Методические указания по определению корбеля в воде, почве и растениях пшеницы методом тонкослойной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 08.06.1989 № 5037-89)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ КОРБЕЛЯ В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РАСТЕНИЯХ ПШЕНИЦЫ

<*> Разработаны В.Н. Кавецким, Г.Г. Андриенко (УкрНИИЗР).

Краткая характеристика препарата. Корбель — 4-[3(4- (1,1-диметилэтил)-фенил)]-[2-метил]пропил-2,6цис-диметил-морфолин. Брутто-формула C H NO. Молекулярная масса 303,5. Общепринятое 20 33

название   -   фенпропиморф.   Агрегатное   состояние   -  жидкое.
Выпускается  в  виде  концентрата  эмульсии  желтоватого  цвета со
слабым  ароматическим запахом. Плотность 0,943 при 20 °C, довольно
легко  воспламеняется,  горюч.  Содержание  действующего  вещества
составляет    750    г/л.   Растворим   во   многих   органических
растворителях,  плохо  растворим  в  воде. Стабилен в воде, слабых

растворах кислот и щелочей до 24 ч.

Применяется для борьбы с болезнями на озимой и яровой пшенице, яровом ячмене. МДУ в ФРГ на зерновых 0,5 мг/кг. Срок ожидания — 35 дней.

Принцип метода. Метод основан на извлечении корбеля из растительной пробы, почвы или воды экстракцией: из воды — органическим растворителем, из почвы и растений — смесью вода — ацетон (20:1) или подкисленной водой с pH 2 — 3. Переэкстракцию проводят хлороформом или смесью гексан — ацетон (4:1). Определение проводят методом ТСХ.

Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 147.

Таблица 147

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА (P = 0,95, N = 5)

индикатор, ч.д.а. Лимонная кислота ч.д.а., 1-процентный раствор. Конго красный. Нитрат серебра ч.д.а. Сульфат натрия безводный х.ч. Уксусная кислота ч.д.а., 5-процентный раствор. Пластинки «Силуфол» УФ . Стандартный раствор корбеля (0,1 мг/мл в этаноле или 254

ацетоне).  Проявляющий реагент: N 1 - 0,4-процентный раствор конго
красного  в  50-процентном  этаноле; N 2 - 0,4-процентный  раствор
бромфенолового  синего  в  ацетоне  и  3-процентный водный раствор

нитрата серебра в соотношении 1:1.

Приборы и посуда. Аппарат для встряхивания. Колбы: круглодонные на 250 мл; мерные на 100 мл. Холодильник стеклянный для отгонки растворителя. Баня водяная или ротационный испаритель. Воронки химические и делительные на 500 мл. Цилиндры мерные. Пульверизатор стеклянный. Камера для хроматографирования (эксикатор). Капиллярные пипетки для нанесения проб. Микропипетки на 0,1 мл конические; плоскодонные на 250 мл. Компрессорная установка УК-40-2.

Ход анализа. Экстракция. Пробу воды (250 мл) помещают в делительную воронку и трижды экстрагируют хлороформом или смесью гексана с ацетоном в соотношении 4:1 порциями по 100, 50, 50 мл в течение 5 мин. Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия (15 г), концентрируют на водяной бане или ротационном испарителе до 0,3 — 0,5 мл.

Навеску воздушно-сухой почвы (100 г) или измельченных растений

(50   г)  помещают  в  колбу  для  экстракции,  приливают  100  мл
водно-ацетоновой   смеси   (20:1)   или   дистиллированной   воды,
подкисленной  хлороводородной кислотой до pH 2 - 3, и экстрагируют
корбель  на  аппарате  для  встряхивания  в  течение 30 мин. Затем
экстракт  фильтруют,  экстракцию  повторяют  дважды.  Объединенный

экстракт помещают в делительную воронку на 500 мл. Если экстракцию

проводят  подкисленной  водой,  то  в экстракт добавляют несколько
капель  1  н   раствора  KOH  до  pH 8 - 9, добавляют 100 мл смеси
гексан  -  ацетон  (4:1)  или хлороформа и встряхивают в течение 3
мин.  Переэкстракцию  таким  же объемом растворителя повторяют еще

дважды. Экстракт собирают в круглодонную колбу через воронку с 15%

безводного  сульфата натрия. Растворитель отгоняют на водяной бане
или  ротационном  испарителе  до объема 0,5 мл. Остаток наносят на
тонкий слой пластинок "Силуфол" УФ   . Справа от пятна исследуемой

                              254

пробы наносят стандарт с известной концентрацией корбеля. Диаметр нанесенного пятна не должен превышать 1 — 1,5 см.

    Хроматографирование.  Пластинку с нанесенными пробами помещают
в  хроматографическую  камеру  с  системой  растворителей гексан -
ацетон  (1:1)  или  гексан  -  ацетон  -  0,5  н  уксусная кислота

(1:2:0,1). Когда фронт растворителя поднимется до 10 см, пластинку

вынимают  и  оставляют  на  несколько  минут на воздухе до полного
испарения  подвижного растворителя. Пластинку опрыскивают одним из
проявляющих  реагентов.  После опрыскивания пластинку помещают под
источник  УФ-света - лампу ПРК-4. На светло-сером фоне проявляются
малиновые  пятна  корбеля  с  R   0,87.  Для большей контрастности

                           f

пластинку  можно  оросить 1-процентным раствором лимонной кислоты,
после  чего  на  сине-сером  фоне  четко проявятся малиновые пятна
корбеля. После опрыскивания бромфеноловым  реагентом  и  обработки
5-процентным раствором уксусной  кислоты  на желтом фоне пластинки

проявляются пятна корбеля синего цвета.

    Обработка   результатов  анализа.  Количественное  определение
проводят  путем  сравнения  интенсивности окраски и размеров пятен
пробы  и  стандартных растворов. Содержание препаратов в пробе (X,

мг/кг) рассчитывают по формуле:

                              A

X = -, P

где: