---
title: "\"Методические указания по определению топаза в сельскохозяйственных культурах, почве и воде газожидкостной и тонкослойной хроматографией\""
number: "5009-89"
issuer: "Министерство здравоохранения СССР"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-5009-89"
---

## "Методические указания по определению топаза в сельскохозяйственных культурах, почве и воде газожидкостной и тонкослойной хроматографией"

# "Методические указания по определению топаза в сельскохозяйственных культурах, почве и воде газожидкостной и тонкослойной хроматографией"

(утв. Минздравом СССР 08.06.1989 N 5009-89)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждены<br>
Министерством здравоохранения СССР

</div>

<div align="center">

8 июня 1989 г. N 5009-89

</div>


<a id="p100002"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОПАЗА В СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ КУЛЬТУРАХ,**
**ПОЧВЕ И ВОДЕ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ**

<a id="p100003"></a>Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
<a id="p100004"></a>Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.


## 1. <a id="p100005"></a>Краткая характеристика препарата


<a id="p100006"></a>    Топаз   (CGA 71818)       -     1-/2-(2,4-Дихлорфенил)пентил/-
1H-1,2,4-триазол.  Белый  кристаллический порошок. Т.  пл.  60 °C.
Растворимость в воде 70 мг/л, растворим в большинстве органических
растворителей.   Предложен   в   качестве   фунгицида  защитного и
искореняющего  действия  для  борьбы  с мучнистой  росой,  паршой,
ржавчиной,  септориозом,  гнилью и др. в сельском хозяйстве.  ЛД
                                                                50
для крыс 2125 мг/кг.

              Cl
<a id="p100007"></a>        _____/                                        C  H  Cl N .
    Cl_//   \\__CH-CH -N-N                             13 15  2 3

<a id="p100008"></a>

| \ ___ / | 2 / \\ |
| --- | --- |

                 3 7     N


## 2. <a id="p100009"></a>Метод определения топаза



### <a id="p100010"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100011"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100012"></a>    Метод   основан   на   определении   топаза  газожидкостной  и
тонкослойной  хроматографией после извлечения его из анализируемой
пробы  органическим  растворителем,  из  воды  -  хлороформом,  из
растений  -  50-процентным  водным ацетоном, из почвы - смесью ацетона с
0,05 н CaCl  (1:1)  и дальнейшего  перераспределения  между  двумя
           2
несмешивающимися растворителями.

##### <a id="p100013"></a>2.1.2 Метрологическая характеристика метода

<a id="p100014"></a>    ГЖХ
<a id="p100015"></a>    Минимально детектируемое количество    0,01 н
<a id="p100016"></a>    Чувствительность метода                0,005 мг/кг
<a id="p100017"></a>    Среднее значение определения           88,1%
<a id="p100018"></a>    Стандартное отклонение                 2,2%
<a id="p100019"></a>    Доверительный интервал среднего,       83,1 +/- 2,2
    p = 0,95 и n = 5
<a id="p100020"></a>    ТСХ
<a id="p100021"></a>    Минимально детектируемое количество    2 мкг
<a id="p100022"></a>    Чувствительность метода                0,1 - 0,5 мг/кг
<a id="p100023"></a>    Среднее значение определения           68%
<a id="p100024"></a>    Стандартное отклонение                 4,6%
<a id="p100025"></a>    Доверительный интервал среднего,       68 +/- 4,6
    p = 0,95 и n = 5

##### <a id="p100026"></a>2.1.3 Избирательность метода

<a id="p100027"></a>Определению могут мешать препараты из группы триазолов.


### <a id="p100028"></a>2.2. Реактивы и растворы


<a id="p100029"></a>Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79.
<a id="p100030"></a>н-Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.
<a id="p100031"></a>Натрий сернокислый безводный, чда, [ГОСТ 4166-79](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).
<a id="p100032"></a>Натрий хлористый, чда, ГОСТ 4233-77.
<a id="p100033"></a>Неподвижная жидкая фаза: 5% SE-30 на хроматоне N-AW-DMCS.
<a id="p100034"></a>5% XE-60 на хроматоне N-AW-DMCS (0,125 - 0,160 мм).
<a id="p100035"></a>Стандартный раствор топаза в гексане с содержанием фунгицида 1 мкг/мл, срок хранения в холодильнике 1 месяц.
<a id="p100036"></a>**ТСХ**
<a id="p100037"></a>Ацетон, ч, ГОСТ 2601-79.
<a id="p100038"></a>Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.
<a id="p100039"></a>Хлороформ, ч, ГОСТ 20015-74.
<a id="p100040"></a>Бромфеноловый синий, ТУ 6-09-3719-83.
<a id="p100041"></a>Лимонная кислота, осч 6-4, ТУ 6-09-584-75, 2-процентный раствор.
<a id="p100042"></a>Нитрат серебра, ч, ГОСТ 1277-75.
<a id="p100043"></a>Пластинки "Силуфол" (Хемапол, ЧССР).
<a id="p100044"></a>Сульфат натрия безводный, ч, [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).
<a id="p100045"></a>Подвижная фаза ацетон - хлороформ - 1:9.
<a id="p100046"></a>Проявляющий реактив: А - 50 мг бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона.
<a id="p100047"></a>Раствор Б: 500 мг нитрата серебра растворяют в 20 мл воды и прибавляют 60 мл ацетона.
<a id="p100048"></a>Растворы А и Б сливают в мерную колбу на 100 мл и доводят ацетоном до метки. После обработки БФС пластинку обесцвечивают 2% раствором лимонной или уксусной кислоты.
<a id="p100049"></a>Стандартный раствор топаза, содержащий 100 мкг/мл, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе на 100 мл ацетоном (гексаном). Хранят в холодильнике не более 2-х месяцев.


### <a id="p100050"></a>2.3. Посуда и приборы


<a id="p100051"></a>Аппарат для встряхивания колб АВУ-1, ТУ 64-11081-83.
<a id="p100052"></a>Воронки делительные ВД, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100053"></a>Воронки химические, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100054"></a>Колонка хроматографическая стеклянная (1000 мм x 3 мм).
<a id="p100055"></a>Колбы конические со шлифами, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100056"></a>Колбы круглодонные ОНТ-50-14/32 ТС, ГОСТ 25336-82.
<a id="p100057"></a>Газовый хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР) или по захвату электронов (ДЭЗ).
<a id="p100058"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР, ТУ 25-11-917-76.
<a id="p100059"></a>Микрошприц МШ-10М, ТУ 2-833-106.
<a id="p100060"></a>Вата гигроскопическая.
<a id="p100061"></a>Бумажные фильтры, ТУ 6-08-1678-77.
<a id="p100062"></a>Холодильник бытовой.


### <a id="p100063"></a>2.4. Подготовка к определению



##### <a id="p100064"></a>2.4.1 Подготовка хроматографической колонки для ГЖХ

<a id="p100065"></a>Стеклянную колонку (1 м x 3 мм), промытую органическими растворителями (ацетон:этиловый спирт:петролейный эфир - 1:1:1), кондиционируют при 270 °C в течение 8 часов, скорость азота - 30 - 40 мл/мин.

##### <a id="p100066"></a>2.4.2 Отбор проб и подготовка их к анализу

<a id="p100067"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб для определения микроколичеств пестицидов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания и объектах окружающей среды", утвержденными заместителем Главного санитарного врача СССР 21.08.1979 г., N 2051-79.


### <a id="p100068"></a>2.5. Проведение определения


<a id="p100069"></a>Метод ГЖХ

##### <a id="p100070"></a>2.5.1 Экстракция топаза из проб

<a id="p100071"></a>Вода. 500 мл воды помещают в делительную воронку, добавляют 5 - 7 г хлористого натрия, хорошо перемешивают и топаз экстрагируют 50 мл хлороформа. Смесь в течение 2 - 3 мин. осторожно встряхивают. Экстракцию повторяют трижды. После разделения слоев хлороформный экстракт сушат безводным сульфатом натрия. Концентрируют под вакуумом при температуре не выше 50 °C до объема 1 - 2 мл. Растворитель полностью удаляют струей инертного газа. К сухому остатку добавляют 1 мл гексана, перемешивают. Аликвоту 3 - 5 мкл вводят в хроматограф.
<a id="p100072"></a>    Почва.  20  г  пробы помещают в коническую колбу (на 250 мл) и
прибавляют 50 мл смеси (1:1) ацетон - 0,05 н водный раствор CaCl .
                                                                2
Встряхивают  30  мин., отделяют фильтрат, а пробу экстрагируют еще
дважды  смесью  растворителей.  Объединяют  фильтраты,  помещают в
морозильную камеру на 1 час, затем фильтруют. Переносят экстракт в
делительную   воронку,  прибавляют  5  г  хлорида  натрия,  хорошо
перемешивают  и реэкстрагируют топаз дважды по 25 - 30 мл гексана.
Объединяют гексан, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют
до объема 1 - 2 мл. Аликвоту вводят в хроматограф.
<a id="p100073"></a>Растительные пробы. Растительную пробу измельчают, отбирают для анализа навеску массой 20 г, помещают в коническую колбу, заливают 100 мл 50-процентного водного ацетона. Встряхивают в течение 1 часа. Затем экстракт фильтруют через вату. Экстракцию повторяют трижды. Объединенный раствор помещают в морозильную камеру на 1 час. Для удаления выпавших хлопьев (или осадка) раствор фильтруют через бумажный фильтр. После окончания фильтрации фильтр промывают 5 - 7 мл холодного 50-процентного ацетона. Отфильтрованный раствор переносят в делительную воронку, прибавляют 5 г хлорида натрия, хорошо перемешивают и реэкстрагируют топаз трижды по 25 - 30 мл гексана. Объединяют гексановый экстракт, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до объема 1 - 2 мл при температуре не выше 40 - 60 °C. Аликвоту вводят в хроматограф.

##### <a id="p100074"></a>2.5.2 Условия хроматографирования

<a id="p100075"></a>Хроматограф марки "Цвет" или аналогичный прибор с детектором ДПР (ДЭЗ).
<a id="p100076"></a>Условия хроматографирования при работе на ДПР (ДЭЗ):
<a id="p100077"></a>температура колонки - 240 °C, испарителя - 240 °C, детектора - 260 °C;
<a id="p100078"></a>скорость газа-носителя (азота) - 40 мл/мин.
<a id="p100079"></a>Хроматографическая колонка стеклянная размером 1000 x 3 мм, заполненная 5% SE-30 или 5% XE-60 на хроматоне N-AW-DMCS (0,125 - 0,160 мм). Время удерживания на фазе 5% SE-30 - 1 мин. 35 сек., на фазе 5% XE-60 1 мин. 20 сек. Линейность детектирования - 0,01 - 2,5 нг.


### <a id="p100080"></a>2.6. Обработка результатов


<a id="p100081"></a>Содержание топаза в анализируемой пробе (X) в мг/кг или мг/л определяют методом соотношения со стандартом высот пиков и рассчитывают по формуле:

                          H  x V  x C x V
                           2    1        3
<a id="p100082"></a>                      X = ----------------,
                            H  x V  x P
                             1    2

<a id="p100083"></a>    где:
<a id="p100084"></a>    X - количество препарата в пробе, мг/кг или мг/л;
<a id="p100085"></a>    C  -  количество препарата в стандартном растворе, введенном в
хроматограф, мкг/мл;
<a id="p100086"></a>    H  - высота пика стандарта, мм;
     1
<a id="p100087"></a>    H  - высота пика анализируемого раствора, мм;
     2
<a id="p100088"></a>    V   -  объем  стандартного раствора, введенного в хроматограф,
     1
мкл;
<a id="p100089"></a>    V   - объем анализируемого раствора, введенного в хроматограф,
     2
мкл;
<a id="p100090"></a>    V  - объем анализируемой пробы, мл;
     3
<a id="p100091"></a>    P - навеска пробы, г.
<a id="p100092"></a>Метод ТСХ
<a id="p100093"></a>2.6.1. Экстракцию и очистку проб воды, почвы и растительного материала проводят таким же путем, как и в случаях ГЖХ.
<a id="p100094"></a>Полученные экстракты выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 - 50 °C до 0,3 - 0,5 мл.

##### <a id="p100095"></a>2.6.2 Идентификация и количественное определение топаза

<a id="p100096"></a>Пробу, сконцентрированную до объема 0,3 - 0,5 мл, количественно наносят при помощи капилляра на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 2 см от нижнего края пластинки. Колбу с экстрактом 2 - 3 раза смывают порциями гексана, который также наносят в центр пятна. Справа и слева от пробы наносят серию стандартных растворов топаза, содержащих 2 мкг, 5 мкг, 10 мкг препарата.
<a id="p100097"></a>    Пластинку хроматографируют в  системе  хлороформ:ацетон (9:1).
После  хроматографирования  пластинку высушивают на воздухе, после
чего  обрабатывают  из  пульверизатора  проявляющим реактивом БФС.
После  высушивания  пластинку обесцвечивают раствором лимонной или
уксусной  кислоты.  Топаз  проявляется  в виде пятна ярко-голубого
цвета на желтом фоне. Величина R  топаза = 0,45 +/- 0,05.
                                f
<a id="p100098"></a>    Содержание топаза в исследуемой пробе вычисляют по формуле:

                           A
<a id="p100099"></a>                       X = - мг/кг (мг/л),
                           P

<a id="p100100"></a>где:
<a id="p100101"></a>A - количество препарата, найденное на хроматограмме при сравнении со стандартом, мкг;

<div align="center">

<a id="p100102"></a>P - навеска пробы в г или мл.

</div>



## 3. <a id="p100103"></a>Требования безопасности


<a id="p100104"></a>Выполняются в соответствии с "[Правилами](https://bukva.ai/docs/pravila-2455-81) устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санэпидучреждений системы МЗ СССР" N 2455-81 от 20.10.81.



<a id="p100105"></a>

---