--- title: "\"МУК 4.1.1138-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов в клубнях картофеля, ботве и корнеплодах сахарной и столовой свеклы, моркови и луке методом газожидкостной хроматографии. Методические указания\"" number: "МУК 4.1.1138-02" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-1138-02" --- ## "МУК 4.1.1138-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов в клубнях картофеля, ботве и корнеплодах сахарной и столовой свеклы, моркови и луке методом газожидкостной хроматографии. Методические указания" # "МУК 4.1.1138-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов в клубнях картофеля, ботве и корнеплодах сахарной и столовой свеклы, моркови и луке методом газожидкостной хроматографии. Методические указания" (утв. Минздравом России) > [!IMPORTANT] > Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299). > Документ включен в Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения (утв. Россельхознадзором 30.07.2009 N 02-03-48/563). > Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32). > Документ [введен](#p100002) в действие с 1 января 2003 года.
Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации,
Первый заместитель
Министра здравоохранения
Российской Федерации
**Г.Г.ОНИЩЕНКО** #### 4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ **ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ** **КВИЗАЛОФОП-П-ТЕФУРИЛА И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ В КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ,** **БОТВЕ И КОРНЕПЛОДАХ САХАРНОЙ И СТОЛОВОЙ СВЕКЛЫ, МОРКОВИ** **И ЛУКЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ** **МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.1138-02**
Дата введения
1 января 2003 года
1. Методические указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов). 2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России. 3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
4. Введены впервые.
## 1. Вводная часть Фирма-производитель: Юнироял Кемикал Ко. Инк. Торговое наименование препарата: ПАНТЕРА, КЭ. Действующее вещество (д.в.): квизалофоп-П-тефурил. Название д.в. по номенклатуре ИЮПАК: (R)-2-[4-(6-=хлорхиноксалин-2-илокси)фенокси]пропионовой кислоты тетрагидрофурфуриловый эфир. Структурная формула (не приводится). C H N ClO М. м. 428 22 21 2 5 Кристаллический порошок белого цвета без запаха. -8 Давление паров: < 5,9 x 10 мм Hg при 25 °C. Растворимость (мг/л при 25 °C): в воде - 3,753, метаноле - 6439, толуоле - 65170, н-гексане - 1243. Температура плавления: 72,5 - 74,5 °C. Коэффициент распределения в системе октанол/вода: log - 4,3222. p Основным продуктом гидролитического разложения (метаболитом) квизалофоп-П-тефурила является 2-[4-(6-хлорхиноксалин-2-илокси)фенокси]пропионовая кислота. Токсикологическая характеристика: ДСД для массы тела человека - 0,004 мг/кг. Гигиенические нормативы МДУ в сельскохозяйственной продукции: свекла, картофель - 0,04 мг/кг; лук - 0,06 мг/кг. ПАНТЕРА, КЭ - послевсходовый гербицид для борьбы с однолетними и многолетними злаковыми сорными растениями при возделывании овощных и технических культур. ## 2. Методика определения остаточных количеств квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов в клубнях картофеля, ботве и корнеплодах сахарной и столовой свеклы, моркови и луке с применением газожидкостной хроматографии ### 2.1. Основные положения ##### 2.1.1 Принцип метода Метод основан на извлечении остаточных количеств квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов из анализируемого объекта метанолом, последующем гидролизе квизалофоп-П-тефурила и метаболитов с дериватизацией (метанолиз) до конечного продукта 2-метокси-6-хлорхиноксалина, проведении очистки экстрактов на колонке с оксидом алюминия и концентрирования конечных реэкстрактов. Количественное определение проводят методом внешнего стандарта с применением газожидкостной хроматографии с использованием термоионного детектора (ТИД) или детектора электронного захвата (ДЭЗ), набивной или капиллярной колонки с неподвижной фазой типа SE-30. ##### 2.1.2 Избирательность метода Прочие пестициды, применяемые в интенсивной технологии выращивания овощей, определению не мешают. Использование колоночной хроматографии для очистки экстрактов, а также селективных детекторов позволяет устранить влияние возможных мешающих анализу примесей. ##### 2.1.3 Метрологическая характеристика метода
Таблица
**ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ КВИЗАЛОФОП-П-ТЕФУРИЛА**
В МОДЕЛЬНЫХ ПРОБАХ (n = 6) | Анализируемые объекты | Внесено, мг/кг | Извлечено, % | Доверительный интервал среднего результата, % | | --- | --- | --- | --- | | Клубни картофеля | 0,025 0,05 0,1 0,5 | 78 80 85 91 | +/- 8,7 +/- 8,1 +/- 6,2 +/- 4,9 | | Корнеплоды сахарной свеклы | 0,025 0,05 0,1 0,5 | 80 85 90 93 | +/- 8,1 +/- 6,8 +/- 5,0 +/- 4,3 | | Корнеплоды столовой свеклы | 0,025 0,05 0,1 0,5 | 82 86 92 95 | +/- 7,4 +/- 6,8 +/- 5,0 +/- 4,7 | | Ботва свеклы | 0,025 0,05 0,1 0,5 | 80 83 88 90 | +/- 9,3 +/- 8,4 +/- 6,6 +/- 6,0 | | Морковь | 0,025 0,05 0,1 0,5 | 75 78 83 90 | +/- 11,2 +/- 10,5 +/- 10,2 +/- 9,3 | | Репка лука | 0,05 0,1 0,5 | 60 65 72 | +/- 19,2 +/- 14,8 +/- 12,1 | ### 2.2. Реактивы, растворы и материалы Аналитический стандарт 2-метокси-6-хлорхиноксалина Аналитический стандарт квизалофоп-П-тефурила Ацетон, ч ГОСТ 2603-79 Вода дистиллированная ГОСТ 7602-76 н-Гексан, хч ТУ 6-09-3375-78 Кислота соляная, осч 23-4 ТУ 6-09-01-794-90 Метилен хлористый, хч ТУ 6-09-06-856-77 Натрия гидроокись, чда ГОСТ 4328-77 Натрий сернокислый, безводный, чда [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76) Натрий хлористый, чда ГОСТ 4233-77 Оксид алюминия для хроматографии, ч, размер частиц 100 - 200 мкм, 1-й степени активности по Брокману, нейтральный Оксид алюминия для хроматографии, ч, размер частиц 100 -200 мкм, 4-й степени активности по Брокману, нейтральный Спирт метиловый, хч (перегнанный) ТУ 6-09-1709-77 ### 2.3. Приборы, аппаратура, посуда
Газовый хроматограф "Цвет-500" с ДПР (ДЭЗ)
или ТИД Хроматографическая колонка кварцевая капиллярная длиной 10 м и внутренним диаметром 0,53 мм с неподвижной фазой типа SE-30 Хроматографическая колонка насадочная длиной 2,0 м и внутренним диаметром 4,0 мм с неподвижной фазой 3% SE-30 на хроматоне N-AW, 0,125 - 0,160 мм Ротационный испаритель ИР-1М ТУ 25-11-917-76 или аналогичного типа Микрошприц МШ 10А ТУ 64-1-2850 Весы аналитические ТУ 64-1-1065 Пробирки мерные конические на 10 мл ГОСТ 1770-74 Воронки делительные на 500 мл ГОСТ 10054 Воронки для фильтрования стеклянные ГОСТ 8613 Колбы мерные на 10, 50, 100 мл ГОСТ 1770 Концентраторы грушевидные (конические) ГОСТ 10394 **НШ19, КГУ-100-14/19, ТС** Пипетки мерные на 0,1; 1,0; 5,0 мл [ГОСТ 20292](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74) Стаканы стеклянные на 100 мл ГОСТ 6236 Фильтры бумажные "красная лента" ТУ 6-09-2670 Колбы круглодонные на 500 мл со шлифом ГОСТ 25336-82Е Колбы плоскодонные на 500 мл ГОСТ 25336-82Е Гомогенизатор МРТУ 42-15.05-63 Чашка фарфоровая ГОСТ 9147-80Е ### 2.4. Отбор проб Отбор проб для анализа проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными 21.08.79 N 2051-79. ### 2.5. Подготовка к определению ##### 2.5.1 Подготовка и очистка растворителей Перед началом работы рекомендуется проверить чистоту применяемых органических растворителей. Для этого 100 мл растворителя упаривают в ротационном испарителе при температуре 40 °C до объема 1,0 мл и хроматографируют. При обнаружении мешающих определению примесей очистку растворителей производят в соответствии с общепринятыми методиками. ##### 2.5.2 Подготовка и кондиционирование колонки Подготовленной насадкой (3% SE-30 на хроматоне N-AW или другом носителе) заполняют стеклянную колонку и уплотняют ее под вакуумом. Колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и кондиционируют ее при рабочем расходе газа-носителя и температуре 260 °C в течение 8 - 10 ч. ##### 2.5.3 Приготовление стандартных растворов Основной раствор 2-метокси-6-хлорхиноксалина с концентрацией 100 мкг/мл готовят в мерной колбе растворением 0,01 г стандартного вещества в 100 мл н-гексана. Раствор хранят в холодильнике не более 3 месяцев. Рабочие стандартные растворы с концентрациями 2,0; 5,0; 10,0 и 25,0 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора 2-метокси-6-хлорхиноксалина соответствующим последовательным разбавлением н-гексаном. Рабочие растворы хранят в холодильнике не более месяца. При определении в модельных пробах полноты извлечения квизалофоп-П-тефурила используют соответствующие растворы вещества в ацетоне. ##### 2.5.4 Построение калибровочного графика Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 1 - 3 мкл рабочего стандартного раствора 2-метокси-6-хлорхиноксалина с концентрацией 2,0; 5,0; 10,0 и 25,0 мкг/мл. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение высоты (площади) хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты (площади) хроматографического пика в мм (кв. мм) от концентрации 2-метокси-6-хлорхиноксалина в растворе в мкг/мл. 2.5.5. Подготовка хроматографических колонок с оксидом алюминия 1-й и 4-й степени активности по Брокману для очистки экстрактов Оксид алюминия прогревают в фарфоровой чашке в термостате при 150 °C в течение 5 ч и охлаждают до комнатной температуры (1-я степень активности по Брокману). Для приготовления оксида алюминия 4-й степени активности по Брокману внутреннюю поверхность колбы со шлифом объемом 0,5 л увлажняют 11,1 мл дистиллированной воды и добавляют в колбу 100 г активированного оксида алюминия. Содержимое колбы тщательно перемешивают. Колбы с подготовленным оксидом алюминия хранят герметично закрытыми. Стеклянную колонку размером 30,0 x 1,0 см заполняют (при легком встряхивании) 5,0 г оксида алюминия (высота слоя ~ 7,0 см). Над слоем оксида алюминия помещают слой безводного сульфата натрия высотой 2,0 см и содержимое колонки перед использованием промывают 30,0 мл н-гексана. ##### 2.5.6 Подготовка проб к определению Клубни картофеля, корнеплоды моркови и свеклы промывают водой для удаления остатков почвы и обсушивают фильтровальной бумагой. Из каждого неочищенного клубня, корнеплода или репки лука берут сегменты (1/4 часть) по осевой линии. Сегменты нарезают ножом, гомогенизируют и после тщательного перемешивания выделяют средний образец. Ботву свеклы нарезают ножом, гомогенизируют, перемешивают и выделяют средний образец. ### 2.6. Проведение определения ##### 2.6.1 Обработка проб для газохроматографического анализа с использованием ДЭЗ 2.6.1.1. Проведение экстракции и метанолиза. Образец массой 10,0 +/- 0,1 г помещают в круглодонную колбу со шлифом емкостью 250 мл, добавляют 25 мл метилового спирта и 5 мл 40% водного раствора гидроокиси натрия, слегка встряхивают и добавляют 25 мл (вторая порция) метилового спирта. Колбу помещают на водяную баню, присоединяют обратный холодильник и содержимое колбы кипятят в течение 90 мин. Затем обратный холодильник отсоединяют, колбу закрывают пробкой и охлаждают в струе проточной холодной воды. Сразу же после этого содержимое колбы фильтруют через складчатый бумажный фильтр "красная лента" в делительную воронку емкостью 500 мл. Внутренние стенки колбы и фильтр промывают 15 мл метилового спирта. Затем в воронку добавляют 50 мл дистиллированной воды, 10 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия и с использованием концентрированной соляной кислоты (~ 3 мл) доводят содержимое воронки до pH 5 - 6. В воронку приливают 30 мл н-гексана и встряхивают в течение 3 мин. После 5-минутного отстаивания нижний водно-метанольный слой сливают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл. Гексановый экстракт, оставшийся в делительной воронке, пропускают через коническую воронку с ватным тампоном и слоем безводного сульфата натрия (толщина 1,0 - 1,5 см) в грушевидную колбу-концентратор емкостью 100 мл. Экстрагирование с использованием 30 мл н-гексана повторяют еще раз. Воронку и сульфат натрия промывают 5 мл н-гексана. Объединенный гексановый экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 °C до объема 5,0 мл. Водно-метанольный слой отбрасывают. 2.6.1.2. Проведение очистки экстрактов корнеплодов и ботвы свеклы, корнеплодов моркови и клубней картофеля на колонке с оксидом алюминия 4-й степени активности по Брокману. Остаток гексанового экстракта объемом 5 мл количественно переносят из колбы-концентратора в подготовленную колонку с оксидом алюминия. Элюирование 2-метокси-6-хлорхиноксалина осуществляют 20 мл н-гексана со скоростью ~ 60 кап./мин. в грушевидную колбу-концентратор. Элюат после очистки концентрируют на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 °C до объема 1,5 - 2,0 мл. Остаток количественно переносят в мерную коническую пробирку емкостью 10 мл и упаривают н-гексан в токе азота досуха. Сухой остаток в пробирке растворяют в 0,5 мл н-гексана и хроматографируют. 2.6.1.3. Проведение очистки экстрактов репок лука на колонке с оксидом алюминия 1-й степени активности по Брокману. При проведении анализа проб репок лука остаток гексанового экстракта репок лука объемом 5 мл количественно переносят в колонку с оксидом алюминия 1-й степени активности по Брокману. Колонку с нанесенным экстрактом промывают 30 мл смеси н-гексан-метилен хлористый (98:2) и элюат отбрасывают. После этого проводят элюирование 2-метокси-6-хлорхиноксалина 15 мл смеси н-гексан-метилен хлористый (93:7) со скоростью ~ 60 кап./мин. в грушевидную колбу-концентратор. Элюат после очистки концентрируют на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 °C до объема 1,5 - 2,0 мл. Остаток количественно переносят в мерную коническую пробирку емкостью 10 мл и упаривают н-гексан в токе азота досуха. Сухой остаток в пробирке растворяют в 0,5 мл н-гексана и хроматографируют. ##### 2.6.2 Обработка проб для газохроматографического анализа с использованием ТИД Образец массой 10,0 +/- 0,1 г помещают в круглодонную колбу со шлифом емкостью 250 мл, добавляют 25 мл метилового спирта и 5 мл 40%-ного водного раствора гидроокиси натрия, слегка встряхивают и добавляют 25 мл (вторая порция) метилового спирта. Колбу помещают на водяную баню, присоединяют обратный холодильник и содержимое колбы кипятят в течение 90 мин. Затем обратный холодильник отсоединяют, колбу закрывают пробкой и охлаждают в струе проточной холодной воды. Сразу же после этого содержимое колбы фильтруют через складчатый бумажный фильтр "красная лента" в делительную воронку емкостью 500 мл. Внутренние стенки колбы и фильтр промывают 15 мл метилового спирта. Затем в воронку добавляют 50 мл дистиллированной воды, 10 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия и с использованием концентрированной соляной кислоты (~ 3 мл) доводят содержимое воронки до pH 5 - 6. В воронку приливают 30 мл н-гексана и встряхивают в течение 3 мин. После 5-минутного отстаивания нижний водно-метанольный слой сливают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл. Гексановый экстракт, оставшийся в делительной воронке, пропускают через коническую воронку с ватным тампоном и слоем безводного сульфата натрия (толщина 1,0 - 1,5 см) в грушевидную колбу-концентратор емкостью 100 мл. Экстрагирование с использованием 30 мл н-гексана повторяют еще раз. Воронку и сульфат натрия промывают 5 мл н-гексана. Водно-метанольный слой отбрасывают. Объединенный гексановый экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 °C до объема 5,0 мл. Остаток количественно переносят в мерную коническую пробирку емкостью 10 мл и упаривают н-гексан в токе азота досуха. Сухой остаток в пробирке растворяют в 0,5 мл н-гексана и хроматографируют. ### 2.7. Условия газохроматографического анализа ##### 2.7.1 При использовании насадочной колонки | Газовый хроматограф | "Цвет-500" или другой с ДПР (ДЭЗ), ТИД | | --- | --- | | Колонка | насадочная с н. ф. типа SE-30 | | Длина, внутренний диаметр колонки | 2,0 м x 4,0 мм | | Рабочая шкала электрометра | -10 2 x 10 А | | Скорость протяжки ленты самописца | 0,5 см/мин. | | Скорость потока гелия (азота) | 40 куб. см/мин. | | Скорость потока воздуха (ТИД) | 350 куб. см/мин. | | Скорость потока водорода (ТИД) | 35 куб. см/мин. | | Режим хроматографирования | изотермический | | Температура колонки | 150 °C | | Температура испарителя | 250 °C | | Температура детектора | 280 °C | | Объем вводимой пробы | 2,0 - 3,0 мкл | | Время удерживания 2-метокси-6-хлорхиноксалина | 5,6 +/- 0,25 мин. | | Линейный диапазон определения | 5,0 - 50 нг | Примечание: После выполнения 5 - 7 анализов насадочную колонку следует прогреть при температуре 260 °C в течение 1 ч. ##### 2.7.2 При использовании капиллярной колонки | Газовый хроматограф | "Цвет-500" или другой с ТИД | | --- | --- | | 1 | 2 | | Колонка | кварцевая капиллярная с н. ф. SE-30 | | Толщина слоя неподвижной фазы | 2,65 мкм | | Длина, внутренний диаметр колонки | 10 м x 0,53 мм | | Рабочая шкала электрометра | -10 2 x 10 А | | Скорость протяжки ленты самописца | 0,5 см/мин. | | Скорость потока гелия (азота) | 7 куб. см/мин. | | Скорость потока дополнительного газа - гелия (азота) к детектору | 30 куб. см/мин. | | Скорость потока воздуха | 350 куб. см/мин. | | Скорость потока водорода | 35 куб. см/мин. | | Режим хроматографирования | программирование температуры | | Температура колонки начальная | 80 °C | | Время хроматографирования при начальной температуре | 3 мин. | | Температура колонки конечная | 280 °C | | Время хроматографирования при конечной температуре | 20 мин. | | Скорость подъема температуры | 20 °C/мин. | | Температура испарителя | 250 °C | | Температура детектора | 280 °C | | Объем вводимой пробы | 1,0 - 2,0 мкл | | Время удерживания 2-метокси-6- хлорхиноксалина | 9,0 +/- 0,1 мин. | | Линейный диапазон определения | 2,0 - 20 нг | ##### 2.7.3 Расчет суммарного содержания квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов Расчет проводят по стандартному раствору 2-метокси-6-хлорхиноксалина, высота (площадь) пика которого наиболее близка высоте (площади) пика в рабочей пробе. Расчет суммарного содержания квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов производят по следующей формуле: C x H x V x V x K 1 ст 2 -3 X = --------------------- x 10 [мг/кг], H x V x P ст 1 где: C - концентрация стандартного раствора 2-метокси-6-хлорхиноксалина, нг/мкл; H - высота (площадь) пика 2-метокси-6-хлорхиноксалина в 1 анализируемой пробе, мм (кв. мм); H - высота (площадь) пика 2-метокси-6-хлорхиноксалина в ст стандартном растворе, мм (кв. мм); V - объем анализируемой пробы, введенной в хроматограф, мкл; 1 V - объем пробы стандартного раствора, введенного в ст хроматограф, мкл; V - общий объем анализируемой пробы, мкл; 2 P - навеска исследуемого образца пробы, г; K - коэффициент пересчета, равный 2,75, учитывающий соотношение молекулярных масс квизалофоп-П-тефурила и 2-метокси-6-хлорхиноксалина, а также степень извлечения анализируемых компонентов из матрицы. Для получения достоверных результатов измерений конечный результат записывается следующим образом: X = (х +/- ДЕЛЬТА), где: X - содержание остаточных количеств квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов в анализируемой пробе в пересчете на действующее вещество; х - среднее из трех параллельных результатов измерений; ДЕЛЬТА - показатель погрешности измерений, соответствующий диапазону, в который попадает величина х. ## 3. Требования техники безопасности Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами, а также требования, изложенные в документации на приборы. ## 4. Разработчики Долженко В.И., Крылов А.И., Григорьева Л.В., Тарарин П.А., Николаев М.Я. (ВНИИ защиты растений, 189620, Санкт-Петербург - Пушкин, шоссе Подбельского, 3). ---