Методические указания по определению старане200 в воде, почве, зерне методом тонкослойной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 08.06.1987 № 4354-87)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СТАРАНЕ200 В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <>*

<> Разработаны Н.В. Бажановой, М.Г. Алтунян, Ж.А. Арутюнян (АрмНИИЗР).*

Краткая характеристика препарата. Старане — 4-амино-3,5- 200

*дихлор-6-фтор-2-пиридилоксиуксусная    кислота.     Брутто-формула*
*C H FCl N O .  Молекулярная  масса  255. Общепринятое  название  -*
 *7 5   2 2 3*
*флюроксипир. Растворимость при 20 °C: в воде - 0,091, в ацетоне  -*
*41,6  г/л.  Химически чистое  соединение -  белое  кристаллическое*
*вещество без запаха с т. пл. 232 - 233 °C. Старане    предлагается*

                                              *200*

в форме концентрата эмульсии, содержащего 200 г флюроксипира в виде 1-метилгептилового эфира на 1 л. Это послевсходовый гербицид.

*Препарат действует подобно ауксину, обычно  через  несколько часов*
*после обработки. В высшей степени эффективен  как  средство защиты*
*зерновых  культур  от  целого  ряда  распространенных  сорняков  и*
*считается  перспективным  для  уничтожения  многолетних сорняков в*

плодовых садах.

Принцип метода. Метод основан на извлечении старане из воды, почвы и зерна одним из органических растворителей с последующим хроматографированием в тонком слое стандартных пластинок «Силуфол» и проявлении зон локализации препарата аммиакатом серебра.

Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 158.

Таблица 158

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА

Примечание. Число параллельных определений 6.

    Избирательность метода.  Метод специфичен, и другие соединения
при  данных  условиях  хроматографирования  определению не мешают.
Однако    из   всех   исследуемых   объектов   извлекается   много
коэкстрактивных  веществ,  которые  при  опрыскивании  проявляющим
реагентом иногда приобретают  тот  же цвет, что и зоны локализации

препарата и по величинам R , и разности интенсивности окрашивания

                      f

и размерам пятен идентифицировать и определять количество гербицида.

Реактивы и растворы. Аммиак ч.д.а. Ацетон х.ч. Вода дистиллированная. н-Гексан ч. Сульфат натрия ч., безводный. Нитрат серебра х.ч. Этиловый эфир уксусной кислоты х.ч. Этиловый спирт. Хлороформ х.ч. Проявляющий реагент: аммиакат серебра (к 0,5 г нитрата серебра прибавляют 5 мл воды, 10 мл 25-процентного водного аммиака и доводят до 100 мл этиловым спиртом). Используют свежеприготовленным. Стандартный раствор старане (200 мкг/мл) в этаноле можно хранить в холодильнике до 3 мес.

    Приборы  и  посуда.  Аппарат  для   встряхивания   проб.  Весы
равноплечие     ручные;    аналитические.   Воронки:   химические;
делительные.   Ротационный  вакуумный   испаритель.   Камера   для
хроматографирования.  Камера  для  опрыскивания  пластинок. Колбы:

плоскодонные на 100, 250 мл; мерные на 25, 100 мл. Мензурки на 25,

50 мл. Мельница. Микропипетки на 0,1;  0,2 мл. Палочки стеклянные.
Пульверизаторы стеклянные.  Сито  с  отверстиями  0,1  -  1,0  мм.
УФ-установка с ртутно-кварцевой  лампой  марки  ПРК-2,  ПРК-4  или
ПРК-7. Пластинки "Силуфол" УФ   . Фильтры бумажные.

                         254

Ход анализа. Экстракция препарата из анализируемой пробы. К 100 мл анализируемой воды прибавляют хлороформ или этилацетат и ставят на аппарат для встряхивания на 1 ч. Препарат трижды экстрагируют растворителем порциями по 25 мл и через делительную воронку экстракты отделяют. Последние объединяют, высушивают над безводным сульфатом натрия, упаривают на ротационном испарителе до 0,1 — 0,3 мл и наносят на хроматографическую пластинку.

Навеску воздушно-сухой почвы (100 г), предварительно просеянной через сито, кладут в термостат при температуре 60 — 75 °C на 1 ч. Затем почву помещают в колбу, заливают хлороформом до покрытия пробы и ставят на аппарат для встряхивания на 1 ч. Экстракт фильтруют через безводный сульфат натрия (экстракцию хлороформом по 20 — 25 мл проводят 2 — 4 раза), выпаривают на ротационном испарителе до 0,1 — 0,3 мл и наносят этим же растворителем на хроматографическую пластинку.

К 5 — 10 г грубого помола зерна ячменя, пшеницы прибавляют 70-процентный оводненный ацетон и оставляют на ночь. Отфильтрованный через воронку с ватой экстракт переносят в делительную воронку, куда для извлечения препарата очень осторожно (во избежание образования эмульсии) приливают хлороформ. Проводят экстракцию хлороформом трижды порциями по 15 — 20 мл. Хлороформные экстракты объединяют, проводят через безводный сульфат натрия, выпаривают до 0,1 — 0,3 мл и наносят на пластинку.

    Хроматографирование.   Пробу    количественно   переносят   на
пластинку   "Силуфол".   Рядом  наносят   стандартные  растворы  с
различным содержанием  старане  (5  -  10  -  20 мкг). После этого
пластинку    помещают    в   камеру    для    хроматографирования,
предварительно наполненную  свежеприготовленным  растворителем.  В
качестве подвижной  фазы рекомендуются две альтернативные системы:
гексан  -  ацетон  (67:33), R  0,50, или петролейный эфир - ацетон

                         f

(67:33), R 0,45. После поднятия фронта до 12 — 13 см пластинку из f камеры снимают, высушивают на воздухе до полного удаления растворителей. Проявление зон локализации старане на хроматограмме проводят указанным проявляющим реагентом. Старане проявляется в виде коричневого пятна на светло-бежевом фоне пластинки.

В случае проб зерна мы использовали многоступенчатую (3 раза) хроматографию. Пластинку опускали в ту же подвижную фазу после просушивания с целью удлинения фронта разгонки.

Обработка результатов анализа. Количественное определение анализируемых соединений проводится сравнением размеров и интенсивности окраски пятен стандартных растворов и анализируемого гербицида. Содержание старане в исследуемой пробе (X, мг/кг или мг/л) вычисляют по формуле:

                              A

X = -, P

где:

A — количество препарата, найденное на хроматограмме при сравнивании со стандартом, мкг;

P — навеска или объем пробы, г или мл.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать правила по технике безопасности, обычно рекомендуемые при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.