Статья. «Оценка подлинности и качества растительного сырья»

(Л.Устынюк)

(«Фармацевтические ведомости», 2007, № 1)

«Фармацевтические ведомости», 2007, № 1

Цивилизованное развитие гомеопатии как одного из важных направлений современной медицины невозможно без совершенствования существующих и разработки новых критериев оценки подлинности и методов контроля качества лекарственных средств и препаратов на их основе.

На фоне такого негативного явления, как фальсификация, которое затронуло буквально все стороны нашей жизни, в том числе и лекарственные средства, сегодня эта проблема стала настолько актуальной, что стали говорить об угрозе национальной безопасности.

Напомним, что лекарственными веществами считаются только те биологически активные соединения, применение которых для профилактики и лечения заболеваний разрешено законодательно, т.е. они должны соответствовать определенным достаточно жестким требованиям.

Для гомеопатических лекарственных средств такой законодательной базой во многих странах мира являются национальные гомеопатические фармакопеи. В России такой фармакопеи нет, а основным сборником нормативных документов на лекарственные средства является Государственная фармакопея СССР, последнее XI издание которой вышло в свет более 20 лет назад и, естественно, устарело. В этом сборнике приведены требования к качеству 83 видов лекарственного растительного сырья, из них лишь для 43 видов в разделе «Качественные реакции» предусмотрено проведение качественных, гистохимических или хроматографических проб. Между тем только за последние 10 лет зарегистрировано 349 отечественных и 271 зарубежный комплексных гомеопатических препаратов и порядка 450 монопрепаратов, а общий список растений, разрешенных к применению в отечественной гомеопатической практике, по данным Т. Л. Киселевой и Е. В. Цветаевой, превышает 700 наименований.

В соответствии с существующей нормативной документацией на каждое растение, из которого готовят лекарственный препарат, должна быть фармакопейная статья. Такая же статья должна быть и на матричную настойку, на основе которой далее готовят различные препаративные формы. Однако лишь на 14 матричных настоек имеются фармакопейные статьи, хотя основополагающая статья «Настойки матричные гомеопатические» носит временный характер.

На виды сырья, по разным причинам не включенные в издание Государственной фармакопеи, действуют устаревшие ГОСТы и получившие в последние годы широкое распространение фармакопейные статьи предприятий. По традиции при изготовлении матричных настоек обычно пользуются либо Руководством В.Швабе, которое не является официальным, либо Немецкой гомеопатической фармакопеей, где приведено более 20 методик, учитывающих особенности исходного лекарственного растительного сырья.

Определение подлинности сырья по внешним и морфологическим признакам достаточно достоверно и является основополагающим принципом его стандартизации, хотя многие авторы рассматривают эти признаки как товароведческие характеристики.

Что касается матричных настоек, то такие общие параметры, как органолептические показатели, содержание спирта, экстрактивных веществ и золы, больше относятся к технологическим параметрам и не содержат информации о химическом составе веществ, экстрагируемых из растения. Наличие большинства биологически активных веществ в матричной настойке обычно только фиксируется, а их количественное определение предусматривается только в случае заведомо токсичных соединений. Корреляция между химическим составом биологически активных веществ и фармакологической активностью лекарственного препарата отсутствует. Несмотря на то, что с каждым годом появляется все больше публикаций по клиническим испытаниям эффективности гомеопатических препаратов, систематические исследования физико-химических и фармакологических свойств самих препаратов и их взаимосвязи еще не стали нормой.

Для потенций выше 6D обычные методы химического анализа практически неприменимы (чувствительность методов не позволяет), а для потенций выше 12С нужны совсем другие подходы и другие методы. Согласно современным представлениям об энергоинформационном механизме действия гомеопатических лекарственных средств, в высоких потенциях работает не материальная составляющая, как в аллопатических лекарствах, а информация о ней. Достаточно общепринятым является мнение о том, что в процессе изготовления гомеопатических препаратов специфически изменяется структура водно-спиртового раствора, которая в дальнейшем и является носителем лечебных свойств.

К настоящему времени накоплен значительный объем знаний по химическому составу и фармакологическим свойствам лекарственных растений, который позволяет с большим основанием оценить перспективы новых видов ЛРС в качестве источников сырья и новые возможности аналитического контроля.

В рамках Евросоюза уже с 1981 г. действует система единых научных принципов контроля лекарственных препаратов, основными критериями которой являются качество, безопасность и эффективность. Основу составляют три базовых стандарта (правила): надлежащей производственной (GMP), лабораторной (GLP) и клинической (GCP) практики. Требования GMP не являются догмой и могут дополняться и изменяться. Такими изменениями стали принятые позднее правила надлежащей аптечной практики (GPP) и надлежащей производственной практики для гомеопатии (Homeopathic GMP). Есть Европейская гомеопатическая фармакопея. При вступлении в ВТО эти документы приобретут для России юридическую силу.

Особое внимание уделяется безопасности лекарственных средств. К необходимости резкого ужесточения требований к детальному исследованию побочных эффектов потенциальных лекарственных веществ пришли в конце 90-х годов прошлого века, когда обнаружилось, что использование беременными женщинами препарата Талидомид в качестве снотворного средства привело к рождению детей с уродливыми органами. Препарат попал под запрет, а его дополнительное исследование показало, что Талидомид (как химическое вещество) представлял собой смесь оптически активных энантиомеров, из которых (+)R-изомер действительно обладает снотворным действием и нетоксичен, а его (-)S форма вызывает тератогенный эффект.

В специальной литературе достаточно много публикаций на тему, как методы экстракции и хроматографии используются для анализа лекарственного растительного сырья. Если опустить подробности, то сначала группы биологически активных веществ отделяются от сопутствующих соединений, а затем в этих группах методами физико-химического анализа, включая ВЭЖХ, МС, ВЭЖХ-МС, ЯМР-спектроскопию, проводят качественное и количественное определение индивидуальных веществ. Особенно целесообразно так поступать в тех случаях, когда в сырье присутствуют активно действующие вещества, которые являются смесью близких по структуре соединений установленного химического строения и не отличаются по фармакологической активности. В дальнейшем по методике, разработанной для сырья, следует проводить соответствующий контроль и на всех остальных стадиях производства конечного продукта. Такой подход полностью согласуется с системой стандартизации и сертификации лекарственных веществ в странах Евросоюза и правилами GMP для гомеопатии, поскольку аналитические методики гармонизированы. Для крупных фармацевтических фирм, которые действительно могут обеспечить такой постадийный контроль производства, начиная с выращивания лекарственного сырья на специальных площадках и его сбора в установленные сроки и заканчивая получением целевого препарата, вопросы стандартизации, оценки подлинности и качества оказываются решенными, так что потребителю достается продукт, соответствующий определенным требованиям. Ведь контролю подлежат те показатели, которые заложены в технологическом регламенте производства и не более того.

Другое дело, когда возникает необходимость оценить достоверность и качество препарата «по этикетке». Здесь возникает масса трудностей, основными из которых является сложный химический состав любого растительного средства и препаратов на его основе. В отличие от аллопатических лекарств, где идентификации подлежат несколько соединений известного химического строения, в лекарственных препаратах таких соединений сотни, и надо выбрать, по какому из них проводить идентификацию. При этом надо совершенно отчетливо представлять себе, в какой мере вещество, выбранное в качестве критерия оценки подлинности лекарственного сырья, характерно именно для данного вида сырья, не встречается ли оно среди других видов, а если встречается, как отличить один вид от другого. По этой причине анализ растительного сырья представляет собой исключительно сложную задачу, которую можно решить только при наличии современного приборного обеспечения.

При первичной оценке подлинности лекарственного растительного сырья лишь незначительную часть биологически активных веществ удается идентифицировать известными приемами, используя цветные качественные реакции или образование осадка при действии определенных реагентов, поскольку часто этому препятствуют другие химические вещества, которые приходится рассматривать как посторонние примеси.

Используя Государственный стандартный образец (ГСО) и метод хроматографии в тонком слое или на бумаге, можно с достаточно высокой уверенностью судить о наличии того или иного соединения в матричной настойке или экстракте конкретного растения. Дополнительное подтверждение идентичности можно получить методом люминесценции, сравнивая окраску пятен в УФ-свете до и после обработки хромогенными реагентами.

Из литературных данных известно, что флюоресцируют в УФ-свете:

• сердечные гликозиды — оттенками желтого, зеленого и голубого цветов;
• простые фенолы, кумарины — голубым, синим, фиолетовым, зеленым и желтым цветами;
• большинство хромонов и лигнанов — желтым или желто-зеленым цветом;
• флавоны, флавонол-3-гликозиды, флаваноны, халконы — коричневым цветом;
• флавонолы и их 7-гликозиды — желтым или желто-зеленым цветами;
• ксантоны — оранжевым цветом;
• катехины — бесцветным и голубым цветом;
• антраценпроизводные — розовым, красным, оранжевым, желтым цветами;
• некоторые алкалоиды: цитизин — фиолетовым, берберин — желто-зеленым цветом;
• витамин К1 — красным, но под действием УФ-лучей быстро разрушается и флуоресценция переходит в зеленую.

Таким образом, например, установлен аминокислотный состав препаратов Chelidonium, фенольных соединений в матричных настойках Thuja и т.д.

Предлагаемый подход успешно проверен на ряде представителей лекарственного растительного сырья, которые являются предметом систематических исследований, проводимых в ФНКЭЦТ МДЛ. С использованием метода тонкослойной хроматографии и денситометра «Сорбфил» было проведено исследование матричных настоек, полученных из растений семейства Asteraceae рода Artemisia (полынь горькая, обыкновенная и полынь божье дерево), семейства Polygonaceae рода Poligonum (горец птичий, перечный и почечуйный), семейства Hypericaceae рода Hypericum (зверобой продырявленный, зверобой пятнистый), семейства Urticaceae рода Urtica (крапива двудомная, крапива жгучая) и др.

В сравнительном аспекте проверено более 25 растворителей и подвижных фаз, рекомендованных разными авторами для успешного разделения внутри отдельных групп биологически активных веществ и установлено, что последовательная экстракция лекарственного растительного сырья (или сухого остатка после упаривания матричной настойки) позволяет зафиксировать очень большое количество различных активных веществ, соотношение которых (назовем его гармоникой) в каждой фракции специфично для данного вида сырья. Эти гармоники могут дополнить метод микроскопии информацией к подтверждению достоверности растительного сырья, т.к. являются характеристическим признаком конкретного лекарственного растительного сырья.

На примере спиртовых экстрактов боярышника производства четырех разных фирм и гомеопатического препарата Гиперикум Д3, приобретенного в трех разных аптеках г. Москвы, мы подтвердили возможность применения предлагаемого подхода для установления подлинности лекарственного растительного сырья. В качестве эталона для сравнения были использованы матричные настойки, приготовленные нами из свежего или сухого сырья, и Гиперикум Д3, полученный по методу Корсакова разведением соответствующей матричной настойки дистиллированной водой. Положение основных зон и их окраска внутри каждого вида оказались идентичными.

Таким образом, сочетание методов последовательной селективной экстракции, тонкослойной или бумажной хроматографии и люминесцентного анализа закладывает основы нового методологического подхода к успешному решению проблем стандартизации лекарственного растительного сырья и качества лекарственных препаратов на его основе.

Подписано в печать

26.12.2006

---