ГОСТ ISO/TS 22115-2025. Межгосударственный стандарт. Жиры и масла животные и растительные. Разделение классов липидов с помощью капиллярной газовой хроматографии (метод «отпечатка пальцев»)
(введен в действие Приказом Росстандарта от 09.10.2025 № 1176-ст)
Примечание
Текст данного документа приведен с учетом поправки, опубликованной в «ИУС», № 6, 2026. Документ введен в действие с 01.05.2026.
Введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 9 октября 2025 г. № 1176-ст
ЖИРЫ И МАСЛА ЖИВОТНЫЕ И РАСТИТЕЛЬНЫЕ
РАЗДЕЛЕНИЕ КЛАССОВ ЛИПИДОВ С ПОМОЩЬЮ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ (МЕТОД «ОТПЕЧАТКА ПАЛЬЦЕВ»)
Animal and vegetable fats and oils. Separation of lipid classes by capillary gas chromatography (fingerprint method)
Предисловие
Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены»
Сведения о стандарте
1 ПОДГОТОВЛЕН Некоммерческой организацией «Ассоциация производителей и потребителей масложировой продукции» на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии документа, указанного в пункте 5
2 ВНЕСЕН Межгосударственным техническим комитетом по стандартизации МТК 238 «Масла растительные и продукты их переработки»
3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 30 сентября 2025 г. № 189-П)
4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 9 октября 2025 г. № 1176-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO/TS 22115-2025 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 мая 2026 г.
5 Настоящий стандарт идентичен международному документу ISO/TS 22115:2021 «Жиры и масла животные и растительные. Разделение классов липидов с помощью капиллярной газовой хроматографии (метод „отпечатка пальцев“)» [«Animal and vegetable fats and oils — Separation of lipid classes by capillary gas chromatography (fingerprint method)», IDT].
Международный документ разработан Подкомитетом SC 11 «Животные и растительные жиры и масла» Технического комитета ISO/TC 34 «Пищевые продукты» Международной организации по стандартизации (ISO) в сотрудничестве с Техническим комитетом CEN/TC 307 «Семена масличных культур, растительные и животные жиры и масла и их побочные продукты. Методы отбора проб и анализ» Европейского комитета по стандартизации (CEN) в соответствии с Соглашением о техническом сотрудничестве между ISO и CEN (Венское соглашение).
При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им межгосударственные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА
7 Некоторые элементы настоящего стандарта могут быть объектом патентных прав. Международная организация по стандартизации (ISO) не несет ответственность за идентификацию каких-либо или всех патентных прав
Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.
В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге «Межгосударственные стандарты»
1 Область применения
Настоящий стандарт устанавливает метод полуколичественного анализа образцов животных и растительных жиров и масел, и масло-/жиросодержащих продуктов (жировые погоны дезодорации).
Применяется для идентификации масел, жиров и масло-/жиросодержащих продуктов с целью получения информации об основных (например, триглицеридах) и второстепенных (например, стеролах, эфирах стеролов, токоферолах, эфирах восков, жирных спиртах, глицерине) компонентах в рамках одного анализа. Для проведения достоверного количественного анализа заранее определенных классов соединений лучше использовать специальные методы.
Данный метод также может быть использован в качестве эффективного инструмента качественной идентификации для относительного сравнения составов образцов.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использована нормативная ссылка на следующий стандарт [для датированной ссылки применяют только указанное издание ссылочного стандарта, для недатированной — последнее издание (включая все изменения)]:
ISO 661, Animal and vegetable fats and oils — Preparation of test sample (Жиры и масла животные и растительные. Приготовление пробы для испытания)
3 Термины и определения
В настоящем стандарте отсутствуют термины и определения.
4 Сущность метода
Гидроксилированные соединения превращаются в силильные производные. Данная реакция не влияет на неполярные (негидроксилированные) соединения, также присутствующие в образце. Подготовленный образец анализируют методом газовой хроматографии (ГХ) на высокотемпературной капиллярной колонке с малой толщиной пленки, с инжектором для ввода проб непосредственно в колонку и пламенно-ионизационным детектором.
Для количественного определения используют внутренние стандарты (1,2,3-тридеканоилглицерол), а коэффициенты отклика вычисляют по стандартному веществу для каждого класса соединений.
5 Реактивы
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ — Следует уделить особое внимание правилам обращения с опасными веществами. Необходимо соблюдать технические, организационные и личные меры безопасности.
При проведении анализа, если не указано иное, используют только реактивы признанной аналитической степени чистоты и дистиллированную или деминерализованную воду или воду эквивалентной чистоты.
5.1 Смесь реагентов для силилирования: метилимидазол (CAS 616-47-7) и N-метил-N-триметилсилилгептафторбутирамид (MSHFBA) (CAS 53296-64-3).
Готовят смесь реагентов для силилирования: 1 см3 MSHFBA + 50 мм3 метилимидазола.
Примечание - Запрещается хранить данную смесь более одной недели по причине гигроскопичности. Силильные производные крайне чувствительны к влаге.
5.2 Стандартные вещества <1>.
<1> Подходящие поставщики: Sigma-Aldrich (www.sigmaaldrich.com) или Larodan (www.larodan.com). Эта информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не является рекламной поддержкой продукции данных поставщиков.
5.2.1 Олеиновая кислота (CAS 112-80-1).
5.2.2 1-моноолеин (CAS 111-03-5).
5.2.3 1,3-диолеин (CAS 2465-32-9).
5.2.4 Триолеин (CAS 122-32-7).
5.2.5 Тридеканоилглицерол (CAS 621-71-6).
5.2.6 Эйкозанол (CAS 629-96-9).
5.2.7 \alpha - \text{токоферол} (CAS 10191-41-0), \gamma - \text{токоферол} (CAS 54-28-4), \delta - \text{токоферол} (CAS 119-13-1).
5.2.8 Холестерол (CAS 57-88-5).
5.2.9 Холестерол пальмитат (CAS 601-34-3).
5.2.10 Сквален (CAS 111-02-4).
5.2.11 Смесь растительных стеролов <2> (CAS 474-67-9, 474-62-4, 83-48-7, 83-46-5).
<2> Подходящий поставщик: Larodan (www.larodan.com). Эта информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не является рекламной поддержкой продукции данного поставщика.
5.3 Изооктан, чистота 99% минимум, для анализа следовых количеств органических веществ.
5.4 Хлороформ для хроматографии.
6 Оборудование
Используют стандартное лабораторное оборудование, в том числе перечисленное ниже.
6.1 Мерная колба вместимостью 100 и 10 см3.
6.2 Термостат, позволяющий поддерживать температуру (103 +/- 1) °C.
6.3 Конические стеклянные виалы вместимостью 10 см3.
6.4 Газовый хроматограф для капиллярных колонок, оснащенный инжектором для ввода проб непосредственно в колонку или эквивалентным устройством, с программируемой температурой термостата хроматографической колонки и пламенно-ионизационным детектором (ПИД).
6.5 Капиллярная колонка из плавленого кварца, с возможностью программирования до 400 °C («высокотемпературный» тип), для которой рекомендуются следующие характеристики: 100% диметилполисилоксана или 95% диметил/5% дифенилполисилоксана неподвижной фазы, длина 30 м, внутренний диаметр 0,32 мм или 0,25 мм, толщина пленки 0,1 мкм. Допускается использование других колонок с аналогичной полярностью и селективностью.
6.6 Микрошприц вместимостью от 5 до 10 мм3, предназначенный для введения на колонку в газовой хроматографии.
6.7 Лабораторные весы, точность взвешивания 0,001 г.
6.8 Ультразвуковая ванна.
6.9 Испаритель в токе азота.
7 Пробы
7.1 Отбор проб
Отбор проб не является частью метода, установленного в настоящем стандарте. Рекомендуемый метод отбора проб приведен в ISO 5555 [1].
В лабораторию следует направлять представительную пробу. Она не должна быть повреждена или изменена во время транспортирования или хранения.
7.2 Приготовление пробы для испытания
Готовят пробу для испытания в соответствии с ISO 661.
8 Проведение испытания
8.1 Приготовление внутреннего стандарта, тридеканоилглицерола (5.2.5), c = 20 мг/см3
Взвешивают 200 мг тридеканоилглицерола (5.2.5) в мерной колбе вместимостью 10 см3, доводят до метки изооктаном (5.3).
8.2 Приготовление индивидуальных стандартных растворов для определения коэффициентов отклика
Для каждого вещества готовят стандартный раствор в изооктане (5.3) концентрацией 5 мг/см3 (см. таблицу 1), чтобы определить коэффициент отклика для каждого класса соединений.
Список стандартных веществ для определения коэффициентов отклика
| Определяемый класс соединений | Стандартные вещества |
|---|---|
| Спирты | Эйкозанол (5.2.6) |
| Свободные жирные кислоты | Олеиновая кислота (5.2.1) |
| Углеводороды | Сквалены (5.2.10) |
| Моноглицериды | Моноолеин (5.2.2) |
| Токоферолы | \alpha - \text{токоферол} (5.2.7) |
| Стеролы | Холестерол (5.2.8) |
| Диглицериды | Диолеин (5.2.3) |
| Эфиры стеролов | Холестерол пальмитат (5.2.9) |
| Триглицериды | Триолеин (5.2.4) |
8.3 Силилирование стандартных веществ
Добавляют 100 мм3 раствора внутреннего стандарта, тридеканоилглицерола (5.2.5), c = 20 мг/см3, и 200 мм3 раствора индивидуального стандартного вещества (каждый компонент отдельно) в виалу для силилирования (6.3) и выпаривают растворитель досуха в токе азота (6.9). Добавляют 100 мм3 смеси реагентов для силилирования (5.1). Выдерживают при температуре 103 °C в течение 15 мин в термостате (6.2), затем вносят 5 см3 изооктана (5.3).
При приготовлении следующего раствора рекомендуется проверить точность метода (необязательно).
В мерной колбе вместимостью 100 см3 (6.1) взвешивают приблизительно 50 мг каждого стандартного вещества (5.2) с 50 мг раствора внутреннего стандарта, тридеканоилглицерола (5.2.5), и доводят до 100 см3 хлороформом (5.4).
Такой раствор можно хранить при температуре окружающей среды в течение шести месяцев.
Чтобы раствор оставался однородным в течение долгого времени, перед использованием его необходимо поместить в ультразвуковую ванну на 10 мин.
Помещают в виалу для силилирования (6.3) 0,5 см3 раствора и высушивают в токе азота (6.9). Добавляют 100 мм3 смеси реагентов для силилирования (5.1). Выдерживают при температуре 103 °C в течение 15 мин в термостате (6.2), затем вносят 10 см3 изооктана (5.3).
8.4 Приготовление пробы
Если образец имеет твердую консистенцию при комнатной температуре, необходимо полностью расплавить его в термостате при температуре 103 °C (6.2) и гомогенизировать.
8.5 Раствор пробы
В мерной колбе вместимостью 10 см3 (6.1) взвешивают приблизительно 100 мг пробы. Добавляют ровно 1 см3 раствора внутреннего стандарта (см. 8.1) и доводят до 10 см3 изооктаном (5.3).
Если проба не полностью растворима в изооктане, вместо него можно использовать хлороформ или толуол.
8.6 Силилирование пробы
0,5 см3 раствора пробы (см. 8.5) помещают в виалу для силилирования (6.3) и выпаривают растворитель досуха в токе азота (6.9). Добавляют 100 мм3 смеси реагентов для силилирования (5.1). Выдерживают при температуре 103 °C в течение 15 мин в термостате (6.2), затем вносят 10 см3 изооктана (5.3).
8.7 Газовая хроматография
Колонку устанавливают в газовый хроматограф и проверяют рабочие условия, вводя растворитель изооктан (5.3). Базовая линия должна быть прямой с небольшим положительным отклонением. Если отклонение велико, следует перейти к кондиционированию колонки. Если отклонение отрицательное, следует проверить соединения колонки.
Если колонка используется впервые, необходимо ее кондиционировать, нагревая ее в термостате с градиентом температуры до 370 °C (в зависимости от температуры термостата хроматографа, выбранной для анализа) в течение 4 ч. Температуру необходимо поддерживать в течение 2 ч.
В качестве предварительной колонки рекомендуется использовать пустую капиллярную колонку из плавленого кварца длиной 1 м и диаметром 0,5 мм. Условия для газового хроматографа, приведенные в таблице 2, дают приемлемые хроматограммы. Если инжектор позволяет использовать режим удаления растворителя, то рекомендуется его использовать.
Условия для газовой хроматографии
| Функция | Условия |
|---|---|
| Колонка | HP1 (длина — 30 м, внутренний диаметр — 0,25 мм, толщина пленки — 0,10 мкм) |
| Температура термостата | Начальная температура — 60 °C, программируют со скоростью 20 °C/мин до 170 °C, 10 °C/мин до 360 °C (выдержка 10 мин) |
| Газ-носитель | Линейная скорость 87,7 см/с (используют газ-носитель H2) |
| Температура детектора | 370 °C |
| Инжектор | Ввод пробы непосредственно в колонку в режиме холодного инжектора (Cold on-column) |
| Объем вводимой пробы | 1 мм3 раствора, приготовленного в 8.6 |
Температурную программу и скорость потока газа-носителя оптимизируют таким образом, чтобы получить хроматограммы, аналогичные представленным на рисунках A.1 - A.10.
8.8 Идентификация и интеграция пиков
Идентифицируют пики с помощью стандартного раствора, приготовленного по 8.2. Типичные хроматограммы представлены в приложении A. Относительное время удерживания определяемых классов соединений приведено в таблице 3.
Если интересующий класс соединений присутствует в виде одного пика, используют интегрирование по обычным критериям. Для различных классов соединений не всегда достигается их разделение, поскольку могут присутствовать некоторые минорные (второстепенные) соединения. В этом случае рекомендуется интегрировать группу пиков вместе или объединить в общую сумму.
Ориентировочное относительное время удерживания определяемых соединений или класса соединений
9 Результаты испытания
Готовят пробу для испытания в соответствии с ISO 661.
9.1 Расчет коэффициента отклика
Рассчитывают коэффициент отклика F для каждого соединения, представляющего класс x, как указано в формуле
F_{x} = \frac{A_{IS} \cdot m_{x}}{m_{IS} \cdot A_{x}} , (1)
где Fx — коэффициент отклика соединения x, связанного с классом X;
mIS — масса тридеканоилглицерола (внутренний стандарт), мг;
mx — масса стандартного вещества, взятого для приготовления индивидуального стандартного раствора x, мг;
AIS — площадь пика тридеканоилглицерола (внутренний стандарт);
Ax — площадь пика стандартного вещества, взятого для приготовления индивидуального стандартного раствора x.
Примеры ориентировочных коэффициентов откликов приведены в таблице 4.
Если коэффициенты отклика сильно отличаются от приведенных в таблице 4, например, это может произойти в отношении сквалена, рекомендуется использовать альтернативный внутренний стандарт, химически сходный с рассматриваемым соединением.
Ориентировочные коэффициенты отклика стандартных веществ по отношению к тридеканоилглицеролу (внутренний стандарт)
9.2 Количественный расчет
Массовую долю соединений из класса X рассчитывают по формуле (2)
w_{x} = \frac{F_{x} \cdot m_{IS} \cdot \sum A_{x} \cdot 100}{A_{IS} \cdot m} , (2)
где wx — массовая доля соединений класса X (мг/100 мг);
Fx — коэффициент отклика соединения x, для класса этого соединения;
mIS — масса тридеканоилглицерола (внутренний стандарт), мг;
AIS — площадь тридеканоилглицерола (внутренний стандарт);
\sum A_{x} — сумма площадей соединений класса X;
10 Точность
10.1 Результаты межлабораторных испытаний
Результаты межлабораторных испытаний по определению точности метода приведены в приложении B. Значения, полученные на основании этих межлабораторных испытаний, не могут применяться к диапазонам значений и матрицам, отличным от приведенных.
10.2 Повторяемость
Абсолютное расхождение между результатами двух независимых единичных испытаний, полученными при использовании одного и того же метода, на идентичном испытуемом материале, в одной лаборатории, одним оператором, на одном и том же оборудовании, в пределах короткого промежутка времени, будет не более чем в 5% случаев превышать значение предела повторяемости r, приведенное в таблице B.1.
10.3 Воспроизводимость
Абсолютное расхождение между результатами двух единичных испытаний, полученными при использовании одного и того же метода, на идентичном испытуемом материале, в разных лабораториях, разными операторами, на различном оборудовании, будет не более чем в 5% случаев превышать значение предела воспроизводимости R, приведенное в таблице B.1.
11 Протокол испытаний
Протокол испытаний должен включать:
a) всю информацию, необходимую для полной идентификации пробы;
b) используемый метод отбора проб, если он известен;
c) используемый метод анализа вместе со ссылкой на настоящий стандарт;
d) все подробности, не указанные в этом стандарте или рассматриваемые как необязательные, а также данные о любых инцидентах, которые могли повлиять на результаты анализа;
e) полученные результаты анализа;
f) или окончательный результат, если соблюдены условия повторяемости.
См. примеры хроматограмм на рисунках A.1 - A.10.
Рисунок A.1 — Хроматограмма стандартного раствора
X — минуты; DAGs — диглицериды; FFA — свободные жирные кислоты; TAGs — триглицериды
Рисунок A.2 — Хроматограмма пробы оливкового масла из жмыха
X — минуты; DAGs — диглицериды; FFA — свободные жирные кислоты; TAGs — триглицериды
| Время удерживания (мин) | Соединение |
|---|---|
| 10,534 | Олеиновая кислота |
| 10,767 | Стеариновая кислота |
| 18,667 | Тридеканоилглицерол (IS) |
| 22,514 — 23,382 | Диглицериды |
| 27,643 — 28,663 | Триглицериды |
Рисунок A.3 — Хроматограмма пробы сырого масла ши
X — минуты; DAGs — диглицериды; TAGs — триглицериды
| Время удерживания (мин) | Соединение |
|---|---|
| 18,671 | Тридеканоилглицерол (IS) |
| 22,618 — 23,631 | Диглицериды |
| 27,967 — 28,669 | Триглицериды |
Рисунок A.4 — Хроматограмма пробы рафинированного масла ши
X — минуты; 1 — эфиры стеринов
Рисунок A.5 — Хроматограмма пробы жировых погонов дезодорации соевого масла
Рисунок A.6 — Хроматограмма пробы жировых погонов дезодорации рапсового масла
X — минуты; TAGs — триглицериды; 1 — жирные спирты
| Время удерживания (мин) | Соединение |
|---|---|
| 5,0 — 7,3 | Жирные спирты |
| 8,304 | Лауриновая кислота |
| 9,452 | Пальмитиновая кислота |
| 10,533 | Олеиновая кислота |
| 18,668 | Тридеканоилглицерол (IS) |
| 26,965 — 28,629 | Триглицериды |
Рисунок A.7 — Хроматограмма пробы жировых погонов дезодорации кокосового масла
X — минуты; DAGs — диглицериды; MAGs — моноглицериды; TAGs — триглицериды
Рисунок A.8 — Хроматограмма пробы жировых погонов дезодорации пальмового масла
| Время удерживания (мин) | Соединение |
|---|---|
| 8,294 | Лауриновая кислота |
| 8,861 | Миристиновая кислота |
| 9,448 | Пальмитиновая кислота |
| 9,941 | Стеариновая кислота |
| 10,532 | Олеиновая кислота |
| 18,669 | Тридеканоилглицерол (IS) |
Рисунок A.9 — Хроматограмма пробы жировых погонов дезодорации пальмового олеина
| Время удерживания (мин) | Соединение |
|---|---|
| 8,113 | Октадекан |
| 10,542 | Олеиновая кислота |
| 13,322 | C16-моноглицериды |
| 14,481 | C18-моноглицериды |
| 18,684 | Тридеканоилглицерол (IS) |
| 22,535 | C18-диглицериды |
Рисунок A.10 — Хроматограмма пробы эмульгатора (содержание моноглицерида — 90%)
РЕЗУЛЬТАТЫ МЕЖЛАБОРАТОРНОГО ИСПЫТАНИЯ
Международное совместное испытание при участии 6 лабораторий (из 19 подавших заявок) в 5 странах было проведено на пяти образцах масла. Испытание было организовано Инновационным Центром Bunge Katalin Ko"vári и полученные результаты были подвергнуты статистическому анализу в соответствии с ISO 5725-1 [2] и ISO 5725-2 [3] для предоставления точных данных, приведенных в таблицах B.1 - B.9.
Сводные статистические результаты свободных жирных кислот для образцов A — E
Сводные статистические результаты глицеролов (сумма моно-, ди- и триглицеролов) для образцов A — E
Сводные статистические результаты \alpha - \text{токоферолов} для образцов A — E
Сводные статистические результаты \gamma - \text{токоферолов} для образцов A — E
Сводные статистические результаты \delta - \text{токоферолов} для образцов A — E
Сводные статистические результаты брассикастерола для образцов A — E
Сводные статистические результаты кампестерола для образцов A — E
Сводные статистические результаты стигмастерола для образцов A — E
Сводные статистические результаты \beta - \text{ситостеролов} для образцов A — E
СВЕДЕНИЯ О СООТВЕТСТВИИ ССЫЛОЧНЫХ МЕЖДУНАРОДНЫХ СТАНДАРТОВ МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫМ СТАНДАРТАМ
| Обозначение ссылочного международного стандарта | Степень соответствия | Обозначение и наименование соответствующего межгосударственного стандарта |
| ISO 661 | IDT | ГОСТ ISO 661-2016 «Жиры и масла животные и растительные. Приготовление пробы для испытания» |
| Примечание — В настоящей таблице использовано следующее условное обозначение степени соответствия стандарта: - IDT — идентичный стандарт. | ||
БИБЛИОГРАФИЯ
| УДК 665.3:006.354 | МКС 67.200.10 | IDT |
| Ключевые слова: масла растительные, жиры животные, разделение классов липидов, метод «отпечатка пальцев» | ||