---
title: "\"Методические указания по определению возбудителей гельминтозоонозов в пресноводных рыбах\""
number: "13-4-2/1751"
issuer: "Министерство сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-13-4-21751"
---

## "Методические указания по определению возбудителей гельминтозоонозов в пресноводных рыбах"

# "Методические указания по определению возбудителей гельминтозоонозов в пресноводных рыбах"

(утв. Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода РФ 04.10.1999 N 13-4-2/1751)


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель<br>
Департамента ветеринарии<br>
Минсельхозпрода России<br>
**В.М.АВИЛОВ**

</div>

4 октября 1999 г. N 13-4-2/1751


## <a id="p100002"></a>МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ГЕЛЬМИНТОЗООНОЗОВ В ПРЕСНОВОДНЫХ РЫБАХ



### 1. <a id="p100003"></a>Общие положения


<a id="p100004"></a>1.1. Гельминтозоонозы - группа паразитарных болезней, возбудители которых в личиночной стадии обнаруживаются у различных видов рыб, а в половозрелой - у человека и животных.
<a id="p100005"></a>1.2. Возбудители гельминтозоонозов проходят сложный цикл развития с участием промежуточных (моллюски, циклопы, диаптомусы и олигохеты), дополнительных (пресноводные рыбы) и окончательных (человек, кошка, собака, дикий кабан, волк, лисица, выдра и др.) хозяев.
<a id="p100006"></a>1.3. Личиночные стадии возбудителей гельминтозоонозов по отношению к дополнительным хозяевам имеют определенную приуроченность и характерные места локализации [(Приложение 1)](#p100030).


### 2. <a id="p100007"></a>Исследование рыб


<a id="p100008"></a>2.1. Для исследования отбирают 10 - 15 экземпляров живых или свежеуснувших рыб обследуемого вида, регистрируют с указанием даты исследования, вида рыб и места вылова.
<a id="p100009"></a>2.2. Рыб взвешивают, измеряют длину от вершины рыла до начала лучей хвостового плавника. Осматривают плавники, чешую, жабры. Участки с изменениями просматривают под лупой и микроскопом (увеличение 2 х 8). Ножницами разрезают брюшко по средней линии от анального отверстия до области сердца. С помощью лупы просматривают сердце, гонады, печень, селезенку, почки, стенки желудка, кишечник, серозные покровы. Каждый орган отдельно помещают в чашки Петри или на часовые стекла. Из органов и тканей нарезают полоски длиной до 10 мм и толщиной 3 - 4 мм, помещают в компрессориум или между стеклами 9 х 12 см и микроскопируют. Мышцы осматривают, разрезая на продольные и поперечные полоски, и исследуют под микроскопом.
<a id="p100010"></a>2.3. В мускулатуре рыб встречаются метацеркарии трематод, патогенные и непатогенные для человека и животных. Последних в половозрелой стадии обнаруживают в кишечнике рыбоядных птиц (чайки, цапли) и хищных рыб (щука). Для дифференциации этих личинок гельминтов у рыб пользуются таблицей [(Приложение 2)](#p100042).
<a id="p100011"></a>2.4. Для патогенных человеку и животным метацеркарий трематод из сем. Opisthorchidae (описторхисы, меторхисы, псевдамфистомы, клонорхисы) при осмотре под микроскопом характерно наличие двух круглых одинакового размера присосок, которые окрашены светлее тела личинки, и черного экскреторного пузыря овальной или грушевидной формы, занимающего 1/3 - 1/4 тела личинки (рис. 1 - 2 - не приводятся). Для живых личинок характерно активное движение в цисте.
<a id="p100012"></a>2.5. Из непатогенных для человека и животных метацеркарий трематод близкое строение к описторхидам имеют личинки из рода буцефал и рипидокотил, для которых характерно наличие одной крупной ротовой присоски чашеобразной формы с пальцеобразными выступами, экскреторного пузыря зигзагообразной формы, занимающего 2/3 тела личинки (рис. 3 - не приводится), и слабой подвижности живых личинок в цисте.
<a id="p100013"></a>2.6. Для метацеркарий параценогонимусов характерна большая черная экскреторная система с 3 белыми щелевидными пространствами (рис. 4 - не приводится). Другие личинки, встречающиеся у рыб, определяют, пользуясь табл. 2.


### 3. <a id="p100014"></a>Определение жизнеспособности личинок


<a id="p100015"></a>3.1. Извлеченных из органов и тканей рыбы (из цисты) плероцеркоидов помещают в подогретый (до 40 °С) физиологический раствор или в искусственный желудочный сок (100 мл 0,5%-ного раствора поваренной соли, 0,5 г пепсина, 0,75 мл 35%-ного раствора соляной кислоты). Под лупой осторожно раздражают личинку препаровальной иглой. Наличие даже слабых движений указывает на жизнеспособность плероцеркоида.
<a id="p100016"></a>3.2. Личинки из органов рыб освобождают от остатков ткани под контролем лупы. На препарат наносят 2 капли 3%-ного раствора розоловой кислоты на 70%-ном спирте на 2 минуты, добавляют каплю 0,1%-ного раствора едкого калия, оставляют на 2 минуты. Излишек краски смывают физиологическим раствором, препарат высушивают полоской фильтровальной бумаги, накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом. Мышечная ткань и мертвые личинки окрашиваются в розовый цвет, живые личинки не окрашиваются.
<a id="p100017"></a>3.3. Жизнеспособность личинок трематод можно определять, используя микроскоп с подогревательным столиком. Выделенных паразитов переносят на столик (при 36 - 37 °С), добавляют 2 - 3 капли желчи или 0,5%-ного раствора трипсина. Живые личинки через 5 - 10 минут выходят из цист.
<a id="p100018"></a>3.4. Цисту, извлеченную из ткани рыб, под микроскопом в капле физиологического раствора препаровальными иглами освобождают от наружной оболочки. При легком надавливании иглой на покровное стекло, под которое помещают препарат, внутренняя оболочка разрывается. Наличие движений у личинки указывает на ее жизнеспособность.


### 4. <a id="p100019"></a>Определение видовой принадлежности личинок


<a id="p100020"></a>4.1. В сомнительных случаях, если не удается сразу установить вид метацеркарий трематод, обнаруженных в пробе, рекомендуется произвести освобождение личинок от оболочек механически [(п. 3.4)](#p100018) или химическим способом ([п. 3.2](#p100016) и [п. 3.3](#p100017)).
<a id="p100021"></a>4.2. Измельченные кусочки поверхностного слоя спинных мышц (0,3 х 0,5 см) в количестве 10 - 15 г помещают в искусственный желудочный сок в соотношении 1:10. Выдерживают в термостате при 37 - 40 °С 2 - 3 часа, процеживают через марлю. Осадок переносят в чашку Петри, цисты вылавливают пипеткой при проходящем свете под лупой или под микроскопом или, добавив физиологический раствор, круговыми движениями чашки отмывают, при этом цисты концентрируются в центре чашки. Раствор с края осторожно удаляют резиновой грушей. Промывку повторяют до полного удаления остатков непереваренной мышечной ткани. Для освобождения от внутренней оболочки цисты помещают в теплый (22 - 24 °С) раствор трипсина и поваренной соли (на 100 мл 1%-ного раствора поваренной соли берут 1 г трипсина).
<a id="p100022"></a>4.3. Личинки гельминтов, освобожденные от оболочек, имеют характерные признаки, по которым их можно отнести к определенному виду. Определяют видовую принадлежность личинок, используя [Приложение 2](#p100042).
<a id="p100023"></a>4.4. Видовую принадлежность личинок гельминтов определяют также, используя биологическую пробу. Для этого подопытным животным (предпочтительно - котятам, в крайнем случае - щенкам, морским свинкам, хомякам) скармливают мясо рыб с личинками гельминтов или мелкую инвазированную рыбу. Определение вида паразита проводят через 3 - 4 недели после начала опыта по обнаруженным в фекалиях животных яйцам или по половозрелым гельминтам в печени, желчном пузыре, кишечнике (в зависимости от вида гельминта) при вскрытии подопытных животных.


### 5. <a id="p100024"></a>Меры профилактики


<a id="p100025"></a>5.1. При работе с патологическим материалом необходимо соблюдать меры личной профилактики. По окончании исследования следует тщательно мыть руки с мылом и щеткой, а место работы обрабатывают 2%-ным раствором кальцинированной соды.
<a id="p100026"></a>5.2. Выловленная из водоема рыба, где обнаружены возбудители гельминтозоонозов, считается условно годной и подлежит переработке в соответствии с Инструкцией по санитарно-гельминтологической оценке рыбы, зараженной личинками дифиллоботриид (возбудителями дифиллоботриозов) и личинками описторхисов (возбудителями описторхоза), и ее технологической обработке.

<a id="p100027"></a>***

<a id="p100028"></a>С утверждением настоящих Методических указаний утрачивает силу "Методика определения возбудителей гельминтозоонозов в пресноводных рыбах", утв. ГУВ МСХ СССР 21.03.83 N 115-6а.





<div align="right">

<a id="p100029"></a>Приложение N 1<br>
к Методическим указаниям<br>
по определению возбудителей<br>
гельминтозоонозов в пресноводных рыбах,

</div>

утв. 4 октября 1999 года

<div align="center">

<a id="p100030"></a>**ПОРАЖАЕМЫЕ ВИДЫ РЫБ И МЕСТА ЛОКАЛИЗАЦИИ ЛИЧИНОК -**<br>
**ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ГЕЛЬМИНТОЗООНОЗОВ**

</div>



| Вид паразита | Поражаемые виды рыб | Наиболее частая локализация личинок |
| --- | --- | --- |
| Opisthorchis felineus, Metorchis albidus, Pseudamphistomum truncatum | В наибольшей степени язь, елец, линь, меньше - плотва, усач, лещ, густера, жерех, пескарь, сазан, красноперка, уклея, сырть, подуст, гольян, вобла, овсянка и др. | Поверхностный слой мышц на глубине 2 - 3,4 см (в небольшом количестве обнаруживаются во внутренних органах, жабрах, стенках кишечника, на чешуе) |
| Clonorchis sinensis | Сазан, черный и белый амур, толстолобик, верхогляд, карась, окуневые, бычковые и др. | То же |
| Metagonimus yokogawai | Преимущественно карповые | Плавники, поверхность кожи |
| Diphyllobotrium latum | Щука, окунь, ерш, налим | Икра, молоки, печень, серозные покровы, мышцы (без цист) |
| D.dendriticum | Хариус, омуль, сиг, корюшка, окунь, ряпушка, голец, муксун, форель | Мышечная ткань, молоки, икра, печень, серозные покровы (инцистируются) |
| Nanophyetes schikchobalowi | Ленок, таймень, амурский сиг, кета, горбуша, амурский хариус | Мышцы плавников, сердце, почки, реже - мышцы тела, головы, жабры |
| Rossicotrema donicum | Окунь, ерш, судак | Плавники, поверхность кожи |
| Echinochasmus perfoliatus | Щука, линь, сазан, лещ, язь, густера, вобла, красноперка, плотва, тарань, жерех, белоглазка, синец, карась, уклея, окунь, судак, ерш, вьюн, сом, карп | Жаберные лепестки |
| Dioctophyme renale | Язь, плотва, щука, шемая, лопатонос, усач, сом | Стенки кишечника, мышечная ткань (в виде цист) |






<div align="right">

<a id="p100041"></a>Приложение N 2<br>
к Методическим указаниям<br>
по определению возбудителей<br>
гельминтозоонозов в пресноводных рыбах,<br>
утв. 4 октября 1999 года

</div>


<div align="center">

<a id="p100042"></a>**ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ ТАБЛИЦА ЛИЧИНОК ГЕЛЬМИНТОВ,**<br>
**ОБНАРУЖИВАЕМЫХ У ПРЕСНОВОДНЫХ РЫБ**

</div>



<table>
<colgroup><col width="14%"><col width="14%"><col width="15%"><col width="14%"><col width="14%"><col width="14%"><col width="14%"></colgroup>
<tr><td>Вид паразита</td><td>Размер (мм), форма цист личинок</td><td>Оболочки цист, цвет, расположение</td><td>Форма, размер экскреторного пузыря</td><td>Количество, форма и величина присосок (РП - ротовая, БП - брюшная присоски) (размер в мм)</td><td>Подвижность живой личинки</td><td>Описание личинки, освобожденной от оболочек (размер в мм)</td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>6</td><td>7</td></tr>
<tr><td colspan="7">Метацеркарии трематод, патогенных для теплокровных</td></tr>
<tr><td>Opisthorchis</td><td>0,28 - 0,38 х</td><td>Наружная</td><td>Черный,</td><td>Присоски</td><td>Движения</td><td>Тело личинки</td></tr>
<tr><td>felineus</td><td>0,18 - 0,28 овальная, реже круглая</td><td>равномерно прилегает к внутренней</td><td>округлый, почковидный, занимает не более 1/3 тела личинки</td><td>круглые, РП - 0,088; БП - 0,077</td><td>энергичные</td><td>покрыто шипиками до уровня БП, задний конец веретенооб. формы, 0,47 - 0,50, 0,12 - 0,14</td></tr>
<tr><td>Pseudamphistomum truncatum</td><td>0,21 - 0,38 х 0,14 - 0,24</td><td>То же</td><td>То же</td><td>Круглые, одинакового размера</td><td>Движения замедленные</td><td>0,6 - 0,9; 0,15 - 0,20, задний конец обрублен, все тело личинки покрыто шипиками</td></tr>
<tr><td>Metorchis albidus</td><td>0,32 - 0,46, 0,26 - 0,40 без капсулы - 0,30 - 0,44 х 0,24 - 0,38 круглые</td><td>Тонкие, рядом, без утолщений</td><td>Черный округлый, овальный; занимает 1/3 тела личинки</td><td>РП и БП одинакового размера 0,08 х 0,01</td><td>То же</td><td>0,6 - 0,9; 0,16 - 0,20, задний конец в нижней трети тела расширен</td></tr>
<tr><td>Clonorchis sinensis</td><td>0,150 - 0,180 х 0,150 - 0,165, круглая, овальная</td><td>Равномерно прилегают друг к другу</td><td>Черный грушевидный, занимает 1/4 тела; гранулы 10 мкм плотно расположены</td><td>РП - 0,54 - 0,56 х 0,51 - 0,60, БП - 0,66 - 0,75 х 0,63 - 0,72</td><td>Слабые движения</td><td>0,375 - 0,315 х 0,125 - 0,150</td></tr>
<tr><td>Metagonimus yokogawai</td><td>0,157 - 0,157, округлая</td><td>Толщина наружной оболочки отличается от внутренней</td><td>У-образный, экскр. гранулы мелкие, расположены не плотно</td><td>БП меньше РП и смещена в сторону</td><td>Движения активные</td><td>Шипы, покрывающие тело, чешуевидной формы</td></tr>
<tr><td>Echinochasmus perfoliatus</td><td>0,080 - 0,110 х 0,079 - 0,098, овальные, круглые</td><td>Наружная оболочка цисты прозрачная, эластичная</td><td>Из двух экскреторных полостей</td><td>БП выступает, лежит в задней трети тела; головной воротник несет 24 шипика</td><td>Движения слабые</td><td>0,1161 - 0,043, ротовая присоска имеет головной воротник с 24 шипиками</td></tr>
<tr><td>Плероцеркоиды цестод Diphyllobotrium latum</td><td>10 - 60 х 1 - 3 мм, беловато-молочные; не инцистируются</td><td>Тело булавовидное с поперечными морщинами</td><td>-</td><td>На головном конце щелевидное образование</td><td>Активно движутся в физ. растворе при 28 - 30 °С</td><td></td></tr>
<tr><td>Diphyllobotrium dendriticum</td><td>Чаще инцистируются, длина личинки вне цисты 7 - 45 мм и больше</td><td>Тело сигарообразное, со значительной морщинистостью. Передний отдел более заострен</td><td>-</td><td>На головном конце сильно выражена присасывательная бороздка</td><td>Подвижны при освобождении из цист</td><td></td></tr>
<tr><td colspan="7">Метацеркарии трематод, непатогенных для теплокровных</td></tr>
<tr><td>Paracoenogonimus ovatus</td><td>0,42 - 0,50, с наружней капсулой до 0,70; сферичн., темн., прозрачн.</td><td>Наружная оболочка в 2 - 4 раза толще внутр. (равномерно отстает)</td><td>В виде тройника в конце со щелевидными пространствами, занимает все тело личинки</td><td>Две и орган Брандеса 0,08 - 0,12, РП - 0,04 - 0,07; БП - 0,02 - 0,04</td><td>Мало подвижна</td><td>Яйцевидной формы</td></tr>
<tr><td>Bucephalus polymorphus</td><td>0,27 - 0,36 х 0,43, прозрачные, овальные (0,20 - 0,34 х 0,38 - 0,43)</td><td>Тонкие, неравномерно отстают друг от друга</td><td>Зигзагообразная, занимает 2/3 тела личинки</td><td>РП - 0,18 - 0,22, имеет пальцевидные мускульные отростки</td><td>Движение активное у освобожденной личинки</td><td>0,6 - 2,3 х 0,35, на РП 7 пальцевидных выростов</td></tr>
<tr><td>Rhipidocotyle illense</td><td>Прозрачн., сферическ., овальн., 0,27 - 0,37 х 0,27 - 0,37</td><td>То же</td><td>То же</td><td>РП - 0,18 - 0,23 х 0,15 - 0,22, имеет 2 ушкообразн. выроста</td><td>Движения замедленные, у основания личинки активные</td><td>0,8 - 1,0, 0,8 х 0,16 - 0,28, РП имеет 2 ушкообразных выроста</td></tr>
<tr><td>Posthodiplostomum cuticola</td><td>0,6 - 0,9 мм, чечевицеобразн., с черным пигментом</td><td>Вокруг наружной оболочки откладывается черный пигмент</td><td>Из-за черного пигмента не просматривается</td><td>РП меньше БП</td><td>Движения незаметные</td><td>0,15 - 1,5</td></tr>
</table>


<a id="p100059"></a>Примечание: у рыб могут обнаруживаться также цисты миксоспоридий различных форм и размеров (от 0,04 до 1,00 мм). Эти цисты имеют специфические детали внутреннего строения, отличные от таковых личинок гельминтов.





<div align="right">

<a id="p100060"></a>Приложение N 3<br>
к Методике определения<br>
возбудителей гельминтозоонозов<br>
в пресноводных рыбах

</div>


<div align="center">

<a id="p100061"></a>**МЕТАЦЕРКАРИИ ТРЕМАТОД, ПАТОГЕННЫЕ (РИС. 1, 2)**<br>
**И НЕПАТОГЕННЫЕ (РИС. 3, 4) ДЛЯ ТЕПЛОКРОВНЫХ**

</div>


<a id="p100062"></a>1 - личинка вне цисты;
<a id="p100063"></a>2 - личинка в цисте;
<a id="p100064"></a>3 - личинка в мускулатуре;
<a id="p100065"></a>4 - яйцо.

<div align="center">

<a id="p100066"></a>Рис. 1. Opisthorchis felineus

<a id="p100067"></a>Рисунок не приводится.

</div>


<a id="p100068"></a>1 - личинка в цисте;
<a id="p100069"></a>2 - личинка вне цисты;
<a id="p100070"></a>3 - яйцо.

<div align="center">

<a id="p100071"></a>Рис. 2. Pseudamphistomum truncatum

<a id="p100072"></a>Рисунок не приводится.

</div>


<a id="p100073"></a>1 - личинка, извлеченная из цисты;
<a id="p100074"></a>2 - личинка в цисте.

<div align="center">

<a id="p100075"></a>Рис. 3. Bucephalus polymorphus

<a id="p100076"></a>Рисунок не приводится.

</div>


<a id="p100077"></a>а) личинка в оболочке;
<a id="p100078"></a>б) личинка без оболочки.

<div align="center">

<a id="p100079"></a>Рис. 4. Paracoenogonimus ovatus

<a id="p100080"></a>Рисунок не приводится.

</div>




<a id="p100081"></a>

---