Временные методические указания по измерению концентраций диметоморфа (акробата) в воздухе рабочей зоны методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 № 6192-91)
29 июля 1991 г. № 6192-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ДИМЕТОМОРФА (АКРОБАТА) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДАМИ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая характеристика препарата
Диметоморф (акробат) — экспериментальный фунгицид, предназначенный для борьбы с фитофторой.
CH O OCH
3 \ ─── / 3
// \\
<pre class="legal-pre"> \ ___ / O ─── C H ClNO .
─── \ \\ / \ 21 22 4
\C=CH-C-N O
/ \ / М.м. 287,9.
─── / ───
// \\</pre>
\ ___ /
/ ───
Cl
Химическое название — (E,Z)-3/3-(4-хлорофенил)-3-(3,4- диметоксифенил)акрилоил/морфолин.
Бесцветное твердое кристаллическое вещество, без запаха, реакции изомеризации происходят в различных растворителях под влиянием света.
Температура плавления 127 — 148 °C. Легко растворим в ацетоне, ацетонитриле
и метаноле, плохо растворим в гексане - 0,122 г/л и воде - 0,050 г/л. Препарат малотоксичен. ЛД для мышей - 3700 мг/кг, а для крыс - 3900
50
мг/кг, не оказывает кожно-раздражающего действия.
2. Характеристика метода
Метод основан на использовании газожидкостной хроматографии с применением детектора по захвату электронов (ДЭЗ) или тонкослойной хроматографии.
Отбор проб производится с концентрированием на бумажном фильтре «синяя лента».
Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме — 0,5 нг (ГЖХ), 1 мкг (ТСХ).
Нижний предел измерения в воздухе — 0,001 мг/куб. м (ГЖХ), 0,05 мг/куб. м (ТСХ) при отборе 150 л воздуха.
Диапазон измеряемых концентраций: 0,001 — 0,04 (ГЖХ), 0,05 — 0,25 (ТСХ).
Измерению не мешают другие фунгициды.
Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20,0% (ГЖХ) и +/- 25% (ТСХ).
3. Реактивы, растворы и материалы
Диметоморф, 95,6-процентный препарат.
Стандартный раствор диметоморфа с концентрацией 100 мг/мл готовят растворением 10,5 мг препарата в ацетоне в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике. Годен к употреблению в течение 30 дней.
Рабочие растворы диметоморфа концентрации 2,5; 5,0; 10,0; 20,0 мкг/мл готовят в градуированных пробирках вместимостью 10 мл соответствующим разбавлением ацетоном стандартного раствора. Хранят рабочие растворы диметоморфа в холодильнике. Годен к употреблению в течение 1 — 3 дней.
Натрия сульфат безводный хч, ГОСТ 4166-76.
Азот газообразный, ГОСТ 9283-74, в баллоне с редуктором.
Аммиак 25-процентный, ГОСТ 3760-74.
Бромфеноловый синий чда, ТУ 6-99-3719-83.
Кислота лимонная хч, ГОСТ 3652-74, 2-процентный водный раствор.
Кислота уксусная хч, ГОСТ 18290-75, 5-процентный водный раствор.
Серебро азотнокислое чда, ГОСТ 1277-81.
смесь растворов бромфенолового синего (БФС) и азотнокислого серебра. Готовят два раствора: 1. 0,5% водно-ацетоновый (1:3) раствор азотнокислого серебра. 2. 10 мл 0,05-процентного раствора бромфенолового синего в ацетоне. Раствор 2 разбавляют раствором 1 до объема 100 мл. Хранят проявляющий реактив в темном прохладном месте. Годен к употреблению в течение 3 — 5 дней.
растворяют 0,5 г AgNO в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 5 — 7 3 мл аммиака и доводят ацетоном до 100 мл. Хранят в темном месте.
Фильтры бумажные обеззоленные «синяя лента», диаметр 5 — 6 см, ТУ 6-09-1678-77.
4. Приборы и посуда
Газовый хроматограф с детектором по захвату электронов.
Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Шкаф электрический сушильный, ТУ 64-1-1411-72.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ 25336-82.
Колбы грушевидные, ГОСТ 25336-82, вместимостью 50 — 100 мл (для отгонки растворителя).
Колбы мерные, цилиндры, мензурки, пробирки, ГОСТ 1770-74.
Воронки лабораторные, диаметр 5 — 6 см, ГОСТ 25336-82.
Пипетки, ГОСТ 20292-74, на 1; 5; 10 мл.
Воронки делительные, ГОСТ 25336-82, на 250 мл.
Микропипетки, ГОСТ 20292-74, на 0,1; 0,2.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.
Камера для хроматографирования, ГОСТ 25336-82.
Камера для опрыскивания пластинок, ТУ 25-11-430-70.
Колба с тубусом, ГОСТ 25336-82.
Воронка Бюхнера, ГОСТ 9147-80.
Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.
УФ-лампа типа ПРК-4 или аналогичная.
5. Отбор пробы воздуха
Воздух со скоростью 5 л/мин. аспирируют через бумажный фильтр «синяя лента», закрепленный в фильтродержателе. Продолжительность отбора пробы — 30 мин. Длительность хранения проб в стеклянной таре в затемненном от света месте не более 5 суток.
6. Подготовка к измерению
Пластинку «Силуфол» помещают в хроматографическую камеру, содержащую смесь растворителей ацетон — 25% аммиак в соотношении 7:3 (об./об.), глубина погружения пластинки в растворитель составляет 0,5 см. После подъема фронта растворителя до верхнего края пластинки ее вынимают из камеры и выдерживают на воздухе до испарения растворителей. После этого пластинка готова к употреблению.
7. Проведение измерения
Бумажный фильтр, содержащий диметоморф (акробат), из фильтродержателя переносят в делительную воронку и заливают 15 — 20 мл ацетона. Экстрагируют пестицид из фильтра в течение 10 — 15 мин., периодически перемешивая содержимое емкости. Экстракцию повторяют дважды свежими порциями ацетона, экстракты объединяют, отгоняют на ротационном испарителе досуха при температуре бани не выше 55 °C. К сухому остатку пипеткой добавляют 1,5 мл ацетона.
8. Метод ТСХ
0,2 мл полученного раствора наносят микропипеткой на очищенную пластинку «Силуфол». Рядом с пробой наносят по 0,2 мл каждого рабочего раствора диметоморфа, что соответствует содержанию в пятне 0,5; 1,0; 2,0 мкг препарата.
Пластинку помещают в хроматографическую камеру, куда за 10 — 15 мин. до
хроматографирования наливают смесь растворителей гексан - ацетон (1:1) в таком количестве, чтобы глубина погружения пластинки в растворители составляла 0,5 см. После подъема фронта растворителей от линии старта на высоту 10 см хроматографирование прекращают. Пластинку выдерживают в вытяжном шкафу до испарения растворителей и обрабатывают одним из проявляющих реагентов. При обработке азотнокислым серебром (проявляющий реагент 2) пластинку орошают до влажного состояния, выдерживают в вытяжном шкафу 15 - 20 мин. (до исчезновения запаха аммиака) и подвергают
УФ-облучению в течение 10 — 15 мин. (нефильтрованные УФ-лучи, лампа ПРК-4).
Пластинку помещают на расстоянии 20 см от источника света. При наличии диметоморфа на хроматограмме проявляются пятна серо-черного цвета. После обработки пластинки бромфеноловым реагентом (проявляющий реагент 2) пластинку опрыскивают раствором лимонной (или уксусной) кислоты. О наличии
диметоморфа в пробе свидетельствует появление в этом случае синего пятна на желтом фоне. Величина R = 0,5 +/- 0,2.
f
9. Метод ГЖХ
Детектор постоянной скорости рекомбинации.
Колонка стеклянная — 1000 x 3 мм.
Твердый носитель — Хромосорб-750.
Температура термостата колонки — 185 °C,
Газ-носитель — азот особой чистоты.
Скорость движения диаграммной ленты — 60 мм/мин.
Скорость потока азота через колонку — 60 мл/мин.
Скорость потока через детектор — 150 мл/мин. -12
Рабочая шкала электрометра — 20 x 10 .
Время удерживания — 7 мин. 30 сек.
Объем вводимой пробы — 3 - 5 мкл.
10. Расчет концентрации
Концентрацию диметоморфа в мг/куб. м в воздухе вычисляют по формуле:
G x V
G — количество диметоморфа в пятне пробы, найденное путем сравнения со стандартами, мкг;
V — окончательный объем экстракта пробы, мл;
0,2 — объем экстракта пробы, нанесенный на пластинку, мл;
V — объем пробы воздуха, отобранный для анализа и приведенный к 20 нормальным условиям, л.
Газожидкостное хроматографирование:
C x S x V x V
ст пр 1 ст
S x V x V
ст пр 20
S — площадь пика анализируемой пробы, кв. мм; пр
S — площадь пика стандарта, кв. мм; ст
C — содержание диметоморфа в стандарте, мкг/мл;
V — объем стандартного раствора, введенного в хроматограф, мкл; ст
V — объем хроматографируемой пробы, введенной в хроматограф, мкл; пр
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным 20
условиям, л.
11. Требования безопасности
Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделах, отделениях) санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР, № 2455-81 от 20.10.81.