---
title: "\"Методические указания по определению диафентиурона (пегаса) в воде, почве, цитрусовых, семенах хлопчатника хроматографическими методами\""
number: "6255-91"
issuer: "Министерство здравоохранения СССР"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-6255-91"
---

## "Методические указания по определению диафентиурона (пегаса) в воде, почве, цитрусовых, семенах хлопчатника хроматографическими методами"

# "Методические указания по определению диафентиурона (пегаса) в воде, почве, цитрусовых, семенах хлопчатника хроматографическими методами"

(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 N 6255-91)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждены<br>
Министерством здравоохранения СССР

</div>

<div align="center">

29 июля 1991 г. N 6255-91

</div>


<a id="p100002"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДИАФЕНТИУРОНА (ПЕГАСА) В ВОДЕ, ПОЧВЕ,**
**ЦИТРУСОВЫХ, СЕМЕНАХ ХЛОПЧАТНИКА ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ**

<a id="p100003"></a>Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
<a id="p100004"></a>Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.


## 1. <a id="p100005"></a>Краткая характеристика препарата


<a id="p100006"></a>Диафентиурон (пегас CGA 106630) - препарат производства фирмы "СибаГейги", кристаллическое вещество белого цвета, хорошо растворим в ацетонитриле.

                  H C  CH
                   3     3
                     \/
                    C-H
                   /
     /\\  O  /\\  /  H C   CH
    /  \\/ \/  \\/ S  3      3

| \\ \ / М.м. 384,59. |
| --- |

    \  //   \  //\   C   C
     \//     \//  \ / \ / \
             │     N   N   CH

| H C- 3 | CH | H | 3 H |
| --- | --- | --- | --- |

             CH
               3

<a id="p100008"></a>Рекомендован как несистемный инсектоакарицид. Легко разрушается под действием солнечного света. Рекомендуется хранить в закрытой таре при температуре не выше 5 °C.


## 2. <a id="p100009"></a>Определение диафентиурона в воде, почве, цитрусовых, семенах хлопчатника методами газовой и тонкослойной хроматографии



### <a id="p100010"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100011"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100012"></a>Метод основан на определении диафентиурона газожидкостной и тонкослойной хроматографией после извлечения из анализируемой пробы органическим растворителем. Тонкослойная хроматография проводится в тонком слое силикагеля. Газохроматографическое определение проводится на макрокапиллярной колонке либо на набивной колонке в виде гептафторпроизводного.

##### <a id="p100013"></a>2.1.2 Метрологическая характеристика метода

<a id="p100014"></a>Диапазон определяемых концентраций - 0,01 мг/л для воды; 0,03 мг/кг - для почвы, растений.


| Анализируемый объект | Размах варьирования, % | Среднее значение определения, % | Относительное стандартное откл., % | Доверительный интервал среднего, % n = 5, P = 0,95 |
| --- | --- | --- | --- | --- |
| Вода Почва Лимоны Семена хлопчатника | 85,7 - 90,5 80,1 - 85,3 77,1 - 86,0 75,0 - 85,0 | 87,5 82,6 84,3 80,7 | +/- 4,2 +/- 5,7 +/- 5,8 +/- 5,9 | +/- 4,6 +/- 7,9 +/- 7,8 +/- 8,0 |



### <a id="p100020"></a>2.2. Реактивы и растворы


<a id="p100021"></a>Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79.
<a id="p100022"></a>н-Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.
<a id="p100023"></a>Сульфат натрия безводный, [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).
<a id="p100024"></a>Хлороформ, ч, ГОСТ 20015-74.
<a id="p100025"></a>Ацетонитрил, ч, ТУ 6-09-3534-87.
<a id="p100026"></a>Оксид алюминия II ст. акт., ч, МРТУ 6-09-5296-68.
<a id="p100027"></a>Приготовление стандартных растворов диафентиурона
<a id="p100028"></a>Стандартный раствор, содержащий 1000 мкг/мл вещества, готовят растворением 50 г препарата в мерной колбе на 50 мл в ацетонитриле (ацетоне). Исходный основной раствор можно хранить в холодильнике в течение 2-х недель.
<a id="p100029"></a>Рабочие стандартные растворы готовят разбавлением исходного основного раствора. Рабочие растворы хранят не более 2-х суток (препарат разлагается на свету).
<a id="p100030"></a>Получение фторпроизводного диафентиурона с концентрацией 1 мкг/мл: 10 мкл основного стандартного раствора, содержащего 10 мкг вещества, переносят в мерную пробирку, прибавляют 10 мкл гептафтормасляного ангидрида и оставляют на 1 час. По истечении этого времени избыток реагентов отдувают в токе сжатого воздуха. Сухой остаток разбавляют в 10 мл гексана.
<a id="p100031"></a>К методу ГЖХ
<a id="p100032"></a>Гептафтормасляный ангидрид, ч, ТУ 6-09-40-2571-87.
<a id="p100033"></a>Азот газообразный, ГОСТ 9293-74.
<a id="p100034"></a>Хроматон N-AW (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30.
<a id="p100035"></a>К методу ТСХ
<a id="p100036"></a>Бромфеноловый синий, ТУ 6-09-4530-77.
<a id="p100037"></a>Нитрат серебра, ГОСТ 1277-81.
<a id="p100038"></a>Лимонная кислота, ГОСТ 908-79, 2-процентный раствор.
<a id="p100039"></a>Пластинки "Силуфол" (Хемапол, ЧССР).
<a id="p100040"></a>    Проявляющий реактив: Раствор А:  100 мг бромфенолового синего
                                     растворяют в 10 мл ацетона.
<a id="p100041"></a>                         Раствор Б:  1 г нитрата серебра
                                     растворяют в 40 мл воды и
                                     прибавляют 120 мл ацетона.
<a id="p100042"></a>Растворы А и Б сливают в мерную колбу на 200 мл и доводят ацетоном до метки.


### <a id="p100043"></a>2.3. Приборы, аппаратура, посуда


<a id="p100044"></a>Хроматограф "Цвет-106" с ТИД и ДПР.
<a id="p100045"></a>Стеклянная макрокапиллярная колонка с фазой SE-301 с толщиной пленки 2 мкм, диаметром 0,6 мм, длиной 55 м.
<a id="p100046"></a>Колонка стеклянная 1000 x 3 мм с 5% SE-30.
<a id="p100047"></a>Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.
<a id="p100048"></a>Аппарат для встряхивания, ТУ 64-21-1087-73.
<a id="p100049"></a>Микрошприц МШ-10, ТУ 2.833.106.
<a id="p100050"></a>Посуда лабораторная по [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74), 25336-82, 20292-74.
<a id="p100051"></a>Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.


### <a id="p100052"></a>2.4. Отбор, хранение и доставка проб


<a id="p100053"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 за N 2051-79.


### <a id="p100054"></a>2.5. Проведение определения



##### <a id="p100055"></a>2.5.1 Экстракция

<a id="p100056"></a>Вода. 500 мл пробы помещают в делительную воронку и препарат экстрагируют трижды по 30 мл хлороформа. Отделяют органический слой, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до объема 0,3 - 0,5 мл при температуре бани не выше 60 °C. Досуха удаляют остаток растворителя на воздухе. Далее проводят определение методами ГЖХ и ТСХ.
<a id="p100057"></a>Почва, лимоны, семена хлопчатника. 10 г анализируемой пробы (лимоны и семена хлопчатника измельчают на электромельнице, почву просушивают и просеивают) помещают в колбу емкостью 500 мл и заливают 150 мл хлороформа. Встряхивают в течение 1,5 - 2 часов. Экстракцию повторяют трижды. Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе до 1 - 2 мл при температуре не выше 60 °C.

##### <a id="p100058"></a>2.5.2 Очистка экстракта

<a id="p100059"></a>Упаренный экстракт (1 - 2 мл) вносят в стеклянную колонку, заполненную 10 г оксида алюминия и 2 - 3 г безводного сульфата натрия, уплотненных и промытых ацетонитрилом. Элюируют пробу 200 мл ацетонитрила. Элюат концентрируют до объема 0,2 - 0,5 мл. Остаток в колбе растворяют в 50 мл гексана и переносят в делительную воронку. Прибавляют в делительную воронку 15 мл ацетонитрила, встряхивают, дают разделиться фазам. Отделяют ацетонитрил, а к гексану добавляют новые 15 мл ацетонитрила. Экстракцию повторяют трижды. Объединяют ацетонитрильную фракцию, концентрируют до объема ~ 0,1 мл. Полностью удаляют растворитель на воздухе. Далее проводят определение методами ГЖХ и ТСХ.

##### <a id="p100060"></a>2.5.3 Определение методом ГЖХ

<a id="p100061"></a>А. Условия хроматографирования при определении на макрокапиллярной колонке
<a id="p100062"></a>Хроматограф "Цвет-106" с термоионным детектором.
<a id="p100063"></a>Колонка макрокапиллярная с фазой SE-301, толщина пленки 2 мкм, диаметр 0,6 мм, длина 55 м.
<a id="p100064"></a>Температура испарителя - 230 °C.
<a id="p100065"></a>Температура колонки - 230 °C.
<a id="p100066"></a>Расход газа-носителя - 30 мл/мин.
<a id="p100067"></a>Время удерживания - 3,7 мин.
<a id="p100068"></a>Минимально детектируемое количество - 20 нг.
<a id="p100069"></a>Б. Условия хроматографирования при определении в виде фторпроизводного
<a id="p100070"></a>Пробу после концентрирования переносят количественно 1 - 2 мл ацетонитрила в пробирку на шлифе. Удаляют растворитель с помощью сжатого воздуха полностью. К сухому остатку приливают 0,1 мл ацетонитрила и 10 мкл гептафтормасляного ангидрида, оставляют на 1 час на воздухе. Затем удаляют избыток реагента струей воздуха полностью. К сухому остатку приливают 1 мл гексана и аликвоту 3 - 5 мкл вводят в хроматограф.
<a id="p100071"></a>Условия хроматографирования
<a id="p100072"></a>Газовый хроматограф "Цвет-106" с детектором постоянной скорости рекомбинации.
<a id="p100073"></a>Носитель - хроматон N-AW (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30.
<a id="p100074"></a>Колонка стеклянная 1000 x 3 мм.
<a id="p100075"></a>Скорость газа-носителя - 50 мл/мин.
                                -12
<a id="p100076"></a>    Шкала электрометра - 20 x 10    А.
<a id="p100077"></a>Температура колонки - 170 °C.
<a id="p100078"></a>Температура испарителя - 240 °C.
<a id="p100079"></a>Температура детектора - 240 °C.
<a id="p100080"></a>Вводимый объем - 5 мкл.
<a id="p100081"></a>Линейный диапазон детектирования - 2 - 10 нг.

<div align="center">

<a id="p100082"></a>Время удерживания - 4 мин.

</div>



### <a id="p100083"></a>2.6. Обработка результатов


<a id="p100084"></a>Содержание диафентиурона в пробе вычисляют по формуле:

                          G   x h   x V
                           ст    пр    общ
<a id="p100085"></a>                      X = ----------------,
                            h   x V  x P
                             ст    1

<a id="p100086"></a>    где:
<a id="p100087"></a>    X - содержание препарата в пробе, мг/кг, мг/л;
<a id="p100088"></a>    G     -   количество   стандартного   раствора,  введенного  в
     ст
хроматограф, нг;
<a id="p100089"></a>    h   - высота пика стандартного раствора, мм;
     ст
<a id="p100090"></a>    h   - высота пика пегаса в исследуемой пробе, мм;
     пр
<a id="p100091"></a>    V  - объем экстракта, введенный в хроматограф, мкл;
     1
<a id="p100092"></a>    V    - общий объем пробы, мл;
     общ
<a id="p100093"></a>    P - навеска пробы, г (мл).


### <a id="p100094"></a>2.7. Определение методом ТСХ


<a id="p100095"></a>    Пробу,   сконцентрированную   до   объема   0,1   -   0,2  мл,
количественно    наносят   на   пластинку   "Силуфол"   (пластинка
предварительно  промыта  в  ацетоне),  смывая  остаток  2 - 3 раза
хлороформом. Центр пятна должен быть на расстоянии 2 см от нижнего
края  пластинки.  Справа  и  слева  от  пробы  наносят стандартные
растворы пестицида, содержащие 2, 5, 10 мкг препарата. Пластинку с
нанесенными  растворами  помещают  в  хроматографическую камеру, в
которую налита смесь гексан:хлороформ (1:2). После поднятия фронта
растворителей на 10 см пластинку вынимают и оставляют на несколько
мин. на воздухе для испарения подвижного растворителя. После этого
пластинку  обрабатывают из пульверизатора раствором бромфенолового
синего,  затем  обесцвечивают   2-процентным   раствором  лимонной
кислоты.  Диафентиурон  проявляется в виде пятен сине-бурого цвета
на желтом фоне с R  0,5 +/- 0,05.
                  f
<a id="p100096"></a>Количество препарата в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартного раствора.
<a id="p100097"></a>Количество препарата в пробе определяют по формуле:

                                 A
<a id="p100098"></a>                             X = -,
                                 P

<a id="p100099"></a>где:
<a id="p100100"></a>X - содержание пегаса в пробе, мг/кг, мг/л;
<a id="p100101"></a>A - количество пегаса, найденное в пробе, мкг;

<div align="center">

<a id="p100102"></a>P - навеска пробы, г (мл).

</div>



### <a id="p100103"></a>2.8. Техника безопасности


<a id="p100104"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.



<a id="p100105"></a>

---