Методические указания по измерению концентраций о-фенилендиамина в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 12.12.1988 № 4766-88)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ О-ФЕНИЛЕНДИАМИНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов Министерства здравоохранения СССР и других заинтересованных министерств и ведомств.

Методические указания разрабатываются и утверждаются с целью обеспечения контроля соответствия физических концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны их предельно допустимым концентрациям (ПДК) — санитарно-гигиеническим нормативам, утверждаемым Министерством здравоохранения СССР, оценки эффективности внедренных санитарно-гигиенических мероприятий, установления необходимости использования средств индивидуальной защиты органов дыхания, оценки влияния вредных веществ на состояние здоровья работающих и др.

Включенные в данный выпуск методические указания подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны» и ГОСТ 12.1.016-79 «ССБТ. Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ» и одобрены Проблемной комиссией «Научные основы гигиены труда и профессиональной патологии». Методические указания являются обязательными при осуществлении вышеуказанного контроля.

 // \ ──NH

2 М.м. 108,0.

          2

Ортофенилендиамин (ОФДА) — кристаллы светло-желтого цвета без запаха. Т. пл. — 101 — 103 °C. Упругость насыщенного пара при 20 °C — 0,018 мм рт. ст., при 40 °C — 0,08 мм рт. ст. Вещество хорошо растворимо в спиртах, эфире, хлороформе, плохо растворяется в воде.

В воздухе находится в виде паров и аэрозоля.

ОФДА обладает специфическим гонадотропным и эмбриотропным действием.

ПДК вещества в воздухе — 0,5 мг/куб. м.

Характеристика метода

Метод основан на хроматографическом выделении о-фенилендиамина в тонком слое сорбента с последующим проявлением хроматограмм в виде желтых пятен на белом фоне.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр и хлороформ.

Нижний предел измерения вещества в анализируемом объеме пробы — 2 мкг.

Предел измерения вещества в воздухе — 0,05 мг/куб. м (при отборе 40 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе — от 0,05 до 5,0 мг/куб. м.

Измерению не мешают п- и м-фенилендиамины.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, — около 1 часа 40 минут.

Приборы, аппаратура, посуда

Фотоэлектроколориметр.

Аспирационное устройство.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74.

Хроматографическая камера, ГОСТ 2065-78.

Микропипетки для нанесения проб, ТУ 64-1-862-77.

Колбы круглодонные, ГОСТ 8613-75.

Склянка для промывки и очистки газов (склянка Дрекселя), ТУ 25-11-1062-75.

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.

Колбы конические, ГОСТ 10394-72, вместимостью 100 мл.

Колбы грушевидные для отгонки растворителя, ГОСТ 10394-72.

Воронки химические, ГОСТ 8613-75, диаметром 6 см.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.

Стеклянный фильтр с пористой пластинкой.

Реактивы, растворы и материалы

о-Фенилендиамин, ТУ 6-09-08-1127-76, хч.

Хлороформ, ГОСТ 3160-75, хч.

Ацетон, ГОСТ 2603-79, хч.

Пластинки для тонкослойной хроматографии «Силуфол-254» размером 150 x 150 мм (ЧССР).

Этиловый спирт, ГОСТ 5963-67, 95-процентный.

Подвижный растворитель: ацетон — вода (1:1) по объему.

Стандартный раствор о-фенилендиамина с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением 10 мг препарата хлороформом в мерной колбе вместимостью 100 мл. Стандартный раствор может храниться в холодильнике в течение 2-х месяцев.

Фильтры АФА-ВП-20.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 2 л/мин. аспирируют последовательно через фильтр АФА-ВП-20 и для поглощения паров через склянку Дрекселя, содержащую 100 мл хлороформа.

Для определения 1/2 ПДК следует отобрать 8 л воздуха. Пробы могут храниться в холодильнике в течение 2 дней.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в коническую колбу и заливают 30 мл хлороформа. Экстрагируют в течение 30 минут. Экстракцию повторяют дважды. Экстракт сливают в колбу для отгонки растворителя. Хлороформ из поглотителя переносят в ту же колбу. Отгоняют растворитель под вакуумом до объема 0,2 — 0,3 мл при температуре 40 °C.

    Пробу   количественно   наносят   при  помощи  капиллярной  пипетки  на
хроматографическую  пластинку  так,  чтобы  диаметр пятна не превышал 1 см.
Расстояние  центра  пятна  от  нижнего  края  пластинки  -  1,5 см. Колбу с

экстрактом 2 — 3 раза смывают небольшими порциями хлороформа, который также

наносят  в  центр  пятна.  Справа  и  слева  от  пробы  наносят стандартные
растворы,  содержащие  2,  4,  8,  16,  32,  64  мкг препарата. Пластинку с
нанесенными растворами помещают  в  хроматографическую камеру, в которую за

30 минут до хроматографирования залита смесь ацетон — вода (1:1) по объему.

После  поднятия  фронта подвижного растворителя на 10 см пластинку вынимают
из   камеры  и  оставляют  на  несколько  минут  на  воздухе  до  испарения
растворителя,  затем  переносят  в сушильный шкаф и выдерживают в течение 5
минут  при  температуре 100 °C. Исследуемое вещество дает желтую окраску на
белом фоне. Значение R  для о-фенилендиамина составляет 0,6.

                  f

Окрашенную зону локализации о-фенилендиамина (с помощью соскоба) лопаткой переносят в стеклянный фильтр № 4 и элюируют 2 мл этилового спирта. Измеряют оптическую плотность окрашенных растворов на фотоэлектроколориметре со светофильтром № 3 (зеленый) в кювете 2,0 мм против раствора этилового спирта. По данным фотометрирования строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей стандартных растворов, на ось абсцисс — соответствующие им значения содержания вещества в растворе (в мкг).

Количественное измерение содержания о-фенилендиамина в анализируемом объеме пробы находят по градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию вещества в воздухе в мг/куб. м (C) вычисляют по формуле:

                                а x в

C = -----, б x V

где:

а — количество о-фенилендиамина, найденное по градуировочному графику в анализируемом объеме пробы, мкг;

в — общий объем раствора пробы, мл;

б — объем пробы, взятый для анализа, мл;

V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к температуре 20 °C и давлению 760 мм рт. ст. проводят по следующей формуле:

                          V  x (273 + 20) x P
                           t

20 = -------------------, (273 + t°) x 101,33

где:

V — объем воздуха, отобранный для анализа, л; t

P — барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t° — температура воздуха в месте отбора пробы, °C.

Для удобства расчета 20 следует пользоваться таблицей коэффициентов (Приложение 2). Для приведения объема воздуха к температуре 20 °C и давлению 760 мм рт. ст. надо умножить на соответствующий коэффициент.

°C	Давление P, кПа/мм рт. ст.
	97,33/ 730	97,86/ 734	98,4/ 738	98,93/ 742	99,46/ 746	100/ 750	100,53/ 754	101,06/ 758	101,33/ 760	101,86/ 764
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836	1,1899	1,1963	1,2026	1,2058	1,2122
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644	1,1705	1,1768	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1036	1,1097	1,1158	1,1218	1,1278	1,1338	1,1399	1,1400	1,1490	1,1551
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-6	1,0540	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-2	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0535	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+2	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+6	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0557
+10	0,9944	0,9999	1,0054	1,0108	1,0162	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9671	0,9725	0,9778	0,9880	0,9884	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618	0,9669	0,9721	0,9773	0,9799	0,9851
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9555	0,9605	0,9657	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9288	0,9339	0,9891	0,9440	0,9432	0,9542	0,9594	0,9645	0,9670	0,9723
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368	0,9418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9198	0,9248	0,9297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

---