Методические указания по фотометрическому измерению содержания смазочных масел на коже
(утв. Минздравом СССР 28.09.1989 № 5129-89)
Примечание
По вопросу, касающемуся применения данного документа, см. письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 № 01/14262-8-32
28 сентября 1989 г. № 5129-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ФОТОМЕТРИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ
СОДЕРЖАНИЯ СМАЗОЧНЫХ МАСЕЛ НА КОЖЕ
Смазочные масла — смесь высокомолекулярных углеводородов различных классов соединений — вязкие жидкости от светло-желтого до темно-коричневого цвета; плотность 0,985 — 0,900 г/куб. см, Т. кип от 300 до 400 °C, растворимы в гексане, изооктане, октане, нонане, декане; некоторые масла растворяются в ледяной уксусной кислоте, ацетоне, метилэтилкетоне.
Характеристика методики
Методика основана на взаимодействии масел с аллоксаном (аллоксангидратом) или аллоксантином в среде серной и уксусной кислот с последующим фотометрическим измерением окрашенного продукта реакции при 440 — 460 нм.
В качестве смывающей жидкости используется гексан.
Диапазон измеряемого содержания, 0,03 — 3 мг/кв. см.
Измерению мешают ароматические, полициклические и нафталиновые углеводороды. Не мешает угольная и породная пыль.
Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 25%.
Реактивы и растворы
Этиловый спирт, ГОСТ 8314-77, 96% раствор.
Серная кислота, ГОСТ 4204-77, ч.
Уксусная кислота ледяная, ГОСТ 61-75.
Аллоксантин, ВТУ-РУ-689-62 или аллоксан (аллоксангидрат).
250 г аллоксантина или 170 мл аллоксана растирают в ступке с 10 — 15 мл концентрированной серной кислоты, содержимое количественно переносят в колбу, добавляя серную кислоту до объема 54 мл, после чего приливают 11 мл ледяной уксусной кислоты и раствор тщательно перемешивают. Используют свежеприготовленный раствор.
Основной стандартный раствор масла готовят из навески масла, взятого непосредственно в производстве. В мерную колбу вместимостью 25 мл наливают 15 — 20 мл гексана, закрывают притертой пробкой и взвешивают. Вносят в колбу 2 — 3 капли применяемого на производстве масла и повторно взвешивают. После полного растворения масла объем жидкости доводят до метки гексаном. Навеску масла устанавливают по разности между вторым и первым весом и вычисляют его содержание в 1 мл полученного раствора.
Стандартный раствор № 1 с концентрацией смазочного масла 1 мг/мл готовят соответствующим разбавлением основного стандартного раствора гексаном. Раствор устойчив в течение 2-х недель.
Приборы и посуда
Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 25 мл.
Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью от 1 до 10 мл.
Пробирки с пришлифованными пробками, ГОСТ 10515-75, вместимостью 10 мл.
Колбы плоскодонные вместимостью 100 мл.
Стеклянные баночки с притертой пробкой на 30 мл.
Проведение измерения
Участок кожи 100 кв. см, загрязненный смазочными маслами, обрабатывают способом обмыва 20 мл гексана, помещенного в фарфоровую чашку. Ватным тампоном 0,3 г, смоченным гексаном, обмывают участок кожного покрова сверху вниз. При этом тампон несколько раз обмакивают в жидкость. В качестве держателя тампона используется пинцет. Срок хранения проб 2 — 3 дня.
Ватный тампон тщательно стеклянной палочкой промывают в смыве. Если раствор мутный, его центрифугируют.
Для устранения влияния веществ, выделяющихся кожным покровом и дающих окраску, аналогичную маслам, проводят разбавление пробы в 50 раз гексаном, 1,5 мл разбавленной пробы вносят в колориметрическую пробирку, добавляют 0,5 мл уксусной кислоты и помещают в кипящую водяную баню на 20 мин. К остатку (0,2 — 0,3 мл) после охлаждения добавляют 2,5 мл раствора аллоксана или аллоксантина и пробирки снова помещают в кипящую водяную баню на 20 мин. После охлаждения добавляют 2 мл спирта, перемешивают и измеряют оптическую плотность растворов на фотоэлектроколориметре при 440 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 1 см. В качестве раствора сравнения служит смыв с кожи рабочих, не контактирующих с анализируемым веществом, обработанный в условиях анализируемой пробы.
Содержание смазочных масел находят по градуировочному графику. Для построения градуировочного графика готовят шкалу стандартов согласно таблице.
| Номер стандарта | Стандартный раствор № 1, мл | Гексан, мл | Содержание масла, мг |
|---|---|---|---|
| 1 | 0 | 1,5 | 0 |
| 2 | 0,05 | 1,45 | 0,05 |
| 3 | 0,10 | 1,40 | 0,1 |
| 4 | 0,25 | 1,25 | 0,25 |
| 5 | 0,50 | 1,00 | 0,5 |
| 6 | 1,00 | 0,50 | 1,0 |
Пробирки шкалы стандартов обрабатывают аналогично пробам. Шкала стандартов устойчива в течение 6 ч.
Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс — соответствующие им величины содержания масла в градуировочном растворе (мг).
Проверку градуировочного графика проводят 1 раз в месяц или в случае использования новой партии реактивов.
Содержание смазочного масла C (мг/кв. см) вычисляют по формуле:
Q
где Q — количество смазочного масла во всей пробе, мг;
S — площадь исследуемой части тела, кв. см.