Методические указания по определению топаза в сельскохозяйственных культурах, почве и воде газожидкостной и тонкослойной хроматографией
Актуально на 01.11.2026.
Как цитировать: "Методические указания по определению топаза в сельскохозяйственных культурах, почве и воде газожидкостной и тонкослойной хроматографией". 5009-89. https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-5009-89
(утв. Минздравом СССР 08.06.1989 № 5009-89)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299).
8 июня 1989 г. № 5009-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОПАЗА В СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ КУЛЬТУРАХ, ПОЧВЕ И ВОДЕ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая характеристика препарата
Топаз (CGA 71818) - 1-/2-(2,4-Дихлорфенил)пентил/- 1H-1,2,4-триазол. Белый кристаллический порошок. Т. пл. 60 °C.
Растворимость в воде 70 мг/л, растворим в большинстве органических
растворителей. Предложен в качестве фунгицида защитного и искореняющего действия для борьбы с мучнистой росой, паршой, ржавчиной, септориозом, гнилью и др. в сельском хозяйстве. ЛД
50
для крыс 2125 мг/кг.
Cl
_____/ C H Cl N . Cl_// \\__CH-CH -N-N 13 15 2 3
| \ ___ / | 2 / \ |
|---|
3 7 N
2. Метод определения топаза
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Метод основан на определении топаза газожидкостной и тонкослойной хроматографией после извлечения его из анализируемой пробы органическим растворителем, из воды - хлороформом, из растений - 50-процентным водным ацетоном, из почвы - смесью ацетона с 0,05 н CaCl (1:1) и дальнейшего перераспределения между двумя
2
несмешивающимися растворителями.
2.1.2 Метрологическая характеристика метода
Минимально детектируемое количество 0,01 н Чувствительность метода 0,005 мг/кг Среднее значение определения 88,1% Стандартное отклонение 2,2% Доверительный интервал среднего, 83,1 +/- 2,2
p = 0,95 и n = 5
Минимально детектируемое количество 2 мкг Чувствительность метода 0,1 - 0,5 мг/кг Среднее значение определения 68% Стандартное отклонение 4,6% Доверительный интервал среднего, 68 +/- 4,6
p = 0,95 и n = 5
2.1.3 Избирательность метода
Определению могут мешать препараты из группы триазолов.
2.2. Реактивы и растворы
н-Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.
Натрий сернокислый безводный, чда, ГОСТ 4166-79.
Натрий хлористый, чда, ГОСТ 4233-77.
Неподвижная жидкая фаза: 5% SE-30 на хроматоне N-AW-DMCS.
5% XE-60 на хроматоне N-AW-DMCS (0,125 — 0,160 мм).
Стандартный раствор топаза в гексане с содержанием фунгицида 1 мкг/мл, срок хранения в холодильнике 1 месяц.
Бромфеноловый синий, ТУ 6-09-3719-83.
Лимонная кислота, осч 6-4, ТУ 6-09-584-75, 2-процентный раствор.
Нитрат серебра, ч, ГОСТ 1277-75.
Пластинки «Силуфол» (Хемапол, ЧССР).
Сульфат натрия безводный, ч, ГОСТ 4166-76.
Подвижная фаза ацетон — хлороформ — 1:9.
Проявляющий реактив: А — 50 мг бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона.
Раствор Б: 500 мг нитрата серебра растворяют в 20 мл воды и прибавляют 60 мл ацетона.
Растворы А и Б сливают в мерную колбу на 100 мл и доводят ацетоном до метки. После обработки БФС пластинку обесцвечивают 2% раствором лимонной или уксусной кислоты.
Стандартный раствор топаза, содержащий 100 мкг/мл, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе на 100 мл ацетоном (гексаном). Хранят в холодильнике не более 2-х месяцев.
2.3. Посуда и приборы
Аппарат для встряхивания колб АВУ-1, ТУ 64-11081-83.
Воронки делительные ВД, ГОСТ 25336-82.
Воронки химические, ГОСТ 25336-82.
Колонка хроматографическая стеклянная (1000 мм x 3 мм).
Колбы конические со шлифами, ГОСТ 25336-82.
Колбы круглодонные ОНТ-50-14/32 ТС, ГОСТ 25336-82.
Газовый хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР) или по захвату электронов (ДЭЗ).
Ротационный вакуумный испаритель ИР, ТУ 25-11-917-76.
Микрошприц МШ-10М, ТУ 2-833-106.
Бумажные фильтры, ТУ 6-08-1678-77.
2.4. Подготовка к определению
2.4.1 Подготовка хроматографической колонки для ГЖХ
Стеклянную колонку (1 м x 3 мм), промытую органическими растворителями (ацетон:этиловый спирт:петролейный эфир — 1:1:1), кондиционируют при 270 °C в течение 8 часов, скорость азота — 30 — 40 мл/мин.
2.4.2 Отбор проб и подготовка их к анализу
Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб для определения микроколичеств пестицидов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания и объектах окружающей среды», утвержденными заместителем Главного санитарного врача СССР 21.08.1979 г., № 2051-79.
2.5. Проведение определения
2.5.1 Экстракция топаза из проб
Вода. 500 мл воды помещают в делительную воронку, добавляют 5 — 7 г хлористого натрия, хорошо перемешивают и топаз экстрагируют 50 мл хлороформа. Смесь в течение 2 — 3 мин. осторожно встряхивают. Экстракцию повторяют трижды. После разделения слоев хлороформный экстракт сушат безводным сульфатом натрия. Концентрируют под вакуумом при температуре не выше 50 °C до объема 1 — 2 мл. Растворитель полностью удаляют струей инертного газа. К сухому остатку добавляют 1 мл гексана, перемешивают. Аликвоту 3 — 5 мкл вводят в хроматограф.
Почва. 20 г пробы помещают в коническую колбу (на 250 мл) и прибавляют 50 мл смеси (1:1) ацетон — 0,05 н водный раствор CaCl . 2
Встряхивают 30 мин., отделяют фильтрат, а пробу экстрагируют еще дважды смесью растворителей. Объединяют фильтраты, помещают в
морозильную камеру на 1 час, затем фильтруют. Переносят экстракт в
делительную воронку, прибавляют 5 г хлорида натрия, хорошо перемешивают и реэкстрагируют топаз дважды по 25 - 30 мл гексана.
Объединяют гексан, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до объема 1 — 2 мл. Аликвоту вводят в хроматограф.
Растительные пробы. Растительную пробу измельчают, отбирают для анализа навеску массой 20 г, помещают в коническую колбу, заливают 100 мл 50-процентного водного ацетона. Встряхивают в течение 1 часа. Затем экстракт фильтруют через вату. Экстракцию повторяют трижды. Объединенный раствор помещают в морозильную камеру на 1 час. Для удаления выпавших хлопьев (или осадка) раствор фильтруют через бумажный фильтр. После окончания фильтрации фильтр промывают 5 — 7 мл холодного 50-процентного ацетона. Отфильтрованный раствор переносят в делительную воронку, прибавляют 5 г хлорида натрия, хорошо перемешивают и реэкстрагируют топаз трижды по 25 — 30 мл гексана. Объединяют гексановый экстракт, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до объема 1 — 2 мл при температуре не выше 40 — 60 °C. Аликвоту вводят в хроматограф.
2.5.2 Условия хроматографирования
Хроматограф марки «Цвет» или аналогичный прибор с детектором ДПР (ДЭЗ).
Условия хроматографирования при работе на ДПР (ДЭЗ):
температура колонки — 240 °C, испарителя — 240 °C, детектора — 260 °C;
скорость газа-носителя (азота) — 40 мл/мин.
Хроматографическая колонка стеклянная размером 1000 x 3 мм, заполненная 5% SE-30 или 5% XE-60 на хроматоне N-AW-DMCS (0,125 — 0,160 мм). Время удерживания на фазе 5% SE-30 — 1 мин. 35 сек., на фазе 5% XE-60 1 мин. 20 сек. Линейность детектирования — 0,01 — 2,5 нг.
2.6. Обработка результатов
Содержание топаза в анализируемой пробе (X) в мг/кг или мг/л определяют методом соотношения со стандартом высот пиков и рассчитывают по формуле:
H x V x C x V
2 1 3
H x V x P
1 2
X — количество препарата в пробе, мг/кг или мг/л;
C — количество препарата в стандартном растворе, введенном в хроматограф, мкг/мл;
H — высота пика стандарта, мм; 1
H — высота пика анализируемого раствора, мм; 2
V — объем стандартного раствора, введенного в хроматограф, 1 мкл;
V — объем анализируемого раствора, введенного в хроматограф, 2 мкл;
V — объем анализируемой пробы, мл; 3
2.6.1. Экстракцию и очистку проб воды, почвы и растительного материала проводят таким же путем, как и в случаях ГЖХ.
Полученные экстракты выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 — 50 °C до 0,3 — 0,5 мл.
2.6.2 Идентификация и количественное определение топаза
Пробу, сконцентрированную до объема 0,3 — 0,5 мл, количественно наносят при помощи капилляра на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 2 см от нижнего края пластинки. Колбу с экстрактом 2 — 3 раза смывают порциями гексана, который также наносят в центр пятна. Справа и слева от пробы наносят серию стандартных растворов топаза, содержащих 2 мкг, 5 мкг, 10 мкг препарата.
Пластинку хроматографируют в системе хлороформ:ацетон (9:1). После хроматографирования пластинку высушивают на воздухе, после чего обрабатывают из пульверизатора проявляющим реактивом БФС. После высушивания пластинку обесцвечивают раствором лимонной или уксусной кислоты. Топаз проявляется в виде пятна ярко-голубого цвета на желтом фоне. Величина R топаза = 0,45 +/- 0,05.
f
Содержание топаза в исследуемой пробе вычисляют по формуле:
A
A — количество препарата, найденное на хроматограмме при сравнении со стандартом, мкг;
3. Требования безопасности
Выполняются в соответствии с «Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санэпидучреждений системы МЗ СССР» № 2455-81 от 20.10.81.