--- title: "\"Временные методические указания по определению остаточных количеств ронстара в почве, растениях и эфирных маслах газожидкостной хроматографией\"" number: "3012-84" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-3012-84" --- ## "Временные методические указания по определению остаточных количеств ронстара в почве, растениях и эфирных маслах газожидкостной хроматографией" # "Временные методические указания по определению остаточных количеств ронстара в почве, растениях и эфирных маслах газожидкостной хроматографией" (утв. Минздравом СССР 27.04.1984 N 3012-84)
Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
**А.И.ЗАИЧЕНКО**
27 апреля 1984 г. N 3012-84
**ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ** **ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ РОНСТАРА В ПОЧВЕ,** **РАСТЕНИЯХ И ЭФИРНЫХ МАСЛАХ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ** ## 1. Краткая характеристика препарата 1.1. Ронстар - гербицид для борьбы с сорняками в посадках риса, лаванды, шалфея, герани, мяты. Действующее начало препарата - 2-трет-бутил-4/5-изопропокси-2,4-дихлорфенил/1,3,4-оксадиазолин-5. O O / \ C(CH ) C H Cl N O . (CH ) -CHO \\/ \/ 3 2 15 18 2 2 3 | 3 2 \_____ | | --- | Cl-\_____/ Cl #### 1.2 Название ИСО - оксадиазон. 1.3. В чистом виде - белое кристаллическое вещество, температура плавления 90 °C. Растворимость в воде 0,7 мг/л, хорошо растворим в этаноле, -6 ацетоне, хлороформе, бензоле. Давление насыщенного пара 10 мм рт. ст. Выпускается в виде смачивающегося порошка и гранул. ЛД для крыс 8000 50 мг/кг. ## 2. Методика определения ронстара в почве, растениях и эфирных маслах газожидкостной хроматографией ### 2.1. Основные положения ##### 2.1.1 Принцип метода Метод основан на извлечении ронстара из почвы и растений ацетоном, очистке экстрактов перераспределением в системе двух несмешивающихся жидкостей, дополнительной очистке растительных экстрактов на колонке с окисью алюминия и газохроматографическом определении с помощью детекторов: с постоянной скоростью рекомбинации и термоионного. Из эфирных масел ронстар извлекают диметилсульфоксидом, промывают н-гексаном и определяют методом газожидкостной хроматографии с термоионным детектором. ##### 2.1.2 Метрологическая характеристика метода Минимально детектируемое количество ронстара: - с детектором постоянной скорости рекомбинации - 0,1 н; - с термоионным детектором - 0,5 нг. Нижний предел определения, мг/кг: - почва: с ДПР - 0,002, с ТИД - 0,01; - эфиромасличные растения: с ДПР - 0,004, с ТИД - 0,02; - эфирные масла - 0,1. _ Среднее значение процента определения C при n = 5, %: - почва - 88,3; - эфиромасличные растения - 70,7; - эфирные масла - 73,9. Стандартное отклонение S , %: x - почва - 18,6; - эфиромасличные растения - 13,1; - эфирные масла - 19,4. Относительное стандартное отклонение S_, %: x - почва - 8,3; - эфиромасличные растения - 5,9; - эфирные масла - 8,7. Доверительный интервал среднего при P = 0,95 и n = 5, %: - почва - 23,1; - эфиромасличные растения - 16,3; - эфирные масла - 24,2. Размах варьирования R: - почва - 77,4 - 96,8; - эфиромасличные растения - 62,4 - 82,7; - эфирные масла - 62,1 - 84,4. ##### 2.1.3 Избирательность метода Метод не селективен в присутствии гербицидов нитрохлора и дактала при использовании для хроматографического определения ронстара детектора постоянной скорости рекомбинации, поэтому в качестве дополнительного способа идентификации необходимо использовать газожидкостную хроматографию с термоионным детектором. ### 2.2. Реактивы и растворы Диметилсульфоксид, МРТУ 6-09-5097-68, хч. Ацетон, ГОСТ 2603-79, осч. н-Гексан, ТУ 6-09-3375-78, ч, свежеперегнанный. Ацетонитрил, МРТУ 6-09-3534-74, ч. Окись алюминия для хроматографирования, МРТУ 6-09-5296-68, ч, II ст. активности. Сульфат натрия безводный, [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76), хч. Диэтиловый эфир (для наркоза), фармакопея СССР. Хроматон N-AW-DMCS (0,20 - 0,25 мм) с 5% XE-60, ЧССР. Хроматон N-AW-DMCS (0,20 - 0,25 мм) с 5% SE-30, ЧССР. Стандартные растворы ронстара в ацетоне с содержанием 100, 10 мкг/мл. Для приготовления стандартного раствора берут на аналитических весах навеску ронстара 10 мг +/- 0,0002 г, помещают ее в мерную колбу емкостью 100 мл. Навеску растворяют в 10 - 15 мл ацетона и доводят до метки тем же растворителем. Раствор содержит 100 мкг/мл ронстара. Из раствора пипеткой переносят в мерную колбу на 100 мл 10 мл раствора и доводят до метки ацетоном. Раствор содержит 10 мкг/мл ронстара, растворы стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 месяцев. ### 2.3. Приборы и посуда Хроматограф "Цвет-106" с детектором термоионным, ТУ 1.550.003. Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73. Ротационный вакуумный испаритель, RV 0-64, ЧССР. Делительные воронки на 250 мл, 500 мл, ГОСТ 10054-75. Колбы плоскодонные, конические на 250 мл, ГОСТ 10394-72. Колбы круглодонные на 100 мл, ГОСТ 10394-72. Мерные цилиндры на 100 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74). Микрошприцы на 1 мкл (МШ-1) и 10 мкл (МШ-10). Пипетки на 1 и 10 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74). Мерные колбы на 100 мл, [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74). Колонки для хроматографирования 100 x 15 мм. ### 2.4. Подготовка к определению Органические растворители (ацетон, н-гексан) перед началом работы необходимо перегнать, сульфат натрия прокалить при температуре 300 - 400 °C. Хроматографическую колонку и детектор кондиционируют в режимных условиях в течение 2-х часов. Отбор проб для анализа проводят в соответствии с "Унифицированными [правилами](https://bukva.ai/docs/2051-79) отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР N 2051-79 от 21.08.79. Для анализа отбирают среднюю пробу почвы - 100 г, растений эфиромасличных культур - 50 г, эфирного масла - 10 г. ### 2.5. Проведение определения ##### 2.5.1 Почва 100 г измельченной и просеянной через сито почвы помещают в плоскодонную колбу на 250 мл, заливают 150 мл ацетона и встряхивают 1 час с помощью механического встряхивателя, оставляют на ночь. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр в плоскодонную колбу на 250 мл. Остаток на фильтре промывают ацетоном 2 x 30 мл. Фильтрат упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани 50 °C до 10 мл. Остаток количественно с 30 мл н-гексана переносят в делительную воронку емкостью 500 мл, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и реэкстрагируют ронстар н-гексаном, 3 x 30. Объединенный гексановый экстракт сушат, пропуская через 35 г безводного сульфата натрия, и концентрируют на ротационном испарителе досуха. К сухому остатку по стенкам колбы прибавляют 1 мл ацетона, закрывают и вращают колбу. В испаритель хроматографа вводят 2 мкл раствора. Хроматографируют с ТИД и ДПР. ##### 2.5.2 Эфиромасличные растения 50 г свежесрезанных растений гомогенизируют со 150 мл ацетона в течение 15 - 20 мин. со скоростью 8000 об./мин., встряхивают 30 - 40 мин. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр в колбу емкостью 250 мл. Стакан гомогенизатора промывают 3 x 20 мл ацетоном и через фильтр присоединяют смыв к основному фильтрату. Упаривают ацетон на ротационном испарителе до 10 мл при температуре бани 50 °C. Остаток количественно с 50 мл ацетонитрила переносят в делительную воронку емкостью 250 мл с 50 мл н-гексана. Встряхивают 1 - 2 мин. и отделяют верхний слой. Операцию проводят еще дважды. Нижний слой переносят на делительную воронку емкостью 500 мл 10% Na SO и реэкстрагируют ронстар 3 x 50 мл н-гексана. Собирают 2 4 верхний слой, объединяют, высушивают, пропуская через безводный сульфат натрия, и упаривают до 5 мл на ротационном испарителе. Остаток переносят на колонку с 6 г окиси алюминия, промытую 12 мл смеси н-гексан - ацетон (9:1). После того как раствор полностью впитается в слой адсорбента, отгонную колбу смывают 5 мл смеси гексан - ацетон (9:1) и переносят на колонку, операцию проводят 3 раза. Ронстар элюируют 100 мл смеси н-гексан - ацетон (9:1). Элюат упаривают на ротационном испарителе досуха. Остаток растворяют в 1 мл ацетона и 2 мкл вводят в испаритель хроматографа, хроматографируют с ТИД в ДПР. ##### 2.5.3 Эфирные масла Навеску 10 г эфирного масла мяты, лаванды, шалфея, герани помещают в делительную воронку емкостью 250 мл с 50 мл диметилсульфоксида, выдерживают 20 мин. для растворения. Прибавляют 50 мл н-гексана, встряхивает 2 мин. и отделяют верхний слой. Операцию повторяют дважды. Оставшийся раствор переносят в делительную воронку емкостью 500 мл с 200 мл 10% Na SO , 2 4 предварительно насыщенного 15 мл серного эфира, и реэкстрагируют ронстар серным эфиром 3 x 30 мл. Объединенные экстракты собирают, сушат, пропуская через безводный сульфат натрия, и концентрируют досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани 30 °C. К сухому остатку прибавляют 1 мл ацетона, встряхивают и 2 мкл вводят в испаритель хроматографа. Хроматографирование проводят с ТИД. **УСЛОВИЯ ХРОМАТОГРАФИРОВАНИЯ** | | 5% SE-30 | 5% XE-60 | | --- | --- | --- | | Размер колонки, мм | 100 x 3 | 100 x 3 | | Материал колонки | стекло | стекло | | Форма колонки | спираль | спираль | | Расход газа-носителя, мл/мин., при работе с | 40 | 40 | | ТИД при работе с ДПР | 60 | 60 | | Расход воздуха, мл/мин. | 400 | 400 | | Расход водорода, мл/мин. | 16 | 16 | | Температура испарителя, °C | 230 | 230 | | Температура термостата колонок, °C | 190 | 190 | | Хроматографируемый объем, мкл | 2 | 2 | | Время удерживания ронстара, мин.: | | | | при работе с ТИД | 8,2 | 11,5 | | при работе с ДПР | 17,5 | 24,2 | | Число теоретических тарелок: | | | | при работе с ТИД | 697 | 681 | | при работе с ДПР | 784 | 767 | | ВЭТТ: | | | | при работе с ТИД | 1,4 | 1,4 | | при работе с ДПР | 1,3 | 1,3 | | Линейный динамический диапазон, нг: | | | | при работе с ТИД | 0,5 - 500 | 0,5 - 500 | | при работе с ДПР | 0,1 - 10 | 0,1 - 10 | | Рабочая шкала электрометра: | | | | при работе с ТИД | -12 100 x 10 А -12 | -12 100 x 10 А -12 | | при работе с ДПР | 20 x 10 А | 20 x 10 А | ### 2.6. Обработка результатов анализа Количественный расчет препарата в анализируемой пробе проводят по следующей формуле: H x V 1 X = ------ x A, K x V 2 где: X - количество ронстара в пробе, мг/кг; H - высота пика препарата в анализируемой пробе, мл; V - объем анализируемой пробы, мл; 1 V - объем инъектируемой пробы, мкл; 2 A - навеска, г; K - калибровочный коэффициент, который определяется по следующей формуле: H H H 1 1 2 n K = - x [------ + ------ + ... + ------], n C x V C x V C x V 1 2 n где: H , H , H - высоты пиков стандартного раствора ронстара, мм; 1 2 n V , V , V - объемы стандартного раствора ронстара, вводимые в 1 2 n хроматограф, мкл; C - концентрация стандартного раствора ронстара, 10 мкг/мл. Содержание микроколичеств ронстара в пробах вычисляют как среднее из трех параллельных определений. ## 3. Требования безопасности При выполнении операций по определению ронстара следует руководствоваться требованиями безопасности при работе с соединениями 3-го класса токсичности (ронстар), а также с легколетучими растворителями. ---