Методические указания по газохроматографическому измерению содержания циклогексанона и циклогексанола в смывах на коже

(утв. Минздравом СССР 28.09.1989 № 5141-89)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ

   H C___CH

        2      2
       /        \
    H C          C=O
     2 \        /

   H C___CH

2 2 М.м. 98,15

Циклогексанон (ЦГ-он) — бесцветная жидкость. Т. кип. 156,7 °C. Темп. плавл. (-45) °C.

Хорошо растворим в этаноле и эфире. Растворимость в воде 2,4 г на 100 мл (при 31 °C).

   H C___CH

        2      2
       /        \
    H C          CH-OH
     2 \        /

   H C___CH

2 2 М.м. 100,16

Циклогексанол (ЦГ-ол) — бесцветная жидкость. Темп. кип. 161 °C. Темп. плавл. 25,4 °C.

Хорошо растворим в этаноле и эфире. Растворимость в воде — 5,67 на 100 мл (при 15 °C).

1. Характеристика методики

Определение основано на использовании газожидкостной хроматографии на приборе с пламенноионизационным детектором.

В качестве смывающей жидкости используется дистиллированная вода.

Диапазон измеряемого содержания 0,04 — 4,0 мг/ кв. см.

Определению не мешают бензол, циклогексан.

Граница суммарной погрешности +/- 9,5%.

ПДУ циклогексанона на коже 1,5 мг/кв. см, циклогексанола — не установлен.

2. Реактивы и растворы

Циклогексанон, х.ч.

Циклогексанол, х.ч.

Основной стандартный раствор готовят для каждого вещества отдельно. Для этого в мерную колбу на 50 мл вносят 10 — 15 мл дистиллированной воды и взвешивают. Добавляют несколько капель ЦГ-она и вновь взвешивают. По разности в весе определяют его количество. Объем доводят до метки дистиллированной водой и вычисляют содержание ЦГ-она в 1 мл. Аналогично готовят основной раствор ЦГ-ола.

Раствор устойчив в течение месяца.

Стандартный раствор № 1, содержащий 10 мг/мл каждого исследуемого вещества (ЦГ-она и ЦГ-ола) готовят соответствующим разведением основных растворов. Соответствующим разведением готовят стандартные растворы содержанием 1 мг/мл, 2 мг/мл, 4 мг/мл, 6 мг/мл, 8 мг/мл каждого из веществ.

Хроматон N-AW с 15% силикона ДС-550.

Газ-носитель — азот особой чистоты в баллоне с редуктором, ГОСТ 9293-74.

Водород в баллоне с редуктором.

3. Приборы и посуда

Хроматограф с пламенно-ионизационным детектором и стальной колонкой.

Установка компрессорная УК-40 для получения воздуха.

Стеклянная или фарфоровая чашка, удобная для сбора смывов.

Пробирки с притертой пробкой на 30 мл.

Мерный цилиндр на 50 мл.

Конусообразная воронка d = 3,0 — 3,5 см.

Стеклянная палочка, вата гигроскопическая, фильтр.

Колбы мерные вместимостью 10, 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пипетки измерительные вместимостью 1, 2, 5 мл, ГОСТ 20292-74.

Микрошприц на 1 мкл.

Секундомер.

Линейка и лупа измерительная.

4. Проведение измерения

Смыв с кожных покровов проводят способом обмыва. Для этого в фарфоровую чашку наливают 30 мл дистиллированной воды и ватным тампоном (0,3 г), смоченным в воде, обмывают участок кожного покрова (100 кв. см) сверху вниз. При этом тампон несколько раз опускают в чашку с водой. Смыв переносят в склянку. Одновременно проводят смыв с кожи у рабочих, не контактирующих с определяемыми веществами.

Стеклянной палочкой ватный тампон тщательно отжимают, переносят в воронку с фильтром. Вату в воронке промывают 10 мл дистиллированной воды (дробными порциями), присоединяя жидкость к основному смыву. Измеряют объем смыва. Общий объем пробы составляет 40 мл. На анализ берут 0,1 мкл смыва.

Промытую и высушенную колонку заполняют хроматоном N-AW с 15% силикона ДС-550 и кондиционируют в токе азота при температуре 180 °C в течение 15 — 20 часов при отключенном детекторе.

Общую подготовку прибора осуществляют согласно инструкции. Ввод пробы осуществляется микрошприцем через самоуплотняющуюся мембрану испарителя.

    Длина колонки                                              3 м
    Диаметр колонки                                            3 мм
    Температура колонки                                        130 °C
    Температура испарителя                                     180 °C
    Газ-носитель                                               азот
    Скорость потока газа-носителя                              40 мл/мин.
    Скорость потока водорода                                   30 мл/мин.
    Скорость потока воздуха                                    300 мл/мин.
    Скорость диаграммной ленты                                 6 мм/мин.
    Объем анализируемой пробы                                  0,1 мкл
    Продолжительность анализа                                  12 мин.
    Время удерживания циклогексанола                           7 мин. 04 с
                      циклогексанона                           8 мин. 45 с.

Количественное определение ЦГ-ола и ЦГ-она проводят методом абсолютной калибровки по площадям пиков. С этой целью строят шкалу стандартов в условиях анализа пробы.

Хроматографируют по 0,1 мкл каждого стандартного раствора № 2, что соответствует концентрации ЦГ-она и ЦГ-ола 0,1 — 0,2 — 0,4 — 0,6 — 0,8 — 1 мкг.

Проводят 5 параллельных определений каждой концентрации.

Строят калибровочную кривую, выражающую зависимость площадей пиков циклогексанола и циклогексанона от концентрации соответствующего вещества. Площадь пиков определяют путем умножения высоты пика на его ширину, измеренную на половине высоты. Условия анализа и калибровки должны быть идентичными. Содержание (C) циклогексанола и циклогексанона в мг/кв. см вычисляют по формуле:

                                 Q

C = -, S

где Q — количество искомого вещества во всей пробе, мг;

S — площадь исследуемой части тела, кв. см.

---