--- title: "\"Временные методические указания по определению текто в овощах и фруктах (яблоки, лимоны, апельсины, томаты, морковь, лук, капуста) тонкослойной хроматографией\"" number: "3059" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-3059" --- ## "Временные методические указания по определению текто в овощах и фруктах (яблоки, лимоны, апельсины, томаты, морковь, лук, капуста) тонкослойной хроматографией" # "Временные методические указания по определению текто в овощах и фруктах (яблоки, лимоны, апельсины, томаты, морковь, лук, капуста) тонкослойной хроматографией" (утв. Минздравом СССР 31.07.1984 N 3059)
Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
**А.И.ЗАИЧЕНКО**
31 июля 1984 г. N 3059
**ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ** **ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТЕКТО В ОВОЩАХ И ФРУКТАХ (ЯБЛОКИ,** **ЛИМОНЫ, АПЕЛЬСИНЫ, ТОМАТЫ, МОРКОВЬ, ЛУК, КАПУСТА)** **ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ** ## 1. Краткая характеристика препарата Текто - системный фунгицид широкого спектра действия. Действующее начало препарата - 2-(4-тиазолил)бензимидазол - тиабендазол. ```text // \────┬┐N C H N S. │ ││ ││ 10 7 3 \\ /\ N /├────┐ │ │────│ Мол. масса 201,3. ``` H N S \\ / В чистом виде - кристаллы белого цвета с Т пл. 296 - 304 °C, хорошо растворим в ацетоне (2,8 мг/мл), этилацетате (1,7 мг/мл). Растворимость в воде при 25 °C меняется в зависимости от pH. При pH 5 - 12 составляет 0,05 мг/л, ниже pH 5 она возрастает и при pH 2 составляет 1 мг/мл. ЛД текто для теплокровных животных 3330 - 3850 мг/кг. Препарат 50 малотоксичен. МДУ в картофеле - 10 мг/кг, для других овощей и фруктов не установлены. ## 2. Методика определения текто в овощах и фруктах ### 2.1. Основные положения ##### 2.1.1 Принцип метода Метод основан на извлечении тиабендазола из овощей и фруктов этилацетатом, перераспределении в соляную кислоту, а затем, после подщелачивания раствора, в этилацетат, насыщенный водой, с последующим определением тонкослойной хроматографией. ##### 2.1.2 Метрологическая характеристика метода Предел обнаружения в хроматографируемой пробе: в УФ-свете - 1 мкг; реактивом Драгендорфа - 2 мкг. Предел обнаружения в объектах на УФ-пластинках - 0,07 мг/кг, реактивом Драгендорфа - 0,14 мг/кг. Дальнейшую метрологическую характеристику по методу см. в табл. 1. Таблица 1 **МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА** | Объекты | Сред. значение определения стандартных количеств _ тиабендазола C при n = 15, % | Стандартное отклонение S при n = 15, +/- % | Доверительный интерв. среднего при p = 0,95 и n = 5, % | Размах варьирования, %, R | | --- | --- | --- | --- | --- | | Яблоки Лимоны Апельсины Томаты Морковь Лук Капуста | 78,7 78,0 82,7 86,0 95,3 93,3 96,7 | 7,4 9,0 12,2 8,1 5,2 7,2 5,9 | 78,7 +/- 9,2 78,0 +/- 11,2 82,7 +/- 15,1 86,0 +/- 10,0 95,3 +/- 5,9 93,3 +/- 8,3 96,7 +/- 5,9 | 70 - 90 70 - 100 70 - 100 75 - 100 90 - 100 80 - 100 90 - 100 | ##### 2.1.3 Избирательность метода Метод селективен. Беномил, БМК, ФОП и ХОП определению не мешают. ### 2.2. Реактивы и растворы Ацетон хч, ГОСТ 2603-79. Этилацетат хч, [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76). Гексан чда, ТУ 6-09-3375-78. Хлороформ чда, ГОСТ 20015-74. Спирт этиловый 96-процентный, [ГОСТ 5962-67](https://bukva.ai/docs/gost-5962-67). Аммиак водный чда, ГОСТ 3760-64. Соляная кислота (фиксанал), ТУ 6-09-2540-72, 0,1 н. Кали едкое чда, ГОСТ 4203-65, 4 н. Сульфат натрия безводный чда, ГОСТ 42-66-76. Уксусная кислота чда, ГОСТ 61-75. Калий иодистый хч, ГОСТ 4232-74. Висмут основной азотнокислый чда, ГОСТ 10217-62. Реактив Драгендорфа. Растворяют 850 мл основного азотнокислого висмута в 40 мл дистиллированной воды, добавляют 10 мл уксусной кислоты в раствор, содержащий 8 г КУ в 20 мл воды (основной раствор). Для проявления хроматограмм 1 мл полученного раствора разбавляют 2 мл уксусной кислоты и 10 мл дистиллированной воды (рабочий раствор). На обработку хроматограммы идет 2 - 3 мл раствора. Основной раствор стабилен при хранении в темном месте в течение длительного времени. Рабочий раствор готовят перед обработкой хроматограмм. Стандартные растворы тиабендазола в ацетоне с содержанием 100 мкг/мл (раствор А) и 10 мкг/мл (раствор Б). Растворы стабильны при хранении в холодильнике 2 года, а при комнатной температуре - 6 месяцев. ### 2.3. Приборы, аппаратура и посуда Хроматоскоп или другой источник УФ-света длиной волны 250 - 260 нм. Хроматографическая камера, ГОСТ 10565-74. Ротационный вакуумный испаритель ИР-1 или аналогичный с набором колб, ТУ 25-11-917-76. Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73. Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ 10396-75. Колбы плоскодонные, ГОСТ 9737-70, на 500 мл. Колбы конические, ГОСТ 9737-70, на 500 мл. Колбы грушевидные, ГОСТ 9737-70, на 50 мл. Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, на 100 мл. Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, на 100 мл, 10 мл. Пробирки с оттянутым концом, ГОСТ 10515-75, на 5 мл. Пипетки, [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74), на 1 мл, 2 мл, 5 мл. Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74. Пластинка "Силуфол" УФ . 254 Делительные воронки, ГОСТ 8613-75, на 500 мл, 250 мл. ### 2.4. Подготовка к определению Хроматографические камеры за один час до начала хроматографирования заполняют смесью подвижных растворителей: хлороформ:этиловый спирт:аммиак (100:10:0,2) и гексан:ацетон:аммиак (80:80:0,1) для насыщения камеры парами подвижных растворителей. Объем подвижного растворителя в камере должен по высоте находиться не выше чем на 0,7 - 1 см от уровня дна камеры. ### 2.5. Отбор проб Отбор проб проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР 21 августе 1979 г., N 2051-79. ### 2.6. Проведение определения Измельченную с помощью ножа пробу (15 г) помещают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл, заливают 50 мл этилацетата и экстрагируют фунгицид в течение 30 мин. с помощью механического встряхивания колбы. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в делительную воронку емкостью 500 мл. Экстракцию тиабендазола повторяют еще два раза тем же количеством этилацетата. Из объединенного экстракта извлекают фунгицид 0,1 н раствором соляной кислоты три раза, порциями по 30 мл. Этилацетатный слой отбрасывают. Солянокислотную фракцию собирают в другой делительной воронке емкостью 250 мл. К объединенному раствору приливают 3,5 мл 4 н KOH до pH среды 10 и экстрагируют тиабендазол 5 раз этилацетатом, насыщенным водой, порциями по 30 мл. Объединенный в конической колбе на 500 мл экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (25 - 30 г), затем порциями фильтруют через бумажный фильтр в грушевидную колбочку на 50 мл и каждый раз отгоняют растворитель с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема 1 - 2 мл. Последнюю порцию растворителя отгоняют до объема ~ 0,1 мл. Остаток экстракта с помощью стеклянного капилляра количественно наносят на пластинку "Силуфол" УФ . Справа и слева от пробы капилляром наносят 254 стандартные растворы тиабендазола, содержащие 1, 2, 3, 4, 5 мкг препарата. Стандартные растворы готовят следующим обрезом: в серию конических пробирок пипеткой помещают 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 и 0,5 мл стандартного раствора Б и концентрируют растворы, нагревая пробирки на водяной бане, до объема ~ 0,1 мл. Хроматограмму развивают в системе подвижных растворителей хлороформ: этиловый спирт:аммиак (100:10:02) или гексан:ацетон:аммиак (80:80:0,1). После развития хроматограмм и высушивания пластинок на воздухе пятна тиабендазола проявляют под лампой УФ-света типа "Хроматоскоп". Зоны локализации препарата обнаруживаются в виде фиолетовых пятен на зеленоватом фосфоресцирующем фоне с R 0,57 +/- 0,02 в первой системе подвижных f растворителей и 0,49 +/- 0,02 - во второй. Пятна можно наблюдать в течение нескольких месяцев. При необходимости для обнаружения пятен можно использовать реактив Драгендорфа. При обработке хроматограмм этим проявителем тиабендазол проявляется на пластинках в виде оранжевых пятен на
белом фоне. Пятна стабильны на хроматограммах в течение 7 - 8 мин.
### 2.7. Обработка результатов анализа Количественное определение тиабендазола проводят путем сравнения площадей и интенсивности окраски пятен рабочей пробы и серии стандартов. При большом содержании тиабендазола на пластинку наносят аликвотную часть раствора. Содержание тиабендазола в анализируемой пробе (X) в мг/кг вычисляют по формуле: A x V X = ------ мг/кг, Va x P где: A - содержание тиабендазола в хроматографируемой пробе, мкг; V - общий объем раствора, из которого отбирают аликвоту для хроматографирования, мл; Va - объем аликвоты, отобранной для хроматографирования, мл (при нанесении всей пробы V = Va);
P - навеска анализируемой пробы, г.
## 3. Требования безопасности Соблюдать требования техники безопасности, принятые для работы с легковоспламеняющимися жидкостями. ---