---
title: "\"Методические указания по хроматографическому измерению содержания ксилидина на коже\""
number: "5117-89"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-5117-89"
---

## "Методические указания по хроматографическому измерению содержания ксилидина на коже"

# "Методические указания по хроматографическому измерению содержания ксилидина на коже"

(утв. Минздравом СССР 28.09.1989 N 5117-89)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Заместитель Главного<br>
государственного<br>
санитарного врача СССР<br>
**В.И.ЧИБУРАЕВ**

</div>

<div align="center">

28 сентября 1989 г. N 5117-89

</div>


<a id="p100002"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ**

<div align="center">

**СОДЕРЖАНИЯ КСИЛИДИНА НА КОЖЕ**

</div>


<a id="p100003"></a>    (CH ) C H NH                                                М.м. 121,19
       3 2 6 3  2

<a id="p100004"></a>Технический продукт ксилидин представляет собой смесь изомеров с температурой кипения 214 - 226 °C.
<a id="p100005"></a>Ксилидин - жидкость со специфическим запахом, хорошо растворим в этаноле, эфире и некоторых других органических растворителях, плохо растворим в воде.


## 1. <a id="p100006"></a>Характеристика методики


<a id="p100007"></a>Определение основано на хроматографировании ксилидина в тонком слое сорбента, с последующим проявлением хроматограмм n-диметиламинобензальдегидом. В качестве смывающей жидкости используют этиловый спирт.
<a id="p100008"></a>Диапазон измеряемого содержания - 0,024 мг/кв. см - 0,72 мг/кв. см.
<a id="p100009"></a>Определению не мешают толуидин и анилин.
<a id="p100010"></a>Граница суммарной погрешности измерения не превышает +/- 20%.
<a id="p100011"></a>ПДУ ксилидина на коже - 0,08 мг/кв. см.


## 2. <a id="p100012"></a>Реактивы, растворы и материалы


<a id="p100013"></a>Этиловый спирт, ректификат, [ГОСТ 5962-67](https://bukva.ai/docs/gost-5962-67).
<a id="p100014"></a>n-Диметиламинобензальдегид, 1% раствор.
<a id="p100015"></a>Бензол, х.ч.
<a id="p100016"></a>Основной раствор ксилидина: в мерную колбу на 25 мл вносят 10 - 15 мл этилового спирта и взвешивают на аналитических весах. Добавляют 0,1 - 0,2 мл ксилидина и вновь взвешивают. По разности в весе определяют количество ксилидина. Объем доводят до метки этиловым спиртом и вычисляют содержание ксилидина в 1 мл.
<a id="p100017"></a>Раствор устойчив в течение двух недель.
<a id="p100018"></a>Стандартный раствор N 1, содержащий 10 мг/мл ксилидина, готовят соответствующим разбавлением основного раствора этиловым спиртом. Раствор готовят перед употреблением.
<a id="p100019"></a>Материал для смыва - вата, которую следует проверить на чистоту. В случае загрязнения ее надо предварительно прокипятить в дистиллированной воде, затем промыть этиловым спиртом и вновь в горячей дистиллированной водой, просушить.


## 3. <a id="p100020"></a>Приборы, аппаратура, посуда


<a id="p100021"></a>Спектрофотометр.
<a id="p100022"></a>Теплоэлектровентилятор.
<a id="p100023"></a>Пробирки колориметрические с притертыми пробками высотой 120 мм, внутренним диаметром 15 мм.
<a id="p100024"></a>Камера хроматографическая размером (22 х 25 х 12) см.
<a id="p100025"></a>Колбы мерные вместимостью 25 и 50 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100026"></a>Микропипетки, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74), вместимостью 0,1 - 0,2 мл.
<a id="p100027"></a>Пипетки, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74), вместимостью 1, 2 и 10 мл.
<a id="p100028"></a>Воронки стеклянные d = 3,0 - 3,5 см.
<a id="p100029"></a>Линзы плоско-выпуклые (+ 10 Д).
<a id="p100030"></a>Баня водяная.


## 4. <a id="p100031"></a>Проведение измерения


<div align="center">

<a id="p100032"></a>Условия проведения смыва

</div>


<a id="p100033"></a>Смыв с кожных покровов проводится способом обмыва.
<a id="p100034"></a>Для этого в фарфоровую чашку наливают 30 мл этилового спирта. Ватным тампоном (0,3 г), смоченным в смывающей жидкости, обмывают участок кожного покрова (100 кв. см) сверху вниз. При этом тампон несколько раз обмакивают в жидкость. Смыв переносят в склянку. Одновременно проводят контрольный смыв с кожи у рабочих, не контактирующих с ксилидином.

<div align="center">

<a id="p100035"></a>Условия анализа

</div>


<a id="p100036"></a>Стеклянной палочкой ватный тампон тщательно промывают в смывной жидкости, переносят в воронку с фильтром, через который эту жидкость фильтруют в цилиндр. Затем вату промывают еще 10 мл этилового спирта (дробными порциями). Жидкость присоединяют к основному смыву и доводят общий объем пробы до 40 мл. На анализ берут 0,01 мл смыва (при большом содержании ксилидина - 0,005 мл).
<a id="p100037"></a>Пробу наносят на хроматографическую пластинку, которую помещают в хроматографическую камеру, предварительно заполненную бензолом. Бензол наливают в таком количестве, чтобы нижний край пластинки был погружен в растворитель на 1 см ниже линии старта. После того как растворитель поднимется по слою сорбента на 13 см (фронт растворителя), пластинку вынимают и снова подвергают хроматографированию, повторяя эту операцию 5 раз.
<a id="p100038"></a>    Хроматограммы  проявляют  1%  раствором  n-диметиламинобензальдегида  в
этиловом  спирте.  Ксилидин  проявляется  в виде пятен желтого цвета с R  =
                                                                        f
0,23  -  0,27.  Через  30  мин.  интенсивность окраски  пятен  измеряют  на
спектрофотометре  СФ-10  при  430  -  435  нм.  Для  этого на входе лучей в
интегрирующий  шар, справа и слева по ходу их, ставят плоско-выпуклую линзу
с оптической силой + 10 Д (концентрируя световой поток до размеров 6,5 х 15
мм).  Определяют отражения по всей площади окрашенной зоны. В качестве фона
для  сравнения  берут  хроматографические  пластинки, обработанные таким же
образом  холостой  пробой,  т.е.  смывом  с  кожи  лиц, не контактирующих с
ксилидином. Записывают отражение фона. Затем вместо правого, по ходу лучей,
эталона  помещают  измеряемый  образец  и  записывают его спектр отражения.
Находят минимальное значение длины волны (для ксилидина 430 - 435 нм) и при
этой  длине  волны вычисляют для каждой концентрации коэффициенты отражения
(К   ) по формуле:
  отр

                               отражение пробы, %
<a id="p100039"></a>                        К    = ------------------.
                         отр   отражение фона, %

<a id="p100040"></a>Затем для каждой величины концентрации вычисляют значение функции отражения по формуле:

                              отражение стандарта, %
<a id="p100041"></a>                       К    = ----------------------;
                        отр     отражение фона, %;

                                             2
                                   (I - K   )
                                          отр
<a id="p100042"></a>                            f(K) = -----------.
                                    2 x K
                                         отр

<a id="p100043"></a>Количество ксилидина в пробе находят по градуировочному графику, построенному на логарифмической бумаге и отражающему зависимость от количества ксилидина (мкг).
<a id="p100044"></a>Определение методом стандартных серий проводят путем сравнения интенсивности окраски зон проб ксилидина с окраской нанесенных на пластинку стандартных растворов.
<a id="p100045"></a>Градуировочный график и шкалу стандартов для визуального определения строят в условиях аналитической пробы.
<a id="p100046"></a>Для этого из стандартного раствора N 1 готовят серию стандартных растворов с содержанием ксилидина 0,06 мг/мл, 0,09 мг/мл, 0,12 мг/мл, 0,15 мг/мл, 0,18 мг/мл. На хроматографическую пластинку наносят по 0,01 мл каждого из растворов, что соответствует содержанию ксилидина 0,6 - 0,9 - 1,2 - 1,5 - 8 мкг. Шкалу стандартов обрабатывают аналогично пробам.
<a id="p100047"></a>Содержание ксилидина (мг/кв. см) C вычисляют по формуле:

                                   Q
<a id="p100048"></a>                               C = -,
                                   S

<a id="p100049"></a>где Q - количество искомого вещества во всей пробе, мг;
<a id="p100050"></a>S - площадь исследуемой части тела, кв. см.



<a id="p100051"></a>

---