--- title: "\"Временные методические указания по измерению концентраций тиолона в воздухе рабочей зоны методами тонкослойной хроматографии и спектрофотометрии\"" number: "6168-91" issuer: "Министерство здравоохранения СССР" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-6168-91" --- ## "Временные методические указания по измерению концентраций тиолона в воздухе рабочей зоны методами тонкослойной хроматографии и спектрофотометрии" # "Временные методические указания по измерению концентраций тиолона в воздухе рабочей зоны методами тонкослойной хроматографии и спектрофотометрии" (утв. Минздравом СССР 29.07.1991 N 6168-91)
Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6168-91
**ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ** **ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ТИОЛОНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ** **МЕТОДАМИ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ И СПЕКТРОФОТОМЕТРИИ** Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды. Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками. ## 1. Вводная часть //\ O /\\ / \ / \\ HO \\/ \ / O S Молекулярная масса: 168,17. Эмпирическая формула: C H O S. 7 4 3 Тиолон. Химическое название 5-окси-1,3-бензоксатиолон-2. Белое кристаллическое вещество с Т пл. 169 - 173 °C. Растворимость в %: в воде - 0,01 (25 °C); в бензоле - 0,25 (20 °C); этиловом спирте - 7,6 (20 °C); ацетоне - 43,2 (20 °C). Стабилен при хранении в обычных условиях. Применяется в качестве регуляторов роста растений в посевах хлопчатника. Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль. ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,2 мг/куб. м, в воздухе населенных мест - 0,018 мг/куб. м. ## 2. Методика измерения концентраций тиолона в воздухе рабочей зоны методами тонкослойной хроматографии и спектрофотометрии ### 2.1. Основные положения ##### 2.1.1 Тонкослойная хроматография Метод основан на хроматографировании тиолона в тонком слое силикагеля на пластинках "Силуфол" в подвижной фазе гексан:ацетон (3:1) с обнаружением зон локализации обработкой пластинки 2-процентным раствором азотистокислого натрия и нагреванием при 90 - 100 °C. Отбор проб проводится с концентрированием (бумажный фильтр "синяя лента"). Предел измерения - 1 мкг в анализируемом объеме. Предел измерения в воздухе - 0,01 мг/куб. м (при отборе 100 л воздуха). Диапазон измеряемых концентраций - 0,01 - 0,5 мг/куб. м. Определению не мешают вещества, сопутствующие в производстве тиолона. Граница суммарной погрешности измерения - +/- 25%. ##### 2.1.2 Спектрофотометрия Метод основан на спектрофотометрировании метанольных экстрактов при длине волны 292 нм в кварцевой кювете с l = 1 см. Отбор пробы проводится с концентрированием (бумажный фильтр "синяя лента"). Предел измерения концентрации вещества в анализируемом объеме - 0,004 мг/мл. Предел измерения в воздухе - 0,1 мг/куб. м (при отборе 200 л воздуха). Диапазон измеряемых концентраций - 0,1 - 1,2 мг/куб. м. Определению не мешают вещества, сопутствующие в производстве тиолона. Граница суммарной погрешности измерения - +/- 16%. ### 2.2. Реактивы, растворы и материалы Тиолон с содержанием основного вещества не менее 98%. Ацетон чда, ГОСТ 2603-79, или осч, ТУ 6-09-3513-82. Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78. Метиловый спирт хч, ТУ 6-09-402-81. Натрий азотистокислый хч, ГОСТ 4197-47. Фильтры бумажные обеззоленные "синяя лента", ТУ 6-09-1678-77. Пластинки "Силуфол" фирмы "Хемапол" (ЧССР) размером 150 x 150 мм или аналогичные. ### 2.3. Приборы, аппаратура и посуда Спектрофотометр СФ-46 или аналогичный прибор. Аспирационное устройство. Вакуумный насос. Водоструйный насос, ГОСТ 25336-82. Весы аналитические, ГОСТ 24101-80Е. Набор разновесов Г-2-210, ГОСТ 7328-82. Микрошприц МШ-10М, ТУ 2-833-106. Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74. Сушильный шкаф. Камера хроматографическая стеклянная типа СП-4,0, ГОСТ 25336-82Е. Камера для опрыскивания пластинок, ГОСТ 11413-70. Колбы грушевидные для отгонки растворителей, ГОСТ 25336-82Е, вместимостью 100 мл. Колбы мерные, [ГОСТ 1770-74Е](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74), различной вместимости. Колбы конические 1-100-29, ГОСТ 25336-82. Пипетки, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74), различной вместимости с ценой деления 0,01 и 0,1 мл. Пробирки градуированные с пробками на шлифах, [ГОСТ 1770-74Е](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74), вместимостью 5 и 10 мл. Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74. Фильтродержатель ИРА-20 оп. Цилиндры, [ГОСТ 1770-74Е](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74), различной вместимости. Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76. Секундомер механический, ГОСТ 5072-79. ### 2.4. Отбор проб воздуха Воздух со скоростью 10 л/мин. аспирируют через бумажный фильтр, помещенный в фильтродержатель. Для анализа отбирают 100 л (при анализе методом ТСХ) и 200 л (при анализе методом СФ). Пробы можно хранить в закрытых пробирках в течение недели. Для определения точного значения объема воздуха необходимо измерить температуру и давление в помещении. ### 2.5. Подготовка к выполнению измерений ##### 2.5.1 Метод тонкослойной хроматографии ###### 2.5.1.1 Приготовление стандартного раствора тиолона Готовят стандартный раствор тиолона концентрации 0,1 мг/л в мерной колбе вместимостью 250 мл растворением навески 0,0250 г в смеси гексана и ацетона, взятых в объемном соотношении 3:1. Раствор стабилен в течение недели. ###### 2.5.1.2 Приготовление проявляющего реагента Готовят проявляющий реактив растворением 2 г азотистокислого натрия в 98 мл дистиллированной воды. Раствор устойчив в течение суток. ###### 2.5.1.3 Подготовка камеры для хроматографирования Готовят подвижную фазу за 30 минут до хроматографирования смешением в хроматографической камере гексана и ацетона в объемном соотношении 3:1. Высота слоя подвижной фазы должна быть не более 0,5 см. Камеру после приготовления подвижной фазы закрывают пришлифованной стеклянной пластинкой. ##### 2.5.2 Спектрофотометрический метод ###### 2.5.2.1 Приготовление стандартных растворов Готовят стандартный раствор тиолона концентрации 0,5 мг/мл в мерной колбе вместимостью 50 мл растворением навески 0,025 г в метиловом спирте. Для приготовления градуировочных растворов с концентрацией 5, 10, 20, 40 и 60 мкг/мл соответственно отбирают по 0,25; 0,50; 1,0; 2,0; 3,0 мл стандартного раствора, переносят в мерные колбы вместимостью 25 мл, доводят метанолом до метки и тщательно перемешивают. ###### 2.5.2.2 Построение градуировочного графика Проводят измерение оптической плотности полученных градуировочных растворов на спектрофотометре при длине волны 292 нм в кюветах с толщиной поглощающего слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют метанол. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение оптической плотности для каждой концентрации. Строят градуировочный график зависимости величины оптической плотности (Д) от концентрации (А) тиолона в растворе (мкг/мл). ###### 2.5.2.3 Определение коэффициента экстракции тиолона с фильтра (Кэ) Взвешивают 0,02 - 0,03 г тиолона с погрешностью не более 0,0002 г, переносят в мерную колбу на 50 мл, растворяют в метаноле, доводят метанолом до метки и тщательно перемешивают. Наносят на фильтр от 100 до 500 мкл этого раствора и рассчитывают количество введенного вещества (m введено). Экстрагируют вещество с фильтра ацетоном. Для этого фильтр помещают в коническую колбу и заливают последовательно ацетоном четырьмя порциями по 10 мл. Первые три порции выдерживают по 30 мин., периодически помешивая, а затем сливают в грушевидную колбу. Последнюю порцию сливают в грушевидную колбу сразу. Полученный экстракт выпаривают на водяной бане (t = 50 - 60 °C) под вакуумом водоструйного насоса. К сухому остатку добавляют 5 мл метанола и выдерживают 15 мин. Раствор переносят в кварцевые кюветы и измеряют оптическую плотность при лямбда = 292 нм. С помощью градуировочного графика определяют массу вещества (m найдено). Далее по формуле: m найдено Кэ = --------- m введено находят коэффициент экстракции. ### 2.6. Выполнение измерений ##### 2.6.1 Метод тонкослойной хроматографии Фильтр, свернутый трубочкой, переносят в пробирку вместимостью 10 мл и дважды экстрагируют ацетоном порциями по 10 мл и при интенсивном встряхивании в течение 1 - 2 мин. Экстракты сливают в отгонную колбу и концентрируют с помощью ротационного испарителя до 1 - 2 мл, затем в слабом токе воздуха досуха. Остаток растворяют в 0,5 мл смеси гексана с ацетоном (3:1). На пластинке "Силуфол" на расстоянии 15 мм от края намечают линию старта. В середину линии старта количественно наносят раствор пробы. Слева и справа от пятна пробы наносят стандартную шкалу. Для этого в шесть пробирок вместимостью 5 мл вносят 0,01; 0,02; 0,05; 0,10; 0,20 и 0,50 мл стандартного раствора тиолона, объем доводят смесью гексана с ацетоном (3:1) до 0,5 мл и содержание каждой пробирки наносят на пластинку на расстоянии 15 мм друг от друга. Диаметр пятен не должен превышать 10 мм. Содержание тиолона в пятнах стандартной шкалы соответствует 1, 2, 5, 10, 20 и 50 мкг. Пластинку помещают в наклонном положении в хроматографическую камеру с подвижной фазой. После того как фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают из камеры, подсушивают на воздухе, опрыскивают из пульверизатора проявляющим реактивом и выдерживают в сушильном шкафу при температуре 90 - 100 °C до появления оранжевых пятен тиолона с R = 0,37 на f белом фоне. Окраска пятен и фона устойчива. Количественное определение проводят либо с помощью денситометра, используя светофильтр с длиной волны 440 - 470 нм, по отношению интегральных значений содержания вещества в пятнах пробы и стандартного, либо путем измерения с помощью планиметра или прозрачной миллиметровой бумаги площади пятна пробы и соответствующего ему по интенсивности окраски стандартного пятна. ##### 2.6.2 Спектрофотометрический метод Фильтр помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл и далее экстракцию, концентрирование и приготовление раствора для спектрофотометрирования ведут аналогично [разделу 2.5.2.3](#p100078). Определяют оптическую плотность (Д) полученного раствора. ### 2.7. Обработка результатов анализа Концентрацию тиолона в воздухе (C) в мг/куб. м вычисляют по [формулам (1)](#p100093) и [(2)](#p100100). При использовании метода тонкослойной хроматографии - по формуле (1). a x S пр C = ---------, (1) S x V ст ст где: a - содержание тиолона в стандартном пятне, мкг; S - площадь пятна пробы, кв. мм; пр S - площадь стандартного пятна, кв. мм; ст V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным ст условиям в соответствии с ГОСТ 12.1.005-88 при 0 °C (273 °К) и 760 мм рт. ст., л. При использовании метода спектрофотометрии - по формуле (2): A x в C = --------, (2) Кэ x V ст где: Кэ - коэффициент экстракции; A - концентрация вещества, найденная по градуировочному графику, в анализируемом растворе, мкг/мл; в - объем экстракта, приготовленного к анализу (5 мл); V - объем воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным ст
условиям, л.
## 3. Техника безопасности Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также [Правила](https://bukva.ai/docs/pravila-2455-81) устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях и отделах) санитарно-эпидемических учреждений системы МЗ СССР, N 2455-81 от 20.10.81. Спектрофотометр должен эксплуатироваться в лабораторном помещении без повышенной влажности. Рабочее значение температуры от 10 до 35 °C, относительная влажность не должна быть более 80% при температуре 25 °C. ---