МУК 4.1.1138-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов в клубнях картофеля, ботве и корнеплодах сахарной и столовой свеклы, моркови и луке методом газожидкостной хроматографии. Методические указания
Актуально на 09.11.2026.
Как цитировать: "МУК 4.1.1138-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов в клубнях картофеля, ботве и корнеплодах сахарной и столовой свеклы, моркови и луке методом газожидкостной хроматографии. Методические указания". МУК 4.1.1138-02. https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-1138-02
(утв. Минздравом России)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299). Документ включен в Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения (утв. Россельхознадзором 30.07.2009 № 02-03-48/563). Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 № 01/14262-8-32). Документ введен в действие с 1 января 2003 года.
Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации,
Первый заместитель
Министра здравоохранения
Российской Федерации
Г. Г. Онищенко
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ КВИЗАЛОФОП-П-ТЕФУРИЛА И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ В КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ, БОТВЕ И КОРНЕПЛОДАХ САХАРНОЙ И СТОЛОВОЙ СВЕКЛЫ, МОРКОВИ И ЛУКЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МУК 4.1.1138-02
1 января 2003 года
1. Методические указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).
2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.
3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
1. Вводная часть
Фирма-производитель: Юнироял Кемикал Ко. Инк.
Торговое наименование препарата: ПАНТЕРА, КЭ.
Действующее вещество (д.в.): квизалофоп-П-тефурил.
Название д.в. по номенклатуре ИЮПАК: (R)-2-[4-(6-=хлорхиноксалин-2-илокси)фенокси]пропионовой кислоты тетрагидрофурфуриловый эфир.
Структурная формула (не приводится).
C H N ClO М. м. 428 22 21 2 5
Кристаллический порошок белого цвета без запаха. -8
Давление паров: < 5,9 x 10 мм Hg при 25 °C. Растворимость (мг/л при 25 °C): в воде - 3,753, метаноле -
6439, толуоле — 65170, н-гексане — 1243.
Температура плавления: 72,5 — 74,5 °C.
Коэффициент распределения в системе октанол/вода: log - 4,3222.
p
Основным продуктом гидролитического разложения (метаболитом) квизалофоп-П-тефурила является 2-[4-(6-хлорхиноксалин-2-илокси)фенокси]пропионовая кислота.
Токсикологическая характеристика: ДСД для массы тела человека — 0,004 мг/кг.
МДУ в сельскохозяйственной продукции: свекла, картофель — 0,04 мг/кг; лук — 0,06 мг/кг.
ПАНТЕРА, КЭ — послевсходовый гербицид для борьбы с однолетними и многолетними злаковыми сорными растениями при возделывании овощных и технических культур.
2. Методика определения остаточных количеств квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов в клубнях картофеля, ботве и корнеплодах сахарной и столовой свеклы, моркови и луке с применением газожидкостной хроматографии
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Метод основан на извлечении остаточных количеств квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов из анализируемого объекта метанолом, последующем гидролизе квизалофоп-П-тефурила и метаболитов с дериватизацией (метанолиз) до конечного продукта 2-метокси-6-хлорхиноксалина, проведении очистки экстрактов на колонке с оксидом алюминия и концентрирования конечных реэкстрактов.
Количественное определение проводят методом внешнего стандарта с применением газожидкостной хроматографии с использованием термоионного детектора (ТИД) или детектора электронного захвата (ДЭЗ), набивной или капиллярной колонки с неподвижной фазой типа SE-30.
2.1.2 Избирательность метода
Прочие пестициды, применяемые в интенсивной технологии выращивания овощей, определению не мешают. Использование колоночной хроматографии для очистки экстрактов, а также селективных детекторов позволяет устранить влияние возможных мешающих анализу примесей.
2.1.3 Метрологическая характеристика метода
В МОДЕЛЬНЫХ ПРОБАХ (n = 6)
| Анализируемые объекты | Внесено, мг/кг | Извлечено, % | Доверительный интервал среднего результата, % |
|---|---|---|---|
| Клубни картофеля | 0,025 0,05 0,1 0,5 | 78 80 85 91 | +/- 8,7 +/- 8,1 +/- 6,2 +/- 4,9 |
| Корнеплоды сахарной свеклы | 0,025 0,05 0,1 0,5 | 80 85 90 93 | +/- 8,1 +/- 6,8 +/- 5,0 +/- 4,3 |
| Корнеплоды столовой свеклы | 0,025 0,05 0,1 0,5 | 82 86 92 95 | +/- 7,4 +/- 6,8 +/- 5,0 +/- 4,7 |
| Ботва свеклы | 0,025 0,05 0,1 0,5 | 80 83 88 90 | +/- 9,3 +/- 8,4 +/- 6,6 +/- 6,0 |
| Морковь | 0,025 0,05 0,1 0,5 | 75 78 83 90 | +/- 11,2 +/- 10,5 +/- 10,2 +/- 9,3 |
| Репка лука | 0,05 0,1 0,5 | 60 65 72 | +/- 19,2 +/- 14,8 +/- 12,1 |
2.2. Реактивы, растворы и материалы
Аналитический стандарт 2-метокси-6-хлорхиноксалина
Аналитический стандарт квизалофоп-П-тефурила
Вода дистиллированная ГОСТ 7602-76
н-Гексан, хч ТУ 6-09-3375-78 Кислота соляная, осч 23-4 ТУ 6-09-01-794-90 Метилен хлористый, хч ТУ 6-09-06-856-77
Натрия гидроокись, чда ГОСТ 4328-77
Натрий сернокислый, безводный, чда ГОСТ 4166-76
Натрий хлористый, чда ГОСТ 4233-77
Оксид алюминия для хроматографии, ч, размер частиц 100 — 200 мкм, 1-й степени активности по Брокману, нейтральный
Оксид алюминия для хроматографии, ч, размер частиц 100 -200 мкм, 4-й степени активности по Брокману, нейтральный
Спирт метиловый, хч (перегнанный) ТУ 6-09-1709-77
2.3. Приборы, аппаратура, посуда
или ТИД
Хроматографическая колонка кварцевая капиллярная длиной 10 м и внутренним диаметром 0,53 мм с неподвижной фазой типа SE-30
Хроматографическая колонка насадочная длиной 2,0 м и внутренним диаметром 4,0 мм с неподвижной фазой 3% SE-30 на хроматоне N-AW, 0,125 — 0,160 мм
Ротационный испаритель ИР-1М ТУ 25-11-917-76 или аналогичного типа
Микрошприц МШ 10А ТУ 64-1-2850 Весы аналитические ТУ 64-1-1065 Пробирки мерные конические на 10 мл ГОСТ 1770-74 Воронки делительные на 500 мл ГОСТ 10054 Воронки для фильтрования стеклянные ГОСТ 8613 Колбы мерные на 10, 50, 100 мл ГОСТ 1770 Концентраторы грушевидные (конические) ГОСТ 10394
НШ19, КГУ-100-14/19, ТС
Пипетки мерные на 0,1; 1,0; 5,0 мл ГОСТ 20292
Стаканы стеклянные на 100 мл ГОСТ 6236 Фильтры бумажные "красная лента" ТУ 6-09-2670
Колбы круглодонные на 500 мл со шлифом ГОСТ 25336-82Е
Колбы плоскодонные на 500 мл ГОСТ 25336-82Е
Гомогенизатор МРТУ 42-15.05-63
Чашка фарфоровая ГОСТ 9147-80Е
2.4. Отбор проб
Отбор проб для анализа проводят в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными 21.08.79 № 2051-79.
2.5. Подготовка к определению
2.5.1 Подготовка и очистка растворителей
Перед началом работы рекомендуется проверить чистоту применяемых органических растворителей. Для этого 100 мл растворителя упаривают в ротационном испарителе при температуре 40 °C до объема 1,0 мл и хроматографируют. При обнаружении мешающих определению примесей очистку растворителей производят в соответствии с общепринятыми методиками.
2.5.2 Подготовка и кондиционирование колонки
Подготовленной насадкой (3% SE-30 на хроматоне N-AW или другом носителе) заполняют стеклянную колонку и уплотняют ее под вакуумом. Колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и кондиционируют ее при рабочем расходе газа-носителя и температуре 260 °C в течение 8 — 10 ч.
2.5.3 Приготовление стандартных растворов
Основной раствор 2-метокси-6-хлорхиноксалина с концентрацией 100 мкг/мл готовят в мерной колбе растворением 0,01 г стандартного вещества в 100 мл н-гексана. Раствор хранят в холодильнике не более 3 месяцев. Рабочие стандартные растворы с концентрациями 2,0; 5,0; 10,0 и 25,0 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора 2-метокси-6-хлорхиноксалина соответствующим последовательным разбавлением н-гексаном. Рабочие растворы хранят в холодильнике не более месяца.
При определении в модельных пробах полноты извлечения квизалофоп-П-тефурила используют соответствующие растворы вещества в ацетоне.
2.5.4 Построение калибровочного графика
Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 1 — 3 мкл рабочего стандартного раствора 2-метокси-6-хлорхиноксалина с концентрацией 2,0; 5,0; 10,0 и 25,0 мкг/мл. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение высоты (площади) хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты (площади) хроматографического пика в мм (кв. мм) от концентрации 2-метокси-6-хлорхиноксалина в растворе в мкг/мл.
2.5.5. Подготовка хроматографических колонок с оксидом алюминия 1-й и 4-й степени активности по Брокману для очистки экстрактов
Оксид алюминия прогревают в фарфоровой чашке в термостате при 150 °C в течение 5 ч и охлаждают до комнатной температуры (1-я степень активности по Брокману). Для приготовления оксида алюминия 4-й степени активности по Брокману внутреннюю поверхность колбы со шлифом объемом 0,5 л увлажняют 11,1 мл дистиллированной воды и добавляют в колбу 100 г активированного оксида алюминия. Содержимое колбы тщательно перемешивают. Колбы с подготовленным оксидом алюминия хранят герметично закрытыми.
Стеклянную колонку размером 30,0 x 1,0 см заполняют (при легком встряхивании) 5,0 г оксида алюминия (высота слоя ~ 7,0 см). Над слоем оксида алюминия помещают слой безводного сульфата натрия высотой 2,0 см и содержимое колонки перед использованием промывают 30,0 мл н-гексана.
2.5.6 Подготовка проб к определению
Клубни картофеля, корнеплоды моркови и свеклы промывают водой для удаления остатков почвы и обсушивают фильтровальной бумагой. Из каждого неочищенного клубня, корнеплода или репки лука берут сегменты (1/4 часть) по осевой линии. Сегменты нарезают ножом, гомогенизируют и после тщательного перемешивания выделяют средний образец. Ботву свеклы нарезают ножом, гомогенизируют, перемешивают и выделяют средний образец.
2.6. Проведение определения
2.6.1 Обработка проб для газохроматографического анализа с использованием ДЭЗ
2.6.1.1. Проведение экстракции и метанолиза. Образец массой 10,0 +/- 0,1 г помещают в круглодонную колбу со шлифом емкостью 250 мл, добавляют 25 мл метилового спирта и 5 мл 40% водного раствора гидроокиси натрия, слегка встряхивают и добавляют 25 мл (вторая порция) метилового спирта. Колбу помещают на водяную баню, присоединяют обратный холодильник и содержимое колбы кипятят в течение 90 мин. Затем обратный холодильник отсоединяют, колбу закрывают пробкой и охлаждают в струе проточной холодной воды. Сразу же после этого содержимое колбы фильтруют через складчатый бумажный фильтр «красная лента» в делительную воронку емкостью 500 мл. Внутренние стенки колбы и фильтр промывают 15 мл метилового спирта. Затем в воронку добавляют 50 мл дистиллированной воды, 10 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия и с использованием концентрированной соляной кислоты (~ 3 мл) доводят содержимое воронки до pH 5 — 6. В воронку приливают 30 мл н-гексана и встряхивают в течение 3 мин. После 5-минутного отстаивания нижний водно-метанольный слой сливают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл.
Гексановый экстракт, оставшийся в делительной воронке, пропускают через коническую воронку с ватным тампоном и слоем безводного сульфата натрия (толщина 1,0 — 1,5 см) в грушевидную колбу-концентратор емкостью 100 мл. Экстрагирование с использованием 30 мл н-гексана повторяют еще раз. Воронку и сульфат натрия промывают 5 мл н-гексана. Объединенный гексановый экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 °C до объема 5,0 мл.
Водно-метанольный слой отбрасывают.
2.6.1.2. Проведение очистки экстрактов корнеплодов и ботвы свеклы, корнеплодов моркови и клубней картофеля на колонке с оксидом алюминия 4-й степени активности по Брокману. Остаток гексанового экстракта объемом 5 мл количественно переносят из колбы-концентратора в подготовленную колонку с оксидом алюминия. Элюирование 2-метокси-6-хлорхиноксалина осуществляют 20 мл н-гексана со скоростью ~ 60 кап./мин. в грушевидную колбу-концентратор.
Элюат после очистки концентрируют на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 °C до объема 1,5 — 2,0 мл. Остаток количественно переносят в мерную коническую пробирку емкостью 10 мл и упаривают н-гексан в токе азота досуха. Сухой остаток в пробирке растворяют в 0,5 мл н-гексана и хроматографируют.
2.6.1.3. Проведение очистки экстрактов репок лука на колонке с оксидом алюминия 1-й степени активности по Брокману. При проведении анализа проб репок лука остаток гексанового экстракта репок лука объемом 5 мл количественно переносят в колонку с оксидом алюминия 1-й степени активности по Брокману.
Колонку с нанесенным экстрактом промывают 30 мл смеси н-гексан-метилен хлористый (98:2) и элюат отбрасывают. После этого проводят элюирование 2-метокси-6-хлорхиноксалина 15 мл смеси н-гексан-метилен хлористый (93:7) со скоростью ~ 60 кап./мин. в грушевидную колбу-концентратор.
Элюат после очистки концентрируют на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 °C до объема 1,5 — 2,0 мл. Остаток количественно переносят в мерную коническую пробирку емкостью 10 мл и упаривают н-гексан в токе азота досуха. Сухой остаток в пробирке растворяют в 0,5 мл н-гексана и хроматографируют.
2.6.2 Обработка проб для газохроматографического анализа с использованием ТИД
Образец массой 10,0 +/- 0,1 г помещают в круглодонную колбу со шлифом емкостью 250 мл, добавляют 25 мл метилового спирта и 5 мл 40%-ного водного раствора гидроокиси натрия, слегка встряхивают и добавляют 25 мл (вторая порция) метилового спирта. Колбу помещают на водяную баню, присоединяют обратный холодильник и содержимое колбы кипятят в течение 90 мин. Затем обратный холодильник отсоединяют, колбу закрывают пробкой и охлаждают в струе проточной холодной воды. Сразу же после этого содержимое колбы фильтруют через складчатый бумажный фильтр «красная лента» в делительную воронку емкостью 500 мл. Внутренние стенки колбы и фильтр промывают 15 мл метилового спирта. Затем в воронку добавляют 50 мл дистиллированной воды, 10 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия и с использованием концентрированной соляной кислоты (~ 3 мл) доводят содержимое воронки до pH 5 — 6. В воронку приливают 30 мл н-гексана и встряхивают в течение 3 мин. После 5-минутного отстаивания нижний водно-метанольный слой сливают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл.
Гексановый экстракт, оставшийся в делительной воронке, пропускают через коническую воронку с ватным тампоном и слоем безводного сульфата натрия (толщина 1,0 — 1,5 см) в грушевидную колбу-концентратор емкостью 100 мл. Экстрагирование с использованием 30 мл н-гексана повторяют еще раз. Воронку и сульфат натрия промывают 5 мл н-гексана. Водно-метанольный слой отбрасывают.
Объединенный гексановый экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 °C до объема 5,0 мл. Остаток количественно переносят в мерную коническую пробирку емкостью 10 мл и упаривают н-гексан в токе азота досуха. Сухой остаток в пробирке растворяют в 0,5 мл н-гексана и хроматографируют.
2.7. Условия газохроматографического анализа
2.7.1 При использовании насадочной колонки
| Газовый хроматограф | «Цвет-500» или другой с ДПР (ДЭЗ), ТИД |
|---|---|
| Колонка | насадочная с н. ф. типа SE-30 |
| Длина, внутренний диаметр колонки | 2,0 м x 4,0 мм |
| Рабочая шкала электрометра | -10 2 x 10 А |
| Скорость протяжки ленты самописца | 0,5 см/мин. |
| Скорость потока гелия (азота) | 40 куб. см/мин. |
| Скорость потока воздуха (ТИД) | 350 куб. см/мин. |
| Скорость потока водорода (ТИД) | 35 куб. см/мин. |
| Режим хроматографирования | изотермический |
| Температура колонки | 150 °C |
| Температура испарителя | 250 °C |
| Температура детектора | 280 °C |
| Объем вводимой пробы | 2,0 — 3,0 мкл |
| Время удерживания 2-метокси-6-хлорхиноксалина | 5,6 +/- 0,25 мин. |
| Линейный диапазон определения | 5,0 — 50 нг |
Примечание: После выполнения 5 — 7 анализов насадочную колонку следует прогреть при температуре 260 °C в течение 1 ч.
2.7.2 При использовании капиллярной колонки
| Газовый хроматограф | «Цвет-500» или другой с ТИД |
|---|---|
| 1 | 2 |
| Колонка | кварцевая капиллярная с н. ф. SE-30 |
| Толщина слоя неподвижной фазы | 2,65 мкм |
| Длина, внутренний диаметр колонки | 10 м x 0,53 мм |
| Рабочая шкала электрометра | -10 2 x 10 А |
| Скорость протяжки ленты самописца | 0,5 см/мин. |
| Скорость потока гелия (азота) | 7 куб. см/мин. |
| Скорость потока дополнительного газа — гелия (азота) к детектору | 30 куб. см/мин. |
| Скорость потока воздуха | 350 куб. см/мин. |
| Скорость потока водорода | 35 куб. см/мин. |
| Режим хроматографирования | программирование температуры |
| Температура колонки начальная | 80 °C |
| Время хроматографирования при начальной температуре | 3 мин. |
| Температура колонки конечная | 280 °C |
| Время хроматографирования при конечной температуре | 20 мин. |
| Скорость подъема температуры | 20 °C/мин. |
| Температура испарителя | 250 °C |
| Температура детектора | 280 °C |
| Объем вводимой пробы | 1,0 — 2,0 мкл |
| Время удерживания 2-метокси-6- хлорхиноксалина | 9,0 +/- 0,1 мин. |
| Линейный диапазон определения | 2,0 — 20 нг |
2.7.3 Расчет суммарного содержания квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов
Расчет проводят по стандартному раствору 2-метокси-6-хлорхиноксалина, высота (площадь) пика которого наиболее близка высоте (площади) пика в рабочей пробе. Расчет суммарного содержания квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов производят по следующей формуле:
C x H x V x V x K
1 ст 2 -3
X = --------------------- x 10 [мг/кг],
H x V x P
ст 1
C — концентрация стандартного раствора 2-метокси-6-хлорхиноксалина, нг/мкл;
H — высота (площадь) пика 2-метокси-6-хлорхиноксалина в 1 анализируемой пробе, мм (кв. мм);
H — высота (площадь) пика 2-метокси-6-хлорхиноксалина в ст стандартном растворе, мм (кв. мм);
V — объем анализируемой пробы, введенной в хроматограф, мкл; 1
V — объем пробы стандартного раствора, введенного в ст хроматограф, мкл;
V — общий объем анализируемой пробы, мкл; 2
P — навеска исследуемого образца пробы, г;
K - коэффициент пересчета, равный 2,75, учитывающий соотношение молекулярных масс квизалофоп-П-тефурила и 2-метокси-6-хлорхиноксалина, а также степень извлечения
анализируемых компонентов из матрицы.
Для получения достоверных результатов измерений конечный результат записывается следующим образом:
X - содержание остаточных количеств квизалофоп-П-тефурила и его метаболитов в анализируемой пробе в пересчете на действующее
вещество;
х — среднее из трех параллельных результатов измерений;
ДЕЛЬТА — показатель погрешности измерений, соответствующий диапазону, в который попадает величина х.
3. Требования техники безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами, а также требования, изложенные в документации на приборы.
4. Разработчики
Долженко В.И., Крылов А.И., Григорьева Л.В., Тарарин П.А., Николаев М.Я. (ВНИИ защиты растений, 189620, Санкт-Петербург — Пушкин, шоссе Подбельского, 3).