Временные методические указания по определению экспромта в воде методом хроматографии в тонком слое
Актуально на 01.11.2026.
Как цитировать: "Временные методические указания по определению экспромта в воде методом хроматографии в тонком слое". 6107-91. https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-6107-91
(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 № 6107-91)
29 июля 1991 г. № 6107-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЭКСПРОМТА В ВОДЕ МЕТОДОМ ХРОМАТОГРАФИИ В ТОНКОМ СЛОЕ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая характеристика пестицида
Экспромт — смесь препаратов «хардин» (12,5% по мочевине) и «грамекс» (12,5% по мочевине) в соотношении 3:1 (весовые).
Действующее вещество хардина — комплекс диэтилэтаноламина и N-(2-хлор-бензол-сульфонил)-N'-(6-метокси-4-метил-1,3,5-триазин-2-ил)мочевины (хлорсульфурона).
| CH Cl 3 / N/ // \SO NHCONH// \__N \ ___ / 2 \ ___ / N \ | 2 2 / / N___C H \ 2 5 \ |
|---|---|
| OCH 3 | C H 2 5 |
| Эмпирическая формула: C H ClN O S x C H | NO. |
| 12 12 5 4 | 6 15 |
Синонимы: глин, ХСТТ, хлорсульфурон.
Хардин — препарат, представляющий собой раствор действующего вещества в смеси вода — триэтиленгликоль (1:1, вес. %) с добавкой 0,4% ОП-10. Содержание комплекса в растворе 16,5 +/- 0,5% (вес.).
Плотность препарата при 20 °C — 1115 — 1125 кг/куб. м. Т. кип. — 100 °C, хорошо растворим в воде, в полярных растворителях коагулируется, с неполярными не смешивается, нелетуч, в водных растворах устойчив в течение года, при разбавлении водой на свету при pH 5 — 7 и 20 °C разлагается.
Хлорсульфурон - белое кристаллическое вещество. Эмпирическая формула C H ClN O S, мол. масса 357,78. Т. пл. 174 - 178 °C. 12 12 5 4 Растворимость в толуоле - 0,3%, метаноле - 1,8%, ацетоне - 7,0%. Препарат выпускается в виде аминных солей (диметиламинная, изопропиламинная, моноэтаноламинная). Степень чистоты - 96 - 98%. Действующее вещество препарата грамекс - комплекс диэтилэтаноламина и N-O(метил-карбокси-сульфонил)-N'-(4-метил-6-
метокси-1,3,5-триазин-2-ил)мочевины (грамекса).
| COOH CH 3 3 / N/ // \SO NHCONH// \N \ ___ / 2 \ ___ / N \ | 2 2 / / N___C H \ 2 5 \ |
|---|---|
| OCH 3 | C H 2 5 |
| Эмпирическая формула C H O № S x C H | NO. |
| 14 18 6 5 | 6 15 |
| Молекулярная масса — 498,92. | |
| Химически чистый грамекс | - кристаллическое вещество |
слабо-желтого цвета, без запаха. Т. пл. 162 — 164 °C.
Эмпирическая формула C H O № S, молекулярная масса — 381,36. 14 18 6 5
Препарат хорошо растворим в ацетоне. Степень чистоты — 99,1%.
Препарат «экспромт» представляет собой светло-желтую прозрачную жидкость со слабым аминным запахом, плотность — 1,116 г/куб. см, растворим в воде.
ДОК, ПДК, МДУ экспромта в настоящее время не установлены.
2. Методика определения
2.1.1 Принцип метода
Метод основан на извлечении хардина и грамекса (действующие вещества пестицида «экспромт») из подкисленной пробы воды хлороформом, концентрировании экстракта и хроматографировании его аликвоты в тонком слое пластин «Силуфол». В качестве подвижной фазы могут быть использованы: бензол — ацетон в соотношении 4:1 (объемн.), гексан — ацетон в соотношении 1:1 (объемн.), диэтиловый эфир.
Для обнаружения зон локализации препаратов на хроматограммах используют смесь растворов бромфенолового синего и азотнокислого серебра с последующей обработкой хроматограмм лимонной (или уксусной) кислотой. Количественное определение препаратов проводят сравнением интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандарта.
2.1.2 Метрологическая характеристика
Диапазон определяемых концентраций 0,005 — 0,02 мг/л.
Размах варьирования: хардин — 80 — 100%,
Среднее значение определения стандартных количеств:
Стандартное отклонение среднего:
Относительное стандартное отклонение среднего:
2.1.3 Избирательность метода
Метод специфичен. Другие соединения этого класса (круг, эллипс) в указанных условиях хроматографирования определению не мешают.
2.2. Реактивы и материалы
Хардин (хлорсульфурон), ВНИИХСЗР, 96 — 98%.
Бензол, хч, ГОСТ 5955-81.
Этиловый спирт, 96-процентный, ТУ 6-09-1910-77.
Кислота хлористоводородная, ч, ГОСТ 3118-77; водный раствор (1:1).
Кислота уксусная, хч, ГОСТ 18290-72, 5-процентный водный раствор.
Кислота лимонная, хч, ГОСТ 3652-74, 2-процентный водный раствор.
Аммиак водный, чда, ГОСТ 3760-79.
Серебро азотнокислое, чда, ГОСТ 1277-81.
Бромфеноловый синий, чда, ТУ 6-09-3719-83.
Натрий сернокислый безводный, чда, ГОСТ 4166-76.
Вода дистиллированная, ГОСТ 7602-72.
Пластинки «Силуфол» (Kavalier, ЧССР).
2.3. Приборы, посуда
Испаритель ротационный ИР-1М, 25-11-917-74.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ 25336-82.
Колбы грушевидные, ГОСТ 25336-82, вместимостью 50 — 100 мл.
Колбы мерные, цилиндры, мензурки, пробирки, ГОСТ 1770-74.
Колбы конические плоскодонные, ГОСТ 25336-82.
Воронки химические, диаметр 56 мм, ГОСТ 25336-82.
Воронки делительные, ГОСТ 25336-82, вместимостью 250 мл, 1 л.
Пипетки, ГОСТ 20292-74, на 1; 5; 10 мл.
Микропипетки, ГОСТ 20292-74, на 0,1; 0,2 мл.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.
Камера для хроматографирования, ГОСТ 25336-82.
Камера для опрыскивания, ТУ 25-11-430-70.
2.4. Подготовка к определению
2.4.1 Приготовление стандартных рабочих растворов хардина, грамекса
Стандартные растворы пестицидов концентрации 100 мкг/мл готовят растворением соответствующей навески препарата в ацетоне (или этиловом спирте) в мерной колбе на 100 мл. Растворы хранят в холодильнике. Годны к употреблению в течение 30 дней. Рабочие растворы пестицидов концентраций 2,5; 5,0; 10,0; 20,0 мкг/мл готовят в градуированных пробирках вместимостью 10 мл соответствующим разбавлением ацетоном стандартных растворов. Хранят рабочие растворы хардина, грамекса в холодильнике. Годны к употреблению в течение 3 — 5 дней.
2.4.2 Проявляющий реактив — бромфеноловый реагент
Смесь растворов бромфенолового синего (БФС) и азотнокислого серебра. Готовят два раствора: 1. 0,5% водно-ацетоновый (1:3) раствор азотнокислого серебра; 2. 10 мл 0,05-процентного раствора бромфенолового синего в ацетоне. Раствор 2 разбавляют раствором 1 до объема 100 мл. Хранят проявляющий реактив в темном прохладном месте. Годен к употреблению в течение 3 — 5 дней. После обработки хроматограмм бромфеноловым реагентом осветляют фон обработкой пластин 2-процентным водным раствором лимонной кислоты или 5-процентным водным раствором уксусной кислоты.
2.4.3 Подготовка пластин «Силуфол»
Пластинку «Силуфол» помещают в хроматографическую камеру, содержащую смесь растворителей ацетон — 25-процентный аммиак в соотношении 7:3 (об./об.) (глубина погружения пластинки в растворитель составляет 0,5 см). После подъема фронта растворителя до верхнего края пластинки ее вынимают из камеры и выдерживают на воздухе до испарения растворителей. После этого пластинка готова к употреблению. Хранят подготовленные пластинки в эксикаторе.
2.5. Отбор проб
Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (МЗ СССР, ГСЗУ, Москва, 1980, № 2061-79 от 21.08.1979).
Отобранные пробы хранить в стеклянной таре в защищенном от света месте не более 1 — 3 суток.
2.6. Проведение определения
2.6.1 Экстракция и очистка
На одно определение берут на анализируемый образец две пробы воды по 500 мл.
500 мл воды помещают в делительную воронку вместимостью 1 л, подкисляют до pH 2 разбавленной кислотой (берут 1 мл раствора кислоты) и экстрагируют препарат дважды свежими 10 — 15 мл хлороформа, каждый раз встряхивая содержимое воронки в течение 2 — 3 мин. Экстракты двух проб объединяют (получают 40 — 60 мл) в делительной воронке вместимостью 250 мл, промывают 10 — 15 мл дистиллированной воды, подкисленной до pH 6 разбавленной хлористоводородной кислотой, и фильтруют через слой (7 — 10 г) безводного сульфата натрия в химической воронке в грушевидную колбу. Растворитель отгоняют до объема около 1 мл на ротационном испарителе при температуре 55 — 60 °C. Остаток растворителя удаляют продуванием воздуха.
2.6.2 Хроматографирование
Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона (этанола), закрывают колбу герметично пробкой, перемешивают содержимое и 0,2 мл полученного раствора наносят микропипеткой на подготовленную пластинку "Силуфол". Рядом с пробой наносят по 0,2 мл каждого
рабочего раствора пестицидов, что соответствует содержанию в пятне
0,5; 1,0; 2,0; 4,0 мкг каждого препарата (растворы хардина и грамекса одинаковой концентрации наносят в одну точку). Пластинку помещают в хроматографическую камеру, куда за 10 - 15 мин. до хроматографирования наливают один из подвижных растворителей,
указанных в таблице, в таком количестве, чтобы глубина погружения
пластинки в растворитель составила 0,5 см. После подъема фронта растворителя от линии старта на высоту 10 см хроматографирование прекращают. Пластинку выдерживают в вытяжном шкафу до испарения растворителей и обрабатывают бромфеноловым реагентом, затем раствором лимонной (или уксусной) кислоты. О наличии экспромта в пробе свидетельствует проявление на хроматограмме серо-синего пятна хардина либо пятен хардина и грамекса (в зависимости от количества экспромта в пробе). Величины R хардина, грамекса
f
приведены в таблице.
ВЕЛИЧИНЫ R ПРОИЗВОДНЫХ МОЧЕВИНЫ НА ПЛАСТИНКАХ «СИЛУФОЛ» f
| Соединение | Подвижный растворитель | ||
| бензол — ацетон (4:1) | гексан — ацетон (1:1) | диэтиловый эфир | |
| Грамекс Хардин Круг Эллипс | 0,28 0,33 0,37 0,43 | 0,41 0,35 0,53 0,63 | 0,70 нечеткое пятно нечеткое пятно нечеткое пятно |
2.7. Обработка результатов анализа
Количественная оценка хардина, грамекса, являющихся действующими веществами экспромта, проводится путем сравнения площадей и интенсивности окраски пятен пробы и рабочих растворов пестицидов. Содержание каждого пестицида в анализируемой пробе рассчитывают по формуле:
A x V
X — содержание хардина, грамекса в исследуемой пробе, мг/л;
A — количество хардина, грамекса, найденное путем сравнения со стандартами, мкг;
V — объем аликвоты, отобранной для хроматографирования, мл. 1 При нанесении всей пробы V = V; 1
3. Требования безопасности
Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях.