--- title: "\"Методические указания по определению фадеморфа в вишне, огурцах, смородине, яблоках, воде хроматографическими методами\"" number: "2366-81" issuer: "Министерство здравоохранения СССР" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-2366-81" --- ## "Методические указания по определению фадеморфа в вишне, огурцах, смородине, яблоках, воде хроматографическими методами" # "Методические указания по определению фадеморфа в вишне, огурцах, смородине, яблоках, воде хроматографическими методами" (утв. Минздравом СССР 30.03.1981 N 2366-81) > [!IMPORTANT] > Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
Утверждены
Минздравом СССР
30 марта 1981 г. N 2366-81
**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ** **ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФАДЕМОРФА В ВИШНЕ, ОГУРЦАХ, СМОРОДИНЕ,**
**ЯБЛОКАХ, ВОДЕ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ <*>**
--- <*> Разработаны Д.Б. Гиренко, М.А. Клисенко (ВНИИГИНТОКС). Краткая характеристика препарата. Фадеморф - N-(1-формиламино- 2,2,2-трихлорэтил)морфолин. Брутто-формула C H O N Cl . 7 6 2 2 3 Молекулярная масса 214,5. Общепринятое название - триморфамид. Химически чистый препарат - белое кристаллическое вещество с т. пл. 116 - 117 °C. Растворимость, г/л: вода - 3 (при 10 °C); толуол - 100 (при 13 °C); этанол - 1200 (при 23 °C); ацетон - 600 (при 15 °C). ДСД 0,05 <*> мг/кг. МДУ 0,2 <*> (яблоки), 0,1 <*> (виноград), 0,2 <*> мг/кг (огурцы). --- <*> Временный норматив. Принцип метода. Метод основан на извлечении триморфамида из анализируемой пробы органическим растворителем, очистке экстракта в системе жидкость - жидкость и последующем определении хроматографическими методами.
Метрологическая характеристика метода дана в таблице 161.
Таблица 161 **МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА** | Объект исследования | Среднее значение определения, % | Относительное стандартное отклонение, % | Доверительный интервал среднего при p = 0,95, n = 3, % | | --- | --- | --- | --- | | Вода Вишня Яблоки | 87 74 72 | +/- 2,3 +/- 3,1 +/- 3,8 | +/- 3,0 +/- 4,7 +/- 5,1 | *Примечание.* Предел определения: для воды - 0,005 мг/л; растений - 0,02 мг/кг. Реактивы и растворы. Для экстракции. Ацетон х.ч. Хлороформ ч. Хлороводородная кислота, 10-процентный раствор. Сульфат натрия безводный ч. Для метода ТСХ. Силикагель для хроматографии КСК. Сульфат кальция ч.д.а. Марганцовокислый калий, 3-процентный раствор. Хлорирующий раствор - смесь равных объемов 2-процентного раствора марганцовокислого калия и 10-процентного раствора хлороводородной кислоты. Готовить под тягой. Проявляющий реагент: 0,1 г о-толидина растворяют в 0,5 мл уксусной кислоты; 0,4 г KI растворяют в 5 мл дистиллированной воды. Растворы объединяют и разбавляют водой до 100 мл. Для ГЖХ. Неподвижная фаза 5% SE-30 на хроматоне N-AW или любая аналогичная неполярная фаза. Основной стандартный раствор триморфамида 200 мкг/мл в ацетоне. Хранят в холодильнике в течение 2 мес. Стандартные растворы триморфамида - 1 и 5 мкг/мл в ацетоне. Хранят в холодильнике в течение 2 недель. Приборы и посуда. Ротационный вакуумный испаритель. Колбы конические на 250 мл. Воронки: химические; делительные. Пипетки. Цилиндр с делениями. Пластинки стеклянные размером 9 x 12 см. Микропипетки. Пульверизатор стеклянный. Камера для хроматографирования. Микрошприцы на 10 мкл. Хроматограф с ДЭЗ или ДПР. Колонка стеклянная, диаметр 3 мм, длина 1 м. Азот газообразный особой чистоты. Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Среднюю пробу овощей и фруктов 25 г (вишня, огурец, смородина и др.) размалывают и помещают в коническую колбу. Пробу заливают 50 мл смеси ацетон - вода (1:1), встряхивают в течение 30 мин. Экстракцию повторяют дважды. Фильтруют раствор в делительную воронку, прибавляют 100 мл дистиллированной воды, подкисляют водный раствор хлороводородной кислотой до pH 3 - 3,5 и из водного раствора реэкстрагируют фадеморф хлороформом дважды порциями по 30 мл. Органический растворитель (хлороформ) отделяют, сушат безводным сульфатом натрия, упаривают до объема 0,2 - 0,3 мл, досуха доупаривают на воздухе. Остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и хроматографируют (методы ГЖХ и ТСХ). Пробу воды (200 мл) помещают в делительную воронку, подкисляют хлороводородной кислотой до pH 3 - 3,5 и экстрагируют фадеморф дважды хлороформом порциями по 20 мл. Экстракт объединяют, сушат безводным сульфатом натрия, упаривают до объема 0,2 - 0,3 мл досуха на воздухе. Остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и хроматографируют (методы ГЖХ и ТСХ). Метод ГЖХ. Носитель - хроматон N-AW (0,16 - 0,20 мм) силанизированный. Неподвижная фаза - 5% SE-30 (основная). Для дополнительной идентификации хроматографирование можно проводить на колонке длиной 1 м с неподвижной фазой 15% карбовакса 20 М. -12 Скорость азота 70 мл/мин. Шкала электрометра 20 x 10 А. Линейный диапазон детектирования 0,1 - 4 нг. Температура, °C: колонки - 170; испарителя - 200; детектора - 200. При указанных температурных условиях время удерживания фадеморфа составляет: на фазе SE-30 - 3,3 мин.; на фазе карбовакс 20 М - 6,1 мин. Вводимый объем 2 - 5 мин. Обработка результатов анализа при ГЖХ. Количественное определение проводят путем сравнения рассчитываемого пика с пиком, полученным при введении известного количества стандартного раствора, при условии, что пики близки по величине и определение ведется в диапазоне линейности детектора. Количественную оценку хроматограммы проводят по площади пика, рассчитывая ее как произведение высоты пика на ширину, измеренную на половине высоты. Количество препарата в пробе (X, мг/кг или мг/л) определяют по формуле: C V S ст 2 X = ------, S V P ст 1 где: C - количество препарата во введенном в хроматограф ст стандартном растворе, нг; S, S - площади пиков соответственно стандартного раствора ст фадеморфа, введенного в хроматограф, и исследуемого раствора, кв. мм; V - объем экстракта, введенный в хроматограф, мкл; 1 V - общий объем экстракта после упаривания, мл; 2 P - масса или объем анализируемой пробы, г или мл. Метод ТСХ. Пробу, сконцентрированную до 0,3 мл, с помощью микропипетки количественно переносят на хроматографическую пластинку, смывая колбу эфиром. На эту же пластинку наносят 3 и 6 мкг фадеморфа. Помещают пластинку в камеру, в которую за 30 мин. до хроматографирования налита смесь гексан - ацетон (1:1). После поднятия фронта растворителя на 10 см пластинку вынимают, дают испариться растворителю. Помещают пластинку в эксикатор на 3 - 5 мин., содержащий хлорирующую смесь, затем высушивают 10 - 15 мин. (для удаления хлора) при комнатной температуре. После высушивания ее обрабатывают раствором о-толидина. Фадеморф проявляется на хроматограмме в виде ярко-синего пятна. Нижний предел обнаружения 1 мкг. Величина R 0,75 +/- 0,05. f Содержание препарата в пробе (X, мг/кг или мл/л) определяют по формуле: A X = -, P где: A - количество препарата, найденное путем сравнения размера и интенсивности пятен пробы и стандартного раствора, мкг;
P - масса или объем анализируемой пробы, г или мл.
Требования безопасности. Необходимо соблюдать правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.
---