Методические указания по определению базаграна в эфирных маслах методом газожидкостной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 08.06.1987 № 4348-87)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ БАЗАГРАНА В ЭФИРНЫХ МАСЛАХ

---

<*> Разработаны Ю.С. Барановым (ВНИИЭМК).

    Краткая   характеристика  препарата.  Химическое   название 3-
изопропил-бензо-2,1,3-тиадиазинон-4-диоксид-2,2.    Брутто-формула
C  H  N O S.  Молекулярная  масса  240,3.  Общепринятое название -

10 12 2 3

бентазон.  В  чистом виде кристаллы белого цвета, т. пл. 137 - 139
°C.  Растворимость  в воде 500 мг/л при 20°C; давление насыщенного

             -6

пара  1,33  x  10    Па.  Растворим  в  этаноле, бензоле, ацетоне.
Выпускается  в  виде концентрата эмульсии с  содержанием д.в. 25%.
Рекомендован  для  борьбы  с сорняками на рисе, сое, мяте и других

культурах.

Принцип метода. Метод основан на извлечении базаграна из н-гексанового раствора слабой щелочью с последующим перераспределением препарата в диэтиловый эфир, метилировании, очистке на колонке с оксидом алюминия и определении методом ГЖХ с ДПР.

Метрологическая характеристика метода. Минимально детектируемое количество базаграна 2 нг. Нижний предел определения в мятном масле 0,4 мг/кг. Среднее значение определения 76,3%. Стандартное отклонение 3,4%. Доверительный интервал +/- 6,6%; n = 7, p = 0,95.

Избирательность метода. Метод селективен в присутствии хлорорганических и фосфорорганических пестицидов. Определению не мешают симм-триазины, амиды, динитроаналины и другие гербициды, рекомендованные на мяте.

Реактивы и растворы. н-Гексан ч. Бензол ч.д.а. Диэтиловый эфир ч. Оксид алюминия для хроматографии ч., размер частиц 100 — 200 мк, 2-й степени активности по Брокману. Натрия гидроксид х.ч. Диметилсульфат. Хлороводородная кислота ч. Метанол. Хлорид натрия ч.д.а. Сульфат натрия безводный ч. Хроматон N-супер (0,16 — 0,20 мм) с 5% SE-30. Хроматон N-супер (0,16 — 0,20 мм) с 5% XE-60. Стандартный раствор базаграна (метиловый эфир) с содержанием 10 мкг/мл. Для приготовления стандартного раствора отбирают на аналитических весах навеску базаграна 10 мг +/- 0,2 мг, помещают в мерную колбу на 100 мл, растворяют в 10 — 15 мл ацетона и доводят до метки тем же растворителем. Концентрация полученного раствора 100 мкг/мл. Отбирают пипеткой 10 мл раствора данной концентрации, переносят в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки ацетоном. Концентрация полученного раствора 10 мкг/мл. Для метилирования отбирают 1 мл раствора концентрацией 10 мкг/мл, упаривают досуха, добавляют 1 мл диэтилового эфира и 0,5 мл додекана, метилируют диазометаном или диметилсульфатом, как указано ниже. Растворы базаграна в ацетоне стабильны в течение 6 мес. Метилированный препарат стабилен в диэтиловом эфире 3 сут.

Приборы и посуда. Хроматограф газовый с ДЭЗ «Цвет-106», «Цвет-164», «Газохром-1106» и др. Аппарат для встряхивания. Ротационный вакуумный испаритель. Делительные воронки. Лабораторные воронки. Колбы: плоскодонные конические; грушевидные остродонные; мерные на 100 мл. Пипетки на 1, 10 мл. Пробирки на 10 мл. Микрошприцы на 10 мкл. Колонки для хроматографии размером 100 x 15 мм.

Подготовка к определению. Органические растворители перед началом очистить по соответствующим методикам и перегнать. Сульфат натрия прокалить при 300 — 400 °C. Хроматографическую колонку кондиционировать в режимных условиях в течение 2 ч.

Приготовление раствора диазометана. В делительную воронку помещают 3 мл хлороформа и медленно (1 капля за 5 с) приливают в реакционную колбу к смеси 3 г едкого кали, 1 мл гидразин гидрата и 1 мл метанола. Диазометан выделяется в виде желтого газа и через боковой отросток колбы поступает в поглотительный сосуд, содержащий 100 мл диэтилового эфира.

Хранить раствор диазометана в холодильнике не более 3 дней. В случае отсутствия гидразин гидрата можно получать диазометан из нитрозометилмочевины (см. Методические указания).

Отбор проб. Для анализа отбирают среднюю пробу эфирного масла 10 г.

Ход анализа. Навеску 10 г эфирного масла растворяют в 50 мл н-гексана и переносят на делительную воронку. Прибавляют 50 мл 0,5 н едкого натра, встряхивают, отделяют нижний слой. Операцию повторяют. Объединенные щелочные экстракты промывают 50 мл н-гексана, подкисляют соляной кислотой до pH 1, добавляют 10 г хлорида натрия и трижды экстрагируют базагран диэтиловым эфиром порциями по 50 мл, пропуская верхний слой через 100 г безводного сульфата натрия. К эфирному экстракту прибавляют 15 мл раствора диазометана в диэтиловом эфире, выдерживают 2 ч и концентрируют до 5 мл на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40 °C. Остаток переносят на предварительно промытую бензолом хроматографическую колонку с 6 г оксида алюминия, высота слоя безводного сульфата натрия 2 см. При метилировании базаграна диметилсульфатом диэтиловый эфир удаляют на ротационном испарителе досуха. К сухому остатку прибавляют 3 мл 5-процентного диметилсульфата в абсолютном метаноле, прибавляют 1 г безводного сульфата натрия и нагревают 10 мин. на водяной бане при 55 °C с обратным холодильником. Реакционную колбу охлаждают, прибавляют 3 мл насыщенного раствора хлористого натрия, 3 мл бензола и энергично встряхивают. После расслоения фаз бензольный слой отделяют и переносят на хроматографическую колонку. Препарат элюируют 100 мл смеси бензол — диэтиловый эфир (9:1), используя избыточное давление. Элюат концентрируют на ротационном испарителе до 1 мл и аликвоту 2 — 5 мкл вводят в испаритель хроматографа (табл. 145).

Таблица 145

УСЛОВИЯ ХРОМАТОГРАФИРОВАНИЯ НА РАЗЛИЧНЫХ ФАЗАХ

Параметры	5% SE-30	5% XE-60
Размер колонки, мм	1000 x 3	1000 x 3
Материал колонки	Стекло	Стекло
Форма колонки	Спираль	Спираль
Расход газа-носителя, мл/мин.	60	60
Температура, °C:
испарителя	220	220
термостата колонок	160	160
термостата детекторов	230	230
Хроматографируемый объем, мкл	2	2
Время удерживания базаграна	4 мин. 15 с	8 мин.
Линейный динамический диапазон, нг	2 — 100 -12	2 — 100 -12
Рабочая шкала электрометра, A	20 x 10	20 x 10

Обработка результатов анализа. Количественно препарат в анализируемой пробе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

                            HV
                              1

X = ----, V KA 2

где:

V — объем анализируемой пробы, мл; 1

V — объем инъектируемой пробы, мкл; 2

H — высота пика препарата в анализируемой пробе, мм;

A — навеска, г;

K — калибровочный коэффициент, мм/нг, который определяют по формуле:

                       H     H           H
                    1   1     2           n

K = — (--- + --- + ... + ---),

                    n  CV    CV          CV
                         1     2           n

где:

    H , H ...H  -  высоты  пиков  стандартного раствора базаграна,
     1   2    n

мм;

    V , V ...V  - объемы стандартного раствора базаграна, вводимые
     1   2    n

в хроматограф;

C — концентрация стандартного раствора базаграна, мкг/мл.

Содержание базаграна в пробах эфирного масла вычисляют как среднее из трех параллельных определений.

Требования безопасности. При выполнении операций по определению базаграна следует руководствоваться требованиями безопасности при работе с соединениями третьего класса токсичности и легколетучести растворителями. Диазометан взрывоопасен и ядовит (т. кип. 24 °C). Запрещается подвергать растворы диазометана прямому воздействию солнечного света. Хранить растворы диазометана в сосудах, закрытых корковой пробкой, в холодильнике.

---