---
title: "\"ГОСТ Р ИСО 16000-36-2021. Национальный стандарт Российской Федерации. Воздух замкнутых помещений. Часть 36. Стандартный метод оценки снижения содержания культивируемых бактерий воздухоочистителями с использованием испытательной камеры\""
number: "ГОСТ Р ИСО 16000-36-2021"
issuer: "Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-iso-16000-36-2021"
---

## "ГОСТ Р ИСО 16000-36-2021. Национальный стандарт Российской Федерации. Воздух замкнутых помещений. Часть 36. Стандартный метод оценки снижения содержания культивируемых бактерий воздухоочистителями с использованием испытательной камеры"

# "ГОСТ Р ИСО 16000-36-2021. Национальный стандарт Российской Федерации. Воздух замкнутых помещений. Часть 36. Стандартный метод оценки снижения содержания культивируемых бактерий воздухоочистителями с использованием испытательной камеры"

(утв. и введен в действие Приказом Росстандарта от 03.09.2021 N 915-ст)

> [!IMPORTANT]
> Документ [введен](#p100010) в действие с 01.01.2022.


<a id="p100001"></a>Утвержден и введен в действие
Приказом Федерального агентства
по техническому регулированию
и метрологии
от 3 сентября 2021 г. N 915-ст

<a id="p100002"></a>**НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**

<a id="p100003"></a>**ВОЗДУХ ЗАМКНУТЫХ ПОМЕЩЕНИЙ**

<a id="p100004"></a>**ЧАСТЬ 36**

<a id="p100005"></a>**СТАНДАРТНЫЙ МЕТОД ОЦЕНКИ СНИЖЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ**
**БАКТЕРИЙ ВОЗДУХООЧИСТИТЕЛЯМИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ**
**ИСПЫТАТЕЛЬНОЙ КАМЕРЫ**

<a id="p100006"></a>Indoor air. Part 36. Standard method for assessing
the reduction rate of culturable airborne bacteria by air
purifiers using a test chamber

<a id="p100007"></a>**(ISO 16000-36:2018, IDT)**

<a id="p100008"></a>**ГОСТ Р ИСО 16000-36-2021**

<a id="p100009"></a>ОКС 13.040.20

<a id="p100010"></a>Дата введения
1 января 2022 года


### <a id="p100011"></a>Предисловие


<a id="p100012"></a>1 ПОДГОТОВЛЕН Акционерным обществом "Научно-исследовательский институт охраны атмосферного воздуха" (АО "НИИ Атмосфера") на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии стандарта, указанного в [пункте 4](#p100015)
<a id="p100013"></a>2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 457 "Качество воздуха"
<a id="p100014"></a>3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 3 сентября 2021 г. N 915-ст
<a id="p100015"></a>4 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ИСО 16000-36:2018 "Воздух замкнутых помещений. Часть 36. Стандартный метод оценки снижения содержания культивируемых бактерий воздухоочистителями с использованием испытательной камеры" (ISO 16000-36:2018 "Indoor air - Part 36: Standard method for assessing the reduction rate of culturable airborne bacteria by air purifiers using a test chamber", IDT).
<a id="p100016"></a>При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им национальные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном [приложении ДА](#p100305)
<a id="p100017"></a>**5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ**

<a id="p100018"></a>Правила применения настоящего стандарта установлены в статье 26 Федерального закона от 29 июня 2015 г. N 162-ФЗ "О стандартизации в Российской Федерации". Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего года) информационном указателе "Национальные стандарты", а официальный текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)


### <a id="p100019"></a>Введение


<a id="p100020"></a>Микробная среда важна для здоровья людей, особенно в связи с увеличением времени, проводимого в помещении.
<a id="p100021"></a>Для снижения содержания микроорганизмов в воздухе помещений используют специализированные воздухоочистители.
<a id="p100022"></a>Эффективность воздухоочистителей для уменьшения содержания микроорганизмов, находящихся в воздухе, может быть исследована в испытательных камерах при постоянной температуре и относительной влажности воздуха.

<a id="p100023"></a>ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - Испытание, приведенное в настоящем стандарте, должен выполнять квалифицированный персонал, обученный и сертифицированный для работы с методиками, связанными с микроорганизмами. Тест-штамм бактерии золотистый стафилококк является условно-патогенным для человека и животных. Необходимо соблюдать национальные и международные процедуры безопасности при работе с инфекционными биоматериалами, чтобы предотвратить любое загрязнение оборудования, рабочего места или окружающей среды. Экспертизу и подготовку культур следует проводить в боксе микробиологической безопасности II класса.


### <a id="p100024"></a>1 Область применения


<a id="p100025"></a>Настоящий стандарт устанавливает метод оценки способности воздухоочистителей снижать содержание культивируемых бактерий в воздухе.
<a id="p100026"></a>Испытание применяют к воздухоочистителям, используемым в отдельных помещениях.


### <a id="p100027"></a>2 Нормативные ссылки


<a id="p100028"></a>В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты. Для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного стандарта, для недатированных - последнее издание (включая все изменения):
<a id="p100029"></a>ISO 3696, Water for analytical laboratory use - Specification and test methods (Вода для аналитического лабораторного использования. Спецификация и методы испытаний)
<a id="p100030"></a>ISO 16000-9:2006, Indoor air - Part 9: Determination of the emission of volatile organic compounds from building products and furnishing - Emission test chamber method (Воздух замкнутых помещений. Часть 9. Определение выделения летучих органических соединений строительными и отделочными материалами. Метод с использованием испытательной камеры)


### <a id="p100031"></a>3 Термины и определения


<a id="p100032"></a>В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями.
<a id="p100033"></a>ИСО и МЭК ведут терминологические базы данных для использования в стандартизации по следующим адресам:
- <a id="p100034"></a>Платформа онлайн-просмотра ИСО: доступна на https://www.iso.org/obp;
- <a id="p100035"></a>Электропедия МЭК: доступна на http://www.electropedia.org/.
<a id="p100036"></a>3.1 воздухоочиститель (air purifier): Устройство с электрическим питанием, которое в основном состоит из вентилятора и набора компонентов, обладающих способностью улавливать и/или (частично или полностью) уничтожать загрязнители воздуха.
<a id="p100037"></a>3.2 колониеобразующие единицы; КОЕ (colony forming unit, cfu): Единица, в которой выражается количество культивируемых бактерий [(3.3)](#p100039).
<a id="p100038"></a>[ЕН 13098: 2000, модифицирован]
<a id="p100039"></a>3.3 бактерия (bacteria): Прокариотический, одноклеточный, микроскопический организм с пептидогликановой клеточной стенкой.
<a id="p100040"></a>3.4 фоновое содержание (background concentration): Содержание культивируемых бактерий [(3.3)](#p100039) в воздухе внутри испытательной камеры перед испытанием.
<a id="p100041"></a>3.5 естественная скорость снижения (natural decay rate): Скорость снижения содержания культивируемых бактерий [(3.3)](#p100039), которая измеряется путем сравнения содержания бактерий сразу после распыления бактериальной суспензии внутри камеры с содержанием, подсчитанным через определенное время (время испытания) без запуска воздухоочистителя [(3.1)](#p100036).
<a id="p100042"></a>*Примечание* - Естественная скорость снижения выражается в процентах.

<a id="p100043"></a>3.6 скорость снижения содержания бактерий (bacterial reduction rate): Скорость снижения содержания культивируемых бактерий [(3.3)](#p100039), которая измеряется путем сравнения содержания бактерий сразу после распыления бактериальной суспензии внутри камеры с содержанием, подсчитанным после определенного времени работы (времени испытания) воздухоочистителя [(3.1)](#p100036).
<a id="p100044"></a>*Примечание* - Скорость снижения содержания бактерий выражается в процентах.

<a id="p100045"></a>3.7 осаждение (impaction): Отбор бактерий [(3.3)](#p100039) в воздухе путем инерционного разделения на твердой поверхности агара.


### <a id="p100046"></a>4 Основные принципы


<a id="p100047"></a>Эффективность воздухоочистителей проверяют, применяя распыление бактериальных суспензий внутри испытательной камеры при постоянной температуре и относительной влажности воздуха. Эффективность рассчитывают по скорости снижения содержания культивируемых бактерий в воздухе в течение определенного периода времени с учетом однородности и естественной скорости снижения бактерий.


### <a id="p100048"></a>5 Оборудование и материалы



#### <a id="p100049"></a>5.1 Оборудование


##### <a id="p100050"></a>5.1.1 Испытательная камера

<a id="p100051"></a>Испытательная камера должна быть изготовлена из подходящего материала, выделяющего минимальное количество загрязняющих веществ, стойкого к коррозии, такого как нержавеющая сталь. Она должна обладать достаточной воздухонепроницаемостью.
<a id="p100052"></a>При подборе испытательной камеры следует учитывать дальнейшее размещение в ней воздухоочистителя. Минимальный объем должен превышать 8 м3 и обычно составляет от 15 м3 до 30 м3.
<a id="p100053"></a>Внутри испытательной камеры устанавливают блок HEPA-фильтра для очистки воздуха от частиц, блок кондиционирования воздуха для контроля температуры и влажности и систему для очистки воздуха. В частности, для больших испытательных камер применяют вентилятор для равномерного распределения бактерий.
<a id="p100054"></a>Воздушная среда в условиях испытаний должна быть чистой и свободной от микробных загрязнений. Она должна иметь подходящую систему контроля окружающей среды для поддержания постоянной температуры и влажности. Для достижения этой цели испытательная камера должна включать следующее:
- <a id="p100055"></a>систему для удаления загрязнения и поддержания стерильного состояния внутри камеры, такую как УФ-лампа;
- <a id="p100056"></a>средство для перемещения предметов в камеру и из нее без перекрестного загрязнения (может включать в себя специальную систему, такую как перчаточный бокс);
- <a id="p100057"></a>устройство для управления снаружи системами внутри камеры;
- <a id="p100058"></a>установку для генерирования аэрозоля тест-штамма бактерий внутри камеры и обеспечения однородности распределения бактерий (может быть достигнуто путем распыления аэрозоля через специальный вход, соединенный с распылительной насадкой в камере, с вентилятором для обеспечения однородного распределения бактерий внутри камеры);
- <a id="p100059"></a>систему кондиционирования воздуха внутри камеры, способную поддерживать заданную температуру и относительную влажность; система кондиционирования воздуха должна быть отключена во время испытания;
- <a id="p100060"></a>установку для использования потока воздуха обратного давления для промывки камеры после испытания;
- <a id="p100061"></a>индикатор для отображения основных параметров окружающей среды испытания, включая скорость потока, температуру и относительную влажность;
- <a id="p100062"></a>фильтр для предотвращения загрязнения при вентиляции.
<a id="p100063"></a>Система с использованием испытательной камеры показана на [рисунке 1](#p100066).

<a id="p100064"></a> ![5 Оборудование и материалы](https://i.bukva.ai/fYlMD6zN/img_0.png) 

<a id="p100065"></a>1 - воздухоочиститель; 2 - воздухозаборник
воздухоочистителя; 3 - 3A, 3B, 3C расположение импакторов;
4 - подставка для воздухоочистителя; 5 - ввод суспензии;
6 - осушитель; 7 - распылитель; 8 - фильтр (для подачи
чистого воздуха); 9 - нагнетательный насос;
10 - испытательная камера

<a id="p100066"></a>Рисунок 1 - Принципиальная схема системы с использованием
испытательной камеры

<a id="p100067"></a>Примеры фотографий испытательной камеры приведены в [приложении A](#p100196).
<a id="p100068"></a>В соответствии с ИСО 16000-9, 8.1:
- <a id="p100069"></a>температура испытания и допустимый диапазон изменения должны составлять (23 +/- 2) °C;
- <a id="p100070"></a>влажность при испытании и допустимый диапазон изменения должны составлять (50 +/- 5)%.
<a id="p100071"></a>Кроме того, испытание можно проводить в других условиях. Эти условия должны быть задокументированы.
<a id="p100072"></a>После каждого испытания внутреннее пространство испытательной камеры следует очищать с помощью УФ-лампы, 70% этанола [(5.1.12)](#p100086) или с использованием других методов очистки, чтобы предотвратить загрязнение после испытания.

##### <a id="p100073"></a>5.1.2 Распылитель

<a id="p100074"></a>Распылитель должен быть способен распылять питательную среду на частицы (от 0,05 до 5 мкм), чтобы выдавать, насколько это возможно, отдельные бактериальные частицы. Он включает в себя насос, чтобы создать определенное давление воздуха для распыления, блок подачи чистого воздуха и осушитель для удаления избытка воды из образованной питательной среды.

##### <a id="p100075"></a>5.1.3 Импактор для отбора проб бактерий

<a id="p100076"></a>Способ разделения, приведенный в настоящем стандарте, применим только для относительно низких содержаний культивируемых бактерий и небольших испытательных камер вместимостью, например 8 м3.
<a id="p100077"></a>Начальное содержание должно быть ниже верхнего предела обнаружения метода отбора проб. Для разделения с пробоотборником на 300 отверстий и объемом отбираемой пробы 100 дм3 или 50 дм3 верхний предел обнаружения составляет приблизительно 1,6 x 104 КОЕ/м3 или приблизительно 3,2 x 104 КОЕ/м3, соответственно (299 из 300 возможных колоний).
<a id="p100078"></a>5.1.4 Подставка для расположения импактора на необходимой высоте отбора пробы.
<a id="p100079"></a>5.1.5 Автоклав с регулируемой температурой, с установленной температурой (121 +/- 3) °C и давлением (103 +/- 5) кПа.
<a id="p100080"></a>5.1.6 Инкубатор с регулируемой температурой, с установленной температурой (36 +/- 2) °C.
<a id="p100081"></a>5.1.7 Морозильная камера с регулируемой температурой, с установленной температурой (-70 +/- 10) °C.

##### <a id="p100082"></a>5.1.8 Бокс микробиологической безопасности, класс II.


##### <a id="p100083"></a>5.1.9 Весы, с точностью +/- 0,01 г.


##### <a id="p100084"></a>5.1.10 Бактериологическая петля, диаметром 4 мм, стерильная.

<a id="p100085"></a>5.1.11 Чашки Петри, вентилируемые, стерильные, диаметром от 90 мм до 100 мм.
<a id="p100086"></a>5.1.12 Дезинфицирующее средство, изопропанол или этанол (объемная доля 70%).
<a id="p100087"></a>5.1.13 pH-метр, с точностью +/- 0,2 единицы.

##### <a id="p100088"></a>5.1.14 Секундомер.


#### <a id="p100089"></a>5.2 Материалы


##### <a id="p100090"></a>5.2.1 Тест-штаммы бактерии


###### <a id="p100091"></a>5.2.1.1 Золотистый стафилококк АТСС 6538.


###### <a id="p100092"></a>5.2.1.2 Микрококк лютеус АТСС 10240.

<a id="p100093"></a>Для определенных задач могут быть использованы другие бактерии. Все используемые штаммы должны быть перечислены в протоколе испытаний.

##### <a id="p100094"></a>5.2.2 Питательные среды и реагенты


###### <a id="p100095"></a>5.2.2.1 Общие положения

<a id="p100096"></a>Для приготовления питательных сред и реагентов используют ингредиенты однородного качества и химические вещества аналитической степени чистоты. Подготавливают питательные среды с дистиллированной или деионизированной водой, соответствующей качеству 3 ИСО 3696 и не содержащей веществ, препятствующих росту бактерий. Или же используют готовую среду, и строго следуют инструкциям производителя.

###### <a id="p100097"></a>5.2.2.2 Питательный бульон

<a id="p100098"></a>Мясной экстракт 3,0 г.
<a id="p100099"></a>Пептон 10,0 г.
<a id="p100100"></a>Хлорид натрия 5,0 г.
<a id="p100101"></a>Вода 1 000 см3.
<a id="p100102"></a>Растворяют ингредиенты в 1 000 см3 дистиллированной или деионизированной воды. Регулируют pH с помощью гидроксида натрия или соляной кислоты. Конечный pH должен соответствовать 7,0 - 7,2 при 25 °C. Стерилизуют в автоклаве при (121 +/- 3) °C в течение 15 мин. Хранят при (5 +/- 3) °C не более одного месяца.

###### <a id="p100103"></a>5.2.2.3 Питательный агар

<a id="p100104"></a>Мясной экстракт 3,0 г.
<a id="p100105"></a>Пептон 10,0 г.
<a id="p100106"></a>Хлорид натрия 5,0 г.
<a id="p100107"></a>Вода 1 000 см3.
<a id="p100108"></a>Агар 15,0 г.
<a id="p100109"></a>Растворяют ингредиенты в 1 000 см3 дистиллированной или деионизированной воды при нагревании. Регулируют pH с помощью гидроксида натрия или соляной кислоты. Конечный pH должен соответствовать 7,0 - 7,2 при 25 °C. Стерилизуют в автоклаве при (121 +/- 3) °C в течение 15 мин. Хранят при (5 +/- 3) °C не более одного месяца.

###### <a id="p100110"></a>5.2.2.4 Физраствор

<a id="p100111"></a>Хлорид натрия 8,5 г.
<a id="p100112"></a>Вода 1 000 см3.
<a id="p100113"></a>Физраствор готовят путем растворения 8,5 г хлорида натрия в 1 000 см3 дистиллированной или деионизированной воды. Стерилизуют в автоклаве при (121 +/- 3) °C в течение 20 мин. Хранят не более 12 мес.


### <a id="p100114"></a>6 Получение чистых и рабочих культур тест-штамма бактерий



#### <a id="p100115"></a>6.1 Получение и поддержание чистой культуры

<a id="p100116"></a>Лиофилизированную эталонную культуру тест-бактерий следует увлажнять в соответствии с инструкциями производителя. Переносят культуру в коническую колбу, содержащую определенный объем питательной бульонной среды [(5.2.2.2)](#p100097). Далее культивируют в инкубаторе [(5.1.6)](#p100080), осторожно встряхивая, в течение (18 +/- 2) ч при (36 +/- 2) °C. К бактериальной суспензии добавляют тот же объем 20% (объемная доля) стерильного глицерина или 10% (объемная доля) диметилсульфоксида (ДМСО) и хорошо перемешивают для получения суспензии 10% (объемная доля) глицерина или 5% (объемная доля) ДМСО. Аликвоты объемом примерно 0,5 см3 переносят в пластиковые пробирки и хранят при (-70 +/- 10) °C в морозильной камере [(5.1.7)](#p100081) не более двух лет.

#### <a id="p100117"></a>6.2 Приготовление и поддержание рабочих культур тест-бактерий на агаровых пластинах

<a id="p100118"></a>Рабочую культуру тест-бактерий готовят из чистой культуры [(6.1)](#p100115). Замороженную чистую культуру выстаивают до комнатной температуры (от 15 до 30) °C, и засевают бактериальную суспензию в чашку с питательным агаром [(5.2.2.3)](#p100103) таким образом, чтобы получились отдельные колонии. После культивирования чашки хранят при (5 +/- 3) °C не более одного месяца.

#### <a id="p100119"></a>6.3 Приготовление суспензии рабочей культуры

<a id="p100120"></a>Засеивают (50 +/- 5) см3 питательного бульона [(5.2.2.2)](#p100097) в конической колбе объемом 300 см3 с одной - пятью колониями рабочей культуры [(6.2)](#p100117) из чашек с агаром и выдерживают при легком встряхивании в инкубаторе в течение (18 +/- 2) ч при (36 +/- 2) °C.
<a id="p100121"></a>Для испытания получают содержание от 1,0 x 109 до 9,0 x 109 КОЕ/см3 (что эквивалентно 300 "отверстиям" в 300 крышках импакторов, если было отобрано 100 дм3). Если содержание тест-бактерий в суспензии составляет более 1,0 - 3,2 x 103 КОЕ/см3, суспензию разбавляют в 10 раз физраствором [(5.2.2.4)](#p100110). Суспензию культуры бактерий хранят при (5 +/- 3) °C и используют в течение 4 ч.
<a id="p100122"></a>Чтобы проверить содержание бактерий в суспензии, приготовленную суспензию засеивают на питательную среду агара при 10-кратном разбавлении, а после инкубации при (36 +/- 2) °C в течение (18 - 24) ч подсчитывают колонии на агаровых пластинах.


### <a id="p100123"></a>7 Методика испытания



#### <a id="p100124"></a>7.1 Общие положения

<a id="p100125"></a>Предотвращают любое бактериальное загрязнение путем подготовки и обработки тест-бактерий и использования бокса микробиологической безопасности класса II [(5.1.8)](#p100082).
<a id="p100126"></a>Испытание проводят в две стадии. На стадии 1 (см. [7.2](#p100129)) измеряют содержание тест-бактерий без использования воздухоочистителя, затем на стадии 2 (см. [7.3](#p100157)) измеряют содержание тест-бактерий с использованием воздухоочистителя.
<a id="p100127"></a>Испытание действительно только в том случае, если выполнены условия, изложенные в [8.2](#p100171), и испытание [(стадия 2)](#p100157) было выполнено в период времени, когда скорость снижения на [стадии 1](#p100129) оставалась ниже 50% (см. [приложение B](#p100206)). Если эти условия не выполняются, испытание ([стадии 1](#p100129) и [2](#p100157)) следует повторить.
<a id="p100128"></a>Испытание проводят последовательно с обеими тест-бактериями. Суспензия соответствующей тест-бактерии, используемая на [стадии 2](#p100157), соответствует используемой на [стадии 1](#p100129).

#### <a id="p100129"></a>7.2 Стадия 1 - Измерение содержания культивируемых тест-бактерий, Ci, без использования воздухоочистителя


##### <a id="p100130"></a>7.2.1 Общие положения

<a id="p100131"></a>На стадии 1 содержание тест-бактерий измеряют без использования воздухоочистителя.

##### <a id="p100132"></a>7.2.2 Подготовка воздухоочистителя и испытательной камеры

<a id="p100133"></a>Воздухоочиститель помещают в центр камеры. Переднюю поверхность воздухоочистителя осторожно протирают два или три раза кусочком марли или ватного шарика, пропитанного 70% этанолом [(5.1.12)](#p100086), и полностью высушивают. Если этанол не подходит для материалов поверхности кондиционера или вызывает другие разрушения, которые могут повлиять на результаты испытаний, используют другой метод очистки.
<a id="p100134"></a>Температуру и относительную влажность внутри испытательной камеры следует поддерживать на уровне:
- <a id="p100135"></a>температура: (23 +/- 2) °C;
- <a id="p100136"></a>относительная влажность: (50 +/- 5)%.
<a id="p100137"></a>Перед испытанием внутреннее пространство камеры очищают, например с помощью УФ-лампы.
<a id="p100138"></a>Помещают в испытательную камеру три или более импактора, содержащих агаровые пластины с питательной средой. Импакторы обеззараживают 70%-ным этанолом [(5.1.12)](#p100086) или другим подходящим методом.
<a id="p100139"></a>*Примечание* - Для подтверждения однородного распределения бактерий в испытательных камерах более высокого объема используют измерение в нескольких точках (больше трех).


##### <a id="p100140"></a>7.2.3 Измерение фонового содержания бактерий в испытательной камере

<a id="p100141"></a>Фоновое содержание измеряют после помещения воздухоочистителя и до распыления тест-бактерий в камеру. Измеряют содержание культивируемых бактерий в центре камеры с помощью импактора, который содержит подготовленную агаровую пластину. Объем пробы составляет 1000 дм3. Агаровую пластину снимают с импактора, и после инкубации чашек при (36 +/- 2) °C в течение (18 - 24) ч подсчитывают колонии.
<a id="p100142"></a>Фоновое содержание бактерий не должно превышать 1 КОЕ/м3. При обнаружении более высокого содержания камеру проветривают, очищают, например с помощью УФ-лампы и повторяют измерение.

##### <a id="p100143"></a>7.2.4 Распыление суспензии тест-бактерий

<a id="p100144"></a>В распылитель добавляют определенное количество бактериальной суспензии [(6.2)](#p100117). Количество суспензии бактерий может варьироваться в зависимости от используемого распылителя. Суспензию бактерий распыляют с помощью распылителя под давлением 3 x 105 Па (т.е. около 50 дм3/мин). Размер распылительной насадки составляет 0,3 мм. Время распыления варьируют в зависимости от объема камеры. Чтобы обеспечить равномерное распределение бактерий внутри камеры, используют перемешивающий вентилятор.
<a id="p100145"></a>Примечания
<a id="p100146"></a>1 Если объем суспензии бактерий составляет менее 100 см3, проведение распыления затрудняется (в зависимости от размера распылителя).
<a id="p100147"></a>2 Более подробная информация об однородности бактерий в воздухе испытательной камеры приведена в [приложении C](#p100283).

<a id="p100148"></a>Распылитель очищают и стерилизуют в соответствии с инструкциями производителя.

##### <a id="p100149"></a>7.2.5 Измерение исходного содержания культивируемых бактерий внутри испытательной камеры после распыления

<a id="p100150"></a>Исходное содержание культивируемых бактерий внутри камеры после распыления суспензии тест-бактерий [(6.3)](#p100119) измеряют с использованием трех импакторов с помещенными в них агаровыми пластинами. Перед использованием импакторы обеззараживают 70%-ным этанолом или другим подходящим способом. Время измерения и объем варьируют в зависимости от ожидаемого содержания бактерий. Исходное содержание должно составлять от 1,0 x 104 до 3,2 x 104 КОЕ/м3.
<a id="p100151"></a>*Примечание* - Агаровые пластины снимают с импакторов в перчаточном боксе. Для измерения содержания бактерий по истечении определенного времени в импакторы с помощью перчаточного бокса вводят новые агаровые пластины. Загруженные агаровые пластины (с закрытыми крышками) хранят в камере до конца испытания.


##### <a id="p100152"></a>7.2.6 Измерение содержания культивируемых бактерий внутри испытательной камеры через определенный промежуток времени

<a id="p100153"></a>Для определения естественного снижения содержания бактерий измеряют содержание культивируемых бактерий внутри испытательной камеры после определенного периода времени без воздухоочистителя. Период времени выбирают в зависимости от предполагаемого времени работы воздухоочистителя. Естественную скорость снижения измеряют более трех раз.
<a id="p100154"></a>Агаровые пластины выдерживают в инкубаторе при (36 +/- 2) °C в течение (18 - 24) ч, после чего рассчитывают количество культивируемых бактерий в соответствии с [8.1](#p100164).

##### <a id="p100155"></a>7.2.7 Обработка после испытания

<a id="p100156"></a>Удаляют загрязнение после испытания, внутреннее пространство испытательной камеры обеззараживают с помощью УФ-лампы, распылением 70%-ного этанола [(5.1.12)](#p100086) или другим методом обеззараживания.

#### <a id="p100157"></a>7.3 Стадия 2 - Измерение содержания культивируемых тест-бактерий, Ct, после работы воздухоочистителя

<a id="p100158"></a>Подготавливают испытательную камеру и измеряют фоновое содержание бактерий, как описано в [7.2.1](#p100132) и [7.2.2](#p100140).
<a id="p100159"></a>Распыляют суспензию тест-бактерий (см. [7.2.3](#p100143)) и измеряют исходное содержание бактерий внутри камеры с помощью импакторов (см. [7.2.4](#p100149)).
<a id="p100160"></a>После измерения исходного содержания включают воздухоочиститель. Время работы может быть изменено в зависимости от характеристик воздухоочистителя. Время работы очистителя воздуха не должно превышать 30 мин.
<a id="p100161"></a>Исходное содержание измеряют на высоте воздухозаборника воздухоочистителя с помощью импакторов в трех разных положениях (см. [7.2.5](#p100152)).
<a id="p100162"></a>Все агаровые пластины выдерживают в инкубаторе при (36 +/- 2) °C в течение (18 - 24) ч, после чего рассчитывают количество культивируемых бактерий в соответствии с [8.1](#p100164).


### <a id="p100163"></a>8 Расчет и выражение результатов



#### <a id="p100164"></a>8.1 Расчет содержания культивируемых в воздухе бактерий

<a id="p100165"></a>Содержание бактерий в воздухе рассчитывают путем подсчета колоний бактерий на инкубированных агаровых пластинах с применением коэффициента компенсации для соответствующего импактора и объема отобранного воздуха

<a id="p100166"></a> $C = N \cdot \frac{1}{V}$ , (1)

<a id="p100167"></a>где C - содержание бактерий, извлеченных на 1 м3 (КОЕ/м3);
<a id="p100168"></a>N - усредненное число колоний на каждой из трех агаровых пластинок с коэффициентом компенсации, если применимо, КОЕ;
<a id="p100169"></a>V - объем пробы, м3.
<a id="p100170"></a>Если на агаровых пластинках не появляется колония, результат выражают как "< 1 КОЕ". Например, "< 10 КОЕ/м3" указывает на то, что в инкубированных агаровых пластинках не обнаружено бактериальной колонии после отбора 100 дм3 воздуха.

#### <a id="p100171"></a>8.2 Условия для достоверного испытания

<a id="p100172"></a>Начальное содержание внутри камеры сразу после распыления и перед эксплуатацией испытательного устройства должно составлять от 1,0 x 104 КОЕ/м3 до 3,2 x 104 КОЕ/м3. Кроме того, к исходному содержанию бактерий и содержанию бактерий после работы воздухоочистителя применяют формулу

<a id="p100173"></a> $\frac{(L_{max} - L_{min})}{L_{mean}} \leq 0,2$ , (2)

<a id="p100174"></a>где Lmax - максимальное содержание бактерий;
<a id="p100175"></a>Lmin - минимальное содержание бактерий;
<a id="p100176"></a>Lmean - среднее значение измеренного содержания бактерий.

#### <a id="p100177"></a>8.3 Скорость снижения содержания бактерий

<a id="p100178"></a>Скорость снижения содержания бактерий, R, рассчитывают по формуле

<a id="p100179"></a> $R = \frac{C_{i}^{*} - C_{t}^{*}}{C_{i}^{*}} = 1 - \frac{C_{t}^{*}}{C_{i}^{*}}$ , (3)

<a id="p100180"></a>где $C_{i}^{*}$ - нормированное содержание культивируемых бактерий через i часа без использования воздухоочистителя, определяется как C* = Ci/Ci,t = 0;
<a id="p100181"></a> $C_{t}^{*}$ - нормированное содержание культивируемых бактерий через i часа при работе воздухоочистителя, определяется как $C_{t}^{*} = C_{t}C_{t,t = 0}$ .


### <a id="p100182"></a>9 Протокол испытаний


<a id="p100183"></a>Протокол испытаний должен включать следующее:
- <a id="p100184"></a>наименование испытания;
- <a id="p100185"></a>используемые тест-штаммы бактерий;
- <a id="p100186"></a>объем испытательной камеры, название и расход используемого импактора;
- <a id="p100187"></a>условия испытаний, включая режим работы воздухоочистителя и время испытаний;
- <a id="p100188"></a>скорость снижения содержания бактерий в воздухе;
- <a id="p100189"></a>результат испытаний; снижение содержания бактерий должно быть указано с точностью до 0,1% (округление до одного знака после запятой);
- <a id="p100190"></a>все детали, необходимые для идентификации испытательной лаборатории;
- <a id="p100191"></a>ФИО и подпись(и) лица (лиц), отвечающего за испытание;
- <a id="p100192"></a>информация о продукте (заказчик, модель и т.д.).


### <a id="p100193"></a>10 Контроль качества


<a id="p100194"></a>Испытательная лаборатория должна принимать меры по обеспечению качества, которые должны быть задокументированы и предоставлены в любое время.





<a id="p100195"></a>Приложение A
(справочное)

<a id="p100196"></a>**ИСПЫТАТЕЛЬНАЯ КАМЕРА**

<a id="p100197"></a> ![10 Контроль качества](https://i.bukva.ai/fYlMD6zN/img_1.jpg) 

<a id="p100198"></a>A - перчаточный бокс

<a id="p100199"></a>Рисунок A.1 - Основная камера с перчаточным боксом
(выделено красным прямоугольником) для внешнего управления



<a id="p100200"></a> ![10 Контроль качества](https://i.bukva.ai/fYlMD6zN/img_2.jpg) 

<a id="p100201"></a>Рисунок A.2 - Внешний вид испытательной камеры



<a id="p100202"></a> ![10 Контроль качества](https://i.bukva.ai/fYlMD6zN/img_3.jpg) 

<a id="p100203"></a>A - распылитель, B - ввод спрея, C - УФ-лампа

<a id="p100204"></a>Рисунок A.3 - Пример системы испытательной камеры





<a id="p100205"></a>Приложение B
(справочное)

<a id="p100206"></a>**ЕСТЕСТВЕННАЯ СКОРОСТЬ СНИЖЕНИЯ В СООТВЕТСТВИИ С РЕЖИМОМ**
**РАБОТЫ ВОЗДУХООЧИСТИТЕЛЯ**

<a id="p100207"></a>С целью подтверждения получения достоверных условий испытаний для воздухоочистителя в испытательной камере объемом 8 м3 была измерена естественная скорость снижения содержания бактерий в соответствии с рабочим режимом. К основным параметрам испытания относилась температура (23 +/- 2) °C, относительная влажность воздуха (50 +/- 5)%, время распыления 3 мин, импактор MAS 100 NS (Merck) <1>, пробоотборная насадка с отверстиями размером 300 мм x 0,6 мм и отбор воздуха импактором, при этом скорость отбора проб воздуха импактором составила 50 дм3/мин. В качестве биоаэрозоля использовали споры тест-бактерии золотистый стафилококк АТСС 6538. Затем агаровые пластины выдерживали в инкубаторе при (36 +/- 2) °C. Воздухоочиститель работал без фильтров. Пример расхода в соответствии с режимом работы приведен в [таблице B.1](#p100213).

<a id="p100208"></a>

---

<a id="p100209"></a><1> MAS 100 NS - это торговая марка продукта, поставляемого компанией Merck. Эта информация приведена для удобства пользователей данного документа и не является рекламой ИСО названного продукта. При подтверждении воспроизводимости данных могут быть использованы эквивалентные продукты.

<a id="p100210"></a>Результаты показывают, что испытания недостоверны, когда воздухоочиститель работает в сильном режиме, поскольку естественная скорость снижения превышает 50% через 30 мин (этот метод испытаний устанавливает время непрерывной работы воздухоочистителя равное 30 мин, см. [таблицу B.4](#p100263)). Когда воздухоочиститель работает в слабом и среднем режиме, результаты испытаний достоверны, поскольку естественная скорость снижения составляет менее 50% в течение 30 мин (см. [таблицу B.2](#p100223) и [таблицу B.3](#p100243)).
<a id="p100211"></a>Таким образом, воздухоочиститель должен работать в испытательной камере объемом 8 м3 в слабом или среднем режиме.

<a id="p100212"></a>Таблица B.1

<a id="p100213"></a>*Пример* расхода воздухоочистителя в зависимости
от режима работы


| <a id="p100214"></a>Режим работы | <a id="p100215"></a>Скорость потока, м/с |
| --- | --- |
| <a id="p100216"></a>Слабый | <a id="p100217"></a>От 1,1 до 1,6 |
| <a id="p100218"></a>Средний | <a id="p100219"></a>От 2,8 до 3,7 |
| <a id="p100220"></a>Сильный | <a id="p100221"></a>От 3,8 до 7,3 |


<a id="p100222"></a>Таблица B.2

<a id="p100223"></a>Содержание бактерий и естественная скорость снижения (режим
работы воздухоочистителя: слабый)


| <a id="p100224"></a>Время, мин | <a id="p100225"></a>0 | <a id="p100226"></a>10 | <a id="p100227"></a>20 | <a id="p100228"></a>30 | <a id="p100229"></a>40 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100230"></a>Содержание, КОЕ/м3 | <a id="p100231"></a>(3,2 +/- 0,2) x 104 | <a id="p100232"></a>(2,8 +/- 0,2) x 104 | <a id="p100233"></a>(2,1 +/- 0,1) x 104 | <a id="p100234"></a>(1,7 +/- 0,4) x 104 | <a id="p100235"></a>(1,1 +/- 0,2) x 104 |
| <a id="p100236"></a>Естественная скорость снижения, % | <a id="p100237"></a>- | <a id="p100238"></a>12,5 | <a id="p100239"></a>34,3 | <a id="p100240"></a>46,8 | <a id="p100241"></a>65,6 |


<a id="p100242"></a>Таблица B.3

<a id="p100243"></a>Содержание бактерий и естественная скорость снижения (режим
работы воздухоочистителя: средний)


| <a id="p100244"></a>Время, мин | <a id="p100245"></a>0 | <a id="p100246"></a>10 | <a id="p100247"></a>20 | <a id="p100248"></a>30 | <a id="p100249"></a>40 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100250"></a>Содержание, КОЕ/м3 | <a id="p100251"></a>(3,5 +/- 0,2) x 104 | <a id="p100252"></a>(3,0 +/- 0,2) x 104 | <a id="p100253"></a>(2,2 +/- 0,1) x 104 | <a id="p100254"></a>(1,8 +/- 0,2) x 104 | <a id="p100255"></a>(9,1 +/- 0,1) x 103 |
| <a id="p100256"></a>Естественная скорость снижения, % | <a id="p100257"></a>- | <a id="p100258"></a>14,2 | <a id="p100259"></a>37,1 | <a id="p100260"></a>48,5 | <a id="p100261"></a>71,7 |


<a id="p100262"></a>Таблица B.4

<a id="p100263"></a>Содержание бактерий и естественная скорость снижения (режим
работы воздухоочистителя: сильный)


| <a id="p100264"></a>Время, мин | <a id="p100265"></a>0 | <a id="p100266"></a>10 | <a id="p100267"></a>20 | <a id="p100268"></a>30 | <a id="p100269"></a>40 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100270"></a>Содержание, КОЕ/м3 | <a id="p100271"></a>(3,6 +/- 0,1) x 104 | <a id="p100272"></a>(2,6 +/- 0,3) x 104 | <a id="p100273"></a>(2,0 +/- 0,1) x 104 | <a id="p100274"></a>(1,6 +/- 0,1) x 104 | <a id="p100275"></a>(6,0 +/- 0,1) x 103 |
| <a id="p100276"></a>Естественная скорость снижения, % | <a id="p100277"></a>- | <a id="p100278"></a>27,7 | <a id="p100279"></a>44,4 | <a id="p100280"></a>55,5 | <a id="p100281"></a>82,7 |






<a id="p100282"></a>Приложение C
(справочное)

<a id="p100283"></a>**ОДНОРОДНОСТЬ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ БАКТЕРИЙ В ВОЗДУХЕ**
**ИСПЫТАТЕЛЬНОЙ КАМЕРЫ**

<a id="p100284"></a>В настоящем приложении представлены схема и результаты измерения однородного распределения бактерий в воздухе после распыления (см. [рисунок C.1](#p100288)). Содержание бактерий было измерено на трех уровнях высоты испытуемого пространства: выше центра, в центре и ниже центра. Импакторы были расположены в трех разных положениях, связанных с испытанным воздухоочистителем. Пример приведен в [таблице C.1](#p100290), при этом использовали тест-бактерии: золотистый стафилококк АТСС 6538 и микрококк лютеус АТСС 10240. Другими параметрами испытания были: температура (23 +/- 2) °C, относительная влажность воздуха (50 +/- 5)%, время распыления 3 мин, импактор MAS 100 NS (Merck), пробоотборная насадка с отверстиями 300 x 0,6 мм и отбор воздуха со скоростью 50 дм3/мин. Затем агаровые пластины выдерживали в инкубаторе при (36 +/- 2) °C.
<a id="p100285"></a>Содержание культивируемых бактерий в воздухе составляло примерно 3 x 104 КОЕ/м3 в каждой точке отбора проб. Таким образом, подтверждено, что находящиеся в воздухе бактерии были равномерно распределены в испытательной камере.

<a id="p100286"></a> ![10 Контроль качества](https://i.bukva.ai/fYlMD6zN/img_4.png) 

<a id="p100287"></a>1 - импактор; 2 - верх; 3 - центр; 4 - низ

<a id="p100288"></a>Рисунок C.1 - Расположение импактора на разной высоте
(выше центра, в центре и ниже центра) в испытательной камере
во время испытания на однородность бактерий в воздухе

<a id="p100289"></a>Таблица C.1

<a id="p100290"></a>*Пример* содержания бактерий в воздухе в зависимости
от точки отбора проб


<table>
<colgroup><col width="33%"><col width="33%"><col width="33%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100291"></a>Расположение импактора</td><td colspan="2"><a id="p100292"></a>Содержание бактерий в воздухе, КОЕ/м3</td></tr>
<tr><td><a id="p100293"></a>Золотистый стафилококк</td><td><a id="p100294"></a>Микрококк лютеус</td></tr>
<tr><td><a id="p100295"></a>Верх</td><td><a id="p100296"></a>(3,3 +/- 0,2) x 104</td><td><a id="p100297"></a>(3,0 +/- 0,1) x 104</td></tr>
<tr><td><a id="p100298"></a>Центр</td><td><a id="p100299"></a>(3,6 +/- 0,1) x 104</td><td><a id="p100300"></a>(3,2 +/- 0,2) x 104</td></tr>
<tr><td><a id="p100301"></a>Низ</td><td><a id="p100302"></a>(3,5 +/- 0,2) x 104</td><td><a id="p100303"></a>(2,9 +/- 0,2) x 104</td></tr>
</table>






<a id="p100304"></a>Приложение ДА
(справочное)

<a id="p100305"></a>**СВЕДЕНИЯ О СООТВЕТСТВИИ ССЫЛОЧНЫХ МЕЖДУНАРОДНЫХ СТАНДАРТОВ**
**НАЦИОНАЛЬНЫМ СТАНДАРТАМ**

<a id="p100306"></a>Таблица ДА.1


<table>
<colgroup><col width="26%"><col width="13%"><col width="61%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100307"></a>Обозначение ссылочного международного стандарта</td><td><a id="p100308"></a>Степень соответствия</td><td><a id="p100309"></a>Обозначение и наименование соответствующего национального стандарта</td></tr>
<tr><td><a id="p100310"></a>ISO 3696</td><td><a id="p100311"></a>IDT</td><td><a id="p100312"></a>ГОСТ Р 52501-2005 (ИСО 3696:1987) "Вода для лабораторного анализа. Технические условия"</td></tr>
<tr><td><a id="p100313"></a>ISO 16000-9:2006</td><td><a id="p100314"></a>IDT</td><td><a id="p100315"></a>ГОСТ Р ИСО 16000-9-2009 "Воздух замкнутых помещений. Часть 9. Определение выделения летучих органических соединений строительными и отделочными материалами. Метод с использованием испытательной камеры"</td></tr>
<tr><td colspan="3"><a id="p100316"></a><a id="p100317"></a>Примечание - В настоящей таблице использовано следующее условное обозначение степени соответствия стандартов:<br>- IDT - идентичные стандарты.</td></tr>
</table>







## <a id="p100318"></a>Библиография



| <a id="p100319"></a>[1] | <a id="p100320"></a>ISO 846, Пластмассы. Оценка действия микроорганизмов |
| --- | --- |
| <a id="p100321"></a>[2] | <a id="p100322"></a>ISO 4225, Качество воздуха. Общие аспекты. Словарь |
| <a id="p100323"></a>[3] | <a id="p100324"></a>ISO 22196, Измерение антибактериальной активности пластмасс и других непористых поверхностей |
| <a id="p100325"></a>[4] | <a id="p100326"></a>ASTM E 2149, Стандартный метод испытаний для определения антимикробной активности иммобилизованных антимикробных агентов в условиях динамического контакта |
| <a id="p100327"></a>[5] | <a id="p100328"></a>EN 13098:2000, Атмосфера на рабочем месте. Руководство по измерению переносимых по воздуху микроорганизмов и эндотоксинов |
| <a id="p100329"></a>[6] | <a id="p100330"></a>JIS L 1902, Testing for antibacterial activity and efficacy on textile products |
| <a id="p100331"></a>[7] | <a id="p100332"></a>XP B44-200 (2011-05-01), Épurateurs d'air autonomes pour applications tertiaires et résidentielles - Méthode d'essais - Performances intrinsèques |







<table>
<colgroup><col width="50%"><col width="50%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100333"></a>УДК 504.3:006.354</td><td><a id="p100334"></a>ОКС 13.040.20</td></tr>
<tr><td colspan="2"><a id="p100335"></a>Ключевые слова: воздух замкнутых помещений, воздухоочиститель, тест-штаммы бактерий, культивирование, испытания, испытательная камера, отбор проб, импактор</td></tr>
</table>




<a id="p100336"></a>

---