--- title: "\"Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6-хлор-1,3,5-триазина в воздухе хроматографическими методами\"" number: "6159-91" issuer: "Министерство здравоохранения СССР" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-6159-91" --- ## "Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6-хлор-1,3,5-триазина в воздухе хроматографическими методами" # "Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6-хлор-1,3,5-триазина в воздухе хроматографическими методами" (утв. Минздравом СССР 29.07.1991 N 6159-91)
Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6159-91
**ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ** **ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ 2-АМИНО-4-ДИМЕТИЛАМИНО-6-ХЛОР-1,3,5-ТРИАЗИНА** **В ВОЗДУХЕ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ** Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды. Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками. ## 1. Краткая характеристика вещества N // \ C H N Cl. Cl──C // \ C──NH 5 8 5 | 2 М.м. 173,61. | | --- | N \\ / N \\ /C N / \ H C CH 3 3 2-Амино-4-диметиламино-6-хлор-1,3,5-триазин (АДХТ) - метаболит и полупродукт синтеза грамекса. Белое кристаллическое вещество без запаха с Т пл. 210 - 211 °C. Растворимость в воде - 0,049% (25 °C), ацетоне - 1,94%, хлороформе - 0,34%. ОБУВ для воздуха рабочей зоны 1,5 мг/куб. м. ## 2. Методика измерения концентраций АДХТ в воздухе рабочей зоны ### 2.1. Основные положения ##### 2.1.1 Принцип метода Метод основан на использовании тонкослойной и газожидкостной хроматографии с применением пламенно-ионизационного детектора. Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр, в хлороформ и на полисорб. ##### 2.1.2 Избирательность метода Измерению не мешают другие триазины - полупродукты производства производных сульфанилмочевин. ##### 2.1.3 Метрологическая характеристика метода Нижний предел измерения АДХТ в хроматографируемом объеме пробы 1 мкг (ТСХ) и 0,01 мкг (ГЖХ). Нижний предел измерения АДХТ в воздухе 0,01 мг/куб. м. Диапазон измеряемых концентраций АДХТ в воздухе от 0,01 до 2 мг/куб. м. Данные по метрологической характеристике методики представлены в [таблице](#p100024). Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 2,0%. Время выполнения измерения, включая отбор проб, 2 часа (ГЖХ) и 3 часа (ТСХ). Таблица
**МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗМЕРЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ**
**2-АМИНО-4-ДИМЕТИЛАМИНО-6-ХЛОР-1,3,5-ТРИАЗИНА (АДХТ)**
**В ВОЗДУХЕ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ** | Метод измерения | Предел измерения, мг/куб. м | Процент определения, % | Средняя квадратичная ошибка определения, мкг | Доверительный интервал (p = 0,95) | | --- | --- | --- | --- | --- | | ГЖХ | 0,01 | 65 | +/- 1,1 | +/- 0,8 (n = 4, m = 4) a | | ТСХ | 0,01 | 90 | +/- 0,5 | +/- 0,4 (n = 6, m = 4) a | ### 2.2. Реактивы, растворы и материалы Ацетон чда, ТУ 6-08-3513-75. Бензол чда, [ГОСТ 5955-75](https://bukva.ai/docs/gost-5955-75). Натрий сернокислый б/в, ч, ГОСТ 4106-76. Этиловый эфир уксусной кислоты чда, ГОСТ 1277-75. Серебро азотнокислое чда, ГОСТ 1277-75. Бромфеноловый синий чда, ТУ 6-09-37-9-83. Лимонная кислота осч, ТУ 6-09-584-75. Силикагель КСК N 2, ГОСТ 3956-76, ТУ 6-09-2523-72. Силикагель ЛС 5/40 мю для тонкослойной хроматографии с 13% гипса (Хемапол, ЧССР). Пластинки для тонкослойной хроматографии "Силуфол R" (Хемапол, ЧССР). Калий иодистый чда, [ГОСТ 4232-74](https://bukva.ai/docs/gost-4232-74). Крахмал растворимый чда, [ГОСТ 10163-76](https://bukva.ai/docs/gost-10163-76). Калий марганцовокислый чда, ГОСТ 20490-75, 3-процентный водный раствор. Хлористоводородная кислота хч, ГОСТ 18290-72, 12-процентный водный раствор. Кальций сернокислый чда, ГОСТ 3210-66. Кальций хлористый ч, ГОСТ 4460-77. Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74. Хроматон N-AW, 0,16 - 0,20 мм, с 5% XE-60, промытый кислотой и силанизированный ДМСХ. Хромосорб W-HP, 80/100 меш, с 3% OV-17. Полисорб C, 60/100, ТУ 6-05-24-1313-86. ### 2.3. Приборы, аппаратура и посуда Газовый хроматограф с пламенно-ионизационным детектором. Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77. Фильтродержатели. Склянка Дрекселя вместимостью 250 мл. Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74. Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73. Водяная баня, ТУ 64-22-603-75. Электроплитка, ТУ 92-275-76. Поглотители Зайцева с пористой пластинкой, ТУ 25-11-1081-75. Стеклянные концентрационные трубки (гофрированные). Стеклянные пластинки, 15 х 15 см. Сито капроновое, 100/120 меш. Пульверизатор стеклянный для обработки пластинок. Камера для обработки пластинок, ТУ 25-11-430-70. Камера хроматографическая, ГОСТ 10565-63. Эксикатор, ГОСТ 6471-73. Сушильный шкаф, ТУ 69-1-1411-76. Микрошприц емкостью 10 мкл МШ-10. Фарфоровая ступка (d = 86), ГОСТ 9147-78. Стеклянный водоструйный насос, МРТУ 42961-64. Весы лабораторные ВЛА-200М. Колбы мерные вместимостью 100 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) ### 2.4. Отбор пробы воздуха Способ 1. Воздух с объемным расходом 2 л/мин. аспирируют через последовательно соединенный бумажный фильтр "синяя лента" и склянку Дрекселя, содержащую 70 мл хлороформа и помещенную в охлаждающую смесь льда и хлорида натрия. Для определения 1/2 ПДК достаточно отобрать 4 л воздуха. Способ 2. При использовании полисорба для поглощения АДХТ воздух с объемным расходом 3 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные фильтродержатель и концентрационную гофрированную трубку из стекла, содержащую 5 г полисорба. Пробы можно хранить в холодильнике в течение двух недель. ### 2.5. Подготовка к измерению ##### 2.5.1 Приготовление пластинок с тонким слоем силикагеля для ТСХ 35 г силикагеля КСК, просеянного через сито 100/120 меш, смешивают с 2 г сернокислого кальция и 90 мл дистиллированной воды в фарфоровой ступке или на аппарате для встряхивания в течение 15 минут. Около 10 г сорбционной массы наносят на стеклянную пластинку 15 x 15 см и, покачивая, равномерно распределяют по поверхности. Пластинки сушат на воздухе в горизонтальном положении при комнатной температуре 12 часов и затем активируют в сушильном шкафу при 190 °C в течение 30 минут. Хранят в эксикаторе над слоем хлористого кальция. При использовании для приготовления пластинок силикагеля ЛС 14 г этого силикагеля смешивают с 38 мл дистиллированной воды. На одну пластинку наносят 5 - 7 г сорбционной массы и далее поступают так, как это описано выше. ##### 2.5.2 Приготовление проявляющих реактивов для ТСХ Проявляющий реактив N 1: раствор N 1 - в мерную колбу на 100 мл помещают 0,25 г йодистого калия и доводят до метки дистиллированной водой; раствор N 2 - 0,75 г растворимого крахмала заваривают в 25 мл дистиллированной воды и затем охлаждают; пластинку обрабатывают смесью (1:1) растворов N 1 и N 2. Реактив готовят перед употреблением. Проявляющий реактив N 2: раствор N 1 - в мерную колбу на 100 мл помещают 0,4 г бромфенолового синего и доводят до метки дистиллированной водой; раствор N 2 - в мерную колбу на 100 мл помещают 2 г азотнокислого серебра и доводят до метки дистиллированной водой; пластинку обрабатывают смесью (1:1) растворов N 1 и N 2 и затем 4-процентным водным раствором лимонной кислоты. Проявляющие растворы при хранении в плотно закрытых склянках без доступа света годны для применения в течение месяца. ##### 2.5.3 Приготовление стандартного раствора Стандартный раствор АДХТ в ацетоне с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 10,0 мг вещества в мерной колбе на 100 мл. ##### 2.5.4 Приготовление хроматографической колонки Стеклянную спиральную хроматографическую колонку (длина 1 м, внутренний диаметр 3 мм) заполняют хромосорбом W-HP с 3% OV-17 под вакуумом и кондиционируют при 180 °C в течение 8 - 10 часов в токе азота. ##### 2.5.5 Построение градуировочного графика для определения АДХТ методом ГЖХ Количественный анализ с помощью газовой хроматографии АДХТ проводят методом абсолютной калибровки. Для этого градуировочные растворы с содержанием АДХТ 3, 4, 10 и 15 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора ацетоном. Градуировочные растворы устойчивы в течение месяца при хранении в холодильнике. 2 мкл каждого градуировочного раствора вводят в хроматограф и хроматографируют при следующих условиях (хроматограф "Цвет-106" с пламенно-ионизационным детектором): температура термостата колонок 150 °C, температура термостата испарителя 260 °C, скорость потока газа-носителя -12 (азот особой чистоты) 40 мл/мин., шкала электрометра 10 x 10 А, скорость диаграммной ленты потенциометра 240 мм/час. Время удерживания АДХТ в этих условиях 6 мин. Хроматографирование одного стандартного раствора производят трижды. Измеряют на хроматограммах высоты пика (мм) АДХТ и строят график зависимости высоты пика АДХТ от его концентрации (мкг/мл). Полученные данные обрабатывают по методу наименьших квадратов и получают уравнение калибровочного графика в виде: H = A + B x X, где: H - высота пика АДХТ на хроматограмме, мм; X - содержание АДХТ в ацетоне, мкг/мл; A и B - коэффициенты, которые получают при обработке калибровочного графика по методу наименьших квадратов. ### 2.6. Описание измерения ##### 2.6.1 Измерение АДХТ с помощью тонкослойной хроматографии При отборе пробы воздуха по способу 1 фильтр извлекают из фильтродержателя, переносят в стакан на 100 мл, заливают 30 мл хлороформа и оставляют на 10 минут, периодически перемешивая стеклянной палочкой. Хлороформ сливают в круглодонную колбу со шлифом на 250 мл через слой безводного сульфата натрия (10 г), помещенного в воронку, а фильтр промывают двумя порциями хлороформа по 10 мл, сливая эти порции и хлороформ из склянки Дрекселя в ту же колбу, упаривают растворитель на ротационном испарителе при температуре водяной бани 45 °C до объема ~ 1 мл. Остаток количественно наносят на хроматографическую пластинку с тонким слоем силикагеля (могут быть использованы пластинки, приготовленные в лабораторных условиях, и пластинки "Силуфол R"). На эту же пластинку наносят стандартные количества (1 и 2 мкг) АДХТ в виде раствора в ацетоне и проводят хроматографирование в системе растворителей этилацетат - хлороформ (1:1) в хроматографической камере, насыщенной в течение 2 часов парами подвижных растворителей. Для насыщения стенки камеры обкладываются фильтровальной бумагой, которая пропитывается смесью подвижных растворителей. После окончания процесса хроматографирования пластинку извлекают из камеры и сушат на воздухе в вытяжном шкафу. Для обнаружения АДХТ пластинку обрабатывают смесью N 1 и N 2 (1:1) проявляющего реактива N 2 и затем 4-процентным водным раствором лимонной кислоты. АДХТ обнаруживается в виде синих пятен на желтом фоне с величиной R = 0,61 f +/- 0,05. Для повышения надежности идентификации АДХТ хроматографирование может быть также проведено в системе растворителей ацетон - бензол (3:2). Для обнаружения АДХТ пластинку предварительно помещают в эксикатор (камера для хлорирования) на 2 минуты, на дне которого наливают смесь (1:1) 3-процентного водного раствора марганцовокислого калия и 12-процентного водного раствора хлористоводородной кислоты (камера насыщается парами хлора через 5 - 10 минут после помещения в нее растворов марганцовокислого калия и хлористоводородной кислоты). Затем пластинку вынимают из эксикатора, помещают в вытяжной шкаф на 40 минут для удаления паров хлора и обрабатывают проявляющим реактивом N 1. АДХТ обнаруживается в виде синих пятен на светло-голубом фоне с величиной R = 0,82 +/- 0,05 (пластинки f "Силуфол R"). При отборе пробы воздуха по способу 2 полисорб из концентрационной гофрированной трубки из стекла помещают в бюретку на 25 мл (диаметр 10 мм) с краном на конце и АДХТ элюируют 60 мл ацетона со скоростью 1 - 2 мл/мин. Элюат сушат над безводным сульфатом натрия (5 - 10 г) в течение 0,5 - 1,0 часа при периодическом помешивании, удаляют растворитель на ротационном испарителе до объема ~ 1 мл и далее поступают так, как описано выше. ##### 2.6.2 Измерение АДХТ с помощью газожидкостной хроматографии Подготовка проб для измерения проводится так же, как это описано для тонкослойной хроматографии [(п. 2.6.1)](#p100102). При отборе пробы воздуха по способу 1 объединенный хлороформный раствор сушат над безводным сульфатом натрия (5 - 10 г) в течение 0,5 - 1,0 часа при периодическом перемешивании и удаляют растворитель на ротационном испарителе при температуре водяной бани 45 °C до объема ~ 0,5 мл. Остаток растворителя током теплого воздуха удаляют досуха и сухой остаток количественно переносят ацетоном (~ 1 мл) в градуировочную центрифужную пробирку на 10 мл. Током теплого воздуха упаривают содержимое пробирки до 0,2 мл и 2 мкл вводят в хроматограф. Хроматографирование одной пробы проводят дважды, измеряют среднее значение высоты пика АДХТ и по калибровочному графику находят содержание АДХТ. При отборе пробы воздуха по способу 2 остаток ацетона (~ 1 мл) из круглодонной колбы на 250 мл количественно переносят в градуировочную центрифужную пробирку на 10 мл и током теплого воздуха упаривают содержимое до 0,2 мл. 2 мкл ацетонового раствора вводят в хроматограф и далее поступают так, как это описано выше. ### 2.7. Обработка результатов анализа ##### 2.7.1 Метод ТСХ Концентрацию АДХТ в воздухе C в мг/куб. м при измерении с помощью тонкослойной хроматографии вычисляют по формуле: 3 A x 10 C = -------, V 20 где: A - количество АДХТ в анализируемом объеме пробы, мг; V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным 20 условиям, л. Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по следующей формуле: V x (273 + 20) x P t V = -------------------, 20 (273 + t) x 101,33 где: V - объем воздуха, отобранный для анализа, л; t P - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.); t - температура воздуха в месте отбора пробы, °C. Количественную оценку АДХТ на хроматограммах проводят путем сравнения интенсивности окраски и площадей пятен пробы и стандартных растворов АДХТ или по величине площади пятен по формуле: A - A 2 1 A = A - ------- x (S - S), 2 S - S 2 2 1 где: A, S - количество (мкг) и площадь (кв. мм) пятна АДХТ в анализируемой пробе; A , A , S , S - количество (мкг) и площадь (кв. мм) пятен стандартных 1 2 1 2 растворов АДХТ с большим и меньшим содержанием по сравнению с анализируемой пробой. Величину площади пятен определяют, накладывая на пластинку прозрачную бумагу или кальку, - очерчивают контур пятна, переносят его на миллиметровку и подсчитывают число кв. мм, входящих в контур. ##### 2.7.2 Метод ГЖХ Концентрацию АДХТ в воздухе C в мг/куб. м при измерении газожидкостной хроматографией вычисляют по формуле: 3 (H - A) x 10 x V C = -----------------, B x V 20 где: H - высота пика АДХТ на хроматограмме анализируемой пробы, мм (среднее значение из двух параллельных определений); V - общий объем ацетонового раствора пробы АДХТ, мл; A и B - коэффициенты, которые получают при обработке калибровочного графика по методу наименьших квадратов. ## 3. Требования безопасности Соблюдаются требования безопасности, рекомендуемые при работе в химических лабораториях. ---