---
title: "\"ГОСТ ISO 6647-1-2015. Межгосударственный стандарт. Рис. Определение содержания амилозы. Часть 1. Контрольный метод\""
number: "ГОСТ ISO 6647-1-2015"
issuer: "Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/standart-gost-iso-6647-1-2015"
---

## "ГОСТ ISO 6647-1-2015. Межгосударственный стандарт. Рис. Определение содержания амилозы. Часть 1. Контрольный метод"

# "ГОСТ ISO 6647-1-2015. Межгосударственный стандарт. Рис. Определение содержания амилозы. Часть 1. Контрольный метод"

(введен в действие Приказом Росстандарта от 24.07.2015 N 962-ст)

> [!IMPORTANT]
> Документ [введен](#p100011) в действие с 1 июля 2016 года.


<a id="p100001"></a>Введен в действие
Приказом Федерального
агентства по техническому
регулированию и метрологии
от 24 июля 2015 г. N 962-ст

<a id="p100002"></a>**МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ**

<a id="p100003"></a>**РИС**

<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ АМИЛОЗЫ**

<a id="p100005"></a>**ЧАСТЬ 1**

<a id="p100006"></a>**КОНТРОЛЬНЫЙ МЕТОД**

<a id="p100007"></a>Rice. Determination of amylose content.
Part 1. Reference method

<a id="p100008"></a>**(ISO 6647-1:2007, IDT)**

<a id="p100009"></a>**ГОСТ ISO 6647-1-2015**

<a id="p100010"></a>МКС 67.060

<a id="p100011"></a>Дата введения
1 июля 2016 года


### <a id="p100012"></a>Предисловие


<a id="p100013"></a>Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены"


### <a id="p100014"></a>Сведения о стандарте


<a id="p100015"></a>1 ПОДГОТОВЛЕН Открытым акционерным обществом "Всероссийский научно-исследовательский институт сертификации" (ОАО ВНИИС) на основе собственного аутентичного перевода на русский язык международного стандарта, указанного в [пункте 5](#p100044)
<a id="p100016"></a>2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт)
<a id="p100017"></a>3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 18 июня 2015 г. N 47)
<a id="p100018"></a>За принятие проголосовали:


| <a id="p100019"></a>Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97 | <a id="p100020"></a>Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97 | <a id="p100021"></a>Сокращенное наименование национального органа по стандартизации |
| --- | --- | --- |
| <a id="p100022"></a>Армения | <a id="p100023"></a>AM | <a id="p100024"></a>Минэкономики Республики Армения |
| <a id="p100025"></a>Беларусь | <a id="p100026"></a>BY | <a id="p100027"></a>Госстандарт Республики Беларусь |
| <a id="p100028"></a>Казахстан | <a id="p100029"></a>KZ | <a id="p100030"></a>Госстандарт Республики Казахстан |
| <a id="p100031"></a>Киргизия | <a id="p100032"></a>KG | <a id="p100033"></a>Кыргызстандарт |
| <a id="p100034"></a>Россия | <a id="p100035"></a>RU | <a id="p100036"></a>Росстандарт |
| <a id="p100037"></a>Таджикистан | <a id="p100038"></a>TJ | <a id="p100039"></a>Таджикстандарт |
| <a id="p100040"></a>Узбекистан | <a id="p100041"></a>UZ | <a id="p100042"></a>Узстандарт |


<a id="p100043"></a>4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 24 июля 2015 г. N 962-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 6647-1-2015 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2016 г.
<a id="p100044"></a>5 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 6647-1:2007 Rice - Determination of amylose content - Part 1: Reference method (Рис. Определение содержания амилозы. Часть 1. Контрольный метод).
<a id="p100045"></a>Международный стандарт разработан подкомитетом SC 4 "Зерновые и бобовые культуры" технического комитета по стандартизации ISO/TC 34 "Пищевые продукты" Международной организации по стандартизации (ISO).
<a id="p100046"></a>Перевод с английского языка (en).
<a id="p100047"></a>Официальный экземпляр международного стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, и международных стандартов, на которые даны ссылки, имеются в Федеральном информационном фонде технических регламентов и стандартов.
<a id="p100048"></a>Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным международным стандартам приведены в дополнительном [приложении ДА](#p100304).
<a id="p100049"></a>Степень соответствия - идентичная (IDT)
<a id="p100050"></a>**6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ**

<a id="p100051"></a>Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационном указателе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.


### <a id="p100052"></a>1 Область применения


<a id="p100053"></a>Настоящий стандарт устанавливает контрольный метод определения содержания амилозы в шлифованном, не пропаренном рисе. Метод применяют для риса, массовая доля амилозы в котором не менее 5%.
<a id="p100054"></a>Допускается применение метода для шелушеного риса, кукурузы, проса и других зерновых.


### <a id="p100055"></a>2 Нормативные ссылки


<a id="p100056"></a>Для применения настоящего стандарта необходимы следующие ссылочные документы. Для недатированных ссылок применяют последнее издание ссылочного документа (включая все его изменения).
<a id="p100057"></a>ISO 712 Зерновые и продукты из них. Определение содержания влаги. Контрольный метод (Cereals and cereal products. Determination of moisture content. Reference method)
<a id="p100058"></a>ISO 7301 Рис. Технические условия (Rice. Specification)
<a id="p100059"></a>ISO 8466-1 Качество воды. Калибрование и оценка аналитических методов и определение рабочих характеристик. Часть 1. Статистический метод оценки линейной калибровочной функции (Water quality. Calibration and evaluation of analytical methods and estimation of performance characteristics. Part 1: statistical evaluation of the linear calibration function)
<a id="p100060"></a>ISO 15914 Корма для животных. Ферментативное определение общего содержания крахмала (Animal feeding stuffs. Enzymatic determination of total starch content)


### <a id="p100061"></a>3 Термины и определения


<a id="p100062"></a>В настоящем стандарте применяют термины в соответствии с ISO 7301, а также следующие термины с соответствующими определениями:
<a id="p100063"></a>3.1 амилоза (amylose): Полисахарид, входящий в состав крахмала, макромолекулы которого имеют преимущественно линейную структуру.
<a id="p100064"></a>3.2 амилопектин (amylopectin): Полисахарид, входящий в состав крахмала, макромолекулы которого имеют разветвленную структуру.


### <a id="p100065"></a>4 Сущность метода


<a id="p100066"></a>Рис размалывают в муку тонкого помола, способствуя полному диспергированию и желатинизации, затем муку обезжиривают. Часть анализируемой пробы диспергируют в растворе гидроксида натрия, после чего добавляют раствор йода. Далее на спектрофотометре определяют оптическую плотность образовавшегося цветного комплекса при длине волны 720 нм.
<a id="p100067"></a>Массовую долю амилозы в пробе определяют по градуировочному графику, который строят на основе учета воздействия амилопектина на цвет амилозно-йодного комплекса анализируемого раствора с помощью растворов на основе смеси амилозы картофеля и амилопектина.
<a id="p100068"></a>*Примечание* - Настоящий метод определяет способность амилозы связывать йод. Определение проводят при длине волны 720 нм с целью уменьшения мешающего влияния амилопектина.


### <a id="p100069"></a>5 Реактивы


<a id="p100070"></a>Используют реактивы только признанной аналитической чистоты, если не установлено иное и только дистиллированную или деминерализованную воду, или воду эквивалентной чистоты.

#### <a id="p100071"></a>5.1 Метанол, с объемной долей 85%.


#### <a id="p100072"></a>5.2 Этанол, с объемной долей 95%.


#### <a id="p100073"></a>5.3 Растворы гидроксида натрия.


##### <a id="p100074"></a>5.3.1 Раствор гидроксида натрия, концентрацией 1 моль/дм3.


##### <a id="p100075"></a>5.3.2 Раствор гидроксида натрия, концентрацией 0,09 моль/дм3.


#### <a id="p100076"></a>5.4 Приготовление растворов, используемых для депротеинизации


##### <a id="p100077"></a>5.4.1 Раствор детергента

<a id="p100078"></a>Растворяют додецилбензолсульфонат натрия, чтобы получить раствор концентрации 20 г/дм3. Непосредственно перед использованием раствора добавляют сульфит натрия до конечной концентрации 2 г/дм3.
<a id="p100079"></a>5.4.2 Раствор гидроксида натрия для удаления протеина, концентрацией 3 г/дм3.

#### <a id="p100080"></a>5.5 Уксусная кислота, раствор концентрацией 1 моль/дм3.



#### <a id="p100081"></a>5.6 Раствор йода


<a id="p100082"></a>Взвешивают, с точностью до 5 мг, 2,000 г йодида калия в бюксе с крышкой. Добавляют воду в количестве, достаточном для формирования насыщенного раствора. Добавляют 0,200 г йода, взвешенного с точностью до 1 мг. Когда весь йод растворится, количественно переносят раствор в мерную колбу вместимостью 100 см3 [(6.6)](#p100105), доводят объем до метки водой и перемешивают.
<a id="p100083"></a>Свежий раствор готовят в день использования и хранят в защищенном от света месте.
<a id="p100084"></a>5.7 Стандартный раствор амилозы картофеля, не содержащий амилопектин, концентрацией 1 г/дм3.
<a id="p100085"></a>5.7.1 Обезжиривают амилозу картофеля нагреванием с метанолом [(5.1)](#p100071) с обратным холодильником в течение 4 - 6 ч в вытяжном шкафу при скорости пять-шесть капель в секунду.
<a id="p100086"></a>Амилоза картофеля должна быть очищена и проверена с помощью амперометрического или потенциометрического титрования. Некоторые препараты амилозы картофеля, имеющиеся в продаже, могут быть не очищены и давать недостоверные результаты значения массовой доли амилозы в пробах риса. Чистая амилоза должна связывать йод в количестве 19% - 20% собственной массы. Информация, касающаяся проверки чистоты амилозы, приведена в [приложении A](#p100189).
<a id="p100087"></a>5.7.2 Обезжиренную амилозу картофеля распределяют по пластинке и оставляют на два дня, чтобы добиться испарения остатков метанола и чтобы установилось равновесие влагосодержания.
<a id="p100088"></a>Аналогичным образом подготавливают амилопектин [(5.8)](#p100093) и анализируемые пробы [(8.1)](#p100113).
<a id="p100089"></a>5.7.3 Взвешивают [(6.9)](#p100108) (100 +/- 0,5) мг обезжиренной амилозы картофеля с равновесной влажностью в конической колбе вместимостью 100 см3 [(6.8)](#p100107). Осторожно добавляют 1 см3 этанола [(5.2)](#p100072), смывая со стенок колбы остатки амилозы. Добавляют 9 см3 раствора гидроксида натрия концентрацией 1 моль/дм3 [(5.3.1)](#p100074) и перемешивают. Затем смесь нагревают на кипящей водяной бане [(6.7)](#p100106) в течение 10 мин для диспергирования амилозы картофеля. Позволяют содержимому остыть до комнатной температуры и переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 [(6.6)](#p100105).
<a id="p100090"></a>Доводят объем до метки водой и энергично перемешивают.
<a id="p100091"></a>1 см3 приготовленного стандартного раствора содержит 1 мг амилозы картофеля.
<a id="p100092"></a>Когда анализируемые пробы, амилоза и амилопектин увлажнены при одинаковых условиях регулирование влажности не требуется, а результаты приводят на сухое вещество шлифованного риса. Если анализируемые пробы и контрольные пробы подготовлены при различных условиях, содержание влаги всех проб определяют в соответствии с требованиями ISO 712 и корректируют результаты.

#### <a id="p100093"></a>5.8 Стандартный раствор амилопектина, концентрацией 1 г/дм3.

<a id="p100094"></a>Раствор готовят из шлифованного клейкого (глютинозного) риса, содержащего крахмал с массовой долей амилопектина не менее 99%. Увлажняют шлифованный клейкий рис и размалывают в лабораторном блендере [(6.1)](#p100100) до конечного измельченного состояния. Удаляют протеин экстрагированием с раствором детергента [(5.4.1)](#p100077), или, в качестве альтернативы, с раствором гидроксида натрия [(5.4.2)](#p100079), промывают и затем обезжиривают посредством кипячения с метанолом [(5.1)](#p100071) с обратным холодильником, как описано в [5.7.1](#p100085). После удаления протеина наносят обезжиренный амилопектин на пластину и оставляют на два дня, чтобы добиться испарения остатков метанола и установления равновесия влагосодержания.
<a id="p100095"></a>Выполняют процедуру, изложенную в [5.7.3](#p100089), используя вместо амилозы амилопектин.
<a id="p100096"></a>1 см3 приготовленного стандартного раствора содержит 1 мг амилопектина.
<a id="p100097"></a>Способность амилопектина связывать йод должна быть менее 0,2% (рассчитывают, используя вместо амилозы амилопектин в соответствии с [приложением A](#p100189)).


### <a id="p100098"></a>6 Оборудование и химическая посуда


<a id="p100099"></a>Используют следующее лабораторное оборудование.

#### <a id="p100100"></a>6.1 Лабораторный блендер.

<a id="p100101"></a>6.2 Измельчитель, способный измельчать сырой шлифованный рис в муку, проходящую через сито с размером отверстий 150 - 180 мкм (100 - 80 меш). Рекомендуется мельница-циклон с 0,5-миллиметровым экраном.

#### <a id="p100102"></a>6.3 Сито, размер отверстий 150 - 180 мкм (100 - 80 меш).

<a id="p100103"></a>6.4 Спектрофотометр, с кюветами, длина оптического пути 1 см (как правило), обеспечивающий измерение оптической плотности при длине волны 720 нм.
<a id="p100104"></a>6.5 Аппарат для экстрагирования, с обратным холодильником, обеспечивающий нагревание раствора пробы в метаноле со скоростью циркуляции 5 - 6 капель в секунду.

#### <a id="p100105"></a>6.6 Мерные колбы вместимостью 100 см3.


#### <a id="p100106"></a>6.7 Водяная баня.


#### <a id="p100107"></a>6.8 Конические колбы вместимостью 100 см3.


#### <a id="p100108"></a>6.9 Аналитические весы, с точностью взвешивания 0,0001 г.



### <a id="p100109"></a>7 Отбор проб


<a id="p100110"></a>В лабораторию доставляют представительную пробу, которая не была повреждена или изменена в процессе транспортирования и хранения.
<a id="p100111"></a>Отбор проб не является частью метода, установленного настоящим стандартом. Рекомендуемый метод отбора проб приведен в [[3]](#p100327).


### <a id="p100112"></a>8 Проведение испытания



#### <a id="p100113"></a>8.1 Подготовка анализируемой пробы


<a id="p100114"></a>В мельнице [(6.2)](#p100101) измельчают не менее 10 г шлифованного риса в муку тонкого помола, которая пройдет через сито [(6.3)](#p100102).
<a id="p100115"></a>Муку обезжиривают с помощью нагревания с метанолом [(5.1)](#p100071) с обратным холодильником. Проводят процедуру, описанную в [5.7.1](#p100085).
<a id="p100116"></a>*Примечание* - Жиры конкурируют с йодом в формировании комплексного соединения с амилозой, обезжиривание рисовой муки эффективно снижает мешающее влияние жира. При использовании обезжиренных проб получают более высокие значения массовой доли амилозы.

<a id="p100117"></a>После обезжиривания муку наносят тонким слоем на пластину или предметное стекло и оставляют на два дня, чтобы добиться испарения остатков метанола и чтобы установилось равновесие влагосодержания в соответствии с [5.7](#p100084).
<a id="p100118"></a>ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - Необходимо соблюдение правил безопасности, в частности, необходимо использовать вытяжной шкаф при выпаривании метанола.


#### <a id="p100119"></a>8.2 Часть анализируемой пробы и приготовление анализируемого раствора


<a id="p100120"></a>Взвешивают [(6.9)](#p100108) (100 +/- 0,5) мг анализируемой пробы [(8.1)](#p100113) и помещают в коническую колбу вместимостью 100 см3 [(6.8)](#p100107), после чего осторожно добавляют 1 см3 этанола [(5.2)](#p100072), смывая частицы анализируемой пробы со стенок колбы. Добавляют 9 см3 раствора гидроксида натрия концентрацией 1 моль/дм3 [(5.3.1)](#p100074) и перемешивают. Затем смесь нагревают на водяной бане [(6.7)](#p100106) в течение 10 мин, чтобы добиться диспергирования крахмала. Раствору дают остыть до комнатной температуры и переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 [(6.6)](#p100105).
<a id="p100121"></a>Доводят объем до метки водой и энергично перемешивают.


#### <a id="p100122"></a>8.3 Приготовление раствора сравнения


<a id="p100123"></a>Раствор сравнения готовят таким же образом, как и для определения амилозы, используя аналогичные процедуры и реактивы аналогичного качества, однако, вместо анализируемого раствора используют 5 см3 раствора гидроксида натрия концентрацией 0,09 моль/дм3 [(5.3.2)](#p100075).


#### <a id="p100124"></a>8.4 Градуировочный график



##### <a id="p100125"></a>8.4.1 Приготовление серии градуировочных растворов

<a id="p100126"></a>Смешивают стандартные растворы амилозы картофеля [(5.7)](#p100084) и амилопектина [(5.8)](#p100093) и раствор гидроксида натрия концентрацией 0,09 моль/дм3 [(5.3.2)](#p100075) в соответствии с таблицей 1.

<a id="p100127"></a>Таблица 1


<table>
<colgroup><col width="32%"><col width="16%"><col width="18%"><col width="34%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100128"></a>Массовая доля амилозы в шлифованном рисе, %, на сухое вещество <a href="#p100156">&lt;*&gt;</a></td><td><a id="p100129"></a>Амилоза картофеля <a href="#p100084">(5.7)</a>, см3</td><td><a id="p100130"></a>Амилопектин <a href="#p100093">(5.8)</a>, см3</td><td><a id="p100131"></a>Раствор гидроксида натрия концентрацией 0,09 моль/дм3 <a href="#p100075">(5.3.2)</a>, см3</td></tr>
<tr><td><a id="p100132"></a>0</td><td><a id="p100133"></a>0</td><td><a id="p100134"></a>18</td><td><a id="p100135"></a>2</td></tr>
<tr><td><a id="p100136"></a>10</td><td><a id="p100137"></a>2</td><td><a id="p100138"></a>16</td><td><a id="p100139"></a>2</td></tr>
<tr><td><a id="p100140"></a>20</td><td><a id="p100141"></a>4</td><td><a id="p100142"></a>14</td><td><a id="p100143"></a>2</td></tr>
<tr><td><a id="p100144"></a>25</td><td><a id="p100145"></a>5</td><td><a id="p100146"></a>13</td><td><a id="p100147"></a>2</td></tr>
<tr><td><a id="p100148"></a>30</td><td><a id="p100149"></a>6</td><td><a id="p100150"></a>12</td><td><a id="p100151"></a>2</td></tr>
<tr><td><a id="p100152"></a>35</td><td><a id="p100153"></a>7</td><td><a id="p100154"></a>11</td><td><a id="p100155"></a>2</td></tr>
<tr><td colspan="4"><a id="p100156"></a>&lt;*&gt; Данные значения были рассчитаны на основе среднего значения массовой доли крахмала в шлифованном рисе, равного 90%.</td></tr>
</table>



##### <a id="p100157"></a>8.4.2 Цветная реакция и спектрофотометрические определения

<a id="p100158"></a>Отбирают пипеткой 5 см3 каждого градуировочного раствора [(8.4.1)](#p100125) из серии в мерные колбы вместимостью 100 см3 [(6.6)](#p100105), содержащие 50 см3 воды в каждой. Добавляют 1 см3 уксусной кислоты [(5.5)](#p100080) и перемешивают. Затем добавляют 2 см3 раствора йода [(5.6)](#p100081), доводят до метки водой и перемешивают. Дают отстояться в течение 10 мин.
<a id="p100159"></a>Измеряют оптическую плотность при длине волны 720 нм в сопоставлении с раствором сравнения [(8.3)](#p100122), используя спектрофотометр [(6.4)](#p100103).

##### <a id="p100160"></a>8.4.3 Построение градуировочного графика

<a id="p100161"></a>Градуировочный график строят путем нанесения на график значений оптической плотности и соответствующих значений массовой доли амилозы, выраженной в процентах в шлифованном рисе в пересчете на сухое вещество.


#### <a id="p100162"></a>8.5 Проведение испытания


<a id="p100163"></a>Отбирают пипеткой 5 см3 анализируемого раствора [(8.2)](#p100119) в мерную колбу вместимостью 100 см3 [(6.6)](#p100105), содержащую 50 см3 воды, далее по [8.4.2](#p100157), начиная с введения уксусной кислоты [(5.5)](#p100080).
<a id="p100164"></a>Измеряют оптическую плотность при длине волны 720 нм в сопоставлении с раствором сравнения [(8.3)](#p100122), используя спектрофотометр [(6.4)](#p100103).
<a id="p100165"></a>Примечание - Вместо ручных спектрофотометрических измерений может использоваться автоматический анализатор, например, проточно-инжекционный анализатор [(приложение B)](#p100224).

<a id="p100166"></a>Выполняют два определения для двух частей одной и той же анализируемой пробы.


### <a id="p100167"></a>9 Обработка результатов


<a id="p100168"></a>Значение массовой доли амилозы, выраженной в процентах в пересчете на сухое вещество, определяют на основе значения оптической плотности [(8.5)](#p100162) на градуировочном графике [(8.4.3)](#p100160) в соответствии с ISO 8466-1.
<a id="p100169"></a>За результат принимают среднеарифметическое значение двух определений.


### <a id="p100170"></a>10 Прецизионность



#### <a id="p100171"></a>10.1 Межлабораторные испытания


<a id="p100172"></a>Подробности международных межлабораторных испытаний на прецизионность метода приведены в [приложении C](#p100231). Значения, полученные по результатам этих испытаний, могут быть не применимы к диапазонам концентраций и матрицам, отличающимся от приведенных.


#### <a id="p100173"></a>10.2 Повторяемость


<a id="p100174"></a>Абсолютная разница между результатами двух независимых единичных испытаний, полученных по одному и тому же методу на идентичном испытуемом материале в одной и той же лаборатории одним и тем же оператором на одном и том же оборудовании в течение короткого интервала времени не более чем в 5% случаев должна превышать предел воспроизводимости r, выраженный в процентах к массе, вычисленный по следующей формуле

<a id="p100175"></a> $r = 24,90 \cdot \frac{1}{\overline{w^{0,80}}}$ ,

<a id="p100176"></a>где $\overline{w}$ - среднеарифметическое значение результатов двух определений массовой доли, выраженное в граммах на 100 г.


#### <a id="p100177"></a>10.3 Воспроизводимость


<a id="p100178"></a>Абсолютная разница между результатами двух единичных испытаний, полученных по одному и тому же методу на идентичном испытуемом материале в разных лабораториях разными операторами на разном оборудовании в не более чем в 5% случаев должна превышать предел воспроизводимости R, выраженный в процентах по массе, вычисленный по следующей формуле

<a id="p100179"></a> $R = 67,81 \cdot \frac{1}{\overline{w^{0,62}}}$ 

<a id="p100180"></a>где $\overline{w}$ - среднеарифметическое значение результатов двух определений массовой доли, выраженное в граммах на 100 г.


### <a id="p100181"></a>11 Протокол испытаний


<a id="p100182"></a>Протокол испытаний должен содержать следующую информацию:
<a id="p100183"></a>a) всю информацию, необходимую для полной идентификации пробы;
<a id="p100184"></a>b) используемый метод отбора проб, если он известен;
<a id="p100185"></a>c) используемый метод испытаний со ссылкой на настоящий стандарт;
<a id="p100186"></a>d) все детали анализа, не установленные настоящим стандартом или рассматриваемые как необязательные, вместе с факторами, которые могут оказать влияние на результат(ы);
<a id="p100187"></a>e) полученный(е) результат(ы) испытания и, в случае проверки повторяемости, окончательный полученный зарегистрированный результат.





<a id="p100188"></a>Приложение A
(справочное)

<a id="p100189"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ КАЧЕСТВА СТАНДАРТНОГО РАСТВОРА АМИЛОЗЫ КАРТОФЕЛЯ**

<a id="p100190"></a>A.1 Общие положения

<a id="p100191"></a>Используют амилозу, имеющуюся в продаже со следующими свойствами:
- <a id="p100192"></a>способность амилозы связывать йод должна быть от 19% до 20%;
- <a id="p100193"></a>максимальная оптическая плотность A<sub>max</sub>, йодно-крахмального комплекса должна наблюдаться при длине волны (640 +/- 10) нм;
- <a id="p100194"></a>массовая доля крахмала должна быть не менее 99% в пересчете на сухое вещество.

<a id="p100195"></a>A.2 Определение способности амилозы связывать йод

<a id="p100196"></a>A.2.1 Реактивы
<a id="p100197"></a>В дополнение к реактивам, приведенным в [разделе 5](#p100069), используют следующие реактивы.
<a id="p100198"></a>A.2.1.1 Раствор йодида калия, концентрацией 0,1 моль/дм3.
<a id="p100199"></a>A.2.1.2 Стандартный раствор йодата калия, концентрацией 0,001 моль/дм3.
<a id="p100200"></a>A.2.2 Оборудование
<a id="p100201"></a>В дополнение к оборудованию, приведенному в [разделе 6](#p100098), используют следующее оборудование.
<a id="p100202"></a>A.2.2.1 Микробюретка, вместимостью 1 или 2 см3.
<a id="p100203"></a>A.2.2.2 Потенциометр, с возможностью считывания показаний с точностью +/- 0,1 мВ, оборудованный рабочим платиновым электродом и каломельным эталонным электродом.
<a id="p100204"></a>В качестве альтернативы может быть использована установка для титрования.
<a id="p100205"></a>Способность амилозы связывать йод также определяют по контрольному методу [[8]](#p100337).
<a id="p100206"></a>A.2.3 Порядок проведения испытания
<a id="p100207"></a>Приготавливают стандартный раствор амилозы картофеля по [5.7](#p100084).
<a id="p100208"></a>Отбирают пипеткой 5 см3 стандартного раствора амилозы в лабораторный стакан вместимостью 200 см3, добавляют 85 см3 воды, 5 см3 раствора уксусной кислоты концентрацией 1 моль/дм3 [(5.5)](#p100080) и 5 см3 раствора йодида калия [(A.2.1.1)](#p100198). Титруют с шагом 0,05 см3 стандартным раствором йодата калия [(A.2.1.2)](#p100199), используя микробюретку [(A.2.2.1)](#p100202). Считывают показания в милливольтах через 1 мин после каждого добавления, используя метод потенциометрического титрования. Конечная точка может быть рассчитана по второй производной кривой титрования.
<a id="p100209"></a>A.2.4 Расчеты
<a id="p100210"></a>Способность стандартной амилозы связывать йод, выраженную в процентах, рассчитывают по формуле

<a id="p100211"></a> $x = \frac{0,7610}{m(1 - w_{m})} \cdot V \cdot 100$ ,

<a id="p100212"></a>где x - способность связывать йод, %;
<a id="p100213"></a>m - масса амилозы, мг;
<a id="p100214"></a>wm - содержание влаги в пробе амилозы, в процентах по массе, определяемое в соответствии с ISO 712;
<a id="p100215"></a>V - объем стандартного раствора йодата калия [(A.2.1.2)](#p100199), пошедшего на титрование раствора амилозы, см3;
<a id="p100216"></a>0,7610 - коэффициент, принятый для 1 см3 стандартного раствора йодата калия [(A.2.1.2)](#p100199), эквивалентный 0,7610 мг йода.

<a id="p100217"></a>A.3 Спектрометрическое определение йодно-крахмального комплекса

<a id="p100218"></a>Взвешивают 0,1000 г амилозы картофеля в лабораторный стакан вместимостью 100 см3 и добавляют 1 см3 этанола [(5.2)](#p100072), смачивая пробу. После добавления 9 см3 раствора гидроксида натрия [(5.3.1)](#p100074), пробу нагревают на водяной бане [(6.7)](#p100106) при температуре 85 °C до достижения полного диспергирования. Охлаждают, разбавляют водой в мерной колбе на 100 см3 [(6.6)](#p100105) и энергично перемешивают.
<a id="p100219"></a>Отбирают пипеткой 2 см3 стандартного раствора амилозы картофеля в мерную колбу на 100 см3, добавляют 3 см3 гидроксида натрия [(5.3.2)](#p100075), последовательно добавляют 50 см3 воды, 1 см3 уксусной кислоты [(5.5)](#p100080) и 1 см3 раствора йода [(5.6)](#p100081), разбавляют водой до 100 см3. Оставляют на 10 мин и измеряют при помощи спектрофотометра оптическую плотность в диапазоне длин волн 500 - 800 нм.
<a id="p100220"></a>Максимальное значение оптической плотности данного раствора должно наблюдаться при длине волны (640 +/- 10) нм.

<a id="p100221"></a>A.4 Определение массовой доли крахмала

<a id="p100222"></a>Массовая доля крахмала определяют в соответствии с [[4]](#p100329).





<a id="p100223"></a>Приложение B
(справочное)

<a id="p100224"></a>*ПРИМЕР* ПРОТОЧНО-ИНЖЕКЦИОННОГО
**АНАЛИЗАТОРА (ПИА) ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АМИЛОЗЫ**

<a id="p100225"></a> ![11 Протокол испытаний](https://i.bukva.ai/1wO4oLWy/img_0.png) 

<a id="p100226"></a>C <sup>a</sup> - трубка раствора-носителя; D - детектор с длиной
волны 720 нм, с проточной кюветой с длиной оптического пути
1 см (объем 18 мкл); MC1 - виток смешивания, длина 60 см,
внутренний диаметр 0,7 мм; MC2 - виток смешивания, длина
60 см, внутренний диаметр 0,7 мм; R1 <sup>a</sup> - линия раствора
уксусной кислоты [(5.5)](#p100080); R2 <sup>a</sup> - линия раствора йода [(5.6)](#p100081);
S - инжектор для ввода пробы, инжектируемый
объем 300 мкл; W - емкость для отходов


<a id="p100227"></a>

---

<a id="p100228"></a><sup>a</sup> Линии работают при расходе: C = 1,8 см3/мин; R1 = 0,7 см3/мин; R2 = 0,9 см3/мин.

<a id="p100229"></a>Рисунок B.1 - Пример проточно-инжекционного анализатора





<a id="p100230"></a>Приложение C
(справочное)

<a id="p100231"></a>**РЕЗУЛЬТАТЫ МЕЖЛАБОРАТОРНЫХ ИСПЫТАНИЙ**

<a id="p100232"></a>Межлабораторные испытания, которые были организованы FOSS Analytical AB (Швеция) в 2004 году, и в которых принимали участие 23 лаборатории из 11 стран, в том числе две международные организации, проводились на шести пробах риса, имеющих различную массовую долю амилозы, которые были предоставлены Тайским Институтом Промышленной Стандартизации.
<a id="p100233"></a>Полученные результаты были подвергнуты статистическому анализу, который проводил Венгерский Институт Стандартизации, в соответствии с [[1]](#p100323) и [[2]](#p100325), данные, касающиеся прецизионности, представлены в таблице C.1.

<a id="p100234"></a>Таблица C.1

<a id="p100235"></a>Результаты статистического анализа


<table>
<colgroup><col width="51%"><col width="8%"><col width="8%"><col width="8%"><col width="8%"><col width="10%"><col width="8%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"></td><td colspan="6"><a id="p100236"></a>Пробы риса</td></tr>
<tr><td><a id="p100237"></a>A</td><td><a id="p100238"></a>B</td><td><a id="p100239"></a>C</td><td><a id="p100240"></a>D</td><td><a id="p100241"></a>E</td><td><a id="p100242"></a>F</td></tr>
<tr><td><a id="p100243"></a>Количество лабораторий, оставшихся после исключения лабораторий с резко отклоняющимися значениями</td><td><a id="p100244"></a>21</td><td><a id="p100245"></a>21</td><td><a id="p100246"></a>21</td><td><a id="p100247"></a>21</td><td><a id="p100248"></a>20</td><td><a id="p100249"></a>17</td></tr>
<tr><td><a id="p100250"></a>Значение массовой доли, г/100 г</td><td><a id="p100251"></a>12,28</td><td><a id="p100252"></a>22,63</td><td><a id="p100253"></a>13,85</td><td><a id="p100254"></a>26,97</td><td><a id="p100255"></a>0,59</td><td><a id="p100256"></a>28,22</td></tr>
<tr><td><a id="p100257"></a>Стандартное отклонение повторяемости sr, г/100 г</td><td><a id="p100258"></a>0,31</td><td><a id="p100259"></a>0,63</td><td><a id="p100260"></a>0,54</td><td><a id="p100261"></a>0,62</td><td><a id="p100262"></a>0,22</td><td><a id="p100263"></a>0,28</td></tr>
<tr><td><a id="p100264"></a>Коэффициент вариации повторяемости, %</td><td><a id="p100265"></a>2,49</td><td><a id="p100266"></a>2,79</td><td><a id="p100267"></a>3,89</td><td><a id="p100268"></a>2,30</td><td><a id="p100269"></a>38,02</td><td><a id="p100270"></a>0,99</td></tr>
<tr><td><a id="p100271"></a>Предел повторяемости r = 2,8sr, г/100 г</td><td><a id="p100272"></a>0,86</td><td><a id="p100273"></a>1,76</td><td><a id="p100274"></a>1,51</td><td><a id="p100275"></a>1,74</td><td><a id="p100276"></a>0,62</td><td><a id="p100277"></a>0,78</td></tr>
<tr><td><a id="p100278"></a>Стандартное отклонение воспроизводимости sR, г/100 г</td><td><a id="p100279"></a>1,19</td><td><a id="p100280"></a>2,29</td><td><a id="p100281"></a>1,61</td><td><a id="p100282"></a>2,68</td><td><a id="p100283"></a>0,59</td><td><a id="p100284"></a>2,71</td></tr>
<tr><td><a id="p100285"></a>Коэффициент вариации воспроизводимости, %</td><td><a id="p100286"></a>9,69</td><td><a id="p100287"></a>10,12</td><td><a id="p100288"></a>11,65</td><td><a id="p100289"></a>9,95</td><td><a id="p100290"></a>100,16</td><td><a id="p100291"></a>9,60</td></tr>
<tr><td><a id="p100292"></a>Предел воспроизводимости r = 2,8sR, г/100 г</td><td><a id="p100293"></a>3,33</td><td><a id="p100294"></a>6,41</td><td><a id="p100295"></a>4,52</td><td><a id="p100296"></a>7,51</td><td><a id="p100297"></a>1,64</td><td><a id="p100298"></a>7,59</td></tr>
</table>


<a id="p100299"></a> ![11 Протокол испытаний](https://i.bukva.ai/1wO4oLWy/img_1.png) 

<a id="p100300"></a>CV - Коэффициент вариации, в процентах:

<a id="p100301"></a>1 воспроизводимости: y = 67,814x-0,6180 R2 = 0,981;
2 повторяемости: y = 24,895x-0,8028 r2 = 0,920;
W - массовая доля амилозы, %

<a id="p100302"></a>Рисунок C.1 - Соотношение между значениями массовой доли
амилозы и значениями коэффициентов вариации





<a id="p100303"></a>Приложение ДА
(справочное)

<a id="p100304"></a>**СВЕДЕНИЯ О СООТВЕТСТВИИ МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫХ СТАНДАРТОВ**
**ССЫЛОЧНЫМ МЕЖДУНАРОДНЫМ СТАНДАРТАМ**

<a id="p100305"></a>Таблица ДА.1


<table>
<colgroup><col width="54%"><col width="18%"><col width="28%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100306"></a>Обозначение и наименование международного стандарта</td><td><a id="p100307"></a>Степень соответствия</td><td><a id="p100308"></a>Обозначение и наименование соответствующего межгосударственного стандарта</td></tr>
<tr><td><a id="p100309"></a>ISO 712 Зерновые и продукты из них. Определение содержания влаги. Контрольный метод</td><td><a id="p100310"></a>-</td><td><a id="p100311"></a><a href="#p100321">&lt;*&gt;</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100312"></a>ISO 7301 Рис. Технические условия</td><td><a id="p100313"></a>-</td><td><a id="p100314"></a><a href="#p100321">&lt;*&gt;</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100315"></a>ISO 8466-1 Качество воды. Калибрование и оценка аналитических методов и определение рабочих характеристик. Часть 1. Статистический метод оценки линейной калибровочной функции</td><td><a id="p100316"></a>-</td><td><a id="p100317"></a><a href="#p100321">&lt;*&gt;</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100318"></a>ISO 15914 Корма для животных. Ферментативное определение общего содержания крахмала</td><td><a id="p100319"></a>-</td><td><a id="p100320"></a><a href="#p100321">&lt;*&gt;</a></td></tr>
<tr><td colspan="3"><a id="p100321"></a>&lt;*&gt; Соответствующий межгосударственный стандарт отсутствует. До его принятия рекомендуется использовать перевод на русский язык данного международного стандарта.</td></tr>
</table>







## <a id="p100322"></a>БИБЛИОГРАФИЯ



| <a id="p100323"></a>[1] | <a id="p100324"></a>ISO 5725-1:1994, Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results - Part 1: General principles and definitions (Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Общие принципы и определения) |
| --- | --- |
| <a id="p100325"></a>[2] | <a id="p100326"></a>ISO 5725-2:1994, Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results - Part 2: Basic method for the determination of repeatability and reproducibility of a standard measurement Method (Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерения) |
| <a id="p100327"></a>[3] | <a id="p100328"></a>ISO 13690:1999, Cereals, pulses and milled products - Sampling of static batches (Зерновые, бобовые и молотые продукты из них. Отбор проб из статических партий) |
| <a id="p100329"></a>[4] | <a id="p100330"></a>ISO 15914:2004, Animal feeding stuffs - Enzymatic determination of total starch content (Корма для животных. Определение общего содержания крахмала с помощью ферментов) |
| <a id="p100331"></a>[5] | <a id="p100332"></a>AACC method 61-03 (re-approved 1999; this method is equivalent to the withdrawn ISO 6647:1987) |
| <a id="p100333"></a>[6] | <a id="p100334"></a>European Commission Report EUR 16612 EN, 1995: The certification of the amylose content (mass fraction) of three rice reference materials as measured according to method ISO 6647. CRM's 465, 466 and 467 |
| <a id="p100335"></a>[7] | <a id="p100336"></a>JULIANO B.O. A simplified assay for milled rice amylose, Cereal Sci. Today, 1971, 16, pp. 334 - 40, 360 |
| <a id="p100337"></a>[8] | <a id="p100338"></a>SCHOCH T.J. Iodometric determination of amylose. In: Whistler R.L. (ed.). Methods of carbohydrate chemistry, Vol. 4, pp. 157 - 60, Academic Press, New York, 1964 |




<a id="p100339"></a>

---