---
title: "\"Временные методические указания по определению остаточных количеств димилина в яблоках тонкослойной хроматографией\""
number: "6075-91"
issuer: "Министерство здравоохранения СССР"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-6075-91"
---

## "Временные методические указания по определению остаточных количеств димилина в яблоках тонкослойной хроматографией"

# "Временные методические указания по определению остаточных количеств димилина в яблоках тонкослойной хроматографией"

(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 N 6075-91)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждены<br>
Министерством здравоохранения СССР

</div>

<div align="center">

29 июля 1991 г. N 6075-91

</div>


<a id="p100002"></a>**ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДИМИЛИНА В ЯБЛОКАХ**
**ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ**


> <a id="p100003"></a>*(Дополнение к N 9481-81 от 22.10.1981)*


<a id="p100004"></a>Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
<a id="p100005"></a>Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.


## 1. <a id="p100006"></a>Краткая характеристика препарата


<a id="p100007"></a>Название по номенклатуре ИСО, СЭВ - дифлюбензурон.
<a id="p100008"></a>Химическое название N-(2,6-дифторбензил)-N-(4-хлорфенил).

<a id="p100009"></a>     _____F           _____                         C  H ClF N O .
    //   \\ CONHCONH //   \\Cl                       14 9   2 2 2
    \ ___ /          \ ___ /
<a id="p100010"></a>      ─── F            ───                          М.м. 310,7.

<a id="p100011"></a>    В чистом виде кристаллы белого цвета с Т. пл. 230 - 230 °C.
                                             -8
<a id="p100012"></a>    Давление паров при °C 0,013 мПа (9,8 x 10   мм рт. ст.).
<a id="p100013"></a>    Растворимость  в  воде  при  20  °C  0,1  мг/л,  в  неполярных
растворителях  -  10  г/л,  в  ацетоне  -  6,5  г/л  при  25 °C, в
диметилформамиде - 104 г/л, диоксане - 20 г/л.
<a id="p100014"></a>    ЛД    орально  для  мышей и крыс 4640 мг/кг, для кроликов 2000
      50
мг/кг. СК   для рыб 130 - 140 мг/л.
         50
<a id="p100015"></a>В США МДУ в пищевых продуктах 0,05 мг/кг. Допустимое суточное потребление (ADJ) 0,02 мг/кг. В СССР МДУ в яблоках 0,1 мг/кг.
<a id="p100016"></a>Применяется в качестве инсектицида на яблонях, цитрусовых, овощах.


## 2. <a id="p100017"></a>Методика определения димилина в яблоках тонкослойной хроматографией



### <a id="p100018"></a>2.1. Основные положения


<a id="p100019"></a>2.1.1. Метод основан на извлечении димилина из яблок смесью гексан - ацетон, очистке экстракта кислотно-щелочным перераспределением димилина и определении тонкослойной хроматографией на пластинках "Силуфол".

##### <a id="p100020"></a>2.1.2 Метрологическая характеристика метода

<a id="p100021"></a>Диапазон измеряемых концентраций - 0,03 - 3,30 мг/кг.
<a id="p100022"></a>Предел обнаружения в хроматографируемой пробе - 0,2 мкг.
<a id="p100023"></a>Предел обнаружения в яблоках - 0,03 мг/кг.
<a id="p100024"></a>Среднее значение определения стандартных количеств димилина в яблоках при n = 15 +/- 10%.
<a id="p100025"></a>Доверительный интервал среднего определения при n = 5 и p = 0,95 87 +/- 12%.
<a id="p100026"></a>Размах варьирования R 70 - 100%.

##### <a id="p100027"></a>2.1.3 Избирательность метода

<a id="p100028"></a>Метод селективен. Избирательность метода обеспечивается сочетанием двух систем подвижных растворителей различной полярности и двух проявляющих реагентов.


### <a id="p100029"></a>2.2. Реактивы и растворы


<a id="p100030"></a>Ацетон, чда, ГОСТ 2603-79.
<a id="p100031"></a>Этилацетат, хч, [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76).
<a id="p100032"></a>Гексан, чда, ТУ 6-09-3375-78.
<a id="p100033"></a>Бензол, чда, [ГОСТ 5955-75](https://bukva.ai/docs/gost-5955-75).
<a id="p100034"></a>Хлороводородная кислота, HCl, чда, ГОСТ 3118-77, концентрированная.
<a id="p100035"></a>Гидроксид калия, ч, [ГОСТ 24363-80](https://bukva.ai/docs/gost-24363-80).
<a id="p100036"></a>Гидроксид натрия, NaOH, [ГОСТ 11078-78](https://bukva.ai/docs/gost-11078-78), очищенный 4 н раствор.
<a id="p100037"></a>Сульфат натрия, хч, [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76), безводный.
<a id="p100038"></a>о-Толидин, ч, ТУ 6-09-299-73.
<a id="p100039"></a>Калий йодистый, KI, хч, [ГОСТ 4232-74](https://bukva.ai/docs/gost-4232-74).
<a id="p100040"></a> Натрий нитрит, Na NO , ГОСТ 4197-74.
                     2  3
<a id="p100041"></a> Уксусная кислота, ГОСТ 61-75, ледяная.
<a id="p100042"></a> а-Нафтол, чда, ГОСТ 5838-79.
<a id="p100043"></a> Калий марганцевокислый, KMnO , ч, ГОСТ 20490-75.
                                4
<a id="p100044"></a>Проявляющий реагент N 1. Растворяют 0,16 г о-толидина в 30 мл ледяной уксусной кислоты, добавляют 1 г KI и доводят до 500 мл дистиллированной водой. Раствор хранить в темном месте. Срок годности 2 недели. На обработку одной хроматограммы идет около 1 мл реагента.
<a id="p100045"></a>Проявляющий реагент N 2. Раствор А. К смеси, состоящей из 46 мл воды и 4 мл концентрированной HCl, добавляют 1,5 г нитрита натрия. Раствор Б. Растворяют 2,8 г KOH в 50 мл дистиллированной воды и прибавляют 0,3 г а-нафтола.
<a id="p100046"></a>Растворы А и Б готовят перед использованием.
<a id="p100047"></a>Стандартный раствор димилина в ацетоне с содержанием 1000 мг/мл (раствор 1) и 10 мкг/мл (раствор 2).
<a id="p100048"></a>Стандартные растворы димилина стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 месяцев.
<a id="p100049"></a>Пластинки "Силуфол", производства "Хемапол", ЧССР, размером 150 x 150 мм.


### <a id="p100050"></a>2.3. Приборы, аппаратура, посуда


<a id="p100051"></a>Камеры хроматографические, стеклянные, с пришлифованными крышками, ГОСТ 25336-82Е, или аналогичные.
<a id="p100052"></a>Лампа УФ-света, ртутно-кварцевая, с широким диапазоном волн, ТУ 46-22-236-79, или аналогичная.
<a id="p100053"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76, или аналогичный.
<a id="p100054"></a>Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73.
<a id="p100055"></a>Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100056"></a>Воронки делительные, ГОСТ 25336-82Е.
<a id="p100057"></a>Колбы плоскодонные, ГОСТ 25336-82, вместимостью 500, 250 мл.
<a id="p100058"></a>Мерные колбы, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74), вместимостью 100 и 500 мл.
<a id="p100059"></a>Пипетки с делениями, [ГОСТ 20292-74Е](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74).
<a id="p100060"></a>Пробирки градуированные с пробками на шлифах, [ГОСТ 1770-74Е](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74), вместимостью 5 мл.
<a id="p100061"></a>Эксикатор, ГОСТ 25336-82Е, вместимостью не менее 2 л.
<a id="p100062"></a>Микрошприц на 100 мкл или микропипетка, ГОСТ 20392-74Е, на 0,1 мл.


### <a id="p100063"></a>2.4. Подготовка к определению


<a id="p100064"></a>Хроматографическую камеру за один час до начала хроматографирования заполняют смесью подвижных растворителей гексан:ацетон (2:1) и бензол:этилацетат (6:1) для насыщения камер парами подвижного растворителя. Объем подвижного растворителя в камере должен по высоте находиться не выше чем на 0,7 - 1,0 см от уровня дна камеры.
<a id="p100065"></a>    Камеру  для  хроматографирования готовят следующим образом: на
дно  эксикатора  помещают  чашку  Петри  с 5 г KMnO , а затем к ее
                                                   4
содержимому  осторожно  приливают  15  мл  концентрированной  HCl.
Камеру   закрывают   прошлифованной  крышкой.  Камера  может  быть
использована через 5 - 10 минут.


### <a id="p100066"></a>2.5. Отбор проб


<a id="p100067"></a>Отбор проб проводится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР 21.08.1979, N 2051-79.


### <a id="p100068"></a>2.6. Проведение определения


<a id="p100069"></a>Пробу измельченных яблок (30 г) помещают в плоскодонную колбу вместимостью 500 мл, добавляют 70 мл смеси гексана с ацетоном (2:1) и 0,2 мл концентрированной HCl. Димилин экстрагируют при помощи механического встряхивания колбы в течение 30 мин. Экстракт пропускают через пористый фильтр со слоем безводного сульфата натрия в плоскодонную колбу вместимостью 500 мл. Экстракцию димилина повторяют еще два раза тем же количеством растворителя. Объединенный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (N 10 г), а затем фильтруют через пористый фильтр в круглодонную колбу вместимостью 500 мл. Сульфат натрия промывают 2 - 3 раза смесью гексан - ацетон (2:1) общим объемом N 10 мл и полученный раствор также переносят в круглодонную колбу. С помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель. Остаток из колбы количественно с помощью 10 мл ацетона переносят в делительную воронку на 500 мл, добавляют 250 мл дистиллированной воды и около 0,5 мл 4 н NaOH до pH 10. Экстракт промывают три раза гексаном, порциями по 50 мл. Гексановую фазу отбрасывают. К водной фазе пипеткой добавляют около 0,5 мл концентрированной HCl до pH 1. И трижды экстрагируют димилин гексаном, порциями по 50 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (~ 5 г), а затем порциями фильтруют в грушевидную колбу вместимостью 50 мл. Каждую порцию концентрируют с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема 1 - 2 мл. Последнюю порцию гексана удаляют полностью. К сухому остатку пипеткой добавляют 1 мл гексана. Колбочку закрывают пробкой на шлифе и тщательно обмывают стенки колбы растворителем. Для хроматографирования отбирают с помощью микрошприца на 100 мкл или микропипеткой на 0,1 мл аликвотную часть раствора (0,1 - 0,2 мл) и наносят на хроматографическую пластинку "Силуфол". Справа и слева от рабочей пробы таким же образом по 0,1 мл наносят серию стандартных растворов с содержанием 0,2; 0,4; 0,6...1,0 мкл димилина, подготовленных следующим образом: в ряд градуированных пробирок вместимостью 5 мл пипеткой на 1 мл из стандартного раствора N 2 переносят 1, 2, 3... мл и доводят до метки гексаном.
<a id="p100070"></a>Хроматограмму развивают в системе гексан:ацетон (2:1) или бензол:этилацетат (6:1). После развития хроматограмму на 15 минут помещают под лампу УФ-света, затем после полного выветривания паров хлора хроматограмму обрабатывают проявляющим реагентом N 1.
<a id="p100071"></a>    Димилин на  хроматограммах  проявится в виде темно-серых пятен
сначала  на  белом, а затем на бежевом фоне с R  0,40 +/- 0,05 - в
                                               f
первой  системе  подвижных  растворителей  и  0,35  +/-  0,02 - во
второй.   Линейный   диапазон   определения   0,2   -  1,0  мкг  в
хроматографируемой  пробе.  Пятна  стабильны  в течение нескольких
месяцев.
<a id="p100072"></a>В качестве альтернативного проявления используют проявляющий реагент N 2. Хроматограмму после облучения в УФ-свете последовательно обрабатывают растворами А и Б. Димилин проявляется в виде красных пятен на бледно-желтом фоне. Линейный диапазон определения - 0,5 - 10 мкг. Пятна стабильны в течение длительного времени.


### <a id="p100073"></a>2.7. Обработка результатов анализа


<a id="p100074"></a>Количественное определение димилина в анализируемой пробе проводят путем сравнения площадей и интенсивности пятен рабочей пробы и серии стандартных растворов и содержание его (X) в мг/кг вычисляют по формуле:

                           A x V
<a id="p100075"></a>                       X = ------ (мг/кг),
                           V  x P
                            а

<a id="p100076"></a>    где:
<a id="p100077"></a>    A - количество димилина, найденное в хроматографической пробе,
мкг;
<a id="p100078"></a>    V - общий объем раствора, мл;
<a id="p100079"></a>    V  - объем аликвоты, взятой для хроматографирования, мл;
     а

<div align="center">

<a id="p100080"></a>    P - навеска анализируемой пробы, г.

</div>



## 3. <a id="p100081"></a>Требования безопасности


<a id="p100082"></a>Соблюдать все необходимые требования безопасности, принятые для работы с пестицидами и горючими растворителями.



<a id="p100083"></a>

---