) для крыс -  1560 мг/кг;
                                       50
острая  дермальная токсичность (LD  ) для крыс - более 2000 мг/кг;
                                  50
острая  ингаляционная  токсичность  (LC  )  для крыс - более  3720
                                       50
мг/куб. м воздуха. Тиаметоксам не оказывает раздражающего действия
на  кожу  и  слизистую оболочку глаз кролика. LC   для рыб - более
                                                50
100 мг/л (96 ч).
<a id="p100027"></a>Инсектицид не токсичен для птиц, дафний, земляных червей, почвенных микроорганизмов и токсичен для пчел.
<a id="p100028"></a>Гигиенические нормативы для тиаметоксама в России: ПДК в почве - 0,2 мг/кг; ПДК в воде - 0,01 мг/куб. дм; МДУ для зерна хлебных злаков, клубней картофеля, огурцов и гороха - 0,05; томатов, баклажанов, перца - 0,2; плодовых семечковых - 0,1 мг/кг.
<a id="p100029"></a>Основной метаболит тиаметоксама: ЦГА 322704.
<a id="p100030"></a>N-(2-хлор-тиазол-5-илметил)-N-метил-N-нитро-гуанидин (ИЮПАК).
<a id="p100031"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100032"></a>    C H ClN O S                                        М. м. 249,7
     6 8   5 2
<a id="p100033"></a>Светло-кремовый порошок без запаха.
<a id="p100034"></a>Метаболит не токсичен для рыб, дафний.
<a id="p100035"></a>Другие физико-химические и токсикологические характеристики основного метаболита тиаметоксама отсутствуют.
<a id="p100036"></a>Область применения препарата
<a id="p100037"></a>Тиаметоксам является системным инсектицидом. Он воздействует на никотиново-ацетилхолиновый рецептор нервной системы насекомых, обладает быстрой желудочной и контактной активностью. Вещество обладает широким спектром активности против сосущих, грызущих и почвенных насекомых на овощных, зерновых и цветочных культурах, фруктовых и цитрусовых деревьях, хлопчатнике и рисе.
<a id="p100038"></a>Тиаметоксам весьма лабильное соединение и при попадании в почву или растение в течение нескольких дней метаболизируется с образованием более устойчивого соединения - N-(2-хлор-тиазол-5-илметил)-N-метил-N-нитрогуанидина (ЦГА 322704).


## 2. <a id="p100039"></a>Методика определения остаточных количеств тиаметоксама и его метаболита (ЦГА 322704) в воде, почве, картофеле, зерне и соломе зерновых колосовых культур, яблоках, огурцах, томатах, перце, баклажанах, горохе и сахарной свекле методом высокоэффективной жидкостной хроматографии



### <a id="p100040"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100041"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100042"></a>Метод основан на определении тиаметоксама и его метаболита ЦГА 322704 с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором после экстракции веществ из воды хлористым метиленом, из почвы и растительного материала водным ацетоном, очистки экстрактов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, а также на колонке с силикагелем и концентрирующем патроне Диапак С16.
<a id="p100043"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

##### <a id="p100044"></a>2.1.2 Избирательность метода

<a id="p100045"></a>В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания зерновых, овощных и плодовых культур.

##### <a id="p100046"></a>2.1.3 Метрологическая характеристика метода


<a id="p100047"></a>Таблица 1

<a id="p100048"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ МЕТОДА**


<table>
<colgroup><col width="15%"><col width="15%"><col width="18%"><col width="12%"><col width="12%"><col width="12%"><col width="14%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый</td><td colspan="6">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>объект</td><td>Предел обнаружения, мг/ куб. дм, мг/кг</td><td>Диапазон определяемых концентраций, мг/куб. дм, мг/кг</td><td>Среднее значение определения, %</td><td>Стандартное отклонение, S, %</td><td>Относительное отклонение, %</td><td>Доверительный интервал среднего, %</td></tr>
<tr><td colspan="7">Тиаметоксам</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,0002</td><td>0,0002 - 0,002</td><td>92,7</td><td>2,6</td><td>2,8</td><td>+/- 2,4</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>84,9</td><td>4,0</td><td>4,7</td><td>+/- 3,7</td></tr>
<tr><td>Зерно</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>83,9</td><td>3,2</td><td>3,8</td><td>+/- 3,0</td></tr>
<tr><td>Солома</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>81,6</td><td>4,2</td><td>5,2</td><td>+/- 3,9</td></tr>
<tr><td>Картофель</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>82,6</td><td>4,6</td><td>5,6</td><td>+/- 4,3</td></tr>
<tr><td>Яблоки</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>81,6</td><td>3,9</td><td>4,8</td><td>+/- 4,6</td></tr>
<tr><td>Перец</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>84,7</td><td>4,6</td><td>5,4</td><td>+/- 5,4</td></tr>
<tr><td>Томаты</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>86,3</td><td>5,1</td><td>5,9</td><td>+/- 6,1</td></tr>
<tr><td>Огурцы</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>84,2</td><td>4,4</td><td>5,2</td><td>+/- 5,2</td></tr>
<tr><td>Свекла сахарная (корнеплоды)</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>83,1</td><td>4,2</td><td>5,1</td><td>+/- 4,9</td></tr>
<tr><td>Свекла сахарная (ботва)</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>80,2</td><td>4,5</td><td>5,6</td><td>+/- 6,2</td></tr>
<tr><td>Горох (зерно)</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>87,1</td><td>4,6</td><td>5,3</td><td>+/- 6,4</td></tr>
<tr><td>Баклажаны</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>82,1</td><td>4,1</td><td>5,0</td><td>+/- 5,7</td></tr>
<tr><td colspan="7">Метаболит ЦГА 322704</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,0002</td><td>0,0002 - 0,002</td><td>87,2</td><td>3,1</td><td>3,6</td><td>+/- 2,9</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>84,6</td><td>4,1</td><td>4,9</td><td>+/- 3,8</td></tr>
<tr><td>Зерно</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>83,5</td><td>3,6</td><td>4,3</td><td>+/- 3,4</td></tr>
<tr><td>Солома</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>80,4</td><td>2,9</td><td>3,6</td><td>+/- 2,8</td></tr>
<tr><td>Картофель</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>83,2</td><td>4,9</td><td>5,9</td><td>+/- 4,6</td></tr>
<tr><td>Яблоки</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>83,6</td><td>4,3</td><td>5,1</td><td>+/- 5,1</td></tr>
<tr><td>Перец</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>81,5</td><td>3,8</td><td>4,7</td><td>+/- 4,4</td></tr>
<tr><td>Томаты</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>89,0</td><td>3,6</td><td>4,0</td><td>+/- 4,3</td></tr>
<tr><td>Свекла сахарная (корнеплоды)</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>81,3</td><td>3,8</td><td>4,7</td><td>+/- 4,6</td></tr>
<tr><td>Горох (зерно)</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>78,7</td><td>4,4</td><td>5,6</td><td>+/- 6,0</td></tr>
<tr><td>Огурцы</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>83,9</td><td>4,3</td><td>5,1</td><td>+/- 6,1</td></tr>
<tr><td>Свекла сахарная (ботва)</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>82,1</td><td>4,8</td><td>5,9</td><td>+/- 6,7</td></tr>
</table>


<a id="p100077"></a>Таблица 2

<a id="p100078"></a>ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТИАМЕТОКСАМА (n = 5)


| Матрица | Внесено, мг/куб. дм, мг/кг | Открыто, % | Доверительный интервал среднего, % |
| --- | --- | --- | --- |
| Вода | 0,0002 0,0004 0,001 0,002 | 92,0 90,6 93,0 95,2 | +/- 3,4 +/- 1,8 +/- 1,4 +/- 1,6 |
| Почва | 0,01 0,02 0,05 0,10 | 81,7 85,8 85,0 87,2 | +/- 5,1 +/- 4,3 +/- 3,0 +/- 1,4 |
| Зерно | 0,01 0,02 0,05 0,10 | 82,9 84,6 85,0 83,2 | +/- 4,5 +/- 3,1 +/- 3,0 +/- 3,2 |
| Солома | 0,05 0,10 0,25 0,50 | 76,8 82,7 83,2 83,9 | +/- 4,1 +/- 3,6 +/- 2,4 +/- 1,7 |
| Картофель | 0,01 0,02 0,05 0,10 | 83,1 80,8 81,6 85,0 | +/- 7,4 +/- 4,3 +/- 4,5 +/- 3,2 |
| Яблоки | 0,01 0,02 | 80,0 83,2 |  |
| Перец | 0,01 0,02 | 83,8 85,6 |  |
| Томаты | 0,01 0,02 | 82,5 90,1 |  |
| Огурцы | 0,01 0,02 | 81,0 87,4 |  |
| Свекла сахарная (корнеплоды) | 0,02 0,04 | 82,0 84,3 |  |
| Свекла сахарная (ботва) | 0,02 0,04 | 79,2 81,2 |  |
| Горох (зерно) | 0,01 0,02 | 85,3 88,9 |  |
| Баклажаны | 0,01 0,02 | 82,1 82,1 |  |


<a id="p100116"></a>Таблица 3

<a id="p100117"></a>ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТАБОЛИТА ЦГА 322704 (n = 5)


| Матрица | Внесено, мг/куб. дм, мг/кг | Открыто, % | Доверительный интервал среднего, % |
| --- | --- | --- | --- |
| Вода | 0,0002 0,0004 0,001 0,002 | 92,0 90,6 93,0 95,2 | +/- 3,4 +/- 1,8 +/- 1,4 +/- 1,6 |
| Почва | 0,01 0,02 0,05 0,10 | 81,7 85,8 85,0 87,2 | +/- 5,1 +/- 4,3 +/- 3,0 +/- 1,4 |
| Зерно | 0,01 0,02 0,05 0,10 | 82,9 84,6 85,0 83,2 | +/- 4,5 +/- 3,1 +/- 3,0 +/- 3,2 |
| Солома | 0,05 0,10 0,25 0,50 | 76,8 82,7 83,2 83,9 | +/- 4,1 +/- 3,6 +/- 2,4 +/- 1,7 |
| Картофель | 0,01 0,02 0,05 0,10 | 83,1 80,8 81,6 85,0 | +/- 7,4 +/- 4,3 +/- 4,5 +/- 3,2 |
| Яблоки | 0,01 0,02 | 83,0 84,1 |  |
| Перец | 0,02 0,04 | 81,1 81,9 |  |
| Томаты | 0,01 0,02 | 88,9 89,2 |  |
| Свекла сахарная (корнеплоды) | 0,02 0,04 | 80,1 82,5 |  |
| Горох (зерно) | 0,01 0,02 | 76,2 81,2 |  |
| Огурцы | 0,01 0,02 | 85,1 82,7 |  |
| Свекла сахарная (ботва) | 0,02 0,04 | 79,9 84,3 |  |



### <a id="p100153"></a>2.2. Реактивы, материалы


<a id="p100154"></a>Силикагель для адсорбционной хроматографии

<div align="center">

(Вельм, Германия) I степени активности или<br>
силикагель КСК (60 - 100 меш)<br>
<a id="p100155"></a>Стекловата

</div>

<a id="p100156"></a>Целит 535 (2 - 15 мкм) (Серва, Германия)
или аналогичный
<a id="p100157"></a>Фильтры бумажные "синяя лента"                        ТУ 6-09-1678


### <a id="p100158"></a>2.3. Приборы, аппаратура, посуда


<a id="p100159"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым
детектором фирмы Altex (США) или аналогичный
<a id="p100160"></a>Хроматографическая колонка стальная
длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм,
заполненная Диасорбом-130-С16 Т или
Диасорбом-130-С8 Т (АО БиоХимМак,
РФ; 119899, Москва, Ленинские горы)
<a id="p100161"></a>Шприц для ввода образцов в жидкостный хроматограф
<a id="p100162"></a>Шприц медицинский с разъемом Льюера
для ввода образцов в концентрирующий
патрон Диапак
<a id="p100163"></a>Весы аналитические типа ВЛР-200                    ГОСТ 19401-74
<a id="p100164"></a>Водоструйный насос                                 ГОСТ 10696-75
<a id="p100165"></a>Встряхиватель механический                         ТУ 64-1-1081-73
<a id="p100166"></a>Иономер ЭВ-74 или аналогичный ГОСТ 22261-76
<a id="p100167"></a>Прибор для перегонки при атмосферном давлении
<a id="p100168"></a>Мельница электрическая лабораторная                ТУ 46-22-236-79
или аналогичная
<a id="p100169"></a>Ротационный испаритель тип ИР-1М                   ТУ 25-11-917-76
<a id="p100170"></a>Сито с диаметром отверстий 1 мм
<a id="p100171"></a>Баня водяная                                       ТУ 46-22-603-75
<a id="p100172"></a>Воронка Бюхнера                                    ГОСТ 9147-73
<a id="p100173"></a>Воронки делительные вместимостью 100, 250 и ГОСТ 25336-82
1000 мл
<a id="p100174"></a>Воронки для фильтрования стеклянные                ГОСТ 8613-75
<a id="p100175"></a>Колба Бунзена                                      ГОСТ 5614-75
<a id="p100176"></a>Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 100,      ГОСТ 9737-70
250 и 500 мл
<a id="p100177"></a>Колбы конические с притертыми пробками ГОСТ 25336-82
вместимостью 250 мл
<a id="p100178"></a>Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 и 1000 мл    ГОСТ 1770-74
<a id="p100179"></a>Колбы грушевидные вместимостью 100, 250 и 500 мл ГОСТ 25336-82
<a id="p100180"></a>Пипетки мерные вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл [ГОСТ 20292-74Е](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74)
<a id="p100181"></a>Пробирки градуированные с притертыми пробками      ГОСТ 10515-75
вместимостью 5 и 10 мл
<a id="p100182"></a>Цилиндры мерные вместимостью 50, 100, 250 и        ГОСТ 1770-74
500 мл


### <a id="p100183"></a>2.4. Отбор проб


<a id="p100184"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).
<a id="p100185"></a>Отобранные пробы зерна и соломы хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре не выше 4 °C не более трех месяцев. Плоды, клубни и корнеплоды замораживают при температуре -18 °C и хранят в морозильной камере не более трех месяцев. Пробы воды хранят при температуре не выше 4 °C в течение 3 дней, при температуре -18 °C - в течение месяца.
<a id="p100186"></a>Пробы почвы высушивают при комнатной температуре в отсутствии прямого солнечного света до воздушно-сухого состояния и хранят в темном сосуде не более трех месяцев.
<a id="p100187"></a>Перед анализом зерно и солому размалывают на мельнице, плоды, клубни и корнеплоды измельчают на терке, сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.


### <a id="p100188"></a>2.5. Подготовка к определению



##### <a id="p100189"></a>2.5.1 Подготовка и очистка растворителей и материалов

<a id="p100190"></a>Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Гексан и хлористый метилен встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока свежая порция кислоты не перестанет окрашиваться. Затем растворители последовательно промывают водой, 2%-ным раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего сушат над гидроксидом натрия и перегоняют.
<a id="p100191"></a>    Ацетон  перегоняют  над  перманганатом калия и поташом (на 1 л

<div align="center">

ацетона 10 г KMnO  и 2 г K CO ).

</div>

                 4        2  3
<a id="p100192"></a>Этилацетат промывают равным объемом 5%-ного раствора углекислого натрия, сушат над хлористым кальцием и перегоняют.
<a id="p100193"></a>Силикагель I степени активности встряхивают с двойным объемом очищенного ацетона и затем фильтруют на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Силикагель на фильтре промывают 1,5 объемом ацетона и затем высушивают при температуре 150 °C в течение 1 часа.

##### <a id="p100194"></a>2.5.2 Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

<a id="p100195"></a>При подготовке подвижной фазы для анализа тиаметоксама и его метаболита отмеряют 330 мл метанола, переносят в колбу на 1000 мл, добавляют 670 мл бидистиллированной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

##### <a id="p100196"></a>2.5.3 Кондиционирование колонки

<a id="p100197"></a>Промыть колонку для ВЭЖХ при анализе тиаметоксама или его метаболита смесью метанол-вода (33:67 по объему) в течение 30 минут при скорости подачи растворителя 1 мл/мин. Включить детектор и подождать стабилизации базовой линии (5 - 15 минут).

##### <a id="p100198"></a>2.5.4 Приготовление стандартных растворов

<a id="p100199"></a>Основной стандартный раствор тиаметоксама с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 99,3% д.в., в метаноле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике при температуре 12 °C не более месяца.
<a id="p100200"></a>Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,02; 0,04; 0,10 и 0,20 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора тиаметоксама соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ ([п. 2.5.2](#p100194)). Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре не выше 4 °C не более 2 дней.
<a id="p100201"></a>Основной стандартный раствор метаболита ЦГА 322704 с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 99,0% д.в., в метаноле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике при температуре -12 °C не более 30 дней.
<a id="p100202"></a>Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,02; 0,04; 0,10 и 0,20 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора метаболита соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ ([п. 2.5.2](#p100194)). Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре не выше 4 °C не более 3 дней.

##### <a id="p100203"></a>2.5.5 Построение калибровочного графика

<a id="p100204"></a>Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 50 мкл рабочего стандартного раствора тиаметоксама или метаболита с концентрацией 0,02; 0,04; 0,10 и 0,20 мкг/мл. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации тиаметоксама или метаболита в растворе в мкг/мл.

##### <a id="p100205"></a>2.5.6 Подготовка колонки с силикагелем и концентрирующего патрона Диапак С16 для очистки экстракта

<a id="p100206"></a>При анализе тиаметоксама и его метаболита в нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 0,8 см вставляют тампон из стекловаты, закрывают кран и приливают около 10 мл гексана. Затем в колонку вносят суспензию 5 г силикагеля в 20 мл гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 10 мл смеси гексан-этилацетат (40:60 по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду, после чего она готова к работе.
<a id="p100207"></a>Концентрирующий патрон Диапак С16 промывают последовательно с помощью медицинского шприца 20 мл метанола и 10 мл смеси метанол-вода (20:80 по объему) со скоростью 5 мл/мин.

##### <a id="p100208"></a>2.5.7 Проверка хроматографического поведения тиаметоксама на колонке силикагелем

<a id="p100209"></a>В круглодонную колбу емкостью 10 мл отбирают 0,1 мл стандартного раствора тиаметоксама с концентрацией 10 мкг/мл, отдувают растворитель потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 2 - 3 мл элюента N 2 (смесь гексан-этилацетат, 15:85) и наносят на подготовленную колонку. Промывают колонку 70 мл элюента N 2 и затем 60 мл элюента N 3 (смесь этилацетат-метанол, 80:20) со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 5 мл каждая, упаривают, остаток растворяют в 2,5 мл подвижной фазы для ВЭЖХ ([п. 2.5.2](#p100194)) и анализируют на содержание тиаметоксама по [п. 2.7.1.](#p100226)
<a id="p100210"></a>Фракции, содержащие тиаметоксам, объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 10 мл подвижной фазы для ВЭЖХ и вновь анализируют по [п. 2.7.1.](#p100226) Рассчитывают содержание вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.
<a id="p100211"></a>Аналогичным способом проводится проверка хроматографического поведения метаболита ЦГА 322704 на колонке с силикагелем.
<a id="p100212"></a>Примечание: Профили вымывания тиаметоксама и его метаболита могут меняться при использовании новых партий сорбента и растворителей.


### <a id="p100213"></a>2.6. Описание определения



##### <a id="p100214"></a>2.6.1 Экстракция тиаметоксама и метаболита ЦГА 322704

<a id="p100215"></a>2.6.1.1. Вода. 100 мл предварительно отфильтрованной воды помещают в делительную воронку емкостью 250 мл. Добавляют 30 мл хлористого метилена и встряхивают 1 минуту. Нижний органический слой отделяют, собирая в коническую колбу на 200 мл. Водный слой экстрагируют хлористым метиленом еще дважды (30 + 20 мл). Объединенную органическую фазу пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на роторном вакуумном испарителе досуха при температуре 30 °C. Остаток растворяют в 1 мл подвижной фазы для ВЭЖХ ([п. 2.5.2](#p100194)) и анализируют на содержание тиаметоксама по [п. 2.7.1](#p100226) и метаболита ЦГА 322704 по [п. 2.7.2](#p100240).
<a id="p100216"></a>2.6.1.2. Почва. Навеску (20 г) воздушно-сухой почвы помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 100 мл 50%-ного водного ацетона. Суспензию перемешивают в течение 40 минут на аппарате для встряхивания, добавляют 2 г целита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Почву повторно экстрагируют 50 мл 50%-ного водного ацетона в течение 20 минут и суспензию фильтруют. Из объединенного экстракта отбирают аликвоту раствора (35 мл), эквивалентную 5 г почвы. Дальнейшую очистку экстракта проводят по [п. п. 2.6.2](#p100219) и [2.6.3](#p100221).
<a id="p100217"></a>2.6.1.3. Зерно, солома. Навеску размолотого зерна (10 г) или соломы (5 г) помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 75 мл (100 мл для соломы) 50%-ного водного ацетона и перемешивают в течение 1 часа на аппарате для встряхивания. К суспензии добавляют 2 г целита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Растительный материал на фильтре промывают 30 мл 50%-ного ацетона. Из объединенного экстракта муки или соломы отбирают половину объема раствора, эквивалентную соответственно 5 г зерна или 2,5 г соломы. Дальнейшую очистку экстрактов проводят по [п. п. 2.6.2](#p100219), [2.6.3](#p100221) и [2.6.4](#p100223).
<a id="p100218"></a>2.6.1.4. Плоды, клубни и корнеплоды. Навеску измельченного растительного материала (25 г) заливают 100 мл 50%-ного водного ацетона и гомогенизируют в течение 5 минут при 8000 об./мин. К гомогенату добавляют 2 г целита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Остаток на фильтре промывают 50 мл 50%-ного водного ацетона. Из объединенного экстракта отбирают аликвоту, эквивалентную 5 г растительного материала (для корнеплодов сахарной свеклы отбирают аликвоту, соответствующую 2,5 г). Дальнейшую очистку экстракта проводят по п. п. 2.6.2 и [2.6.3](#p100221).

##### <a id="p100219"></a>2.6.2 Очистка экстрактов

<a id="p100220"></a>Аликвоты растительного (из [п. п. 2.6.1.3](#p100217) и [2.6.1.4](#p100218)) и почвенного (из [п. 2.6.1.2](#p100216)) экстрактов упаривают до водной фазы на роторном испарителе при температуре 40 °C. Водный остаток переносят в делительную воронку вместимостью 100 мл, приливают 15 мл насыщенного раствора хлорида натрия и 15 мл гексана. Смесь встряхивают в течение 1 минуты и гексановый слой отбрасывают. Водную фазу обрабатывают 30 мл хлористого метилена при встряхивании и органический слой собирают в колбу вместимостью 200 мл. Экстракцию хлористым метиленом повторяют еще два раза (30 + 20 мл). Объединенный дихлорметановый экстракт сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30 °C.

##### <a id="p100221"></a>2.6.3 Очистка на колонке с силикагелем

<a id="p100222"></a>Остаток в колбе, полученный при упаривании очищенных по [п. 2.6.2](#p100219) экстрактов растительного материала и почвы, количественно переносят тремя 1-мл порциями смеси гексан-этилацетат (40:60 по объему) в подготовленную хроматографическую колонку ([п. 2.5.6](#p100205)). Колонку промывают 50 мл смеси гексан-этилацетат (30:70 по объему), которые отбрасывают. Метаболит ЦГА 322704 элюируют 50 мл смеси гексан-этилацетат (15:85 по объему), а тиаметоксам 40 мл смеси этилацетат-метанол (80:20 по объему) и элюаты собирают в 100 мл грушевидные колбы. Растворы упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °C, сухие остатки элюатов зерна, почвы, плодов, клубней и корнеплодов растворяют в 2,5 мл подвижной фазы для ВЭЖХ ([п. 2.5.2](#p100194)) и анализируют соответственно на содержание тиаметоксама по [п. 2.7.1](#p100226) и метаболита ЦГА 322704 по [п. 2.7.2](#p100240). Сухой остаток элюата соломы, содержащего тиаметоксам, растворяют в 6,25 мл подвижной фазы для ВЭЖХ и анализируют непосредственно по [п. 2.7.1](#p100226), а сухой остаток элюата соломы, содержащего метаболит ЦГА 322704, дополнительно очищают на концентрирующем патроне Диапак С16.

##### <a id="p100223"></a>2.6.4 Очистка на концентрирующем патроне Диапак

<a id="p100224"></a>Сухой остаток элюата соломы (из п. 2.6.4), содержащего метаболит ЦГА 322704, количественно переносят двумя 1-мл порциями смеси метанол-вода (20:80 по объему) в подготовленный концентрирующий патрон Диапак С16 ([п. 2.5.6](#p100205)) и фильтрат отбрасывают. Метаболит ЦГА 322704 элюируют 5 мл смеси метанол-вода (33:67 по объему) со скоростью 5 мл/мин. Объем элюата доводят подвижной фазой для ВЭЖХ до объема 6,25 мл и анализируют на содержание метаболита ЦГА 322704 по [п. 2.7.2](#p100240).


### <a id="p100225"></a>2.7. Условия хроматографирования



##### <a id="p100226"></a>2.7.1 Тиаметоксам

<div align="center">

<a id="p100227"></a>Жидкостный хроматограф с ультрофиолетовым детектором Altex (США)

</div>

<a id="p100228"></a>Колонка стальная длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Диасорб-130-С16 Т, зернением 7 мкм
<a id="p100229"></a>    Температура колонки             комнатная
<a id="p100230"></a>    Подвижная фаза                  метанол-вода (33:67 по объему)
<a id="p100231"></a>    Скорость потока элюента         0,7 мл/мин.
<a id="p100232"></a>    Рабочая длина волны             255 нм
<a id="p100233"></a>    Чувствительность                0,01 ед. абсорбции на шкалу
<a id="p100234"></a>    Объем вводимой пробы            50 мкл
<a id="p100235"></a>    Время удерживания               около 5 минут
    тиаметоксама
<a id="p100236"></a>    Линейный диапазон               1 - 10 нг
    детектирования
<a id="p100237"></a>    Альтернативная неподвижная      Диасорб-130-С8 Т (5 мкм)
    фаза
<a id="p100238"></a>    Время удерживания               около 5 мин. 30 с
    тиаметоксама
<a id="p100239"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,2 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.

##### <a id="p100240"></a>2.7.2 Метаболит ЦГА 322704

<a id="p100241"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США)
<a id="p100242"></a>Колонка стальная длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Диасорб 130-С16 Т, зернением 7 мкм
<a id="p100243"></a>    Температура колонки             комнатная
<a id="p100244"></a>    Подвижная фаза                  метанол-вода (33:67 по объему)
<a id="p100245"></a>    Скорость потока элюента         0,7 мл/мин.
<a id="p100246"></a>    Рабочая длина волны             270 нм
<a id="p100247"></a>    Чувствительность                0,01 ед. абсорбции на шкалу
<a id="p100248"></a>    Объем вводимой пробы:           50 мкл
<a id="p100249"></a>    Время удерживания метаболита    около 8 мин.
<a id="p100250"></a>    Линейный диапазон               1 - 10 нг
    детектирования
<a id="p100251"></a>    Альтернативная неподвижная      Диасорб-130-С8 Т (5 мкм)
    фаза
<a id="p100252"></a>    Время удерживания метаболита    8 мин. 30 с
<a id="p100253"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,2 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.


### <a id="p100254"></a>2.8. Обработка результатов анализа


<a id="p100255"></a>    Содержание  тиаметоксама и его метаболита рассчитывают методом
абсолютной калибровки по формуле:

                             H  x A x V
                              1
<a id="p100256"></a>                         X = ----------,
                               H  x m
                                0

<a id="p100257"></a>    где:
<a id="p100258"></a>    X - содержание тиаметоксама в пробе, мг/кг или мг/куб. дм;
<a id="p100259"></a>    H  - высота пика образца, мм;
     1
<a id="p100260"></a>    H  - высота пика стандарта, мм;
     0
<a id="p100261"></a>    A - концентрация стандартного раствора тиаметоксама, мкг/мл;
<a id="p100262"></a>    V  - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,
мл;
<a id="p100263"></a>    m - масса или объем анализируемого образца, г или мл.
<a id="p100264"></a>    При  расчете содержания метаболита в эквивалентах тиаметоксама
полученное значение X умножают на 1,17.


## 3. <a id="p100265"></a>Требования техники безопасности


<a id="p100266"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.


## 4. <a id="p100267"></a>Разработчики


<a id="p100268"></a>Дубовая Л.В., Макеев А.М., к. биол. н.
<a id="p100269"></a>ВНИИ фитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел.: 592-92-86.



<a id="p100270"></a>

---