Методические указания по газохроматографическому измерению содержания гваякола и о-анизидина на коже

(утв. Минздравом СССР 28.09.1989 № 5108-89)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ

/ \

О	_OCH

    \ /     3

     OH                                                         М.м. 124,13

Гваякол (о-метоксифенол) — бесцветные кристаллы со слабым ароматическим запахом. Т. кип. 205 °C, плотность 1,12 — 1,13, хорошо растворяется в обычных органических растворителях. Гваякол вызывает экземы, поверхностные омертвления.

/ \

О	_OCH

    \ /     3

     NH                                                         М.м. 123,16

   2

о-Анизидин (2-аминоанизол) — бесцветная жидкость. Т. кип. 225 °C, хорошо растворим в спирте и эфире. Хорошо всасывается через кожу. Является метгемоглобинообразователем.

1. Характеристика методики

Методика основана на газохроматографическом определении гваякола и о-анизидина с использованием пламенно-ионизационного детектора.

В качестве смывающей жидкости используется дистиллированная вода.

Диапазон измеряемого содержания 0,0025 — 0,025 мг/кв. см.

Определению не мешает дихлорэтан.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 15%.

ПДУ гваякола и о-анизидина на коже не установлены.

2. Реактивы и растворы

Гваякол, перегнанный при Т = 205 °C.

о-Анизидин, МРТУ 6-09-1752-64.

Дихлорэтан, ГОСТ 1942-74.

Инертон N-AW-DMCS — твердый носитель для газовой хроматографии (0,16 — 0,20 мм).

Полиметилфенилсилоксановое масло ПФМС-4 — жидкая фаза для хроматографии.

Азот газообразный, ГОСТ 9293-74, в баллонах с редуктором.

Водород газообразный, ГОСТ 3022-80, в баллонах с редуктором.

Воздух от компрессора СО-7А.

Основные растворы гваякола и о-анизидина готовят в мерной колбе на 100 мл растворением в дистиллированной воде 100 мг каждого из веществ. Срок хранения — в течение месяца в холодильнике. Рабочие растворы с содержанием 0,0055 мг/мл; 0,011 мг/мл; 0,022 мг/мл; 0,033 мг/мл и 0,055 мг/мл готовят соответствующим разбавлением основного раствора дистиллированной водой.

Рабочие растворы устойчивы в течение двух недель в холодильнике.

Материал для смыва — вата гигроскопическая.

3. Приборы и посуда

Хроматограф серии «Цвет»-100 с детектором ионизационно-пламенным.

Хроматографическая колонка стеклянная, размером (100 x 0,3) см.

Колбы мерные вместимостью 100 мл и 25 мл, ГОСТ 1770-74.

Пипетки на 1,5 и 10 мл, ГОСТ 20292-74.

Микрошприц МШ-10, ТУ 2.833.106.

Пинцет медицинский.

Фарфоровая чашка диаметром 120 мм.

Логарифмическая линейка.

4. Проведение измерения

Смыв с кожных покровов проводится способом обмыва. Для этого в фарфоровую чашку наливают 20 мл дистиллированной воды. Ватным тампоном (0,3 г), смоченным в воде, обмывают участок кожного покрова (100 кв. см) сверху вниз. При этом тампон несколько раз опускают в чашку с водой. Общий объем пробы составляет 25 мл. Одновременно проводят смыв с кожи у рабочих, не контактирующих с определяемыми веществами. Пробы устойчивы в течение суток.

Вату отжимают, промывают 1 мл дистиллированной воды, вновь отжимают. Из полученного экстракта 1 мкл вводят в испаритель хроматографа для анализа.

Хроматографическую насадку готовят следующим образом: жидкую фазу ПФМС-4 в количестве 15% от веса носителя растворяют в хлороформе, этим раствором заливают твердый носитель инертон N-AW-DMCS, смесь нагревают на водяной бане при перемешивании до полного испарения хлороформа. Затем с помощью вакуумного насоса полученной насадкой заполняют хроматографическую колонку. Колонку кондиционируют 24 ч в токе азота при постоянном повышении температуры колонки от 50 до 200 °C без подключения к детектору. Прибор для работы готовят согласно инструкции.

Температура колонки 120 °C.

Температура испарителя 250 °C.

Скорость азота 40 мл/мин.

Скорость водорода 40 мл/мин.

Скорость воздуха 400 мл/мин.

Скорость диаграммной ленты 240 мм/ч.

Объем вводимой пробы 1 мкл.

Время удерживания: гваякола 3 мин. 15 с,

о-анизидина 6 мин. 8 с.

Количественное определение гваякола и о-анизидина проводят методом абсолютной градуировки к площадям пиков. Для построения градуировочной характеристики гваякола и о-анизидина в испарителе хроматографа вводят 1 мкл рабочих растворов известного содержания 5,5; 11,0; 22,0; 33,0; 55,0 мкг/мл пятикратной повторности. На основании полученных данных строят градуировочный график зависимости площади пика от количества введенного вещества.

Условия анализа пробы и калибровки должны быть идентичны.

Концентрацию гваякола и о-анизидина C (мг/кв. см) вычисляют по формуле:

                                     Q

C = -, S

где Q — количество гваякола или о-анизидина во всей пробе, мг;

S — площадь исследуемой части тела, кв. см.

---