Временные методические указания по определению остаточных количеств ронстара в почве, растениях и эфирных маслах газожидкостной хроматографией

(утв. Минздравом СССР 27.04.1984 № 3012-84)

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ РОНСТАРА В ПОЧВЕ, РАСТЕНИЯХ И ЭФИРНЫХ МАСЛАХ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ

1. Краткая характеристика препарата

1.1. Ронстар — гербицид для борьбы с сорняками в посадках риса, лаванды, шалфея, герани, мяты. Действующее начало препарата — 2-трет-бутил-4/5-изопропокси-2,4-дихлорфенил/1,3,4-оксадиазолин-5.

                    O

                    O  / \  C(CH )               C  H  Cl N O .
    (CH ) -CHO      \\/   \/    3 2               15 18  2 2 3

3 2 _____

     Cl-\_____/

               Cl

1.2 Название ИСО — оксадиазон.

1.3. В чистом виде — белое кристаллическое вещество, температура плавления 90 °C. Растворимость в воде 0,7 мг/л, хорошо растворим в этаноле, -6

ацетоне,  хлороформе,  бензоле.  Давление  насыщенного пара 10   мм рт. ст.
Выпускается  в  виде  смачивающегося  порошка  и гранул. ЛД   для крыс 8000

                                                       50

мг/кг.

2. Методика определения ронстара в почве, растениях и эфирных маслах газожидкостной хроматографией

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на извлечении ронстара из почвы и растений ацетоном, очистке экстрактов перераспределением в системе двух несмешивающихся жидкостей, дополнительной очистке растительных экстрактов на колонке с окисью алюминия и газохроматографическом определении с помощью детекторов: с постоянной скоростью рекомбинации и термоионного. Из эфирных масел ронстар извлекают диметилсульфоксидом, промывают н-гексаном и определяют методом газожидкостной хроматографии с термоионным детектором.

2.1.2 Метрологическая характеристика метода

Минимально детектируемое количество ронстара:

• с детектором постоянной скорости рекомбинации — 0,1 н;
• с термоионным детектором — 0,5 нг.

Нижний предел определения, мг/кг:

• почва: с ДПР — 0,002, с ТИД — 0,01;
• эфиромасличные растения: с ДПР — 0,004, с ТИД — 0,02;
• эфирные масла — 0,1. _

Среднее значение процента определения C при n = 5, %:

• почва — 88,3;
• эфиромасличные растения — 70,7;
• эфирные масла — 73,9.

Стандартное отклонение S , %: x

• почва — 18,6;
• эфиромасличные растения — 13,1;
• эфирные масла — 19,4.

Относительное стандартное отклонение S_, %: x

• почва — 8,3;
• эфиромасличные растения — 5,9;
• эфирные масла — 8,7.

Доверительный интервал среднего при P = 0,95 и n = 5, %:

• почва — 23,1;
• эфиромасличные растения — 16,3;
• эфирные масла — 24,2.

Размах варьирования R:

• почва — 77,4 — 96,8;
• эфиромасличные растения — 62,4 — 82,7;
• эфирные масла — 62,1 — 84,4.

2.1.3 Избирательность метода

Метод не селективен в присутствии гербицидов нитрохлора и дактала при использовании для хроматографического определения ронстара детектора постоянной скорости рекомбинации, поэтому в качестве дополнительного способа идентификации необходимо использовать газожидкостную хроматографию с термоионным детектором.

2.2. Реактивы и растворы

Диметилсульфоксид, МРТУ 6-09-5097-68, хч.

Ацетон, ГОСТ 2603-79, осч.

н-Гексан, ТУ 6-09-3375-78, ч, свежеперегнанный.

Ацетонитрил, МРТУ 6-09-3534-74, ч.

Окись алюминия для хроматографирования, МРТУ 6-09-5296-68, ч, II ст. активности.

Сульфат натрия безводный, ГОСТ 4166-76, хч.

Диэтиловый эфир (для наркоза), фармакопея СССР.

Хроматон N-AW-DMCS (0,20 — 0,25 мм) с 5% XE-60, ЧССР.

Хроматон N-AW-DMCS (0,20 — 0,25 мм) с 5% SE-30, ЧССР.

Стандартные растворы ронстара в ацетоне с содержанием 100, 10 мкг/мл. Для приготовления стандартного раствора берут на аналитических весах навеску ронстара 10 мг +/- 0,0002 г, помещают ее в мерную колбу емкостью 100 мл. Навеску растворяют в 10 — 15 мл ацетона и доводят до метки тем же растворителем. Раствор содержит 100 мкг/мл ронстара. Из раствора пипеткой переносят в мерную колбу на 100 мл 10 мл раствора и доводят до метки ацетоном. Раствор содержит 10 мкг/мл ронстара, растворы стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 месяцев.

2.3. Приборы и посуда

Хроматограф «Цвет-106» с детектором термоионным, ТУ 1.550.003.

Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73.

Ротационный вакуумный испаритель, RV 0-64, ЧССР.

Делительные воронки на 250 мл, 500 мл, ГОСТ 10054-75.

Колбы плоскодонные, конические на 250 мл, ГОСТ 10394-72.

Колбы круглодонные на 100 мл, ГОСТ 10394-72.

Мерные цилиндры на 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Микрошприцы на 1 мкл (МШ-1) и 10 мкл (МШ-10).

Пипетки на 1 и 10 мл, ГОСТ 1770-74.

Мерные колбы на 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Колонки для хроматографирования 100 x 15 мм.

2.4. Подготовка к определению

Органические растворители (ацетон, н-гексан) перед началом работы необходимо перегнать, сульфат натрия прокалить при температуре 300 — 400 °C. Хроматографическую колонку и детектор кондиционируют в режимных условиях в течение 2-х часов.

Отбор проб для анализа проводят в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР № 2051-79 от 21.08.79. Для анализа отбирают среднюю пробу почвы — 100 г, растений эфиромасличных культур — 50 г, эфирного масла — 10 г.

2.5. Проведение определения

2.5.1 Почва

100 г измельченной и просеянной через сито почвы помещают в плоскодонную колбу на 250 мл, заливают 150 мл ацетона и встряхивают 1 час с помощью механического встряхивателя, оставляют на ночь. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр в плоскодонную колбу на 250 мл. Остаток на фильтре промывают ацетоном 2 x 30 мл. Фильтрат упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани 50 °C до 10 мл. Остаток количественно с 30 мл н-гексана переносят в делительную воронку емкостью 500 мл, прибавляют 200 мл дистиллированной воды и реэкстрагируют ронстар н-гексаном, 3 x 30. Объединенный гексановый экстракт сушат, пропуская через 35 г безводного сульфата натрия, и концентрируют на ротационном испарителе досуха. К сухому остатку по стенкам колбы прибавляют 1 мл ацетона, закрывают и вращают колбу. В испаритель хроматографа вводят 2 мкл раствора. Хроматографируют с ТИД и ДПР.

2.5.2 Эфиромасличные растения

50 г свежесрезанных растений гомогенизируют со 150 мл ацетона в течение 15 — 20 мин. со скоростью 8000 об./мин., встряхивают 30 — 40 мин. Экстракты

фильтруют   через   бумажный  фильтр   в  колбу  емкостью  250  мл.  Стакан
гомогенизатора  промывают  3  x  20 мл ацетоном и через фильтр присоединяют
смыв  к  основному фильтрату. Упаривают ацетон на ротационном испарителе до
10 мл  при  температуре  бани  50  °C.  Остаток   количественно   с  50  мл
ацетонитрила переносят в делительную  воронку  емкостью  250  мл  с  50  мл
н-гексана.  Встряхивают   1  -  2  мин. и  отделяют  верхний слой. Операцию
проводят еще дважды. Нижний слой  переносят на делительную воронку емкостью
500  мл  10%  Na SO  и реэкстрагируют ронстар 3 x 50 мл н-гексана. Собирают
                2  4
верхний слой, объединяют, высушивают, пропуская  через   безводный  сульфат
натрия,  и  упаривают до 5 мл на ротационном  испарителе. Остаток переносят
на колонку  с  6 г  окиси  алюминия, промытую 12 мл смеси н-гексан - ацетон
(9:1).  После  того  как раствор полностью  впитается  в  слой  адсорбента,
отгонную колбу смывают 5  мл  смеси  гексан - ацетон (9:1)  и переносят  на

колонку, операцию проводят 3 раза. Ронстар элюируют 100 мл смеси н-гексан -

ацетон (9:1). Элюат упаривают  на  ротационном  испарителе  досуха. Остаток
растворяют  в  1  мл  ацетона  и 2 мкл вводят  в  испаритель  хроматографа,

хроматографируют с ТИД в ДПР.

2.5.3 Эфирные масла

Навеску 10 г эфирного масла мяты, лаванды, шалфея, герани помещают в делительную воронку емкостью 250 мл с 50 мл диметилсульфоксида, выдерживают

20  мин. для  растворения. Прибавляют 50 мл н-гексана, встряхивает 2 мин. и
отделяют  верхний  слой.  Операцию  повторяют  дважды.  Оставшийся  раствор
переносят  в  делительную  воронку  емкостью  500  мл  с 200 мл 10% Na SO ,
                                                                      2  4
предварительно  насыщенного  15  мл серного эфира, и реэкстрагируют ронстар
серным  эфиром 3 x 30 мл. Объединенные экстракты собирают, сушат, пропуская
через  безводный  сульфат  натрия, и  концентрируют  досуха  на ротационном
испарителе при температуре водяной бани 30 °C. К сухому остатку  прибавляют
1 мл  ацетона, встряхивают  и  2  мкл  вводят  в  испаритель  хроматографа.

Хроматографирование проводят с ТИД.

УСЛОВИЯ ХРОМАТОГРАФИРОВАНИЯ

	5% SE-30	5% XE-60
Размер колонки, мм	100 x 3	100 x 3
Материал колонки	стекло	стекло
Форма колонки	спираль	спираль
Расход газа-носителя, мл/мин., при работе с	40	40
ТИД при работе с ДПР	60	60
Расход воздуха, мл/мин.	400	400
Расход водорода, мл/мин.	16	16
Температура испарителя, °C	230	230
Температура термостата колонок, °C	190	190
Хроматографируемый объем, мкл	2	2
Время удерживания ронстара, мин.:
при работе с ТИД	8,2	11,5
при работе с ДПР	17,5	24,2
Число теоретических тарелок:
при работе с ТИД	697	681
при работе с ДПР	784	767
ВЭТТ:
при работе с ТИД	1,4	1,4
при работе с ДПР	1,3	1,3
Линейный динамический диапазон, нг:
при работе с ТИД	0,5 — 500	0,5 — 500
при работе с ДПР	0,1 — 10	0,1 — 10
Рабочая шкала электрометра:
при работе с ТИД	-12 100 x 10 А -12	-12 100 x 10 А -12
при работе с ДПР	20 x 10 А	20 x 10 А

2.6. Обработка результатов анализа

Количественный расчет препарата в анализируемой пробе проводят по следующей формуле:

                              H x V
                                   1

X = ------ x A, K x V 2

где:

X — количество ронстара в пробе, мг/кг;

H — высота пика препарата в анализируемой пробе, мл;

V — объем анализируемой пробы, мл; 1

V — объем инъектируемой пробы, мкл; 2

A — навеска, г;

K — калибровочный коэффициент, который определяется по следующей формуле:

                           H        H              H
                    1       1        2              n

K = — x [------ + ------ + ... + ------],

                    n    C x V    C x V          C x V
                              1        2              n

где:

    H , H , H  - высоты пиков стандартного раствора ронстара, мм;
     1   2   n
    V , V , V   -   объемы  стандартного  раствора   ронстара,  вводимые  в
     1   2   n

хроматограф, мкл;

C — концентрация стандартного раствора ронстара, 10 мкг/мл.

Содержание микроколичеств ронстара в пробах вычисляют как среднее из трех параллельных определений.

3. Требования безопасности

При выполнении операций по определению ронстара следует руководствоваться требованиями безопасности при работе с соединениями 3-го класса токсичности (ронстар), а также с легколетучими растворителями.

---