Методические указания по газохроматографическому измерению содержания 1-фенил-4,5-дихлорпиридазона (дихлорпиридазона) и 1-фенил-6-амино-5-хлорпиридазона-6 (феназона) на коже
(утв. Минздравом СССР 28.09.1989 № 5135-89)
Примечание
Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 № 01/14262-8-32).
28 сентября 1989 г. № 5135-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ 1-ФЕНИЛ-4,5-ДИХЛОРПИРИДАЗОНА (ДИХЛОРПИРИДАЗОНА) И
1-ФЕНИЛ-6-АМИНО-5-ХЛОРПИРИДАЗОНА-6 (ФЕНАЗОНА) НА КОЖЕ
| Название вещества | Структурная формула | М.м. | Агрегатное состояние | Т. пл., °C | Упругость пара, мм рт. ст. | Растворимость |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Дихлорпиридазон (1-фенил- 4,5-дихлорпиридазон) | N ___ / \ / \ CL О -N- О _/ __/ Cl \ O | 241,0 | Белое кристаллическое вещество | 161 — 164 | -6 4,6 х 10 при 20 °С -6 3,9 х 10 при 40 °С | Хорошо растворим в метиловом и этиловом спиртах, этилацетате |
| Феназон (1-фенил-6- амино-5- хлорпиридазон-6) | NH N ___ 2/ \ / \ Cl О -N- О _/ __/ O | 221,5 | Белые кристаллы | 205 — 206 | -4 1 х 10 при 40 °С | -«-» |
На коже человека феназон вызывает легкое воспаление, на глазах вызывает конъюнктивит с дальнейшим нарушением зрения. Дихлорпиридазон (ДХП) оказывает на кожу более слабое действие.
1. Характеристика методики
Методика основана на газохроматографическом определении обработанной пробы с использованием детектора постоянной скорости рекомбинации.
В качестве смывающей жидкости используется этиловый спирт.
Диапазон измеряемых концентраций ДХП 0,00004 — 0,0007 мг/кв. см и феназона 0,0002 — 0,01 мг/кв. см. Погрешность определения не превышает 15%.
Определению не мешают мукохлорная кислота, анилин и фенилгидразин.
ПДУ дихлорпиридазона и феназона на коже не установлены.
2. Реактивы и растворы
Феназон, перекристаллизованный, с Т. пл. 205 — 206 °C.
Дихлорпиридазон, перекристаллизованный, с Т. пл. 161 — 164 °C.
Метил-бета-цианэтиленсилоксановый каучук ХЕ-60 жидкая фаза для хроматографии.
Хроматон-AW-ДMCS фирмы «Chemapol, ЧССР, зер. 0,20 — 0,25 мм — твердый носитель для хроматографии.»
Этиловый спирт, ГОСТ 18300-72.
Газообразный азот особой чистоты в баллонах с редуктором.
Основные растворы с содержанием 1 мг/мл готовят растворением 100 мг феназона и дихлорпиридазона в 100 мл этанола.
Срок хранения — 2 месяца в холодильнике.
3. Приборы и посуда
Хроматограф серии «Цвет-100» с детектором постоянной скорости рекомбинации.
Хроматографическая колонка стеклянная размером (100 х 0,4) см.
Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 и 50 мл.
Пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 10 мл.
Пипетки, ГОСТ 20292-74, на 1,5 и 10 мл.
Баня водяная, ТУ 64-4-2850-76.
Фарфоровая чашка диаметром 120 мм.
Лупа измерительная, ГОСТ 8309-85.
4. Проведение измерения
Участок загрязненной кожи 100 кв. см обрабатывают 10 мл этанола, нагретого до 40 °C, налитого в фарфоровую чашку. Ватным тампоном 0,3 г, смоченным в спирте, обмывают участок кожного покрова сверху вниз. Одновременно проводят смыв с кожи у рабочих, не контактирующих с определяемыми веществами. Отобранная проба может сохраняться месяц.
Вату отжимают, промывают 1 мл этанола, вновь отжимают, измеряют количество экстрагента, доводят до 10 мл и 1 мкл последнего вводят в испаритель хроматографа.
Общую подготовку прибора проводят согласно инструкции.
Хроматографическая насадка — 10% XE-60 на хроматоне AW-ДMCS, зер. 0,20 — 0,25 мм. Температура колонки для феназона 260 °C, для ДХП 190 °С.
Температура испарителя 280 °C.
Температура камеры детектора 280 °C.
Скорость газа-носителя (азота особой чистоты) для продувки:
Скорость движения диаграммной ленты 60 мм/ч.
Время удерживания ДХП 3 мин. 30 с,
Количественное определение ДХП и феназона проводят методом абсолютной градуировки по высотам пиков для ДХП и по площадям пиков для феназона. Для построения градуировочной характеристики в хроматографическую колонку в пятикратной повторности вводят по 1 мкл градуировочных растворов, полученных разбавлением исходных стандартных растворов с содержанием феназона: 0,002; 0,004; 0,006; 0,02; 0,1 мкг/мкл и дихлорпиридазона: 0,0004; 0,00068; 0,00136; 0,0068; 0,0076 мкг/мкл.
Строят градуировочный график в координатах: высота пика (см) от количества ДХП и площадь пика (кв. см) от количества феназона в вводимой пробе.
Содержание ДХП и феназона C (мг/кв. см) вычисляют по формуле:
Q
где Q — количество искомого вещества, найденное во всей пробе, мг;
S — площадь исследуемой части тела, кв. см.