---
title: "\"Методические указания по хроматографическому измерению содержания тестостерона и эфиров тестостерона - пропионата, фенилпропионата, изокапроната, каприната и энантата на коже\""
number: "5132-89"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-5132-89"
---

## "Методические указания по хроматографическому измерению содержания тестостерона и эфиров тестостерона - пропионата, фенилпропионата, изокапроната, каприната и энантата на коже"

# "Методические указания по хроматографическому измерению содержания тестостерона и эфиров тестостерона - пропионата, фенилпропионата, изокапроната, каприната и энантата на коже"

(утв. Минздравом СССР 28.09.1989 N 5132-89)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Заместитель Главного<br>
государственного<br>
санитарного врача СССР<br>
**В.И.ЧИБУРАЕВ**

</div>

<div align="center">

28 сентября 1989 г. N 5132-89

</div>


<a id="p100002"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ ТЕСТОСТЕРОНА**
**И ЭФИРОВ ТЕСТОСТЕРОНА - ПРОПИОНАТА, ФЕНИЛПРОПИОНАТА,**

<div align="center">

**ИЗОКАПРОНАТА, КАПРИНАТА И ЭНАНТАТА НА КОЖЕ**

</div>


<a id="p100003"></a>Таблица 20


<table>
<colgroup><col width="20%"><col width="4%"><col width="5%"><col width="3%"><col width="3%"><col width="3%"><col width="5%"><col width="11%"><col width="9%"><col width="14%"><col width="23%"></colgroup>
<tr><td>Наименование вещества</td><td colspan="7">Структурная формула</td><td>М.м.</td><td>Т.пл., °C</td><td>Агрегатное состояние</td></tr>
<tr><td>Тестостерон (Т)</td><td>// O</td><td>/ \ \ /</td><td>/ \</td><td>/ \ / R</td><td>\ /</td><td>s__ \ /</td><td>| OH| | | | | | &gt;|</td><td>288,41</td><td>151 - 152</td><td>Белый мелкокристаллический порошок</td></tr>
<tr><td>Тестостерона</td><td colspan="7">R-CO-CH -CH</td><td>344,47</td><td>118 - 119</td><td>-"-</td></tr>
<tr><td>пропионат (ТП)</td><td colspan="7">2 3</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>Тестостерона фенилпропионат</td><td colspan="7">R-CO-(CH ) -C H 2 2 6 5</td><td>420,57</td><td>112 - 113</td><td>-"-</td></tr>
<tr><td>(ТФП)</td><td colspan="7"></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>Тестостерона изокапронат (ТИК)</td><td colspan="7">CH / 3 R-CO-(CH ) -CH 2 2 \ CH 3</td><td>386,56</td><td>79 - 80</td><td>-"-</td></tr>
<tr><td>Тестостерона капринат (ТК)</td><td colspan="7">R-CO-(CH ) -CH 2 3 3</td><td>442,66</td><td>53 - 54</td><td>-"-</td></tr>
<tr><td>Тестостерона энантат (ТЭ)</td><td colspan="7">R-CO-(CH ) -CH 2 5 3</td><td>400,59</td><td>35 - 37,5</td><td>Парафинообразная масса</td></tr>
</table>



## 1. <a id="p100011"></a>Характеристика методики


<a id="p100012"></a>Определение основано на хроматографировании анализируемых веществ в тонком слое сорбента с последующим проявлением зон локализации раствором фосфорномолибденовой кислоты и денситометрировании окрашенных зон.
<a id="p100013"></a>В качестве смывающей жидкости используется этиловый спирт.
<a id="p100014"></a>Определение избирательно на стадиях сушки, просеивания и фасовки.
<a id="p100015"></a>Диапазон измеряемого содержания Т 0,0001 - 0,01 мг/кв. см, ТП, ТФП, ТИК, ТКиТЭ - 0,0004 - 0,01 мг/кв. см.
<a id="p100016"></a>Граница суммарной погрешности измерения не превышает +/- 25%.
<a id="p100017"></a>Рекомендуемый предельно допустимый уровень (ПДУ) загрязнения кожи: Т - 0,0003 мг/кв. см; ТП, ТФП, ТИК, ТК и ТЭ - 0,001 мг/кв. см.


## 2. <a id="p100018"></a>Реактивы и растворы


<a id="p100019"></a>Т - перекристаллизованный из изопропилового спирта.
<a id="p100020"></a>**ТП - ФС 42-1119-77.**
<a id="p100021"></a>**ТФП - ВФС 42-0563-76.**
<a id="p100022"></a>**ТИК - ВФС 42-0562-76.**
<a id="p100023"></a>**ТК - ВФС 42-0561-76.**
<a id="p100024"></a>**ТЭ - ФС 42-1545-80.**
<a id="p100025"></a>Спирт этиловый ректификат, ГОСТ 5963-67.
<a id="p100026"></a>Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-79.
<a id="p100027"></a>Хлороформ, х.ч., ГОСТ 20015-74.
<a id="p100028"></a>Система растворителей: смесь хлороформа с ацетоном в соотношении 9:1 (по объему).
<a id="p100029"></a>Проявляющий раствор - 10% раствор фосфорно-молибденовой кислоты в ацетоне.
<a id="p100030"></a>Основные растворы Т, ТП, ТФП, ТИК, ТК и ТЭ, содержащие 2,5 мг/мл, готовят растворением 0,2500 г каждого вещества в этиловом спирте в мерной колбе вместимостью 100 мл.
<a id="p100031"></a>Стандартные растворы тестостеронов с содержанием 1 мг/мл готовят соответствующим разбавлением основного раствора этиловым спиртом.
<a id="p100032"></a>Марлевые тампоны.


## 3. <a id="p100033"></a>Приборы и посуда


<a id="p100034"></a>Камера хроматографическая.
<a id="p100035"></a>Пластинки силуфол размером (7,5 х 15,0) см.
<a id="p100036"></a>Пульверизатор стеклянный.
<a id="p100037"></a>Пипетки вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл с делениями, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74).
<a id="p100038"></a>Микропипетки вместимостью 0,1 мл с оттянутым на капилляр концом.
<a id="p100039"></a>Стаканы лабораторные стеклянные вместимостью 25 мл, ГОСТ 10394-72.
<a id="p100040"></a>Колбы мерные вместимостью 25, 50 и 100 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100041"></a>Пробирки с притертыми пробками вместимостью 10 мл.
<a id="p100042"></a>Остродонные колбы вместимостью 25 мл с нормальным шлифом.
<a id="p100043"></a>Вакуумная установка.
<a id="p100044"></a>Баня водяная.
<a id="p100045"></a>Сушильный шкаф.
<a id="p100046"></a>Пинцет медицинский.
<a id="p100047"></a>Денситометр.


## 4. <a id="p100048"></a>Проведение измерения


<div align="center">

<a id="p100049"></a>Условия проведения смыва

</div>


<a id="p100050"></a>Трафарет размером (5 х 5) см накладывают на исследуемый участок кожного покрова работающего. Двумя марлевыми тампонами, смоченными в спирте, проводят смыв, затем сухим тампоном промокают смываемый участок кожи.
<a id="p100051"></a>Все тампоны складывают в пробирку или стакан. Одновременно проводят контрольный смыв с кожи у работающих, не контактирующих с тестостеронами.

<div align="center">

<a id="p100052"></a>Условия анализа

</div>


<a id="p100053"></a>Тампоны тщательно промывают двумя порциями спирта по 5 мл каждая, сливают полученный раствор в остродонную колбу и упаривают под вакуумом при температуре 60 - 70 °C. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл спирта и используют для анализа.
<a id="p100054"></a>При хроматографировании смыва с чистой кожи на пластинке силуфол образуется слабо окрашенная полоса. С целью исключения влияния "фона" на результаты анализа, для приготовления шкалы стандартов используют спирт, полученный после смыва с чистой кожи.
<a id="p100055"></a>Для очистки сорбента пластинку помещают в камеру для хроматографирования с системой растворителей хлороформ-ацетон (9:1) и закрывают крышкой. Для насыщения камеры парами подвижной фазы достаточно 10 минут. Край пластинки погружают в растворитель подвижной фазы не более чем на 0,5 см. После того как подвижная фаза дойдет до конца пластинки, последнюю вынимают из камеры и сушат на воздухе 3 - 5 минут. На подготовленную таким образом пластинку, на линию старта (от края 1 см), наносят при помощи микропипетки по 0,05 мл растворов пробы и шкалы стандартов (размер пятен не должен превышать 0,5 см). Пластинку высушивают на воздухе в течение 3 минут и помещают в ту же камеру с системой растворителей. После поднятия подвижной фазы на высоту 10 см от стартовой линии пластинку из камеры извлекают и оставляют на воздухе под вытяжным шкафом до полного испарения растворителей (3 - 5 минут). Затем пластинку опрыскивают проявляющим раствором и помещают в сушильный шкаф на 5 минут при температуре 80 °C. Анализируемые вещества проявляются в виде синих пятен на желтом фоне. Окраска пятен устойчива в течение суток.
<a id="p100056"></a>    Количественное   определение  анализируемых  веществ  на  хроматограмме
оценивают  денситометрически  сравнением  пятен проб и шкалы стандартов. R
                                                                          f
тестостерона составляет 0,2; ТП - 0,57; ТФП - 0,55; ТИК - 0,57; ТК - 0,57 и
ТЭ - 0,63.
<a id="p100057"></a>Шкалу стандартов с содержанием Т 5-25-50-100-300-500 мкг/мл и ТП, ТФП, ТИК, ТК и ТЭ 25-50-100-300-500 мкг/мл готовят соответствующим разведением стандартного раствора N 1, это соответствует содержанию Т 0,25 мкг, 1,25 мкг, 2,5 мкг, 5 мкг, 25 мкг, ТП, ТФП, ТИК, ТК и ТЭ 1,25 мкг, 2,5 мкг, 5 мкг, 25 мкг.
<a id="p100058"></a>Содержание анализируемых веществ в мг/кв. см кожи (C) вычисляют по формуле:

                                   Q
<a id="p100059"></a>                               C = -,
                                   S

<a id="p100060"></a>где Q - количество вещества во всей пробе, мг;
<a id="p100061"></a>S - площадь исследуемой части тела, кв. см.



<a id="p100062"></a>

---