---
title: "\"Временные методические указания по определению остаточных количеств диметилового эфира аминофумаровой кислоты в воде, почве, яблоках, виноградном соке, эфирных маслах, рисе, картофеле методом газовой хроматографии\""
number: "6230-91"
issuer: "Министерство здравоохранения СССР"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-6230-91"
---

## "Временные методические указания по определению остаточных количеств диметилового эфира аминофумаровой кислоты в воде, почве, яблоках, виноградном соке, эфирных маслах, рисе, картофеле методом газовой хроматографии"

# "Временные методические указания по определению остаточных количеств диметилового эфира аминофумаровой кислоты в воде, почве, яблоках, виноградном соке, эфирных маслах, рисе, картофеле методом газовой хроматографии"

(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 N 6230-91)


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждены<br>
Министерством здравоохранения СССР

</div>

<div align="center">

29 июля 1991 г. N 6230-91

</div>


<a id="p100002"></a>**ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДИМЕТИЛОВОГО**
**ЭФИРА АМИНОФУМАРОВОЙ КИСЛОТЫ В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЯБЛОКАХ,**
**ВИНОГРАДНОМ СОКЕ, ЭФИРНЫХ МАСЛАХ, РИСЕ, КАРТОФЕЛЕ**
**МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100003"></a>Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.
<a id="p100004"></a>Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.


## 1. <a id="p100005"></a>Краткая характеристика препарата


<a id="p100006"></a>Торговое наименование: Фумар.
<a id="p100007"></a>Производители: Россия, Украина.
<a id="p100008"></a>Действующее вещество: диметиловый эфир аминофумаровой (дигидроаспарагиновой) кислоты.
<a id="p100009"></a>Структурная формула:

        O
        \\
    CH O-C     NH
      3   \   /  2
           C=C
          /   \
         H     C-OCH
               \\   3
                O

<a id="p100010"></a>    Эмпирическая формула: C H NO .
                           6 9  4
<a id="p100011"></a>Молекулярная масса: 159.
<a id="p100012"></a>Желтая жидкость, растворимая в большинстве органических растворителей (спирте, бензоле, хлороформе, ацетоне), воде. Температура плавления 28 - 29 °C, температура кипения 82 °C при 2 мм рт. ст. Негорюча, невзрывоопасна, слаболетуча. Выдерживает длительное нагревание при 50 °C. После замерзания не теряет своих свойств.
<a id="p100013"></a>Используется в виде 10% раствора в диметилсульфоксиде.
<a id="p100014"></a>    Малотоксичен.  ЛД    для  крыс  6000  мг/кг,  не обладает мутагенными и
                     50
канцерогенными свойствами, не раздражает кожу и слизистые оболочки.
<a id="p100015"></a>Гигиенические нормативы:
<a id="p100016"></a>ДСД 0,00001 мг/кг.
<a id="p100017"></a>МДУ (виноград, яблоня) - не требуется.
<a id="p100018"></a>ОБУВ (воздух рабочей зоны) - 0,5 мг/куб. м.
<a id="p100019"></a>Атмосферный воздух - не требуется.
<a id="p100020"></a>ПДК в воде водоемов - 0,000003 мг/куб. дм.
<a id="p100021"></a>ПДК в почве - не требуется.
<a id="p100022"></a>Область применения препарата
<a id="p100023"></a>Фумар, 10% р.в. ДМСО, - регулятор роста растений, рекомендован для опытно-производственного применения на черенках виноградной лозы, яблони, эфиромасличных культур. Для улучшения срастаемости привоя и подвоя их срезы обмакивают в раствор препарата при норме расхода 0,1 - 15 мл/л.


## 2. <a id="p100024"></a>Методика определения остаточных количеств диметилового эфира дигидроаспарагиновой кислоты в воде, почве, яблоках, виноградном соке, эфирных маслах, рисе, картофеле методом газовой хроматографии



### <a id="p100025"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100026"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100027"></a>Метод основан на газохроматографическом определении препарата фумар с применением селективных азотно-фосфорных детекторов после извлечения его из субстатов метиленхлоридом, перераспределения в этанол и очистки активированным углем. Извлечение препарата из эфирных масел основано на его перераспределении в системе двух несмешивающихся жидкостей.
<a id="p100028"></a>Метод позволяет селективно определять содержание фумара на фоне различных примесей. Предел обнаружения фумара 0,000001 мг/мл в растворе в этиловом спирте, что соответствует его содержанию в исследуемых субстратах 0,0000002 мг/кг (л).
<a id="p100029"></a>Для определения использовался газовый хроматограф Mega 5300 с селективным азотно-фосфорным детектором (NPD) фирмы Carlo Erba Strument (Италия), позволяющий селективно определять азотсодержащие соединения. Линейный диапазон детектора 1000. Определение проводили на капиллярной колонке с привитой жидкой фазой FFAP (США). Запись хроматограмм и измерение площадей хроматографических пиков проводили на интеграторе SP 4290 фирмы Spectra Physics (США). Пробу дозировали микрошприцем Hamilton (США). Фумар идентифицировали на хромато-масс-спектрометре M80A фирмы Hitachi (Япония) с использованием вышеуказанной капиллярной колонки при ионизирующем напряжении 20 эВ, в токе эмиссии электронов 10 мА (M/Z, приведены пики относительной интенсивностью > 10%): 159 (М), 128, 101, 100, 69, 68, 59, 41, 40.

##### <a id="p100030"></a>2.1.2 Избирательность метода

<a id="p100031"></a>Метод избирателен в присутствии других росторегуляторов (гобберлин, гетероауксин, ивин).

##### <a id="p100032"></a>2.1.3 Метрологическая характеристика метода для определения фумара в:

<a id="p100033"></a>а) воде:
<a id="p100034"></a>Число параллельных определений - 5.
<a id="p100035"></a>Среднее значение определения - 96%.
<a id="p100036"></a>Относительное стандартное отклонение - 4,2%.
<a id="p100037"></a>Доверительный интервал при p = 0,95 - +/- 5,5%;
<a id="p100038"></a>б) почве:
<a id="p100039"></a>Число параллельных определений - 5.
<a id="p100040"></a>Среднее значение определения - 93%.
<a id="p100041"></a>Относительное стандартное отклонение - 7,1%.
<a id="p100042"></a>Доверительный интервал при p = 0,95 - +/- 7,9%;
<a id="p100043"></a>в) яблоках:
<a id="p100044"></a>Число параллельных определений - 5.
<a id="p100045"></a>Среднее значение определения - 90%.
<a id="p100046"></a>Относительное стандартное отклонение - 10,6%.
<a id="p100047"></a>Доверительный интервал при p = 0,95 - +/- 11,0%;
<a id="p100048"></a>г) виноградном соке:
<a id="p100049"></a>Число параллельных определений - 5.
<a id="p100050"></a>Среднее значение определения - 91%.
<a id="p100051"></a>Относительное стандартное отклонение - 11,2%.
<a id="p100052"></a>Доверительный интервал при p = 0,95 - +/- 11,5%;
<a id="p100053"></a>д) эфирных маслах:
<a id="p100054"></a>Число параллельных определений - 5.
<a id="p100055"></a>Среднее значение определения - 87%.
<a id="p100056"></a>Относительное стандартное отклонение - 13,3%.
<a id="p100057"></a>Доверительный интервал при p = 0,95 - +/- 13,9%;
<a id="p100058"></a>е) рисе:
<a id="p100059"></a>Число параллельных определений - 5.
<a id="p100060"></a>Среднее значение определения - 91%.
<a id="p100061"></a>Относительное стандартное отклонение - 9,9%.
<a id="p100062"></a>Доверительный интервал при p = 0,95 - +/-10,6;
<a id="p100063"></a>ж) картофеле:
<a id="p100064"></a>Число параллельных определений - 5.
<a id="p100065"></a>Среднее значение определения - 89%.
<a id="p100066"></a>Относительное стандартное отклонение - 10,4%.
<a id="p100067"></a>Доверительный интервал при p = 0,95 - +/- 11,1%.
<a id="p100068"></a>Гарантированный предел обнаружения для всех случаев - 0,0000005 мг/кг.


### <a id="p100069"></a>2.2. Реактивы и материалы


<a id="p100070"></a>Метиленхлорид хч, ТУ 6-09-3716-80.
<a id="p100071"></a>Этиловый спирт хч, ТУ 6-09-1710-77.
<a id="p100072"></a>Уголь активированный марки КАД молотый или OV-A.
<a id="p100073"></a>Стандартный раствор диметилового эфира аминофумаровой кислоты в этиловом спирте конц. 0,005 мг/мл.
<a id="p100074"></a>Натрий сернокислый безводный ч, [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).


### <a id="p100075"></a>2.3. Приборы и посуда


<a id="p100076"></a>Газовый хроматограф Mega 5300 с селективным азотно-фосфорным детектором NDP фирмы Carlo Erba Strument (Италия).
<a id="p100077"></a>Разделяющая капиллярная колонка кварцевая длиной 25 м, внутренним диаметром 0,3 мм, покрытая жидкой фазой FFAP (США), толщина пленки 0,3 микрона.
<a id="p100078"></a>Интегратор SP 4290 фирмы Spectra Physics (США).
<a id="p100079"></a>Весы лабораторные равноплечие второго класса ВЛР-200, ТУ 25-86-11-79Е.
<a id="p100080"></a>Воронка химическая, 60 мм, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74).
<a id="p100081"></a>Гири второго класса набора Г-2-210, ГОСТ 7328-73.
<a id="p100082"></a>Ротационный вакуум-испаритель, ТУ 25-11-917-76.
<a id="p100083"></a>Холодильник бытовой.
<a id="p100084"></a>Гомогенизатор.
<a id="p100085"></a>Колба Бунзена, ГОСТ 6514-75.
<a id="p100086"></a>Воронка Бюхнера, ГОСТ 9147-73.
<a id="p100087"></a>Колбы конические со шлифом на 3 л, 500, 100, 50 мл, ГОСТ 10394-72.
<a id="p100088"></a>Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ 10696-75.
<a id="p100089"></a>Цилиндры мерные на 1000, 500, 100, 50 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100090"></a>Воронки делительные на 2 л, ГОСТ 86613-75.
<a id="p100091"></a>Фильтры бумажные, ТУ 6-60-1678-77.


### <a id="p100092"></a>2.4. Отбор проб


<a id="p100093"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 за N 2051-79.
<a id="p100094"></a>Продолжительность хранения отобранных проб при температуре 0 +/- 5 °C:
<a id="p100095"></a>а) воды - 7 суток;
<a id="p100096"></a>б) почвы - 6 суток;
<a id="p100097"></a>в) яблок - 2 суток;
<a id="p100098"></a>г) виноградного сока - 2 суток;
<a id="p100099"></a>д) эфирных масел - 30 суток;
<a id="p100100"></a>е) риса - 30 суток;
<a id="p100101"></a>ж) картофеля - 10 суток.


### <a id="p100102"></a>2.5. Подготовка к определению



##### <a id="p100103"></a>2.5.1 Приготовление градуировочных растворов

<a id="p100104"></a>Для приготовления градуировочных растворов из стандартного раствора диметилового эфира аминофумаровой кислоты готовят калибровочные растворы с содержанием определяемого вещества от 0,005 до 0,000001 мг/мл методом последовательного разбавления. Продолжительность хранения стандартных калибровочных растворов - 1 месяц.


### <a id="p100105"></a>2.6. Описание определения



##### <a id="p100106"></a>2.6.1 Экстракция и очистка экстрактов


###### <a id="p100107"></a>2.6.1.1 Почва

<a id="p100108"></a>5 кг измельченного образца почвы разделяют на 5 частей (~ по 1 кг каждой), помещают в 5 конических колб емкостью 3 л и экстрагируют каждую часть 1 л метиленхлорида. Смесь фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера, дважды промывая остаток на фильтре 0,5 л метиленхлорида. Фильтрат дважды промывают 100 мл воды, сушат сульфатом натрия, фильтруют. Растворитель отгоняют на ротационном испарителе до объема 3 - 5 мл, добавляют 20 мл этилового спирта, 0,5 г активированного угля, встряхивают в течение 5 мин., помещают на 0,5 ч в холодильник (температура 0 +/- 5 °C). Раствор фильтруют через бумажный фильтр и отгоняют этанол до объема ~ 0,5 мл. Чистым этанолом объем пробы доводят до 1 мл.

###### <a id="p100109"></a>2.6.1.2 Вода

<a id="p100110"></a>5 литров пробы разделяют на 5 частей (~ по 1 л). В делительную воронку емкостью 2 л помещают 200 мл метиленхлорида и по очереди экстрагируют все 5 частей. Экстракцию повторяют еще дважды на свежих порциях (по 200 мл) метиленхлорида. Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия, фильтруют, упаривают до объема 1 - 2 мл, добавляют 20 мл этанола и упаривают до объема ~ 0,5 мл. Чистым этанолом объем пробы доводят до 1 мл.

###### <a id="p100111"></a>2.6.1.3 Яблоки

<a id="p100112"></a>Для анализа 5 кг яблок измельчают в гомогенизаторе до однородной массы, которую затем разделяют на 5 частей (~ по 1 кг). В делительную воронку емкостью 2 л помещают 0,6 л метиленхлорида и по очереди экстрагируют все 5 частей пробы. Экстракцию проводят еще дважды на свежих порциях метиленхлорида (по 0,5 л). Объединенные фильтраты дважды промывают 0,5 л воды и сушат безводным сульфатом натрия. Хлористый метилен отгоняют на ротационном испарителе до объема 2 - 3 мл, добавляют 20 мл этанола, 0,5 г активированного угля, встряхивают в течение 5 мин. и помещают в холодильник (температура 0 +/- 5 °C). Раствор фильтруют через бумажный фильтр и отгоняют до объема ~ 0,5 мл и чистым этанолом доводят до 1 мл.

###### <a id="p100113"></a>2.6.1.4 Виноградный сок

<a id="p100114"></a>5 литров виноградного сока разделяют на 5 частей (~ по 1 л). В делительную воронку емкостью 2 л помещают 300 мл метиленхлорида и по очереди экстрагируют все 5 частей. Экстракцию повторяют еще дважды (по 300 мл метиленхлорида). Экстракты объединяют. Объединенные фильтраты дважды промывают 0,5 л воды и сушат безводным сульфатом натрия. Хлористый метилен отгоняют на ротационном испарителе до объема 2 - 3 мл, добавляют 20 мл этанола, 0,5 г активированного угля, встряхивают в течение 5 мин. и помещают в холодильник (температура 0 +/- 0,5 °C). Раствор фильтруют через бумажный фильтр и отгоняют до объема ~ 0,5 мл и чистым этанолом доводят до 1 мл.

###### <a id="p100115"></a>2.6.1.5 Эфирные масла

<a id="p100116"></a>Навеску 0,5 кг эфирного масла мяты, лаванды, розы, шалфея помещают в делительную воронку емкостью 2 л и встряхивают в течение 5 мин. с 500 мл диметилсульфоксида. К образовавшемуся раствору добавляют 500 мл гексана, встряхивают 5 мин. и отделяют верхний слой. Операцию повторяют еще 4 раза. Оставшийся раствор переносят в делительную воронку с 1 л 10-процентного раствора сульфата натрия и экстрагируют полученную смесь метиленхлоридом (5 x 300 мл). Объединенные экстракты промывают водой (5 x 200 мл), сушат сульфатом натрия. Хлористый метилен отгоняют досуха, к остатку добавляют 0,1 мл чистого этилового спирта.

###### <a id="p100117"></a>2.6.1.6 Рис

<a id="p100118"></a>5 кг семян риса измельчают в гомогенизаторе до однородной массы, которую затем разделяют на 5 примерно равных частей. Каждую часть помещают в 3-литровую коническую колбу, добавляют по 1 л метиленхлорида и размешивают в течение 20 мин. Смесь фильтруют в вакууме на воронке Бюхнера, остаток на фильтре дважды промывают 300 мл метиленхлорида. Все экстракты объединяют и упаривают на ротационном испарителе до объема 3 - 5 мл, добавляют 20 мл этилового спирта, 0,5 г активированного угля, встряхивают в течение 5 мин., помещают на 0,5 ч в холодильник (температура 0 + 5 °C). Раствор фильтруют через бумажный фильтр и отгоняют этанол до объема ~ 0,5 мл. Чистым этанолом объем пробы доводят до 1 мл.

###### <a id="p100119"></a>2.6.1.7 Картофель

<a id="p100120"></a>Для анализа 5 кг клубней картофеля измельчают в гомогенизаторе до однородной массы, которую затем разделяют на 5 частей (~ по 1 кг). В делительную воронку емкостью 2 л помещают 0,6 л метиленхлорида и по очереди экстрагируют все 5 частей пробы. Экстракцию проводят еще дважды на свежих порциях метиленхлорида (по 0,5 л). Объединенные фильтраты дважды промывают 0,5 л воды и сушат безводным сульфатом натрия. Хлористый метилен отгоняют на ротационном испарителе до объема 2 - 3 мл, добавляют 20 мл этанола, 0,5 г активированного угля, встряхивают в течение 5 мин. и помещают в холодильник (температура 0 +/- 5 °C). Раствор фильтруют через бумажный фильтр и отгоняют до объема ~ 0,5 мл и чистым этанолом доводят до 1 мл.

##### <a id="p100121"></a>2.6.2 Условия хроматографирования

<a id="p100122"></a>Разделяющая колонка длиной 25 м, кварцевая, внутренним диаметром 0,3 мм, покрыта жидкой фазой FFAP, толщина пленки 0,3 микрона.
<a id="p100123"></a>Газ-носитель - гелий.
<a id="p100124"></a>Скорость потока газа-носителя - 10 мл/мин.
<a id="p100125"></a>Температура детектора и испарителя - 310 °C.
<a id="p100126"></a>Температура колонки программируется от 50 до 230 °C со скоростью 5 град./мин.
<a id="p100127"></a>Загрубление множителя шкалы чувствительности усилителя 1.
<a id="p100128"></a>Объем вводимой пробы от 1 до 10 мкл.
<a id="p100129"></a>Время выхода диметилового эфира дигидроаспарагиновой кислоты 21 мин. 57 сек.
<a id="p100130"></a>Органические примеси, не содержащие азота, детектором не фиксируются.
<a id="p100131"></a>Используя калибровочные растворы, строят график зависимости показаний интегратора (отн. ед.) от концентрации диметилового эфира дигидроаспарагиновой кислоты в мг/мл этанола, после чего анализируют пробы с неизвестным содержанием препарата и по калибровочному графику, исходя из показаний интегратора, определяют его содержание в исследуемом этанольном растворе. При анализе объем вводимой пробы должен быть таким же, как и при построении калибровочного графика. Проводят три параллельных определения и вычисляют среднее значение. При определении содержания в этанольных растворах в концентрациях, 0,00001 мг/мл объем вводимой пробы должен составлять 10 мкл.


### <a id="p100132"></a>2.7. Обработка результатов анализа


<a id="p100133"></a>Полученное значение концентрации диметилового эфира дигидроаспарагиновой кислоты в этанольном растворе делят на 5 и получают содержание препарата в исследуемой пробе в мг/кг (л).


## 3. <a id="p100134"></a>Техника безопасности


<a id="p100135"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.



<a id="p100136"></a>

---