---
title: "\"ГОСТ ISO 17234-2-2022. Межгосударственный стандарт. Кожа. Химические испытания для определения содержания азокрасителей в окрашенной коже. Часть 2. Определение содержания 4-аминоазобензола\""
number: "ГОСТ ISO 17234-2-2022"
issuer: "Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/standart-gost-iso-17234-2-2022"
---

## "ГОСТ ISO 17234-2-2022. Межгосударственный стандарт. Кожа. Химические испытания для определения содержания азокрасителей в окрашенной коже. Часть 2. Определение содержания 4-аминоазобензола"

# "ГОСТ ISO 17234-2-2022. Межгосударственный стандарт. Кожа. Химические испытания для определения содержания азокрасителей в окрашенной коже. Часть 2. Определение содержания 4-аминоазобензола"

(введен в действие Приказом Росстандарта от 23.12.2022 N 1581-ст)

> [!IMPORTANT]
> Документ [введен](#p100011) в действие с 01.06.2023.

> [!NOTE]
> ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

```mermaid
flowchart LR
  n0["ГОСТ Р ИСО 17234-2-2015"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-17234-2-2015" "ГОСТ Р ИСО 17234-2-2015. Национальный стандарт Российской Федерации. Кожа. Химические испытания для определения содержания некоторых азокрасителей в окрашенной коже. Часть 2. Метод"
  n1["ГОСТ ISO 17234-2-2022"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/standart-gost-iso-17234-2-2022" "ГОСТ ISO 17234-2-2022. Межгосударственный стандарт. Кожа. Химические испытания для определения содержания азокрасителей в окрашенной коже. Часть 2. Определение содержания 4-аминоаз"
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;
```


<a id="p100001"></a>Введен в действие
Приказом Федерального агентства
по техническому регулированию
и метрологии
от 23 декабря 2022 г. N 1581-ст

<a id="p100002"></a>**МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ**

<a id="p100003"></a>**КОЖА**

<a id="p100004"></a>**ХИМИЧЕСКИЕ ИСПЫТАНИЯ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ**
**АЗОКРАСИТЕЛЕЙ В ОКРАШЕННОЙ КОЖЕ**

<a id="p100005"></a>**ЧАСТЬ 2**

<a id="p100006"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ 4-АМИНОАЗОБЕНЗОЛА**

<a id="p100007"></a>Leather. Chemical tests for the determination
of azo colorants in dyed leathers. Part 2.
Determination of 4-aminoazobenzene

<a id="p100008"></a>**(ISO 17234-2:2011, IDT)**

<a id="p100009"></a>**ГОСТ ISO 17234-2-2022**

<a id="p100010"></a>МКС 59.140.30

<a id="p100011"></a>Дата введения
1 июня 2023 года


### <a id="p100012"></a>Предисловие


<a id="p100013"></a>Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены [ГОСТ 1.0](https://bukva.ai/docs/gost-1-0-2015) "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и [ГОСТ 1.2](https://bukva.ai/docs/gost-1-2-2015) "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены"


### <a id="p100014"></a>Сведения о стандарте


<a id="p100015"></a>1 ПОДГОТОВЛЕН Акционерным обществом "Инновационный научно-производственный центр текстильной и легкой промышленности" (АО "ИНПЦ ТЛП") на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии стандарта, указанного в [пункте 5](#p100041)
<a id="p100016"></a>2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии
<a id="p100017"></a>3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 13 декабря 2022 г. N 62)
<a id="p100018"></a>За принятие проголосовали:


| <a id="p100019"></a>Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97 | <a id="p100020"></a>Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97 | <a id="p100021"></a>Сокращенное наименование национального органа по стандартизации |
| --- | --- | --- |
| <a id="p100022"></a>Армения | <a id="p100023"></a>AM | <a id="p100024"></a>ЗАО "Национальный орган по стандартизации и метрологии" Республики Армения |
| <a id="p100025"></a>Беларусь | <a id="p100026"></a>BY | <a id="p100027"></a>Госстандарт Республики Беларусь |
| <a id="p100028"></a>Казахстан | <a id="p100029"></a>KZ | <a id="p100030"></a>Госстандарт Республики Казахстан |
| <a id="p100031"></a>Киргизия | <a id="p100032"></a>KG | <a id="p100033"></a>Кыргызстандарт |
| <a id="p100034"></a>Россия | <a id="p100035"></a>RU | <a id="p100036"></a>Росстандарт |
| <a id="p100037"></a>Узбекистан | <a id="p100038"></a>UZ | <a id="p100039"></a>Узстандарт |


<a id="p100040"></a>4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 23 декабря 2022 г. N 1581-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 17234-2-2022 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июня 2023 г.
<a id="p100041"></a>5 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 17234-2:2011 "Кожа. Химические испытания для определения содержания некоторых азокрасителей в окрашенной коже. Часть 2. Определение содержания 4-аминоазобензола" ("Leather - Chemical tests for the determination of certain azo colorants in dyed leathers - Part 2: Determination of 4-aminoazobenzene", IDT).
<a id="p100042"></a>При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им межгосударственные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном [приложении ДА](#p100380)
<a id="p100043"></a>**6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ**
<a id="p100044"></a>7 Некоторые элементы настоящего стандарта могут являться объектами патентных прав

<a id="p100045"></a>Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.
<a id="p100046"></a>В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"


### <a id="p100047"></a>1 Область применения


<a id="p100048"></a>Настоящий стандарт дополняет ISO 17234-1 и устанавливает специальный метод обнаружения в продукции некоторых азокрасителей, способных высвобождать 4-аминоазобензол. Данный метод также позволяет обнаружить 4-аминоазобензол (краситель сольвентный Желтый 1), уже присутствующий в качестве свободного амина в продукции, не прошедшей восстановительное расщепление.
<a id="p100049"></a>Азокрасители, способные образовывать 4-аминоазобензол, генерируют в условиях, установленных в ISO 17234-1 для аминов, анилина и 1,4-фенилендиамина. Наличие красителей на основе 4-аминоазобензола невозможно надежно установить без дополнительной информации (например, химического состава использованного красителя) или без специальной методики.
<a id="p100050"></a>Данным методом невозможно определить количественное содержание использованных азокрасителей, способных выделять в процессе восстановительного расщепления азогрупп(ы) один или несколько других ароматических аминов, приведенных в приложении XVII к Регламенту ЕС 1907/2006 Европейского парламента и Совета по регистрации, оценке, санкционированию и ограничению применения химических веществ [Council on the Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemicals (Регламент REACH)], за исключением 4-аминоазобензола.


### <a id="p100051"></a>2 Нормативные ссылки


<a id="p100052"></a>В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты [для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного стандарта, для недатированных - последнее издание (включая все изменения)].
<a id="p100053"></a>ISO 2418, Leather - Chemical, physical and mechanical and fastness tests - Sampling location (Кожа. Химические, физические и механические испытания и испытания на устойчивость. Установление места отбора образцов)
<a id="p100054"></a>ISO 4044, Leather - Chemical tests - Preparation of chemical test samples (Кожа. Химические испытания. Подготовка образцов для химических испытаний)


### <a id="p100055"></a>3 Общие положения


<a id="p100056"></a>Некоторые азокрасители способны высвобождать при восстановительном расщеплении азогрупп(ы) вещество 4-аминоазобензол, которое запрещено согласно приложению XVII Регламента (ЕС) N 1907/2006 Европейского Парламента и Совета, касающегося правил регистрации, оценки, санкционирования и ограничения химических веществ (REACH).

<a id="p100057"></a>Таблица 1

<a id="p100058"></a>4-аминоазобензол, запрещенный
Регламентом REACH 1907/2006/Приложение XVII


| <a id="p100059"></a>N | <a id="p100060"></a>Номер по CAS | <a id="p100061"></a>Номер по указателю | <a id="p100062"></a>Номер в ЕС | <a id="p100063"></a>Вещество |
| --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100064"></a>22 | <a id="p100065"></a>60-09-3 | <a id="p100066"></a>611-008-00-4 | <a id="p100067"></a>200-453-6 | <a id="p100068"></a>4-аминоазобензол |



### <a id="p100069"></a>4 Принцип


<a id="p100070"></a>После обезжиривания образец кожи обрабатывают дитионитом натрия в щелочном растворе при температуре 40 °C в закрытом сосуде. 4-аминоазобензол, который высвобождается в процессе, с помощью жидкостной экстракции переводят в фазу трет-бутилметилового эфира. Аликвоту фазы трет-бутилметилового эфира используют для анализа.
<a id="p100071"></a>Обнаружение и определение 4-аминоазобензола выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии [ВЭЖХ (HPLC)] с использованием фотометрического детектора на диодной матрице [ФДМД (DAD)] или масс-селективного детектора [ВЭЖХ/МСД (HPLC/MS)], методом капиллярной газовой хроматографии с помощью масс-селективного детектора [КГХ/МСД (GC/MS)] или методом капиллярного электрофореза с помощью фотометрического детектора на диодной матрице [КЭ/ФДМД (CE/DAD)], качественно с помощью метода тонкослойной хроматографии или высокоэффективной тонкослойной хроматографии [ТСХ, ВЭТСХ (TLC, HPTLC)].
<a id="p100072"></a>Если 4-аминоазобензол обнаруживают одним хроматографическим методом, то подтверждение выполняют, используя один или несколько альтернативных методов. Количественное определение аминов проводят методом [ВЭЖХ/ФДМД (HPLC/DAD)].


### <a id="p100073"></a>5 Требования безопасности


<a id="p100074"></a>5.1 Соединения 4-аминоазобензола относят к потенциальным канцерогенам для человека.
<a id="p100075"></a>Взаимодействие с этими веществами, их утилизацию необходимо проводить в строгом соответствии с национальными правилами по здравоохранению и безопасности.
<a id="p100076"></a>5.2 Пользователь несет ответственность за соблюдение техники безопасности при использовании данного метода испытаний и сопутствующих материалов. Необходимо проконсультироваться с изготовителями относительно получения дополнительной информации, например паспорта безопасности материалов, а также прочих рекомендаций.
<a id="p100077"></a>5.3 Рекомендуется следовать правилам надлежащей лабораторной практики. В любом из помещений лаборатории при работе с порошкообразными красителями и 4-аминоазобензолом необходимо пользоваться защитными очками, противопылевыми респираторами и одноразовыми перчатками.
<a id="p100078"></a>5.4 Пользователи должны соблюдать требования национальных и местных правил техники безопасности.


### <a id="p100079"></a>6 Аппаратура


<a id="p100080"></a>Используют стандартное лабораторное оборудование, в частности следующее.
<a id="p100081"></a>6.1 Подходящий для реакции сосуд из термостойкого стекла с газонепроницаемой пробкой.

#### <a id="p100082"></a>6.2 Нагреватель, обеспечивающий температуру (40 +/- 2) °C.


#### <a id="p100083"></a>6.3 Сепаратор со скоростью вращения более 3000 об/мин.


#### <a id="p100084"></a>6.4 Ротационный вакуумный испаритель.


#### <a id="p100085"></a>6.5 Пипетки требуемого размера или разные.


#### <a id="p100086"></a>6.6 Ультразвуковая баня не менее 160 Вт, с регулируемым нагревом.

<a id="p100087"></a>6.7 Горизонтальный встряхиватель с достаточной частотой 5 с-1, длиной пути от 2 до 5 см.

#### <a id="p100088"></a>6.8 Полипропиленовый или полиэтиленовый шприц объемом 2 см3.


#### <a id="p100089"></a>6.9 Приборное оборудование для нижеперечисленных методов


##### <a id="p100090"></a>6.9.1 Газовая хроматография (ГХ) с масс-селективным детектором (МСД).

<a id="p100091"></a>6.9.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) с градиентом элюирования и фотометрическим детектором на диодной матрице (ФДМД) или масс-селективным детектором (МСД).
<a id="p100092"></a>6.9.3 Тонкослойная хроматография (ТСХ) или высокоэффективная тонкослойная хроматография (ВЭТСХ) с соответствующим детектированием.

##### <a id="p100093"></a>6.9.4 Капиллярный электрофорез (КЭ) с детектором ФДМД.

<a id="p100094"></a>Примечание - Описание оборудования приведено в [приложении A](#p100173).


### <a id="p100095"></a>7 Реактивы


<a id="p100096"></a>Если нет иных указаний, применяют химические вещества аналитической чистоты.

#### <a id="p100097"></a>7.1 Гидроксид натрия.

<a id="p100098"></a>7.2 Водный раствор дитионита натрия, $\rho = 200\text{мг}/\text{см}^{3}$ <1>, свежеприготовленный, для использования непосредственно после выдерживания в течение 1 ч в закрытом сосуде.

<a id="p100099"></a>

---

<a id="p100100"></a><1> - концентр $\rho$ ация по массе (масса вещества на единицу массы смеси).


#### <a id="p100101"></a>7.3 Раствор гидроксида натрия, w = 2% <2>.


<a id="p100102"></a>

---

<a id="p100103"></a><2> w - процентная концентрация по массе (массовая доля).

<a id="p100104"></a>7.4 н-гексан.
<a id="p100105"></a>7.5 трет-бутилметиловый эфир (ТБМЭ).

#### <a id="p100106"></a>7.6 Хлорид натрия.

<a id="p100107"></a>7.7 4-аминоазобензол, сверхчистый.

#### <a id="p100108"></a>7.8 Внутренние стандарты для газовой хроматографии (ИС), например:

- <a id="p100109"></a>ИС 1: нафталин-d 8 (CAS No.: 1146-65-2);
- <a id="p100110"></a>ИС 2: 2, 4, 5-трихлоранилин (CAS No.: 636-30-6);
- <a id="p100111"></a>ИС 3: бензидин-d 8 (CAS No.: 92890-63-6);
- <a id="p100112"></a>ИС 4: антрацен-d 10 (CAS No.: 1719-06-8).

#### <a id="p100113"></a>7.9 Стандартные растворы

<a id="p100114"></a>7.9.1 Раствор внутреннего стандарта (ИС) в трет-бутилметиловом эфире, p = 10,0 мкг/см3.
<a id="p100115"></a>7.9.2 Калибровочный раствор 4-аминоазобензола для проверки методики эксперимента и приготовления калибровочных растворов 4-аминоазобензола в метаноле, $\rho = 500\text{мкг}/\text{см}^{3}$ .


### <a id="p100116"></a>8 Отбор и подготовка образцов


<a id="p100117"></a>Отбор образцов проводят в соответствии с ISO 2418, измельчение образцов кожи - в соответствии с ISO 4044. Если отбор образцов в соответствии с ISO 2418 невозможен (например, извлечение из готовых изделий - обуви, одежды, и т.п.), то способ отбора образцов должен быть описан в протоколе испытаний. Все следы клея должны быть удалены механическим способом.
<a id="p100118"></a>В случае если образец отбирают из лоскутного кожаного изделия с разноцветным рисунком, то образцы различных цветов по возможности анализируют отдельно. Для изделий, изготовленных из кожи различного качества, образцы кожи различного качества анализируют отдельно.


### <a id="p100119"></a>9 Процедура



#### <a id="p100120"></a>9.1 Обезжиривание

<a id="p100121"></a>Кожу массой более 1,0 г, порезанную кусочками (площадью 25 мм2), или измельченный образец кожи помещают в закрытый сосуд [(6.1)](#p100081) вместимостью 50 см3, обрабатывают порцией 20 см3 н-гексана [(7.4)](#p100104) в ультразвуковой бане [(6.6)](#p100086) при температуре (40 +/- 2) °C в течение 20 мин.
<a id="p100122"></a>Декантируют слой н-гексана с образца кожи. Следует избегать потерь частиц кожи во время декантирования. Сразу после декантирования обрабатывают образец так же, как до этого, порцией 20 см3 н-гексана. Выпаривают остаток н-гексана из открытого сосуда по меньшей мере в течение ночи.

#### <a id="p100123"></a>9.2 Восстановительное расщепление

<a id="p100124"></a>К образцу добавляют 9,0 см3 раствора гидроксида натрия [(7.3)](#p100101). Плотно закупоривают реакционный сосуд и энергично встряхивают. Все волокна материала кожи должны быть смочены.
<a id="p100125"></a>Затем с помощью шприца [(6.8)](#p100088) добавляют 1,0 см3 водного раствора дитионита натрия [(7.2)](#p100098). Образец и восстановительный раствор энергично встряхивают и выдерживают при температуре (40 +/- 2) °C в течение точного интервала времени - 30 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры (от 20 °C до 25 °C) в течение 1 мин водой или, если необходимо, охлаждающей смесью льда, воды и соли.

#### <a id="p100126"></a>9.3 Отделение и концентрирование 4-аминоазобензола

<a id="p100127"></a>Добавляют 5,0 см3 трет-бутилметилового эфира [(7.5)](#p100105) или 5,0 см3 раствора внутреннего стандарта [(7.9.1)](#p100114) в реакционный раствор. После этого добавляют 7,0 г хлорида натрия [(7.6)](#p100106) и встряхивают смесь непрерывно в течение 45 мин, с частотой встряхивания f = 5 с-1 [(6.7)](#p100087). Для полного разделения фаз смесь после встряхивания центрифугируют.
<a id="p100128"></a>Время задержки между охлаждением и встряхиванием не должно превышать 5 мин.
<a id="p100129"></a>Для последующего анализа переносят аликвоту фазы трет-бутилметилового эфира в подходящую виалу, которую немедленно закрывают. Выполняют обнаружение и определение 4-аминоазобензола хроматографическими методами, перечисленными в [6.9](#p100089).
<a id="p100130"></a>РЕКОМЕНДАЦИЯ - Для некоторых методов анализа может потребоваться концентрирование экстракта, полученного по 9.3, или перенос его в другой подходящий растворитель (например, метанол). Рекомендуется концентрировать экстрагированную фазу трет-бутилметилового эфира до примерно 1,0 см3 (не досуха) в вакуумном ротационном испарителе при небольшом разрежении и температуре не более 50 °C. Затем удалить остаток растворителя очень осторожно, без вакуума, посредством слабого потока инертного газа.
<a id="p100131"></a>Примечания
<a id="p100132"></a>1 Удаление растворителя (концентрирование в вакуумном ротационном испарителе, выпаривание досуха) может привести к значительным потерям 4-аминоазобензола, если выполнять процедуру без контроля.
<a id="p100133"></a>2 По возможности, стараются избегать замены растворителя, поскольку в процессе анализа значительные потери анализируемого вещества могут произойти за счет матричных эффектов.


#### <a id="p100134"></a>9.4 Калибровочный раствор

<a id="p100135"></a>Добавляют 5,0 см3 трет-бутилметилового эфира [(7.5)](#p100105) или 5,0 см3 раствора внутреннего стандарта [(7.9.1)](#p100114) к 0,1 см3 калибровочного раствора 4-аминоазобензола [(7.9.2)](#p100115). Эту смесь используют для калибровки, поскольку извлечение 4-аминоазобензола при разделении фаз с использованием данной методики составляет от 95% до 100%.

#### <a id="p100136"></a>9.5 Проверка аналитической системы

<a id="p100137"></a>Для проверки данной методики 0,1 см3 калибровочного раствора 4-аминоазобензола [(7.9.2)](#p100115) обрабатывают в соответствии с [9.2](#p100123) и [9.3](#p100126). Степень извлечения 4-аминоазобензола должна быть не менее 60%.

#### <a id="p100138"></a>9.6 Хроматографический анализ

<a id="p100139"></a>Обнаружение 4-аминоазобензола может быть выполнено с помощью хроматографических методов, перечисленных в [6.9](#p100089). Можно также использовать другие подтвержденные методы. Количественное определение 4-аминоазобензола выполняют с помощью метода ВЭЖХ/ФДМД или КГХ/МСД. Если используют газовую хроматографию, то применяют соответствующие внутренние стандарты [(7.8)](#p100108).


### <a id="p100140"></a>10 Оценка результатов


<a id="p100141"></a>Количество 4-аминоазобензола обычно вычисляют с помощью компьютерной программы. Расчет можно осуществить вручную по площадям пиков.

#### <a id="p100142"></a>10.1 Расчет с помощью внутреннего стандарта

<a id="p100143"></a>Концентрацию 4-аминоазобензола рассчитывают как массовую долю, w, в миллиграммах на килограмм (мг/кг) образца, по следующей формуле:

<a id="p100144"></a> $w = \rho_{c} \cdot \frac{A_{S} \cdot A_{ISC} \cdot V}{A_{C} \cdot A_{ISS} \cdot m_{E}}$ , (1)

<a id="p100145"></a>где $\rho_{c}$ - концентрация 4-аминоазобензола в калибровочном растворе в мкг/см3;
<a id="p100146"></a>AS - площадь пика 4-аминоазобензола в растворе образца, в единицах площади;
<a id="p100147"></a>AC - площадь пика 4-аминоазобензола в калибровочном растворе, в единицах площади;
<a id="p100148"></a>AISS - площадь пика внутреннего стандарта в растворе образца, в единицах площади [<1>](#p100153);
<a id="p100149"></a>AISC - площадь пика внутреннего стандарта в калибровочном растворе, в единицах площади [<1>](#p100153);
<a id="p100150"></a>V - объем образца согласно [9.3](#p100126) (конечный объем образца), см3; здесь: 5,0 см3;
<a id="p100151"></a>mE - масса образца кожи, г.

<a id="p100152"></a>

---

<a id="p100153"></a><1> Количественный анализ с помощью ГХ/МСД.


#### <a id="p100154"></a>10.2 Расчет без внутреннего стандарта

<a id="p100155"></a>Концентрацию 4-аминоазобензола рассчитывают как массовую долю, w, в миллиграммах на килограмм (мг/кг) образца, по следующей формуле:

<a id="p100156"></a> $w = \rho_{c} \cdot \frac{A_{S} \cdot V}{A_{C} \cdot m_{E}}$ , (2)

<a id="p100157"></a>где $\rho_{c}$ - концентрация 4-аминоазобензола в калибровочном растворе, (мкг/см3);
<a id="p100158"></a>AS - площадь пика 4-аминоазобензола в растворе образца, в единицах площади;
<a id="p100159"></a>AC - площадь пика 4-аминоазобензола в калибровочном растворе, в единицах площади;
<a id="p100160"></a>V - объем образца согласно [9.3](#p100126) (конечный объем образца), см3; здесь: 5,0 см3;
<a id="p100161"></a>mE - масса образца кожи, г.

#### <a id="p100162"></a>10.3 Надежность метода

<a id="p100163"></a>Информация о надежности метода представлена в [приложении B](#p100332).


### <a id="p100164"></a>11 Протокол испытаний


<a id="p100165"></a>Протокол испытаний должен ссылаться на данный официальный метод и содержать следующую информацию:
<a id="p100166"></a>a) ссылку на настоящий стандарт (т.е. ГОСТ ISO 17234-2);
<a id="p100167"></a>b) вид, происхождение и обозначение образца (неполный образец, если таковой использовался);
<a id="p100168"></a>c) дату поступления образца и дату проведения анализа;
<a id="p100169"></a>d) процедуру отбора образцов;
<a id="p100170"></a>e) способ обнаружения и метод количественного определения;
<a id="p100171"></a>f) результаты анализа, такие как концентрация и предел обнаружения 4-аминоазобензола, в миллиграммах на килограмм (мг/кг). Следует быть внимательным в интерпретации результатов при получении значения 4-аминоазобензола менее 30 мг/кг (см. [приложение C](#p100371)).





<a id="p100172"></a>Приложение A
(справочное)

<a id="p100173"></a>**МЕТОДЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО АНАЛИЗА**

<a id="p100174"></a>A.1 Предварительное замечание
<a id="p100175"></a>Поскольку оснащение [(6.9)](#p100089) лабораторий может быть различным, для хроматографических анализов невозможно представить общие инструкции. Успешно испытываются и используются следующие параметры.
<a id="p100176"></a>A.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) (количественный метод)
<a id="p100177"></a>A.2.1 Высокоэффективная жидкостная хроматография/фотометрический детектор с диодной матрицей (ВЭЖХ/ФДМД)


| <a id="p100178"></a>Элюент 1: | <a id="p100179"></a>Метиловый спирт; |
| --- | --- |
| <a id="p100180"></a>Элюент 2: | <a id="p100181"></a>0,575 г дигидрофосфата аммония + 0,7 г гидрофосфата натрия в 1000 см3 воды, pH = 6,9; |
| <a id="p100182"></a>Неподвижная фаза: | <a id="p100183"></a>Zorbax SB-Phenyl [<1>](#p100189) (5 мкм); (250 x 4,6) мм; |
| <a id="p100184"></a>Скорость потока: | <a id="p100185"></a>от 0,7 до 1,0 см3/мин; |
| <a id="p100186"></a>Градиент: | <a id="p100187"></a>см. [таблицу A.1](#p100191); |



<a id="p100188"></a>

---

<a id="p100189"></a><1> Zorbax SB-Phenyl является примером подходящей продукции, имеющейся в продаже. Эта информация приведена исключительно для удобства пользователей настоящего стандарта и не указывает на предпочтение данного продукта со стороны ИСО.

<a id="p100190"></a>Таблица A.1

<a id="p100191"></a>Программа градиента


| <a id="p100192"></a>Время, мин | <a id="p100193"></a>Элюент 1, % | <a id="p100194"></a>Элюент 2, % |
| --- | --- | --- |
| <a id="p100195"></a>0 | <a id="p100196"></a>0 | <a id="p100197"></a>100 |
| <a id="p100198"></a>5 | <a id="p100199"></a>10 | <a id="p100200"></a>90 |
| <a id="p100201"></a>10 | <a id="p100202"></a>10 | <a id="p100203"></a>90 |
| <a id="p100204"></a>27 | <a id="p100205"></a>68 | <a id="p100206"></a>32 |
| <a id="p100207"></a>29 | <a id="p100208"></a>100 | <a id="p100209"></a>0 |



| <a id="p100210"></a>Температура колонки: | <a id="p100211"></a>30 °C; |
| --- | --- |
| <a id="p100212"></a>Объем впрыска: | <a id="p100213"></a>0,01 см3; |
| <a id="p100214"></a>Детектирование: | <a id="p100215"></a>ФДМД, спектрограф; |
| <a id="p100216"></a>Количественный анализ: | <a id="p100217"></a>при 240, 280, 305 и 380 нм. |


<a id="p100218"></a>A.2.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография/масс-селективный детектор (ВЭЖХ/ФДМД/МСД)


| <a id="p100219"></a>Элюент 1: | <a id="p100220"></a>ацетонитрил; |
| --- | --- |
| <a id="p100221"></a>Элюент 2: | <a id="p100222"></a>ацетат аммония в 1000 см3 воды, 5 ммоль, уровень pH = 3,0; |
| <a id="p100223"></a>Неподвижная фаза: | <a id="p100224"></a>Zorbax Eclipse XDB C18 [<2>](#p100230) (3,5 мкм); (50 x 2,1) мм; |
| <a id="p100225"></a>Скорость потока: | <a id="p100226"></a>0,3 см3/мин; |
| <a id="p100227"></a>Градиент: | <a id="p100228"></a>см. [таблицу A.2](#p100232); |



<a id="p100229"></a>

---

<a id="p100230"></a><2> Zorbax Eclipse XDB C18 является примером подходящей продукции, имеющейся в продаже. Эта информация приведена исключительно для удобства пользователей настоящего стандарта и не указывает на предпочтение данного продукта со стороны ИСО.

<a id="p100231"></a>Таблица A.2

<a id="p100232"></a>Программа градиента


| <a id="p100233"></a>Время, мин | <a id="p100234"></a>Элюент 1, % | <a id="p100235"></a>Элюент 2, % |
| --- | --- | --- |
| <a id="p100236"></a>0 | <a id="p100237"></a>10 | <a id="p100238"></a>90 |
| <a id="p100239"></a>1,5 | <a id="p100240"></a>20 | <a id="p100241"></a>80 |
| <a id="p100242"></a>7,5 | <a id="p100243"></a>90 | <a id="p100244"></a>10 |



| <a id="p100245"></a>Температура колонки: | <a id="p100246"></a>40 °C; |
| --- | --- |
| <a id="p100247"></a>Объем впрыска: | <a id="p100248"></a>0,002 см3; |
| <a id="p100249"></a>Детектирование: | <a id="p100250"></a>квадрупольная и/или масс-спектрометрическая ионная ловушка, режим сканирования и/или МС детектирование МС-дочернего иона; ФДМД: в отношении длины волны см. [A.2.1](#p100177); |
| <a id="p100251"></a>Газ-спрей: | <a id="p100252"></a>азот (в сосудах/генераторный); |
| <a id="p100253"></a>Ионизация: | <a id="p100254"></a>электрораспыление, положительное, по API, фрагментор 120 В. |


<a id="p100255"></a>A.3 Капиллярная газовая хроматография (КГХ/МСД) (количественный метод)


| <a id="p100256"></a>Капиллярная колонка: | <a id="p100257"></a>ZB-5-(Zebron) [<1>](#p100271), длина: 30 м, внутренний диаметр: 0,25 мм, толщина пленки: 0,25 мкм |
| --- | --- |
| <a id="p100258"></a>Система ввода: | <a id="p100259"></a>без деления; |
| <a id="p100260"></a>Температура инжектора: | <a id="p100261"></a>250 °C; |
| <a id="p100262"></a>Газ-носитель: | <a id="p100263"></a>Гелий; |
| <a id="p100264"></a>Температурная программа: | <a id="p100265"></a>50 °C (3 мин), от 50 °C до 280 °C (15 °C/мин), 280 °C (6 мин); |
| <a id="p100266"></a>Объем впрыска: | <a id="p100267"></a>0,001 см3, разделение 1 : 15; |
| <a id="p100268"></a>Детектирование: | <a id="p100269"></a>МС. |



<a id="p100270"></a>

---

<a id="p100271"></a><1> ZB-5-(Zebron) является примером подходящей продукции, имеющейся в продаже. Эта информация приведена исключительно для удобства пользователей данного документа и не указывает на предпочтение данного продукта со стороны ИСО.

<a id="p100272"></a>A.4 Капиллярный электрофорез (КЭ/ФДМД) (количественный метод)
<a id="p100273"></a>0,2 см3 испытуемого раствора [(9.3)](#p100126) смешивают с 0,05 см3 соляной кислоты HCl (c = 0,01 моль/дм3) и пропускают через мембранный фильтр (0,0002 см3). Этот раствор анализируют с помощью капиллярного зонального электрофореза.


| <a id="p100274"></a>Капилляр 1: | <a id="p100275"></a>56 см, без покрытия, внутренний диаметр 50 мкм, с увеличенной длиной оптического пути; |
| --- | --- |
| <a id="p100276"></a>Капилляр | <a id="p100277"></a>56 см, покрытый поливиниловым спиртом (ПВС), внутренний диаметр 50 мкм, с увеличенной длиной оптического пути; |
| <a id="p100278"></a>Буферный раствор: | <a id="p100279"></a>фосфатный буферный раствор (c = 50 ммоль/л), pH = 2,5; |
| <a id="p100280"></a>Температура колонки: | <a id="p100281"></a>25 °C; |
| <a id="p100282"></a>Напряжение: | <a id="p100283"></a>30 кВ; |
| <a id="p100284"></a>Время впрыска: | <a id="p100285"></a>4 с; |
| <a id="p100286"></a>Время опорожнения: | <a id="p100287"></a>5 с; |
| <a id="p100288"></a>Детектирование: | <a id="p100289"></a>ФДМД 214, 254 нм, спектрограф. |


<a id="p100290"></a>A.5 Тонкослойная хроматография (ТСХ) (качественный метод); ВЭТСХ или ТСХ только для полуколичественного подтверждения
<a id="p100291"></a>A.5.1


| <a id="p100292"></a>Пластины (ВЭТСХ): | <a id="p100293"></a>силикагель 60 с флуоресцентным индикатором F 254, (20 x 10) см; |
| --- | --- |
| <a id="p100294"></a>Объем исследуемого раствора: | <a id="p100295"></a>(0,002 - 0,005) см3, наносится в виде капли; |
| <a id="p100296"></a>Подвижный растворитель 1: | <a id="p100297"></a>хлороформ/уксусная кислота (90 + 10) частей на объем. |


<a id="p100298"></a>A.5.2


| <a id="p100299"></a>Пластины (ТСХ): | <a id="p100300"></a>силикагель 60 с флуоресцентным индикатором F 254, (20 x 20) см; |
| --- | --- |
| <a id="p100301"></a>Объем исследуемого раствора: | <a id="p100302"></a>0,01 см3, наносится в виде линии; |
| <a id="p100303"></a>Подвижный растворитель 2: | <a id="p100304"></a>хлороформ/этилацетат/уксусная кислота (60 + 30 + 10) частей на объем; |
| <a id="p100305"></a>Подвижный растворитель 3: | <a id="p100306"></a>хлороформ/метанол (95 + 5) частей на объем; |
| <a id="p100307"></a>Подвижные растворители 2 и 3: | <a id="p100308"></a>один за другим без просушивания пластин. |


<a id="p100309"></a>A.5.3


| <a id="p100310"></a>Детектирование: | <a id="p100311"></a><a id="p100312"></a>1) ультрафиолетовая (УФ) лампа;<br>2) после последовательной обработки реактивами 1 и 2 время реакции приблизительно 5 мин. |
| --- | --- |
| <a id="p100313"></a>Реактив 1: | <a id="p100314"></a>0,1% нитрита натрия (NaNO2) в хлориде натрия (HCl) (c = 1 моль/дм3); |
| <a id="p100315"></a>Реактив 2: | <a id="p100316"></a>0,2% $\alpha - \text{нафтола}$ в гидроксиде калия (KOH) (c = 1 моль/дм3). |


<a id="p100317"></a>A.6 Примеры хроматограмм и спектров
<a id="p100318"></a>Примеры хроматограмм и спектров показаны на [рисунках A.1](#p100321) - [A.4](#p100330).

<a id="p100319"></a> ![11 Протокол испытаний](https://i.bukva.ai/WyhJs3G9/img_0.png) 

<a id="p100320"></a>X - время; Y - относительные единицы;
1 - внутренний стандарт; 2 - 4-аминоазобензол

<a id="p100321"></a>Рисунок A.1 - Хроматограмма общего ионного тока,
4-аминоазобензол, КГХ/МСД



<a id="p100322"></a> ![11 Протокол испытаний](https://i.bukva.ai/WyhJs3G9/img_1.png) 

<a id="p100323"></a>X - m/z; Y - относительные единицы

<a id="p100324"></a>Рисунок A.2 - КГХ/МСД 70 эВ-спектр
и структура 4-аминоазобензола



<a id="p100325"></a> ![11 Протокол испытаний](https://i.bukva.ai/WyhJs3G9/img_2.png) 

<a id="p100326"></a>X - мин; Y - мЕОП (0,001 единицы оптической плотности);
1 - ФДМД A, сигнал = 240; 2 - 4-аминоазобензол;
3 - ФДМД B, сигнал = 380

<a id="p100327"></a>Рисунок A.3 - Хроматограмма 4-аминоазобензола, ВЭЖХ/ФДМД;
детектирование при 240 и 380 нм



<a id="p100328"></a> ![11 Протокол испытаний](https://i.bukva.ai/WyhJs3G9/img_3.png) 

<a id="p100329"></a>X - нм; Y - мЕОП (0,001 единицы оптической плотности)

<a id="p100330"></a>Рисунок A.4 - ВЭЖХ/ФДМД-спектр 4-аминоазобензола





<a id="p100331"></a>Приложение B
(справочное)

<a id="p100332"></a>**НАДЕЖНОСТЬ МЕТОДА**

<a id="p100333"></a>В [таблице B.1](#p100335) отражены результаты межлабораторных испытаний, выполненных для определения содержания 4-аминоазобензола в коже.

<a id="p100334"></a>Таблица B.1

<a id="p100335"></a>Результаты межлабораторных испытаний. Определение
концентрации образовавшегося 4-аминоазобензола в коже [[1]](#p100396)


<table>
<colgroup><col width="64%"><col width="18%"><col width="18%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100336"></a>Параметр</td><td colspan="2"><a id="p100337"></a>Методика анализа</td></tr>
<tr><td><a id="p100338"></a>КГХ/МСД</td><td><a id="p100339"></a>ВЭЖХ</td></tr>
<tr><td><a id="p100340"></a>Число лабораторий-участниц</td><td><a id="p100341"></a>10</td><td><a id="p100342"></a>11</td></tr>
<tr><td><a id="p100343"></a>Число выбросов</td><td><a id="p100344"></a>2</td><td><a id="p100345"></a>2</td></tr>
<tr><td><a id="p100346"></a>Число лабораторий после исключения выбросов</td><td><a id="p100347"></a>8</td><td><a id="p100348"></a>9</td></tr>
<tr><td><a id="p100349"></a>Среднее значение, x, мг/кг</td><td><a id="p100350"></a>81,9</td><td><a id="p100351"></a>91,2</td></tr>
<tr><td><a id="p100352"></a>Повторяемость, r, мг/кг</td><td><a id="p100353"></a>21,4</td><td><a id="p100354"></a>27,1</td></tr>
<tr><td><a id="p100355"></a>Стандартное отклонение повторяемости. sr, мг/кг</td><td><a id="p100356"></a>7,6</td><td><a id="p100357"></a>9,7</td></tr>
<tr><td><a id="p100358"></a>Воспроизводимость R, мг/кг</td><td><a id="p100359"></a>32,5</td><td><a id="p100360"></a>35,9</td></tr>
<tr><td><a id="p100361"></a>Стандартное отклонение воспроизводимости sR, мг/кг</td><td><a id="p100362"></a>11,6</td><td><a id="p100363"></a>12,5</td></tr>
</table>


<a id="p100364"></a>Данный официальный метод был разработан рабочей группой "Анализ запрещенных азокрасителей" немецкого учреждения BVL (Bundesamt für Verbraucherschutz und Lebensmittelsicherh eit, Berlin Deutschland - Федеральное ведомство по защите прав потребителей и безопасности пищевых продуктов) и оценен в межлабораторном испытании, в котором приняли участие 11 лабораторий.
<a id="p100365"></a>a) В отношении оценки повторяемости и воспроизводимости результатов межлабораторных испытаний (по круговой схеме) необходимо учесть следующее:
1) <a id="p100366"></a>межлабораторные испытания показали, что отношение красителя к восстановителю и "возраст" восстановителя могут оказывать решающее влияние на количественный результат. Следовательно, рекомендуется выполнять восстановительное расщепление в строгом соответствии с условиями, изложенными в [9.2](#p100123) (время, температура и количество);
2) <a id="p100367"></a>другим важным фактором является экстракция системы "жидкость - жидкость", например, разделение водной и органической фаз, для предотвращения дальнейшей реакции расщепления азогруппы 4-аминоазобензола. Поэтому настоятельно рекомендуется точно соблюдать условия, изложенные в [9.3](#p100126).
<a id="p100368"></a>b) Образец кожи для межлабораторных испытаний отобран из типового изделия, его измельчили и смешали с неокрашенной кожей. Таким образом можно снизить гомогенность материала.
<a id="p100369"></a>c) Применение других подходящих внутренних стандартов может привести к более высокой повторяемости метода КГХ/МСД. Это условие, однако, не рассматривалось при оценке межлабораторных испытаний.





<a id="p100370"></a>Приложение C
(справочное)

<a id="p100371"></a>**РУКОВОДСТВО ПО ОЦЕНКЕ. ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗА**

<a id="p100372"></a>Поскольку получение аминов в очень небольших количествах может привести к ложным положительным результатам, приложение XVII Регламента REACH 1907/2006 устанавливает предельное значение как 30 мг/кг образца. Это значение применяется только к образцу материала, который является гомогенным по структуре и окрашиванию, а не к смешанному образцу гетерогенного состава.
<a id="p100373"></a>Если обнаруженное количество 4-аминоазобензола превышает 30 мг/кг, можно предположить, что был использован определенный азокраситель. При концентрации ниже 30 мг/кг в настоящее время невозможно сделать авторитетное заявление об использовании определенных азокрасителей без получения дополнительной информации, такой, например, как тип и/или чистота использованных красителей или другого использованного сырья.
<a id="p100374"></a>В этом контексте рекомендуется сообщать результаты анализа предлагаемым образом.
<a id="p100375"></a>В случае, когда концентрация образовавшегося 4-аминоазобензола не более 30 мг/кг:
<a id="p100376"></a>Согласно выполненному анализу азокрасителей, способных высвобождать 4-аминоазобензол в результате восстановительного расщепления азогрупп(ы), в представленном изделии обнаружено не было.
<a id="p100377"></a>В случае, когда концентрация образовавшегося 4-аминоазобензола более 30 мг/кг:
<a id="p100378"></a>Согласно выполненному анализу предполагается, что представленное изделие изготовлено или обработано с применением азокрасителей, запрещенных в соответствии с приложением XVII Регламента REACH 1907/2006.





<a id="p100379"></a>Приложение ДА
(справочное)

<a id="p100380"></a>**СВЕДЕНИЯ О СООТВЕТСТВИИ ССЫЛОЧНЫХ МЕЖДУНАРОДНЫХ СТАНДАРТОВ**
**МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫМ СТАНДАРТАМ**

<a id="p100381"></a>Таблица ДА.1


<table>
<colgroup><col width="26%"><col width="11%"><col width="63%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100382"></a>Обозначение ссылочного международного стандарта</td><td><a id="p100383"></a>Степень соответствия</td><td><a id="p100384"></a>Обозначение и наименование соответствующего межгосударственного стандарта</td></tr>
<tr><td><a id="p100385"></a>ISO 2418</td><td><a id="p100386"></a>IDT</td><td><a id="p100387"></a><a href="https://bukva.ai/docs/standart-gost-iso-2418-2013">ГОСТ ISO 2418-2013</a> "Кожа. Химические, физические и механические испытания и испытания на устойчивость. Установление места отбора проб" <a href="#p100394">&lt;*&gt;</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100388"></a>ISO 4044</td><td><a id="p100389"></a>IDT</td><td><a id="p100390"></a>ГОСТ ISO 4044-2014 "Кожа. Химические испытания. Подготовка образцов для химических испытаний" <a href="#p100394">&lt;*&gt;</a></td></tr>
<tr><td colspan="3"><a id="p100391"></a><a id="p100392"></a>Примечание - В настоящей таблице использовано следующее условное обозначение степени соответствия стандартов:<br>- IDT - идентичные стандарты</td></tr>
</table>



<a id="p100393"></a>

---

<a id="p100394"></a><*> Рекомендуется использовать действующие версии этих стандартов с учетом всех внесенных в данные версии изменений.






## <a id="p100395"></a>БИБЛИОГРАФИЯ



| <a id="p100396"></a>[1] | <a id="p100397"></a>Amtliche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach § 64 LFGB B 82.02-9:2006-09 / BVL B 82.02-9:2006-09 Berichtigung 2008-04 - Nachweis der Verwendung von Azofarbstoffen, die 4-Aminoazobenzol freisetzen können (Официальный сборник процедур исследования в соответствии с § 64 LFGB B 82.02-9:2006-09/BVL B 82.02-9:2006-09 Berichtigung 2008-04 - Доказательство использования азокрасителей, которые могут выделять 4-аминоазобензол) |
| --- | --- |
| <a id="p100398"></a>[2] | <a id="p100399"></a>Regulation (EC) No. 1907/2006 of the European Parliament and of the Council concerning the Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemicals (REACH), Annex XVII (Регламент EC No. 1907/2006 Европейского парламента и Совета по регистрации, оценке, санкционированию и ограничению применения химических веществ (REACH), приложение XVII) |







<table>
<colgroup><col width="33%"><col width="33%"><col width="33%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100400"></a>УДК 675.046.12:006.354</td><td><a id="p100401"></a>МКС 59.140.30</td><td><a id="p100402"></a>IDT</td></tr>
<tr><td colspan="3"><a id="p100403"></a>Ключевые слова: окрашенная кожа, азокраситель, 4-аминоазобензол, определение, принцип, процедура, оценка, протокол</td></tr>
</table>




<a id="p100404"></a>

---