---
title: "\"Методические указания по определению эллипса в почве, зерне зерновых культур методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии\""
number: "6273-91"
issuer: "Министерство здравоохранения СССР"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-6273-91"
---

## "Методические указания по определению эллипса в почве, зерне зерновых культур методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии"

# "Методические указания по определению эллипса в почве, зерне зерновых культур методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии"

(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 N 6273-91)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждены<br>
Министерством здравоохранения СССР

</div>

<div align="center">

29 июля 1991 г. N 6273-91

</div>


<a id="p100002"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЭЛЛИПСА В ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ ЗЕРНОВЫХ КУЛЬТУР**
**МЕТОДАМИ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100003"></a>Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
<a id="p100004"></a>Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.


## 1. <a id="p100005"></a>Краткая характеристика препарата


<a id="p100006"></a>Действующее вещество - N-(O-хлорфенилсульфонил)-N'-(4-диметиламино-6-(а-метил)пропилидениминоокси-1,3,5-триазин-2-ил)мочевина.

           Cl                   N(CH )
<a id="p100007"></a>     _____/             N_____/     3 2               C  H  N O S.
    //   \\_SO -NH-C-NH_//   \\N                       16 20 7 4

<a id="p100008"></a>

| \ ___ / 2 | \ ___ / CH |
| --- | --- |

                               O-N=C
                                    \
                                     C H
                                      2 5

<a id="p100009"></a>Синонимы: эллипс, хлорсульфоксилеметил.
<a id="p100010"></a>Химически чистое вещество без запаха. Т. пл. = 173 °C. Препарат плохо растворим в воде, растворим в спирте, ацетоне.
<a id="p100011"></a>Применяется в качестве регулятора роста растений и гербицида на зерновых культурах.
<a id="p100012"></a>ПДК в воде - 0,005 мг/л, МДУ в пищевых продуктах не допускается (в зерне хлебных злаков), ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,25 мг/куб. м.


## 2. <a id="p100013"></a>Методика определения эллипса в почве, в зерне зерновых культур методом тонкослойной и газожидкостной хроматографии



### <a id="p100014"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100015"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100016"></a>Метод основан на определении эллипса в почве, зерне зерновых культур способом тонкослойной и газожидкостной хроматографии после экстракции препарата из проб и очистки экстракта.

##### <a id="p100017"></a>2.1.2 Метрологическая характеристика метода

<a id="p100018"></a>Минимально детектируемое количество эллипса - 0,2 - 0,5 мкг.
<a id="p100019"></a>Диапазон определяемых концентраций:
<a id="p100020"></a>почва: ГЖХ - 0,004 - 0,04, ТСХ - 0,01 - 0,1;
<a id="p100021"></a>зерно зерновых культур: ГЖХ - 0,005 - 0,05, ТСХ - 0,01 - 0,1.
<a id="p100022"></a>Среднее значение определения 90,0 - 95,0%.
<a id="p100023"></a>Суммарная погрешность определения - +/- 16 - 20%.


### <a id="p100024"></a>2.2. Реактивы и материалы


<a id="p100025"></a>Эллипс (ВНИИХСЗР), 97-процентный препарат.
<a id="p100026"></a>Натрия сульфат, хч, ГОСТ 4328-77.
<a id="p100027"></a>Азот газообразный, ГОСТ 9283-74, в баллоне с редуктором.
<a id="p100028"></a>Ацетон, ч, ГОСТ 2603-79.
<a id="p100029"></a>Хлороформ, ч, ГОСТ 20015-74.
<a id="p100030"></a>Кислота хлористоводородная, хч, ГОСТ 3118-77, 1 н водный раствор (1:1).
<a id="p100031"></a>Этиловый спирт, 96-процентный, ТУ 6-09-1900-77.
<a id="p100032"></a>Хромосорб-750, 3% OV-17.
<a id="p100033"></a>Эфирный раствор диазометана.
<a id="p100034"></a>О-толидин, 0,5-процентный раствор в ацетоне.
<a id="p100035"></a>Азотнокислое серебро, чда, ГОСТ 1277-81.
<a id="p100036"></a>Аммиак водный, чда, ГОСТ 3760-79.
<a id="p100037"></a>Метанол, хч, ТУ 6-09-1709-77.
<a id="p100038"></a>Калия гидрат окиси, [ГОСТ 9285-78](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-9285-78).
<a id="p100039"></a>Гидразин-гидрат, хч, ГОСТ 5832-65.
<a id="p100040"></a>Бензол, хч, [ГОСТ 5955-81](https://bukva.ai/docs/gost-5955-75).
<a id="p100041"></a>Серебро азотнокислое, ГОСТ 1277-81.
<a id="p100042"></a>О-толидин, ТУ 6-09-2232-75.
<a id="p100043"></a>Гексан, ч, ТУ 6-09-3375-78.
<a id="p100044"></a>Кислота уксусная, хч, ГОСТ 18290-72, 5-процентный водный раствор.
<a id="p100045"></a>Кислота лимонная, хч, ГОСТ 3652-74, 2-процентный водный раствор.
<a id="p100046"></a>Бромфеноловый синий, чда, ТУ 6-09-3719-83.
<a id="p100047"></a>Кальций хлористый, хч, ГОСТ 4460-77.
<a id="p100048"></a>Вода дистиллированная, ГОСТ 7602-72.
<a id="p100049"></a>Пластинки "Силуфол" (Kavalier, ЧССР).
<a id="p100050"></a>Диэтиловый эфир, хч, [ГОСТ 6262-79](https://bukva.ai/docs/gost-6262-79).
<a id="p100051"></a>Вата гигроскопическая.


### <a id="p100052"></a>2.3. Приборы, посуда


<a id="p100053"></a>Лампа ртутно-кварцевая ПРК-4, ТУ 16-535-280-74.
<a id="p100054"></a>Весы аналитические ВЛА-200М.
<a id="p100055"></a>Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.
<a id="p100056"></a>Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
<a id="p100057"></a>Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ 10396-75.
<a id="p100058"></a>Колбы грушевидные, ГОСТ 25336-82, вместимостью 50 - 100 мл.
<a id="p100059"></a>Колбы мерные, цилиндры, мензурки, пробирки, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100060"></a>Колбы конические плоскодонные, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100061"></a>Воронки химические, диаметр 5 - 6 см, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100062"></a>Воронки делительные, ГОСТ 25336-82, вместимостью 250 мл, 1 л.
<a id="p100063"></a>Пипетки, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74), на 1, 5, 10 мл.
<a id="p100064"></a>Микропипетки, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74), на 0,1; 0,2 мл.
<a id="p100065"></a>Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100066"></a>Скальпель.
<a id="p100067"></a>Камера для хроматографирования, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100068"></a>Камера для опрыскивания, ТУ 25-11-430-70.
<a id="p100069"></a>Колба КГУ-2-1-100-14/23 ТС, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100070"></a>Колба ОГ-2-100-14/23 ТС, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100071"></a>Камера.
<a id="p100072"></a>Холодильник ХШ-1-200-14/23 ХС, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100073"></a>Воронка ВК-50 ХС, ГОСТ 25336-82 (с байпасом).
<a id="p100074"></a>Трубка ТХ 45°-14/23, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100075"></a>Капилляр 14/23.
<a id="p100076"></a>Шланг резиновый.
<a id="p100077"></a>Микрошприц МШ-10, ТУ 2-833-106.
<a id="p100078"></a>Стакан полиэтиленовый.
<a id="p100079"></a>Мельница электрическая лабораторная, ТУ 46-22-236-79.


### <a id="p100080"></a>2.4. Подготовка к определению



##### <a id="p100081"></a>2.4.1 Отбор и подготовка проб

<a id="p100082"></a>Отбор проб проводят в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР 21.08.79 N 2051-79.

##### <a id="p100083"></a>2.4.2 Приготовление стандартного, рабочих растворов эллипса

<a id="p100084"></a>Стандартный раствор эллипса с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением соответствующей навески препарата (10,3 г) в ацетоне в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике. Годен к употреблению в течение 30 дней.
<a id="p100085"></a>Рабочие растворы эллипса с концентрацией 2,5; 5,0; 10,0; 20,0 мкг/мл готовят в градуированных пробирках вместимостью 10 мл соответствующим разбавлением ацетоном стандартного раствора. Хранят рабочие растворы эллипса в холодильнике. Годен к употреблению в течение 3 - 5 дней.

##### <a id="p100086"></a>2.4.3 Проявляющий реактив - бромфеноловый реагент

<a id="p100087"></a>Смесь растворов бромфенолового синего (БМФ) и азотнокислого серебра. Готовят два раствора: 1. 0,5% водно-ацетоновый (1:3) раствор азотнокислого серебра. 2. 10 мл 0,05-процентного раствора бромфенолового синего в ацетоне. Раствор 2 разбавляют раствором 1 до объема 100 мл. Хранят проявляющий реактив в темном прохладном месте. Годен к употреблению в течение 3 - 5 дней.
<a id="p100088"></a>После обработки хроматограмм бромфеноловым синим реагентом осветляют фон обработкой пластин 2-процентным водным раствором лимонной кислоты или 5-процентным водным раствором уксусной кислоты.

##### <a id="p100089"></a>2.4.4 Проявляющий реактив - раствор о-толидина в ацетоне

<a id="p100090"></a>Готовят 0,5% раствор о-толидина в ацетоне. После опрыскивания пластинки следует облучать УФ-светом.

##### <a id="p100091"></a>2.4.5 Получение диазометана

<a id="p100092"></a>В круглодонную двугорлую колбу вместимостью 100 мл, снабженную капельной воронкой с байпасом и обратным холодильником, помещают 12 г (0,2 моля) гидрата окиси калия, 6 мл или 6,1 г (0,12 моля) гидразингидрата и 6 мл или 5,3 г (0,17 моля) метанола. Затем, охлаждая колбу до +5 °C смесью воды со льдом, начинают медленно прибавлять из капельной воронки 10 мл или 14,9 г (0,12 моля) хлороформа, постепенно увеличивая скорость, при этом реакционная масса приобретает желтую окраску.
<a id="p100093"></a>Выделяющийся в ходе реакции диазометан через обратный холодильник, соединенный с капилляром резиновым шлангом, поступает в двугорлую грушевидную колбу вместимостью 100 мл и растворяется в 50 мл осушенного диэтилового эфира. Предварительно эту колбу, заполненную диэтиловым эфиром, укрепляют в полиэтиленовом стакане с водой и помещают в морозильную камеру холодильника (Т. = -12 - 18 °C) на 6 - 8 часов.
<a id="p100094"></a>По окончании прибавления хлороформа реакционную колбу нагревают до +40 °C на водяной бане для полного удаления диазометана из реакционной массы. Когда реакционная масса и поверхность холодильника обесцветятся, реакцию считают завершенной. Выход диазометана 25% от теоретического.

##### <a id="p100095"></a>2.4.6 Подготовка пластин "Силуфол"

<a id="p100096"></a>Пластинку "Силуфол" помещают в хроматографическую камеру, содержащую смесь растворителей ацетон - 25-процентный аммиак в соотношении 7:3 (об./об.). Глубина погружения в растворитель составляет 0,5 см. После подъема фронта растворителя до верхнего края пластинки ее вынимают из камеры и выдерживают на воздухе до испарения растворителей. После этого пластинка готова к употреблению. Хранят подготовленные пластинки в эксикаторе.


### <a id="p100097"></a>2.5. Проведение определения



##### <a id="p100098"></a>2.5.1 Экстракция и очистка

<a id="p100099"></a>Зерно (30 - 50 г) предварительно измельчают на электрической мельнице. Почву (50 - 100 г) просеивают через сито. Помещают в коническую колбу, прибавляют ацетон или спирт и настаивают в течение 1 часа. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр. Остаток зерна (почвы) в колбе встряхивают дважды с 50 мл растворителя в течение 10 - 15 мин. В объединенные экстракты приливают 100 мл 1 н HCl, перемешивают, фильтруют через бумажный фильтр в делительную воронку и экстрагируют трижды хлороформом по 20 - 25 мл. Хлороформный экстракт пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают досуха.

##### <a id="p100100"></a>2.6.2 Хроматографирование

<a id="p100101"></a>Метод тонкослойной хроматографии
<a id="p100102"></a>    Сухой  остаток  в  колбе  растворяют в 1 мл ацетона, закрывают
колбу   герметично  пробкой,  перемешивают  содержимое  и  0,2  мл
полученного   раствора  наносят  микропипеткой  на  подготовленную
пластинку  "Силуфол".  Рядом  с  пробой  наносят по 0,2 мл каждого
рабочего  раствора  эллипса,  что соответствует содержанию в пятне
0,5;   1,0;   2,0;   4,0   мкг  препарата.  Пластинку  помещают  в
хроматографическую   камеру,   куда   за   10   -   15   мин.   до
хроматографирования наливают подвижный растворитель: бензол:ацетон
(4:1)  -  1 или гексан:ацетон (1:1) - 2  в таком количестве, чтобы
глубина  погружения  пластинки  в  растворитель  составила 0,5 см.
После  подъема фронта растворителя от линии старта на высоту 10 см
хроматографирование  прекращают.  Пластинку выдерживают в вытяжном
шкафу  до  испарения  растворителей  и  обрабатывают бромфеноловым
реагентом,  затем  раствором  лимонной  (или  уксусной) кислоты. О
наличии    эллипса   в   пробе   свидетельствует   проявление   на
хроматограмме   серо-синего   пятна  препарата.  Или  обрабатывают
пластинку   раствором  о-толидина.  Сразу  же  после  опрыскивания
пластинку   облучают   УФ-светом.   О   наличии  эллипса  в  пробе
свидельствует  проявление на хроматограмме синего пятна препарата.
Величины  R   эллипса равны при использовании подвижной  фазы  (1)
           f
0,43, при использовании подвижной фазы (2) - 0,63.
<a id="p100103"></a>    Метод прямого газохроматографического определения
<a id="p100104"></a>    3  -  5 мкл ацетонового экстракта вводят в испаритель газового
хроматографа   "Цвет-106"   с   детектором   постоянной   скорости
рекомбинации (ДПР).
<a id="p100105"></a>    Проводят хроматографирование при следующих условиях:
<a id="p100106"></a>    Колонка стеклянная   - 1000 x 3 мм.
<a id="p100107"></a>    Твердый носитель     - Хромосорб-750.
<a id="p100108"></a>    Жидкая фаза          - 5% OV-17.
<a id="p100109"></a>    Температура термостата колонки - 185 °C;
<a id="p100110"></a>                           детектора - 250 °C;
<a id="p100111"></a>                           испарителя - 200 °С.
<a id="p100112"></a>    Газ-носитель         - азот особой чистоты.
<a id="p100113"></a>    Скорость движения диаграммной ленты - 240 мм/час.
<a id="p100114"></a>    Скорость потока азота через колонку - 60 мл/мин.
<a id="p100115"></a>    Скорость потока азота через детектор - 150 мл/мин.
                                        -12
<a id="p100116"></a>    Рабочая шкала электрометра - 20 x 10   .
<a id="p100117"></a>    Время удерживания эллипса - 7 мин. 30 сек.
<a id="p100118"></a>Метод газохроматографического определения с использованием диазометана
<a id="p100119"></a>К сухому остатку в грушевидной колбочке приливают 5 мл эфирного раствора диазометана и выдерживают 30 минут. Затем эфир отгоняют на ротационном испарителе досуха, остаток растворяют в 1 мл ацетона и 1 - 5 мкл вводят в испаритель газового хроматографа. Проводят хроматографирование при следующих условиях:
<a id="p100120"></a>    Колонка стеклянная   - 1000 x 3 мм.
<a id="p100121"></a>    Твердый носитель     - Хромосорб-750.
<a id="p100122"></a>    Жидкая фаза          - 5% OV-17.
<a id="p100123"></a>    Температура термостата колонки - 175 °C;
<a id="p100124"></a>                           детектора - 200 °C;
<a id="p100125"></a>                           испарителя - 200 °C.
<a id="p100126"></a>    Газ-носитель         - азот особой чистоты.
<a id="p100127"></a>    Скорость движения диаграммной ленты - 240 мм/час.
<a id="p100128"></a>    Скорость потока азота через колонку - 60 мл/час.
<a id="p100129"></a>    Скорость потока азота через детектор - 150 мл/мин.
                                        -12
<a id="p100130"></a>    Рабочая шкала электрометра - 20 x 10   .
<a id="p100131"></a>    Время удерживания эллипса - 5 мин. 40 сек.


### <a id="p100132"></a>2.7. Обработка результатов анализа. Газохроматографический метод


<a id="p100133"></a>Для количественного анализа измеряют площади пиков проб и стандартных растворов. Содержание эллипса в зерне пшеницы рассчитывают по формуле:

                          S   x G x V x V
                           пр            ст
<a id="p100134"></a>                      X = -----------------,
                            S   x V  x P
                             ст    a

<a id="p100135"></a>    где:
<a id="p100136"></a>    X - содержание препарата "эллипс" в зерне, мг/кг;
<a id="p100137"></a>    G - содержание эллипса в стандартном растворе, нг;
<a id="p100138"></a>    S   - площадь пика анализируемой пробы, кв. мм;
     пр
<a id="p100139"></a>    V - общий объем пробы, мл;
<a id="p100140"></a>    S   - площадь пика стандартного раствора, кв. мм;
     ст
<a id="p100141"></a>    V  - объем хроматографируемой пробы, мкл;
     a
<a id="p100142"></a>    P - навеска пробы, г.
<a id="p100143"></a>    Тонкослойная хроматография
<a id="p100144"></a>    Количественная  оценка  проводится  путей сравнения площадей и
интенсивности окраски пятен пробы и рабочих растворов.
<a id="p100145"></a>    Содержание  эллипса  в  анализируемой  пробе  рассчитывают  по
следующей формуле:

                               A x V
<a id="p100146"></a>                           X = ------,
                               V  x P
                                1

<a id="p100147"></a>    где:
<a id="p100148"></a>    X - содержание эллипса в исследуемой пробе, мг/кг;
<a id="p100149"></a>    A   -   количество   эллипса,  найденное  путем  сравнения  со
стандартами, мкг;
<a id="p100150"></a>    V - конечный объем пробы, мл;
<a id="p100151"></a>    V   -  объем аликвоты, отобранной для хроматографирования, мл.
     1
При нанесении всей пробы V  = V.
                          1

<div align="center">

<a id="p100152"></a>    P - навеска исследуемой пробы, г.

</div>



## 3. <a id="p100153"></a>Требования безопасности


<a id="p100154"></a>Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях. При работе с ядовитыми и взрывчатыми веществами реакции следует проводить только в вытяжном шкафу, строго соблюдая правила производственной санитарии и личной гигиены.



<a id="p100155"></a>

---