Методические указания по газохроматографическому измерению содержания фенола на коже

(утв. Минздравом СССР 28.09.1989 № 5136-89)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ

C H OH М.м. 94,11 6 5

Фенол (гидроксибензол, карболовая кислота)

Бесцветные кристаллы, краснеющие на воздухе.

Т. пл. 40,9 °C, Т. кип. 182 °C, при 66 °C смешивается с водой во всех отношениях. Растворим в этаноле, эфире, хлороформе и других органических растворителях.

1. Характеристика методики

Определение основано на использовании газожидкостной хроматографии на приборе с пламенно-ионизационным детектором.

В качестве смывающей жидкости используется дистиллированная вода.

Диапазон измеряемого содержания — 0,05 — 1 мг/кв. см.

Определению не мешают другие фенолы, о,м,п-крезолы.

Граница суммарной погрешности +/- 16,5%.

ПДУ фенола на коже 0,17 мг/кв. см.

2. Реактивы и растворы

Фенол, чда, ГОСТ 6417-72.

Основной раствор фенола готовят растворением свежеперегнанного фенола в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 100 мл с содержанием 10 мг/мл. Раствор устойчив в течение 6 месяцев (в холодильнике).

Рабочие стандартные растворы с содержанием фенола 0,1 мг/мл, 0,5 мг/мл, 1 мг/мл, 2 мг/мл, 4 мг/мл, 8 мг/мл готовят соответствующим разведением основного стандартного раствора.

Материал для смыва — вата.

Полисорб-1 (0,25 — 0,5), ТУ 6-09-3602-74.

Апиезон L.

Насадка готовится следующим образом: 3 г апиезона L растворяют в 100 мл хлороформа, заливают 30 г полисорба-1, тщательно перемешивают и сушат при комнатной температуре при постоянном помешивании, затем продолжают сушку насадки в сушильном шкафу при температуре 60 — 70 °C с периодическим помешиванием в течение 5 — 6 часов.

Газоноситель — азот (ГОСТ 9293-74) или гелий в баллоне с редуктором.

Водород в баллоне с редуктором, технический, марка А, ГОСТ 3022-70.

3. Приборы и посуда

Хроматограф с пламенно-ионизационным детектором и стеклянной колонкой длиной 1 м и диаметром 0,3 см.

Установка компрессорная, УК-40, для получения воздуха.

Стеклянная или фарфоровая чашка, удобная для сбора смывов.

Пробирки с пришлифованными пробками.

Фильтр.

Колбы мерные вместимостью 10, 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пипетки вместимостью 1, 2, 5 мл, ГОСТ 20292-74.

Микрошприцы на 1,0 мкл.

Секундомер.

Линейка и лупа измерительные.

4. Проведение измерения

Смыв с кожных покровов проводится способом обмыва, для чего в фарфоровую чашку наливают 40 мл дистиллированной воды. Ватным тампоном (0,3 г), смоченным в воде, обмывают участок кожного покрова (100 кв. см) сверху вниз. При этом тампон несколько раз опускают в чашку с водой. Смыв переносят в склянку. Одновременно проводят смыв с кожи у рабочих, не контактирующих с определяемыми веществами.

Ватный тампон тщательно отжимают стеклянной палочкой, переносят в воронку с фильтром. Вату в воронке промывают 10 мл дистиллированной воды (дробными порциями), присоединяя жидкость к основному смыву, и измеряют объем смыва. Для анализа берут 1,0 мкл смыва. Общий объем смыва составляет 50 мл.

Промытую и высушенную колонку заполняют полисорбом-1 с 10% апиезона L, концы колонки закрывают стекловатой. Заполненную колонку, отключенную от детектора, кондиционируют в токе газа-носителя вначале при температуре 180 °C, затем при температуре 230 °C в течение 25 — 30 часов, а затем подсоединяют колонку к детектору.

Ввод пробы осуществляется микрошприцем через самоуплотняющуюся мембрану испарителя. Общую подготовку прибора осуществляют согласно инструкции.

    Длина колонки                                              1 м
    Диаметр колонки                                            0,3 см
    Температура колонки                                        170 °C
    Температура испарителя                                     200 °C
    Газ-носитель                                               азот
    Скорость потока газа-носителя                              40 мл/мин.
    Скорость потока водорода                                   40 мл/мин.
    Скорость потока воздуха                                    400 мл/мин.
    Скорость диаграммной ленты                                 200 мм/ч
    Объем анализируемой пробы                                  1 мкл
    Продолжительность анализа                                  7 мин.
    Время удерживания фенола                                   4 мин. 45 с.

Количественное определение фенола проводят методом абсолютной калибровки по площади пиков. Для этого вводят по 1 мкл рабочих стандартных растворов с содержанием фенола 0,1 мкг/мкл, 0,5 мкг/мкл, 1 мкг/мкл, 2 мкг/мкл, 4 мкг/мкл, 8 мкг/мкл. На основании полученных данных строят градуировочный график зависимости площади пика от количества введенного вещества. Условия анализа пробы и построения градуировочного графика должны быть идентичны.

Содержание фенола в мг/кв. см (C) вычисляют по формуле:

                                 Q

C = -, S

где Q — количество искомого вещества во всей пробе, мг;

S — площадь исследуемой части тела, кв. см.

---