--- title: "\"Методические указания по газохроматографическому определению гексафлумурона (сонета) в воде, почве, картофеле и ботве\"" number: "6212-91" issuer: "Министерство здравоохранения СССР" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-6212-91" --- ## "Методические указания по газохроматографическому определению гексафлумурона (сонета) в воде, почве, картофеле и ботве" # "Методические указания по газохроматографическому определению гексафлумурона (сонета) в воде, почве, картофеле и ботве" (утв. Минздравом СССР 29.07.1991 N 6212-91)
Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6212-91
**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ** **ПО ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ** **ГЕКСАФЛУМУРОНА (СОНЕТА) В ВОДЕ, ПОЧВЕ, КАРТОФЕЛЕ И БОТВЕ** Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде. Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками. ## 1. Краткая характеристика препарата F O O Cl _____/ \\ \\ _____/ // \\───C-N-C-N-// \\-O-CF -CF H C H Cl F N O . | \ ___ / 2 2 16 8 2 6 2 3 | | --- | F Cl М.м. 461. Гексафлумурон (сонет, консалт, ХКД 473, OMS 3031, DOWCO 473). Химическое название - N-(3,5-дихлор-4-(1,1,2,2- тетрафторэтоксифенил)амино)-карбонил-2,6-дифторбензамид, порошок белого цвета без запаха, температура плавления 202 - 206 °C, -9 -12 упругость пара 5,87 x 10 Па, 298 °K (44,03 x 10 мм рт. ст.), -6 летучесть паров 1,09 x 10 мг/куб. м, растворимость (г/л при -5 18 °C) в воде - 2,7 x 10 , ацетоне > 100, толуоле - 6,4, метаноле - 11,3, ксилоле - 5,2, дихлорметане - 14,6, этилацетате > 100, пропаноле - 3. ## 2. Методика определения гексафлумурона в воде, почве, картофеле, ботве ### 2.1. Основные положения ##### 2.1.1 Принцип метода Метод основан на извлечении пестицида из анализируемого объекта этанолом, реэкстракции гексафлумурона из водно-спиртового раствора в гексан с последующей очисткой экстракта на колонке с силикагелем и идентификации препарата способом газовой хроматографии. Газохроматографическое определение проводят с детектором по захвату электронов, на фазе QF-1 - 10% (OV-210) при t кол. 150 °C. ##### 2.1.2 Метрологическая характеристика метода Нижний предел обнаружения - 1 нг. Метрологическая характеристика определения сонета в воде, почве, картофеле, ботве приведена в таблице 1. Таблица 1
**МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОНЕТА**
**В ВОДЕ, ПОЧВЕ, КАРТОФЕЛЕ, БОТВЕ** | Определяемое вещество | Исследуемый объект | Нижний предел обнаружения, мг/кг, ГЖХ | Размах варьирования, % | Среднее значение определения, % | Относительное стандартное отклонение, +/- % | | --- | --- | --- | --- | --- | --- | | Сонет | вода почва картофель ботва | 0,005 0,01 0,005 0,01 | 80 - 100 75 - 100 80 - 100 75 - 100 | 86 91 92 91 | 9,1 9,6 8,7 10,4 | ##### 2.1.3 Избирательность метода Метод избирателен в присутствии производных циклопарафинов, альфа-, гамма-, бета-ГХЦГ. На других фазах определению могут мешать изомеры-ГХЦГ. ### 2.2. Реактивы и материалы Этанол, 96%, ГОСТ 5962-81. Гексан, ч, ТУ 6-09-3375-78. Толуол, чда, [ГОСТ 5789-78](https://bukva.ai/docs/gost-5789-78). Этилацетат, ч, [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76). Ацетонитрил, ч, ТУ 6-09-3534-82. Хлорид натрия, ч, ГОСТ 4233-77. Сульфат натрия безводный, ч, [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76). Силикагель Л 40/100 м для колоночной хроматографии (Чехословакия). Вода дистиллированная. Фильтры МРТУ 6-09-2411-65. Фаза неподвижная: трифторпропилметилсиликоновый каучук QF-1 (OV-210). Носитель инертный: Инертон-Супер 0,125 - 0,160 мм. Азот газообразный осч, ГОСТ 9293-74. Основной стандартный раствор (ОСР) гексафлумурона с концентрацией 100 мкг/мл готовят взятием навески 5 мг (0,005 г) хч вещества, перенесением в мерную колбу объемом 50 мл, прибавлением 10 мл ацетона и доведением н-гексаном до метки. Устойчив при хранении в течение 3-х месяцев. Рабочий стандартный раствор 1 гексафлумурона (РСР 1) готовят внесением 2,5 мл ОСР в мерную колбу емкостью 25 мл и доведением н-гексаном до метки. Концентрация сонета 10 мкг/мл. Рабочий стандартный раствор 2 гексафлумурона готовят внесением 1 мл РСР 1 в мерную колбу емкостью 10 мл и доведением н-гексаном до метки. Концентрация сонета 1 мкг/мл. Растворы устойчивы в холодильнике в течение 10 дней. ### 2.3. Приборы и посуда Газовый хроматограф "Цвет-164" с детектором постоянной скорости рекомбинации (возможно использование другого прибора с одним из вариантов электронозахватного детектора). Вытяжной шкаф. Холодильник. Ротационный вакуумный испаритель типа ИР-1М, ТУ 25-11-917-76. Аппарат для встряхивания АВУ-60, ТУ 64-1-2451-78. Воронки делительные на 500 - 1000 мл, ГОСТ 25336-82. Воронки конические, диаметр 3 и 5 см, ГОСТ 25336-82. Воронки Бюхнера, ГОСТ 9147-80. Колбы Бунзена, ГОСТ 25336-82. Колбы конические, ГОСТ 25336-82, с притертой пробкой на 50 мл, 100 мл, 250 мл, ГОСТ 9737-70. Пипетки 0,1; 1; 5 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74). Цилиндры мерные 10 и 50 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74). Колбы круглодонные, ГОСТ 25336-82, на шлифе 50 мл, ГОСТ 9737-70. Пробирки мерные - цена деления 0,1 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74). Колонки для адсорбционной хроматографии размером 500 x 15 мм. Колбы мерные вместимостью 10 мл, 25 мл, 50 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74). Микрошприц на 10 мкл МШ-10, ТУ SE-2.833.024. ### 2.4. Подготовка к определению ##### 2.4.1 Отбор проб Отбор, хранение и доставка проб производятся в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, N 2051-79 от 21.08.79. ##### 2.4.2 Приготовление хроматографической колонки для газожидкостной хроматографии Для приготовления 20 г набивки, содержащей 10% QF-1 на Инертоне-Супер (0,125 - 0,160 мм), взвешивают в бюксе 2 г жидкой фазы QF-1 (OV-210), которые растворяют в 40 мл ацетона. Полученную смесь выливают в круглодонную колбу на шлифе емкостью 500 мл, содержащую 18 г носителя. Тщательно перемешивают, оставляют на ночь, закрыв плотно пробкой. Затем осторожно упаривают на ротационном испарителе до исчезновения запаха ацетона. Затем помещают в сушильный шкаф на 2 - 3 часа при t = 100 +/- 5 °C. Стеклянную хроматографическую колонку, предварительно промытую хромовой смесью, дистиллированной водой, этанолом и диэтиловым эфиром, высушенную досуха и содержащую прокладку из стекловаты, наполняют носителем и устанавливают в термостат колонки. Термостатируют колонку в течение 12 - 18 часов при 200 - 220 °C и слабом потоке газа-носителя, не подсоединяя к детектору. После продувки колонку присоединяют к детектору. ### 2.5. Описание определения ##### 2.5.1 Экстракция Вода. К 200 мл воды добавляют 5 г NaCl, перемешивают и экстрагируют гексафлумурон в делительной воронке н-гексаном трижды, порциями по 30 - 50 мл, встряхивая воронку в течение 3 мин. Гексановые экстракты объединяют, фильтруют через воронку со слоем безводного сернокислого натрия. Воронку готовят следующим образом: в нижнюю суживающуюся часть воронки (d = 5 см) закладывают тампон из белой ваты (50 мг) и насыпают слой безводного сернокислого натрия - 1,5 см. После окончания фильтрации воронку промывают 6 мл гексана и концентрируют на ротационном испарителе под вакуумом при 45 °C досуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл н-гексана и вводят в хроматограф 3 - 5 мкл. Почва. К 100 г воздушно-сухой почвы добавляют 10 мл воды, хорошо перемешивают и заливают 100 мл этанола. Гексафлумурон экстрагируют из почвы в течение 1 часа на аппарате для встряхивания. Экстракт фильтруют с отсасыванием в колбу Бунзена через воронку Бюхнера с плотным фильтром, применяя вакуум. Повторяют экстракцию 40 мл этанола в течение 30 мин. Промывают остаток этанолом и объединяют экстракты. Объединенные этанольные экстракты сливают в делительную воронку, добавляют 100 мл 5-процентного водного раствора хлорида натрия (NaCl). Гексафлумурон реэкстрагируют из этой смеси 3 раза гексаном по 3 минуты, используя каждый раз по 30 мл гексана. Гексановые экстракты объединяют, фильтруют через воронку со слоем сернокислого натрия (см. [воду](#p100071)), концентрируют на ротационном испарителе досуха. Далее очистка, как описано ниже (см. [очистку](#p100075) экстрактов от коэкстрактивных веществ). Картофель, ботва. Для исследования отбирают средний образец продукта, тщательно измельчают. Для анализа используют навеску в 20 г. Исследуемый образец помещают в колбу с притертой пробкой и заливают 60 мл этанола. Экстракцию гексафлумурона проводят на шутель-аппарате в течение 1 часа. Экстракты фильтруют, применяя вакуум. Экстракцию повторяют и далее проводят определение, как описано выше для почвы. ##### 2.5.2 Очистка экстрактов от коэкстрактивных веществ В адсорбционную хроматографическую колонку помещают небольшой ватный тампон, затем насыпают 1 см безводного сернокислого натрия, 3 г (5 см) силикагеля Л 40/100 м для колоночной хроматографии, снова слой 1 см безводного сернокислого натрия. Промывают колонку 50 мл гексана, затем 10 мл толуола. Сухой остаток экстракта в колбе смывают дважды 2 мл толуола и переносят в колонку. Добавляют в колонку 10 мл толуола и вытекающий элюат отбрасывают. В колонку добавляют 40 мл 1-процентного раствора этилацетата в толуоле. Первые 10 мл элюата отбрасывают. Следующие 25 мл отбирают в круглодонную колбу. Элюат отгоняют на ротационном испарителе до объема 0,2 - 0,3 мл и упаривают досуха в токе азота или воздуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл гексана и используют для ГЖХ-анализа. ##### 2.5.3 Определение газожидкостной хроматографией Хроматограф марки "Цвет" с детектором по захвату электронов. Колонка стеклянная спиральная, длина 1 м, диаметр 3 мм, заполненная фазой 10% QF-1 на Инертоне-Супер (0,125 - 0,16 мм) (OV-210). -12 Рабочая шкала электрометра 20 x 10 А. Скорость протяжения диаграммной ленты 240 мм/час. Расход газа-носителя - азота 60 мл/мин. Температура термостата колонки - 150 °C. Температура испарителя 170 °C. Температура термостата детектора 200 °C. Вводимый объем - 3 мкл. Время удерживания: в указанных условиях препарат дает два пика: I - t = 4,7; II - t = 11,5 мин. уд удер Для количественного определения измеряют площадь двух пиков в пробе и в стандарте (пики должны быть близки по величине). Количественное определение проводят методом соотношения со стандартом. Для этого до и после анализа проб вводят в хроматограф по 3 - 5 мкл рабочих растворов 2 и вычисляют среднее арифметическое из 5 определений. Если при введении в хроматограф аликвотной части (3 - 5 мкл) конечного экстракта пробы получают слишком большие пики или происходит зашкаливание, пробу разбавляют н-гексаном. Обработку результатов анализа проводят по следующей формуле. Содержание сонета в пробе рассчитывают по формуле: C x V x H x V ст ст пр общ X = ----------------------, H x V x P ст пр где: X - количество препарата в пробе (мг/кг); C - количество пестицида в хроматографируемом объеме ст стандартного раствора, нг; V - объем стандарта, введенного в хроматограф, мкл; ст V - объем экстракта анализируемой пробы, введенный в пр хроматограф, мкл; V - общий объем экстракта анализируемой пробы, мкл; общ H - высота (площадь) пика исследуемой пробы, мм (кв. мм); пр P - навеска анализируемой пробы, г; H - высота (площадь) пика стандарта, мм (кв. мм).
ст
## 3. Техника безопасности Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсическими веществами. ---