---
title: "\"Методические указания по определению ципроконазола (альто) в воде, почве, растениях хроматографическими методами\""
number: "6181-91"
issuer: "Министерство здравоохранения СССР"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-6181-91"
---

## "Методические указания по определению ципроконазола (альто) в воде, почве, растениях хроматографическими методами"

# "Методические указания по определению ципроконазола (альто) в воде, почве, растениях хроматографическими методами"

(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 N 6181-91)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждены<br>
Министерством здравоохранения СССР

</div>

<div align="center">

29 июля 1991 г. N 6181-91

</div>


<a id="p100002"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЦИПРОКОНАЗОЛА (АЛЬТО) В ВОДЕ, ПОЧВЕ,**
**РАСТЕНИЯХ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ**

<a id="p100003"></a>Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
<a id="p100004"></a>Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.


## 1. <a id="p100005"></a>Краткая характеристика препарата


<a id="p100006"></a>Ципроконазол (альто) - 2-(4-хлорфенил)-3-циклопропил-1(1H-1,2,4,-триазол-1-ил)бутан.

                  OH

<a id="p100008"></a>

| \ ___ / | 2 / \\ |
| --- | --- |

                 /  \
                CH   CH
                  3  / \
                    CH -CH
                      2   2

<a id="p100009"></a>Растворим в хлороформе, ацетоне, метаноле, хлористом метилене.
<a id="p100010"></a>МДУ в зерновых (пшеница, ячмень) - 0,05 мг/кг.
<a id="p100011"></a>ПДК в почве - 0,2 мг/кг, ПДК в воде водоемов - 0,03 мг/л.


## 2. <a id="p100012"></a>Методика определения ципроконазола (альто) хроматографическими методами в воде, почве, растениях



### <a id="p100013"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100014"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100015"></a>Метод основан на определении ципроконазола (альто) методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии после извлечения из анализируемой пробы органическими растворителями (хлороформ, смеси ацетон - вода, метанол - вода).

##### <a id="p100016"></a>2.1.2 Метрологическая характеристика

<a id="p100017"></a>    Диапазон определяемых концентраций    0,005 - 0,5 мг/кг (мг/л)
<a id="p100018"></a>    Предел обнаружения                    ТСХ - 2 мкг


<table>
<colgroup><col width="18%"><col width="19%"><col width="16%"><col width="19%"><col width="27%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Среднее значение определения, %</td><td>Стандартное отклонение S, %</td><td>Относительное стандартное отклонение Sr, %</td><td>Доверительный интервал среднего, % P = 0,95, n = 5</td></tr>
<tr><td colspan="5">ГЖХ</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>90,1</td><td>3,5</td><td>3,9</td><td>+/- 4,2</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>83,7</td><td>3,6</td><td>5,2</td><td>+/- 6,0</td></tr>
<tr><td>Растения</td><td>78,2</td><td>3,3</td><td>4,3</td><td>+/- 5,0</td></tr>
<tr><td colspan="5">ТСХ</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>85,0</td><td>4,73</td><td>5,0</td><td>+/- 5,8</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>80,0</td><td>6,36</td><td>7,5</td><td>+/- 9,2</td></tr>
<tr><td>Растения</td><td>75,0</td><td>7,5</td><td>9,3</td><td>+/- 12,4</td></tr>
</table>



##### <a id="p100028"></a>2.1.3 Избирательность метода

<a id="p100029"></a>Метод избирателен в присутствии фосфорорганических, хлорорганических пестицидов. Определению могут мешать препараты из группы замещенных триазолов.


### <a id="p100030"></a>2.2. Реактивы и растворы


<a id="p100031"></a>Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79.
<a id="p100032"></a>Гексан, ч, ТУ 6-09-3375-78.
<a id="p100033"></a>Метиловый спирт, чда, [ГОСТ 6995-77](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77).
<a id="p100034"></a>Натрий сульфат безводный, чда, [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).
<a id="p100035"></a>Хлороформ, чда, ГОСТ 20015-74.
<a id="p100036"></a>Фильтры "синяя лента".
<a id="p100037"></a>Стандартный раствор в ацетоне концентрации 100 мкг/мл. Готовят растворением 10 мг препарата в 100 мл ацетона. Срок хранения до 3-х месяцев. Для ГЖХ готовят стандартные растворы последовательным разведением исходного раствора. Срок хранения до 5 дней.
<a id="p100038"></a>К методу ГЖХ
<a id="p100039"></a>Носитель для колонки - Хроматон N-AW с 5% SE-30.
<a id="p100040"></a>К методу ТСХ
<a id="p100041"></a>Серебро азотнокислое, чда, ГОСТ 1277-81.
<a id="p100042"></a>Пластинки "Силуфол" (ЧССР).
<a id="p100043"></a>Бромфеноловый синий, чда, ТУ 6-09-1058-76.
<a id="p100044"></a>Проявляющий реактив - раствор бромфенолового синего. 0,05 г бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона, доводят до 100 мл 0,5% водно-ацетоновым (1 часть воды + 3 части ацетона) раствором азотнокислого серебра.


### <a id="p100045"></a>2.3. Приборы и посуда


<a id="p100046"></a>Ротационный испаритель с набором колб (типа ИР-1), ТУ 26-11-917-77.
<a id="p100047"></a>Водяная баня, ТУ 64-1-2850-76.
<a id="p100048"></a>Посуда стеклянная лабораторная по [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74), ГОСТ 25336-82.
<a id="p100049"></a>К методу ГЖХ
<a id="p100050"></a>Хроматограф с термоионным детектором (типа "Цвет", "Кристалл-2000" или другой).
<a id="p100051"></a>Колонка стеклянная, длина 1 м, диаметр 3 мм.
<a id="p100052"></a>Микрошприц на 10 мкл МШ-10.
<a id="p100053"></a>К методу ТСХ
<a id="p100054"></a>Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100055"></a>Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.


### <a id="p100056"></a>2.4. Отбор, хранение и доставка проб


<a id="p100057"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукций, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения остаточных количеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР 21.08.1979, N 2051-79.


### <a id="p100058"></a>2.5. Проведение определения



##### <a id="p100059"></a>2.5.1 Экстракция и очистка экстрактов

<a id="p100060"></a>Вода. Пробу (500 мл) воды помещают в делительную воронку на 1 л, добавляют 10 г хлорида натрия, перемешивают и экстрагируют ципроконазол трижды по 50 мл хлороформа, предварительно насыщенного водой. Объединенные хлороформные экстракты сушат безводным сульфатом натрия, упаривают до объема ~ 0,2 - 0,3 мл. Досуха удаляют растворитель на воздухе. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона, 3 - 5 мкл вводят в хроматограф.
<a id="p100061"></a>Растительный материал. 50 г измельченной пробы помещают в коническую колбу, заливают 200 мл смеси метанол - вода 7:3 (ацетон - вода 7:3). Встряхивают 1 часть. Экстракцию повторяют дважды. Объединяют фильтрат, переносят в делительную воронку, прибавляют 10 г хлорида натрия, перемешивают. Препарат из водного раствора реэкстрагируют трижды по 50 мл хлороформа. Объединяют хлороформный экстракт, сушат безводным сульфатом натрия и упаривают растворитель. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона и 3 - 5 мкл вводят в хроматограф.
<a id="p100062"></a>Если экстракт содержит большое количество коэкстрактивных веществ, сухой остаток в колбе растворяют в 10 мл ацетона и помещают колбу в морозильную камеру. Через 2 - 3 часа после выпадания осадка раствор фильтруют через бумажный фильтр "красная лента", смывая стенки колбы и фильтр холодным ацетоном. Фильтрат упаривают и далее проводят определение хроматографическими методами.
<a id="p100063"></a>Почва. 50 г почвы помещают в коническую колбу, смачивают 10 - 15 мл дистиллированной воды, затем приливают 100 - 150 мл смеси метанол - вода (7:3) (ацетон - вода 7:3) и далее проводят анализ так, как описано выше для растительного материала.
<a id="p100064"></a>Определение методом ГЖХ
<a id="p100065"></a>Хроматограф с термоионным детектором.
<a id="p100066"></a>Колонка длиной 1 м, диаметр 3 мм.
<a id="p100067"></a>Носитель - Хроматон N-AW с 5% SE-30.
<a id="p100068"></a>Температура колонки - 210 °C.
<a id="p100069"></a>Температура испарителя - 230 °C.
<a id="p100070"></a>Расходы газов: азот - 30 - 32, водород 11 - 13, воздух - 100 - 150 мл/мин.
                                        -10
<a id="p100071"></a>    Рабочая шкала электрометра - 32 x 10   .
<a id="p100072"></a>Объем вводимой пробы - 3 мкл.
<a id="p100073"></a>Время удерживания - 1 пик - 2,8 мин.; 2 пик - 5 - 6 мин.
<a id="p100074"></a>Количественный расчет ведут методом соотношения со стандартом.
<a id="p100075"></a>Концентрацию ципроконазола в пробе определяют по формуле (по сумме двух пиков):

                        C x h   x V   x V
                             пр    ст    общ
<a id="p100076"></a>                    X = --------------------,
                           h   x V   x P
                            ст    пр

<a id="p100077"></a>    где:
<a id="p100078"></a>    X - содержание ципроконазола в пробе, мг/кг (мг/л);
<a id="p100079"></a>    C - концентрация ципроконазола в стандартном растворе, мкг/мл;
<a id="p100080"></a>    h   - высота пика пробы, мм;
     пр
<a id="p100081"></a>    h   - высота пика стандартного раствора, мм;
     ст
<a id="p100082"></a>    V   - объем пробы, введенный в хроматограф, мкл;
     пр
<a id="p100083"></a>    V   - объем  стандартного  раствора,  введенный в хроматограф,
     ст
мкл;
<a id="p100084"></a>    V    - общий объем пробы, мл;
     общ
<a id="p100085"></a>    P - навеска пробы, (г, мл).
<a id="p100086"></a>Определение методом ТСХ
<a id="p100087"></a>Пробу после упаривания количественно наносят при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую пластину так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 2 см от нижнего края пластинки. Колбу с экстрактом 2 - 3 раза смывают небольшими порциями ацетона, который также наносят в центр пятна. Справа и слева от пробы наносят серию стандартов, содержащих 2, 5, 7 и 10 мкг препарата. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую за 30 минут до хроматографирования залита смесь хлороформ - ацетон 9:1. После поднятия фронта подвижной фазы на 10 см пластинку вынимают и оставляют на несколько минут для испарения растворителя. После этого пластинку обрабатывают из пульверизатора раствором бромфенолового синего.
<a id="p100088"></a>    После  высушивания  пластинку  обрабатывают  для удаления фона
растворителя  2-процентным  раствором лимонной (уксусной) кислоты.
Альто проявляется в виде пятен (2 изомера) ярко-голубого  цвета на
                              1          2
светло-желтом фоне. Величина R  - 0,45, R  - 0,60.
                              f          f
<a id="p100089"></a>Количественное определение пестицида проводят путем сравнения интенсивности (по сумме) окраски и площадей пятен пробы и стандартного раствора. Прямолинейная зависимость между площадью пятна и содержанием препарата соблюдается в интервале 1 - 10 мкг. Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона 10 мкг, то для нанесения на пластинку необходимо брать аликвотную часть экстракта (0,1 - 0,2 мл) параллельной пробы.
<a id="p100090"></a>Концентрацию препарата в пробе вычисляют по формуле:

                                  A
<a id="p100091"></a>                              X = -,
                                  P

<a id="p100092"></a>где:
<a id="p100093"></a>X - содержание препарата в пробе, мг/кг (мг/л);
<a id="p100094"></a>A - количество препарата, найденное в анализируемой пробе, мкг;

<div align="center">

<a id="p100095"></a>P - навеска пробы (г, мл).

</div>



## 3. <a id="p100096"></a>Требования безопасности


<a id="p100097"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами.



<a id="p100098"></a>

---