---
title: "\"Методические указания по определению остаточных количеств ромуцида в воде, почве и растительном материале (огурцах, пшенице и сахарной свекле) методом тонкослойной хроматографии\""
number: "3163-84"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-3163-84"
---

## "Методические указания по определению остаточных количеств ромуцида в воде, почве и растительном материале (огурцах, пшенице и сахарной свекле) методом тонкослойной хроматографии"

# "Методические указания по определению остаточных количеств ромуцида в воде, почве и растительном материале (огурцах, пшенице и сахарной свекле) методом тонкослойной хроматографии"

(утв. Минздравом СССР 27.11.1984 N 3163-84)


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Заместитель Главного<br>
государственного<br>
санитарного врача СССР<br>
**А.И.ЗАИЧЕНКО**

</div>

<div align="center">

27 ноября 1984 г. N 3163-84

</div>


<a id="p100002"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ РОМУЦИДА**
**В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ (ОГУРЦАХ, ПШЕНИЦЕ**
**И САХАРНОЙ СВЕКЛЕ) МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**


## 1. <a id="p100003"></a>Краткая характеристика препарата


<a id="p100004"></a>Синонимы и торговые названия: ромуцид, 20-ный эмульгирующийся концентрат.
<a id="p100005"></a>Химически чистый препарат ромуцид представляет собой кристаллическое вещество желтого цвета, имеющее температуру плавления 73 - 74 °C (технический продукт, содержащий не ниже 93% ромуцида, имеет температуру плавления не ниже 63 °C).
<a id="p100006"></a>Ромуцид плохо растворяется в воде, хорошо в этаноле, ацетоне, диоксане, бензоле, ксилоле, толуоле и хлороформе. Устойчив при 20 °C и влажности 80% длительное время в герметично закрытой посуде.
<a id="p100007"></a>Под действием щелочей и сильных кислот гидролизуется.
<a id="p100008"></a>    Ромуцид  малотоксичен  - ЛД   - 4400 (4000 - 4800) мг/кг на белых мышах
                               50
перорально.
<a id="p100009"></a>Препарат предложен как высокоэффективный фунгицид для наземного опрыскивания посевов огурцов, сахарной свеклы и пшеницы против мучнистой росы. Проявляет заметную активность против ржавчины пшеницы. Привыкания микроорганизмов к препарату не зарегистрировано.


## 2. <a id="p100010"></a>Методика определения ромуцида в воде, почве и растительном материале



### <a id="p100011"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100012"></a>2.1.2 Принцип метода

<a id="p100013"></a>Метод основан на экстракции ромуцида из проб органическими растворителями, очистке экстрактов от мешающих веществ оксидом алюминия и определении содержания ромуцида с помощью тонкослойной хроматографии.

##### <a id="p100014"></a>2.1.2 Метрологическая характеристика метода приводится в таблице 1.


<a id="p100015"></a>Таблица 1


<table>
<colgroup><col width="39%"><col width="12%"><col width="12%"><col width="12%"><col width="12%"><col width="12%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Метрологические параметры</td><td colspan="5">Анализируемый объект</td></tr>
<tr><td>вода</td><td>почва</td><td>огурцы</td><td>пшеница</td><td>свекла</td></tr>
<tr><td>Предел обнаружения в пробе, мкг</td><td>3</td><td>5</td><td>5</td><td>3</td><td>3</td></tr>
<tr><td>Диапазон определяемых</td><td>0,012 -</td><td>0,20 -</td><td>0,125 -</td><td>0,15 -</td><td>0,1 -</td></tr>
<tr><td>концентраций, мг/кг</td><td>800</td><td>800</td><td>1000</td><td>1500</td><td>1000</td></tr>
<tr><td>Среднее значение определения стандартных кол-в, %</td><td>99,4</td><td>78,0</td><td>82,8</td><td>84,7</td><td>89,0</td></tr>
<tr><td>Стандартное отклонение</td><td>12,40</td><td>4,8</td><td>11,3</td><td>6,20</td><td>5,04</td></tr>
<tr><td>Относительное стандартное отклонение, %</td><td>12,50</td><td>11,3</td><td>11,8</td><td>7,32</td><td>5,66</td></tr>
<tr><td>Доверительный интервал среднего, %</td><td>+/- 5,06</td><td>+/- 2,14</td><td>+/- 5,04</td><td>+/- 2,53</td><td>+/- 1,78</td></tr>
<tr><td>Количество повторностей, шт.</td><td>6</td><td>5</td><td>5</td><td>6</td><td>8</td></tr>
</table>



##### <a id="p100024"></a>2.1.2 Избирательность метода

<a id="p100025"></a>Определению не мешают препараты коллоидной серы, применяемые, как и ромуцид, против мучнистой росы.


### <a id="p100026"></a>2.2. Реактивы, растворы и материалы


<a id="p100027"></a>Ромуцид чда, ТУ 88 УССР 192.030.83 (п. 4.2.3 "Примечание").
<a id="p100028"></a>Ромуцид технический, ТУ 88 УССР 192.030.83.
<a id="p100029"></a>Ацетон ч, ГОСТ 2603-79.
<a id="p100030"></a>н-Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78.
<a id="p100031"></a>Хлороформ хч, ТУ 6-09-4263-76.
<a id="p100032"></a>Дистиллированная вода.
<a id="p100033"></a>Гидроксид натрия чда, ГОСТ 4328-77.
<a id="p100034"></a>Петролейный эфир хч, ГОСТ 11992-66.
<a id="p100035"></a>Бензол чда, [ГОСТ 5955-75](https://bukva.ai/docs/gost-5955-75).
<a id="p100036"></a>Оксид алюминия (для хроматографии), ТУ 6-09-3916-75.
<a id="p100037"></a>Сульфат натрия безводный чда, [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).
<a id="p100038"></a>Пропанол-2 (изо-пропиловый спирт) ч, ТУ 6-09-402-81.
<a id="p100039"></a>Хроматографические пластинки типа "Силуфол" UV-254 (ЧССР).
<a id="p100040"></a>Фильтры бумажные, ТУ 6-09-1706-77.
<a id="p100041"></a>Этанол, [ГОСТ 5962-67](https://bukva.ai/docs/gost-5962-67).
<a id="p100042"></a>Проявляющий реагент: 6-процентный раствор гидроксида натрия в этаноле. 6 г гидроксида натрия растворяют в 5 мл дистиллированной воды и доводят 96% этанолом до 100 мл. Раствор хранят в холодильнике.
<a id="p100043"></a>Стандартные растворы ромуцида: навески ромуцида 10 и 100 мг растворяют в 100 мл ацетона. Растворы стабильны в течение 2-х недель при хранении в холодильнике в герметично закрытой посуде.


### <a id="p100044"></a>2.3. Приборы, аппаратура и посуда


<a id="p100045"></a>Весы технические, ГОСТ 19491-74.
<a id="p100046"></a>Весы аналитические ВЛР-200 г, ТУ 25.06.1131-75.
<a id="p100047"></a>Делительные воронки на 1000 мл, ГОСТ 8613-75.
<a id="p100048"></a>Мерные колбы на 100 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100049"></a>Конические колбы на 100 и 250 мл с пришлифованными пробками.
<a id="p100050"></a>Микрошприцы на 10 мкл типа МШ-10.
<a id="p100051"></a>Микропипетки, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74).
<a id="p100052"></a>Мерные цилиндры на 25 мл, 50 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100053"></a>Кофемолка механическая.
<a id="p100054"></a>Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 19391-65.
<a id="p100055"></a>Сита почвенные, ТУ 46-47885-73.
<a id="p100056"></a>Камера хроматографическая.
<a id="p100057"></a>Эксикатор.
<a id="p100058"></a>Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
<a id="p100059"></a>Водяная баня, ТУ 46-22-603-75.
<a id="p100060"></a>Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ 10696-75.
<a id="p100061"></a>Компрессор мембранный.
<a id="p100062"></a>Воронки Бюхнера, ГОСТ 9147-73.


### <a id="p100063"></a>2.4. Подготовка к определению


<a id="p100064"></a>Хроматографические камеры за два часа до начала хроматографирования заполняют смесью подвижных растворителей для насыщения камеры парами подвижных растворителей. В качестве подвижных растворителей для проб воды, почвы, огурцов и свеклы используют смесь н-гексана и ацетона (4:1); для проб пшеницы - сначала петролейный эфир, а затем смесь н-гексана и ацетона (4:1). Объем подвижного растворителя в камере должен по высоте находиться не выше чем 0,7 - 1 см от уровня дна камеры.


### <a id="p100065"></a>2.5. Отбор проб


<a id="p100066"></a>Отбор проб проводится в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (Москва, 1980 г., N 2051-79 от 21.08.79). Отобранные пробы хранить в стеклянной или полиэтиленовой таре в прохладном месте.


### <a id="p100067"></a>2.6. Проведение определения



##### <a id="p100068"></a>2.6.1 Экстракция и очистка


###### <a id="p100069"></a>2.6.1.1 Вода

<a id="p100070"></a>Пробу воды - 250 мл - помещают в делительную воронку на 1000 мл и экстрагируют ромуцид 50 мл хлороформа, энергично встряхивая в течение 3 - 5 минут. Эту операцию повторяют дважды. Объединенный экстракт фильтруют через бумажный фильтр, в воронку которого помещают 4 - 6 г сульфата натрия безводного и 2 - 3 г оксида алюминия. Растворитель упаривают на ротационном испарителе до сухого остатка.

###### <a id="p100071"></a>2.6.1.2 Почва

<a id="p100072"></a>25 г воздушно-сухой почвы, растертой и просеянной через сито с размером отверстий 1 мм, помещают в коническую колбу с пришлифованной пробкой на 250 мл, прибавляют 50 мл изо-пропанола и помещают на аппарат для встряхивания на 1 час. После отстаивания экстракт сливают в колбу через складчатый бумажный фильтр. Остаток в колбе промывают дважды порциями изо-пропанола по 25 мл, сливая растворитель после отстаивания через складчатый фильтр.
<a id="p100073"></a>Для очистки фильтрат пропускают через оксид алюминия (8 - 10 г) и натрий сернокислый безводный (2 - 3 г), которые помещают в фильтрующую воронку со стеклянным фильтром. Содержимое воронки промывают растворителем два раза по 30 мл. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе до сухого остатка.

###### <a id="p100074"></a>2.6.1.3 Огурцы

<a id="p100075"></a>40 г мелко нарезанных огурцов помещают в коническую колбу на 250 мл с пришлифованной пробкой и приливают 100 мл хлороформа или бензола. Экстрагирование ромуцида проводят в течение 20 - 30 минут, периодически перемешивая гомогенат. По истечении времени экстракт очищают, пропуская его через слой молселекта-15 или 25 (12 - 15) и сульфата натрия безводного (20 г), помещенных в воронку со стеклянным фильтром. Операцию повторяют трижды. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе до сухого остатка.

###### <a id="p100076"></a>2.6.1.4 Свекла

<a id="p100077"></a>Пробу - 30 г измельченных корнеплодов сахарной свеклы - помещают в коническую колбу на 250 мл с пришлифованной пробкой и добавляют 100 мл хлороформа. Экстрагирование проводят в течение 30 минут, периодически перемешивая. Экстракт фильтруют через складчатый фильтр, в воронке которого находятся 3 - 5 г сульфата натрия безводного и 2 - 3 г оксида алюминия. Остаток свеклы промывают двумя порциями растворителя по 30 мл. Объединенный экстракт упаривают до сухого остатка на ротационном испарителе.

###### <a id="p100078"></a>2.6.1.5 Пшеница

<a id="p100079"></a>Пробу измельченного на кофемолке зерна пшеницы в количестве 20 г помещают в коническую колбу на 100 мл с пришлифованной пробкой, прибавляют 50 мл ацетона и экстрагируют 30 минут, постоянно перемешивая гомогенат. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр, содержащий 1 - 2 г сульфата натрия безводного и 6 - 8 г оксида алюминия. Остаток промывают двумя порциями ацетона по 40 мл. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе. После удаления растворителя в колбе находится остаток вязкой консистенции.

##### <a id="p100080"></a>2.6.2 Хроматографирование и проявление ромуцида

<a id="p100081"></a>После удаления растворителя остаток растворяют в 0,5 мл ацетона и упаривают до 0,1 - 0,15 мл током воздуха, количественно наносят на хроматографическую пластинку при помощи микрошприца или микропипетки. Рядом наносят 3, 5, 7 и 10 мкг ромуцида в ацетоне. После испарения растворителя пластинки помещают в хроматографические камеры с подвижным растворителем. После подъема растворителей на 10 см пластинку вынимают из хроматографической камеры и помещают в вытяжной шкаф на 5 - 10 минут для удаления следов подвижной фазы.
<a id="p100082"></a>    Проявление ромуцида проводят 6-процентным раствором гидроксида натрия в
этаноле, опрыскивая пластинки с помощью стеклянного пульверизатора. Ромуцид
проявляется  в  виде  ярко-желтых пятен на белом фоне. Ввиду того что пятна
после  испарения  этанола  несколько бледнеют, их контуры обводят иглой. R
                                                                          f
для  проб  воды, почвы, огурцов и свеклы составляет 0,35 +/- 0,02, для проб
пшеницы - 0,26 +/- 0,02.
<a id="p100083"></a>Оценку содержания ромуцида в пробе проводят путем сравнения размера и интенсивности окраски пятен стандарта с пятнами пробы. При большом содержании препарата в пробе экстракты хроматографируют без упаривания.


### <a id="p100084"></a>2.7. Обработка результатов анализа


<a id="p100085"></a>Содержание ромуцида в анализируемой пробе рассчитывают по формуле:

                                         5
                                   B x 10
<a id="p100086"></a>                               A = -------,
                                    a x C

<a id="p100087"></a>где:
<a id="p100088"></a>A - содержание ромуцида в пробе, мг/л или мг/кг;
<a id="p100089"></a>B - количество ромуцида в пробе, найденное сравнением со стандартом, мг;
<a id="p100090"></a>C - процент определения, найденный предварительно, %;

<div align="center">

<a id="p100091"></a>a - объем или вес пробы, мл или г.

</div>



## 3. <a id="p100092"></a>Требования безопасности


<a id="p100093"></a>При работе с ромуцидом беречь глаза от попадания порошка, руки мыть с мылом, а также соблюдать требования безопасности, необходимые при работе с горючими, взрывоопасными, легковоспламеняющимися веществами, едкими щелочами.



<a id="p100094"></a>

---