Статья: Управление биорисками в лабораториях при работе с образцами, в которых подозревается или подтверждено наличие вируса гриппа

(Гордеев И.А.)

(«Охрана труда и пожарная безопасность в учреждениях здравоохранения», 2019, № 12)

«Охрана труда и пожарная безопасность в учреждениях здравоохранения», 2019, № 12

---

<1> Статья подготовлена по материалам ВОЗ. Русскоязычные источники: письмо Роспотребнадзора от 09.05.2009 № 01/6378-9-23 «О направлении рекомендаций ВОЗ по управлению лабораторными биорисками» и письмо Роспотребнадзора от 12.05.2010 № 01/7192-10-32 «О направлении информации ВОЗ по управлению лабораторным биориском в лабораториях, работающих с пандемическим вирусом гриппа».

1. Контрольный список вопросов по организации управления биорисками для руководителей и персонала лабораторий.

2. Рекомендации в отношении минимальных/необходимых условий работы, связанных с проведением конкретных манипуляций в лабораторных помещениях.

Предлагается, что руководители и работники лабораторий сначала прорабатывают контрольный список вопросов, а затем рассматривают лабораторные процедуры своего учреждения в свете представленных рекомендаций.

Представленный материал соответствует требованиям безопасности к медицинским лабораториям, содержащимся в ГОСТ Р 52905-2007 <1>. Напомним, что указанный стандарт устанавливает требования по формированию и поддержанию безопасной рабочей среды в медицинских лабораториях, в том числе вирусологических. Как и во всех других правилах по безопасности необходимо, чтобы было выделено лицо, ответственное за безопасность, а также чтобы все сотрудники были персонально ответственны за свою собственную безопасность во время работы и за безопасность других людей, которых это может затрагивать.

---

<1> Стандарт утвержден и введен в действие Приказом Ростехрегулирования от 27.12.2007 № 531-ст.

КОНТРОЛЬНЫЙ СПИСОК ВОПРОСОВ ПО ОРГАНИЗАЦИИ УПРАВЛЕНИЯ БИОРИСКАМИ ДЛЯ РУКОВОДИТЕЛЕЙ И ПЕРСОНАЛА ЛАБОРАТОРИЙ

Данный контрольный список вопросов был разработан для обеспечения руководства для лабораторий, которые получают и работают с образцами от людей, подозреваемых или подтвержденных на инфицирование гриппом типа A(H1N1).

Данный контрольный список вопросов не исчерпывающий, но представляет собой отправную точку в организации готовности лабораторий к получению образцов и к любой дополнительной рабочей нагрузке в условиях усиленного эпидемиологического надзора в период угрозы пандемии.

Система управления биорисками	1. Имеются в наличии адекватные ресурсы для осуществления управления (например, временные, денежные). 2. Персонал проинструктирован о том, что поддержание безопасных условий на рабочем месте имеет первостепенное значение и что необходимо в обязательном порядке выполнять соответствующие процедуры, урезание которых недопустимо, несмотря на возросшие объемы работ. 3. В достаточном количестве имеется обученный персонал и другие ресурсы, включая: - управленческий персонал; - научный персонал; - специалистов, например специалистов по вопросам биобезопасности; - вспомогательный персонал, например: специалистов по обработке отходов, уборщиков, инженерно-технический обслуживающий персонал, водительский персонал. 4. Имеется в наличии персонал, который можно задействовать в дежурном режиме в течение дополнительных рабочих часов (например, в вечернее время, во время выходных дней). 5. Имеются в наличии и доведены до персонала пересмотренные и обновленные протоколы и принципы рабочей практики (например, безопасные приемы и методы проведения работ; процедура обеззараживания). 6. Определены и изучены соответствующие источники информации в отношении надлежащих методов обеспечения биобезопасности (например, Практическое руководство по биологической безопасности в лабораторных условиях, ВОЗ, издание 3-е).
Оценка риска	1. Произведена оценка рисков в отношении приемов и методов ведения работ, включая пролив (утечку) материала и работы, при которых образуется аэрозоль. 2. Решены вопросы организации работы с дополнительным количеством образцов; учтены вопросы обеспечения персоналом и другие условия работы в чрезвычайных условиях, включая дополнительные рабочие часы. 3. Учтены вопросы обеспечения инфекционного контроля на рабочем месте (например, при чихании; обеспечена санитарная уборка) и персонал приведен в состояние готовности. 4. Учтены вопросы возможного возникновения заболевания на рабочем месте, а также отсутствие [по этой причине] значительной части персонала.
Инвентарный перечень болезнетворных микроорганизмов и токсинов	1. Имеется в наличии и регулярно обновляется система инвентарного учета образцов и культур вирусов. 2. Имеются в наличии достаточные мощности по хранению образцов и культур вирусов. 3. Образцы маркируются надлежащим образом с целью обеспечения их идентификационного учета.
Общие требования безопасности	1. Имеются в наличии и выполняются надлежащие процедуры по поддержанию чистоты и порядка, и лаборатория поддерживается в чистом и опрятном состоянии. 2. Проведена проверка обеспечения соблюдения общих требований безопасности при проведении работ (например, электробезопасность, противопожарная безопасность).
Персонал и компетентность	1. Имеются в наличии и выполняются планы по проведению обучения и повышению уровня компетентности, а также стандартные операционные процедуры (СОПы) для всего персонала. 2. Имеется в наличии обученный, компетентный персонал, включая необходимых дополнительных/временных членов персонала. 3. Право на работу с потенциально инфицированными материалами имеет только компетентный персонал, прошедший обучение, относящееся к работе с вирусом гриппа типа A(H1N1), включая научный и вспомогательный персонал.
Надлежащая методика микробиологических исследований	1. Дополнительно проанализированы процедуры в отношении манипуляций, представляющих опасность (например, работы, приводящие к возникновению аэрозолей, использование центрифуг/боксов биобезопасности, обработка отходов). 2. Выполняются валидированные, отредактированные и обновленные СОПы, обеспечивающие ясность, четкость и последовательность выполняемых операций.
Одежда и средства индивидуальной защиты (СИЗ)	1. Определены адекватные и надлежащие средства индивидуальной защиты (СИЗ), имеются соответствующие запасы (маски, респираторы, лабораторные халаты и т.п.), а персонал обучен их использованию.
Человеческие факторы	1. Предусмотрены соответствующие условия для отдыха и решены другие вопросы социального обеспечения (например, снятие стресса после работы, забота о членах семьи). 2. Организовано проведение регулярных собраний и информационных совещаний членов коллектива с целью обеспечения надлежащей коммуникации. 3. Весь персонал (научный и вспомогательный) информирован о риске, связанном с инфицированием вирусом гриппа типа A(H1N1), о симптомах заболевания, процедуре доклада и помощи, которую окажет учреждение/организация в случае возникновения заболевания.
Охрана здоровья	1. Определены потребность в вакцинации и схемы ее обеспечения. 2. Имеется в наличии план по обеспечению наличия, использованию и обучению введению противовирусных препаратов. 3. Определены симптомы, о которых следует немедленно докладывать руководству лаборатории и в другие органы.
Реагирование на чрезвычайные ситуации и планирование действий в чрезвычайных обстоятельствах	1. Имеется в наличии, функционирует и проверено стабильное обеспечение электропитания с адекватными резервными мощностями (например, [дизель] — генераторы). 2. В случае необходимости имеется в наличии и может быть задействован лабораторный потенциал других отделов. 3. Риск возникновения пожара, затопления и другие риски не будут увеличены в результате измененных условий работы.
Расследование несчастных случаев/инцидентов	1. Имеется процедура по оповещению о происшествиях и их расследованию.
Требования к физической инфраструктуре объекта	1. Имеется достаточный объем помещений, включая помещения для хранения образцов и других материалов (например, отходов).
Оборудование и вопросы техобслуживания и ремонта	1. Имеются в наличии боксы биологической безопасности и другое необходимое оборудование. 2. Необходимо обеспечить надлежащее техобслуживание и валидацию оборудования, желательно иметь также резерв запасных частей к нему.
Обеззараживание, дезинфекция и стерилизация	1. Определены процедуры по надлежащему обеззараживанию всех отходов и других материалов. 2. Обеспечены адекватные запасы необходимых дезинфектантов и других материалов.
Порядок транспортирования	1. Для обеспечения транспортирования имеются в наличии адекватные запасы материалов, включая соответствующие емкости (контейнеры) для транспортировки. 2. Имеются в наличии процедуры по порядку получения и вскрытия [емкостей] с образцами. 3. Отправители образцов знают о необходимости соблюдения требуемых процедур по транспортировке. 4. Имеются в наличии процедуры по обеспечению безопасной транспортировки материалов в лабораторию и из лаборатории.
Безопасность	1. Имеются в наличии надлежащие средства управления общей безопасностью (security), включая средства, необходимые для обеспечения проведения работ в необычных условиях и во внеурочное время (например, привлечение дополнительного персонала).

РЕКОМЕНДАЦИИ В ОТНОШЕНИИ МИНИМАЛЬНЫХ/НЕОБХОДИМЫХ УСЛОВИЙ РАБОТЫ, СВЯЗАННЫХ С ПРОВЕДЕНИЕМ КОНКРЕТНЫХ МАНИПУЛЯЦИЙ В ЛАБОРАТОРНЫХ ПОМЕЩЕНИЯХ

Нижеуказанные рекомендации касаются минимальных/необходимых условий работы, связанных с проведением конкретных манипуляций в лабораторных помещениях:

Обычные лабораторные процедуры, включая диагностические работы и ПЦР-анализ <1>

---

<1> ПЦР-диагностика (полимеразная цепная реакция) — высокоточный метод диагностики инфекций, который основывается на исследовании генетического материала человека (ДНК и РНК).

Диагностические лабораторные работы и ПЦР-анализ клинических образцов от пациентов, подозреваемых или подтвержденных на заболевание гриппом типа A(H1N1), следует проводить, адаптируя методы работ и процедуры, описанные для лабораторий уровня биозащиты BSL-2, как указано в «Практическом руководстве по биологической безопасности в лабораторных условиях», ВОЗ, издание 3-е.

Примеры обычных лабораторных процедур, требующих наличия условий BSL-2, включают в себя:

• диагностическое тестирование сывороток, крови (включая гематологию и клиническую химию), образцов из дыхательных путей или других образцов;
• манипуляции с нейтрализованными или инактивированными (лизированными, фиксированными или иным образом обработанными) вирусными частицами и/или неинфекционными частями вирусного генома;
• рутинное исследование грибковых и бактериальных культур.

При обращении с образцами и их обработке следует использовать надлежащие методы проведения работ в лабораторных условиях (GLP <1>):

---

<1> Стандарт GLP (англ. Good Laboratory Practice — Надлежащая лабораторная практика) — система норм, правил и указаний, направленных на обеспечение согласованности и достоверности результатов лабораторных исследований. Система является утвержденным национальным стандартом РФ с 1 марта 2010 года — «ГОСТ 33044-2014. Межгосударственный стандарт. Принципы надлежащей лабораторной практики» (введен в действие Приказом Росстандарта от 20.11.2014 № 1700-ст).

• все манипуляции с потенциально инфекционными материалами, включая те, которые могут привести к разбрызгиванию, образованию капельных масс или аэрозолей инфекционных материалов (например, загрузка и разгрузка герметичных центрифужных стаканов, центрифугирование, измельчение, смешивание, интенсивное встряхивание или перемешивание, ультразвуковое дробление, вскрытие контейнеров с инфекционным материалом, внутреннее давление в которых отличается от атмосферного) следует выполнять внутри надлежащим образом обслуживаемых и аттестованных боксов биологической безопасности (BSCs). Принято считать, что использование боксов биобезопасности II-го класса обеспечивает защиту материалов рабочих поверхностей, а также персонала и окружающей среды;
• следует ограничить использование игл и шприцев для подкожных инъекций. Их нельзя использовать в качестве альтернативы пипетирующим устройствам или для какой-либо другой цели, кроме как для парентеральных инъекций или отсасывания жидкостей из тела лабораторных животных. Контаминированные «колющие предметы» следует всегда складывать в контейнеры с твердыми стенками, снабженные крышкой и подлежащие обработке в качестве инфекционных отходов;
• пипетирование ртом должно быть строго запрещено;
• следует иметь в наличии адекватные контейнеры для биологически опасных материалов для надлежащего уничтожения контаминированных материалов. Они должны находиться непосредственно в рабочей зоне;
• рабочие поверхности следует дезинфицировать после загрязнения потенциально опасным материалом, а также по окончании рабочего дня. Свежеприготовленный раствор гипохлорита натрия пригоден для ликвидации последствий пролива биологически опасного материала. Более подробная информация в отношении дезинфекции и стерилизации представлена в «Практическом руководстве по биологической безопасности в лабораторных условиях», ВОЗ, издание 3-е;
• работники лаборатории должны часто мыть руки, особенно после манипуляций с инфицированными материалами и животными, перед выходом из рабочей зоны лаборатории, а также перед приемом пищи;
• средства индивидуальной защиты нужно обязательно снимать перед выходом из лаборатории;

Выделение вируса

Выделение вируса из клинических образцов от пациентов с подозреваемой или подтвержденной инфекцией гриппа типа A(H1N1) следует проводить только в лабораториях, отвечающих нижеследующим дополнительным необходимым (минимальным) требованиям изолирующей защиты:

• наличие управляемой вентиляционной системы для обеспечения отрицательного давления внутри лаборатории, с тем чтобы воздух шел в сторону рабочих помещений лаборатории;
• отработанный воздух из лабораторного помещения не рециркулируется в другие помещения внутри здания. Воздух должен фильтроваться с использованием фильтров тонкой очистки (HEPA), если он подвергается рекондиционированию и рециркуляции внутри помещений лаборатории. Когда отработанный воздух из лаборатории выводится наружу, это должно быть организовано с таким расчетом, чтобы он мог рассеиваться вдали от служебных и жилых зданий или отверстий для забора свежего воздуха. Такой воздух может выводиться через фильтры тонкой очистки (HEPA);
• все манипуляции с инфекционными или потенциально инфекционными материалами следует выполнять внутри надлежащим образом обслуживаемых и аттестованных боксов биологической безопасности (BSCs);
• во время выполнения работ доступ в лабораторию ограничивается;
• строго выполняются методы, рекомендованные для изолированных лабораторий 3-го уровня биологической безопасности (BSL-3) в «Практическом руководстве по биологической безопасности в лабораторных условиях», ВОЗ, издание 3-е;

• все материалы, транспортируемые внутри и между лабораториями, должны помещаться во вторичный контейнер, чтобы минимизировать возможность поломки контейнера или утечки, например, при переносе материалов из бокса биологической безопасности в инкубатор и назад. [Поверхность емкостей] с образцами, выносимыми из полости бокса биологической безопасности, должна обеззараживаться.

Работа с животными

Нижеследующие работы требуют наличия виварных помещений для животных уровня BSL-3 и соблюдения методов ведения работ, указанных в «Практическом руководстве по биологической безопасности в лабораторных условиях», ВОЗ, издание 3-е:

• заражение животных с целью выделения вирусного агента из образцов гриппа типа A(H1N1);

Использование надлежащих дезинфицирующих средств

Дезинфицирующие средства с доказанной активностью против оболочечных вирусов включают в себя: хлор, спирт, перекись водорода, четвертичные соединения аммония и фенольные соединения. Они должны быть адекватными, если используются в соответствии с рекомендациями производителя.

После обработки образцов следует проводить обеззараживание рабочих поверхностей и оборудования. Более подробная информация по проведению дезинфекции и стерилизации представлена в «Практическом руководстве по биологической безопасности в лабораторных условиях», ВОЗ, издание 3-е.

Контаминированные отходы

Контаминированные «колющие предметы» следует всегда складывать в контейнеры с твердыми стенками, снабженные крышкой и подлежащие обработке в качестве инфекционных отходов.

Гигиена труда

Все работники лаборатории должны немедленно сообщать о любых симптомах гриппоподобного заболевания в медицинские организации для получения медицинской помощи по профилактике и/или лечению.

Об инцидентах или несчастных случаях с потенциальным или фактическим контактом с гриппом типа A(H1N1) следует немедленно докладывать, а любая затронутая зона/оборудование должны быть обеззаражены надлежащим образом. Персонал, который, возможно, подвергся вредному воздействию, должен как можно скорее обратиться за медицинской помощью для получения профилактики и/или лечения.

И.А. Гордеев

---