Методические указания по хроматографическому измерению концентраций ципроконазола (альто) в воздухе рабочей зоны
(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 № 6180-91)
29 июля 1991 г. № 6180-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ЦИПРОКОНАЗОЛА (АЛЬТО) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
Ципроконазол (альто) — 2-(4-хлорфенил)-3-циклопропил-1-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)бутон-2-ол.
OH
| \ ___ / | 2 / \ |
|---|
/ \ N
CH CH
3 / \
CH ──CH
2 2
Растворим в хлороформе, ацетоне, метаноле, хлористом метилене.
ОБУВ альто в воздухе рабочей зоны — 0,7 мг/куб. м.
1. Характеристика метода
Определение основано на хроматографическом определении (ГЖХ, ТСХ) препарата после концентрирования из воздуха.
Отбор проб проводится с концентрированием (бумажный фильтр «синяя лента», поглотитель с хлороформом).
Пределы измерения в анализируемом объеме пробы: 20 нг (ГЖХ), 1 мкг (ТСХ).
Пределы измерения в воздухе: 0,2 мг/куб. м (ГЖХ), 0,3 мг/куб. м (ТСХ) (при отборе 100 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций — 0,2 — 6,0 мг/куб. м (ГЖХ), 0,3 — 3,0 мг/куб. м (ТСХ).
Определению не мешают наполнители технического препарата.
Граница суммарной погрешности — +/- 18,5%.
2. Реактивы, растворы, материалы
Натрия сульфат безводный чда, ГОСТ 4166-76.
Стандартный раствор ципроконазола в ацетоне концентрации 100 мкг/мл. Готовят растворением 10 мг препарата в 100 мл ацетона. Срок хранения — до 3 месяцев. Для ГЖХ готовят стандартные растворы последовательным разведением исходного раствора. Срок хранения — до 5 дней.
Насадка для колонки — Хроматон N-AW с 5% SE-30.
Серебро азотнокислое чда, ГОСТ 1277-75.
Бромфеноловый синий чда, ТУ 6-09-1058-76.
Подвижная фаза — хлороформ — ацетон (9:1).
Проявляющий реактив — раствор бромфенолового синего. 0,05 г бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона, доводят до 100 мл 0,5% водно-ацетоновым (1 часть воды + 3 части ацетона) раствором азотнокислого серебра.
3. Приборы, аппаратура и посуда
Электроаспиратор, ТУ 64-1-862-77.
Бумажные фильтры «синяя лента».
Ротационный испаритель с набором колб (типа ИР-1), ТУ 26-11-917-76.
Водяная баня, ТУ 64-1-2850-76.
Посуда стеклянная лабораторная по ГОСТ 1770-74, ГОСТ 25336-82, ГОСТ 20292-74.
Хроматограф с термоионным детектором (типа «Цвет», «Кристалл-2000» или другой).
Колонка стеклянная, длина 1 м, диаметр 3 мм.
Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.
4. Отбор проб воздуха
Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные фильтры «синяя лента» и дрексель, заполненный 100 мл хлороформа, в течение 20 мин. Дрексель целесообразно поместить в емкость с охлаждающей смесью (лед — соль).
Пробы хранятся в закрытых склянках до 3-х дней.
5. Проведение измерения
Фильтр переносят в коническую колбу, заливают 10 — 15 мл ацетона и оставляют на 1 час. Экстракцию повторяют дважды. Ацетон сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до объема ~ 0,2 — 0,3 мл, досуха удаляют растворитель на воздухе.
Хлороформ из дрекселя переносят в колбу для отгонки растворителей и концентрируют до объема ~ 0,2 — 0,3 мл. Досуха удаляют растворитель на воздухе. Сухой остаток количественно переносят с помощью ацетона в колбу, где находится экстракт пробы из фильтра. Объединенный экстракт доупаривают досуха, остаток растворяют в 3 мкл ацетона и далее хроматографируют. Параллельно в хроматограф вводят по 3 мкл стандартных растворов, содержащих 20, 30, 50, 100, 600 нг ципроконазола.
Хроматограф с термоионным детектором (ТИД).
Колонка длиной 1 м, диаметром 3 мм.
Носитель Хроматон N-AW с 5% SE-30.
Температура испарителя — 230 °C.
Расходы газов: азот — 3 - 32, водород 11 — 13, воздух 100 — 150 мл/мин. -10
Рабочая шкала электрометра — 32 x 10 .
Время удерживания: I пик — 2,8 мин.; II — 5,6 мин.
Количественный расчет ведут методом соотношения со стандартом путем сравнения высоты пика пробы с высотой пика соответствующего стандартного раствора, высота пика которого наиболее близка пику рабочей пробы.
6. Расчет концентрации
Концентрацию ципроконазола (альто) в воздухе (X) в мг/куб. м определяют по формуле (по сумме двух пиков):
C x H x V
рп общ
h x V x V
ст пр 20
C — количество стандарта ципроконазола, введенного в хроматограф, нг;
H — высота пика рабочей пробы, мм; рп
h — высота пика стандартного раствора, мм; ст
V — объем пробы, введенный в хроматограф, мкл; пр
V — общий объем рабочей пробы, мл; общ
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным 20 условиям, л.
Аликвотную часть рабочей пробы (0,1 мл) с помощью микропипетки наносят на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 2 см от нижнего края пластинки. Справа и слева от пробы с помощью микропипетки наносят по 0,1 мл серии стандартов, содержащих 1, 2, 3...10 мкг препарата. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую за 30 мин. до хроматографирования залита смесь хлороформ - ацетон (1:1). После развития хроматограммы пластинку вынимают и оставляют на несколько минут для испарения растворителя, затем пластинку обрабатывают из пульверизатора раствором бромфенолового синего. После высушивания пластинку обрабатывают для удаления фона 2-процентным раствором лимонной (уксусной) кислоты. Ципроконазол (альто) проявляется в виде 2-х пятен ярко-голубого цвета на 1 2 светло-желтом фоне. Величина R = 0,45, R = 0,60. Линейный диапазон f f
определения — 1 - 10 мкг.
Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона 10 мкг, то к рабочему раствору пипеткой добавляют дополнительное количество ацетона и анализируют более разбавленный раствор.
Количественное определение пестицида проводят путем сравнения интенсивности (по сумме) окраски и площади пятен пробы и стандартных растворов.
7. Расчет концентрации
Концентрацию препарата (X) в воздухе мг/куб. м вычисляют по формуле:
A x V
V x V
1 20
A — количество препарата, найденное в пробе, мкг;
V — общий объем рабочей пробы, мл;
V — объем аликвоты, нанесенный на хроматографическую пластинку, мл; 1
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным 20
условиям, л.
8. Требования безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами.