ГОСТ ISO 10993-16-2016. Межгосударственный стандарт. Изделия медицинские. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 16. Концепция токсикокинетических исследований продуктов разложения и выщелачиваемых веществ

(введен в действие Приказом Росстандарта от 31.10.2016 № 1534-ст)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["ГОСТ Р ИСО 10993.16-99"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/nastavlenie-po-primeneniyu-fenotiazina-pri" "ГОСТ Р ИСО 10993.16-99. Государственный стандарт Российской Федерации. Изделия медицинские. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 16. Моделирование и исследован"
  n1["ГОСТ Р ИСО 10993-16-2009"]:::rst
  click n1 "https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-iso-10993-16-2009" "ГОСТ Р ИСО 10993-16-2009. Национальный стандарт Российской Федерации. Изделия медицинские. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 16. Моделирование и... (утв. и "
  n2["ГОСТ ISO 10993-16-2011"]:::rst
  click n2 "https://bukva.ai/docs/standart-1301-st" "ГОСТ ISO 10993-16-2011. Межгосударственный стандарт. Изделия медицинские. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 16. Моделирование и исследование токсикокинетики"
  n3["ГОСТ ISO 10993-16-2016"]:::rst
  click n3 "https://bukva.ai/docs/standart-gost-iso-10993-16-2016" "ГОСТ ISO 10993-16-2016. Межгосударственный стандарт. Изделия медицинские. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 16. Концепция токсикокинетических исследований.."
  n4["ГОСТ ISO 10993-16-2021"]:::doc
  click n4 "https://bukva.ai/docs/gost-iso-10993-16-2021" "ГОСТ ISO 10993-16-2021. Межгосударственный стандарт. Изделия медицинские. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 16. Концепция токсикокинетических исследований.."
  n3 --> n4
  n2 --> n3
  n1 --> n2
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

Введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 31 октября 2016 г. № 1534-ст

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ИЗДЕЛИЯ МЕДИЦИНСКИЕ. ОЦЕНКА БИОЛОГИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ МЕДИЦИНСКИХ ИЗДЕЛИЙ

ЧАСТЬ 16

КОНЦЕПЦИЯ ТОКСИКОКИНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ ПРОДУКТОВ РАЗЛОЖЕНИЯ И ВЫЩЕЛАЧИВАЕМЫХ ВЕЩЕСТВ

Medical devices. Biological evaluation of medical devices. Part 16. Toxicokinetic study design for degradation products and leachables

(ISO 10993-16:2010, Biological evaluation of medical devices — Part 16. Toxicokinetic study design for degradation products and leachables, IDT)

ГОСТ ISO 10993-16-2016

Группа Р20

МКС 01.020

Дата введения 1 октября 2017 года

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-2015 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2015 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1 ПОДГОТОВЛЕН Автономной некоммерческой организацией «Институт медико-биологических исследований и технологий (АНО „ИМБИИТ“) на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии международного стандарта, указанного в пункте 5»

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 25 октября 2016 г. № 92-П)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 31 октября 2016 г. № 1534-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 10993-16-2016 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 октября 2017 г.

5 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 10993-16:2010 «Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 16. Концепция токсикокинетических исследований продуктов разложения и выщелачиваемых веществ» («Biological evaluation of medical devices — Part 16: Toxicokinetic study design for degradation products and leachables», IDT).

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного стандарта для увязки с наименованиями, принятыми в существующем комплексе межгосударственных стандартов.

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им межгосударственные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА.

6 ВЗАМЕН ГОСТ ISO 10993-16-2011

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)

Введение

ИСО (Международная организация по стандартизации) является Всемирной федерацией национальных органов по стандартизации (органов — членов ИСО). Работу по подготовке международных стандартов проводят через ИСО технические комитеты. Каждый комитет-член, заинтересованный в деятельности, для которой был создан технический комитет, имеет право быть представленным в этом комитете. Международные организации, правительственные и неправительственные, имеющие связи с ISO, также принимают участие в работе. ИСО тесно сотрудничает с Международной электротехнической комиссией (МЭК) по всем вопросам электротехнической стандартизации.

Международные стандарты проектируются в соответствии с правилами, приведенными в Директивах ИСО/МЭК, часть 2.

Основной задачей технических комитетов является подготовка международных стандартов. Проекты международных стандартов, принятые техническими комитетами, рассылаются членам ИСО для голосования. Их опубликование в качестве международных стандартов требует одобрения не менее 75% комитетов-членов, принимающих участие в голосовании.

ISO 10993-16 был подготовлен Техническим комитетом ISO/TC 194 «Биологическая оценка медицинского оборудования».

В серию ISO 10993 входят следующие части под общим названием «Оценка биологического действия медицинских изделий»:

• часть 1 — Оценка и испытания в рамках процесса менеджмента риска;
• часть 2 — Требования к охране здоровья животных;
• часть 3 — Испытания на генотоксичность, канцерогенность и токсичность, влияющую на репродуктивность;
• часть 4 — Выбор испытаний, относящихся к взаимодействию с кровью;
• часть 5 — Испытания на цитотоксичность in vitro;
• часть 6 — Испытания для определения локальных эффектов после имплантации;
• часть 7 — Остатки при стерилизации этиленоксидом;
• часть 9 — Структура идентификации и квантификации потенциальных продуктов разложения;
• часть 10 — Пробы на раздражение и аллергическую реакцию кожи;
• часть 11 — Испытания на системную токсичность;
• часть 12 — Приготовление проб и стандартные образцы;
• часть 13 — Идентификация и количественная оценка продуктов разложения в полимерных медицинских устройствах;
• часть 14 — Идентификация и количественная оценка продуктов разложения керамики;
• часть 15 — Идентификация и количественная оценка продуктов разложения металлов и сплавов;
• часть 16 — Концепция токсикокинетических исследований продуктов разложения и выщелачиваемых веществ;
• часть 17 — Установление допустимых пределов выщелачиваемых веществ;
• часть 18 — Определение химических характеристик материалов;
• часть 19 — Физико-химическая, морфологическая и топографическая характеристика материалов (технические требования);
• часть 20 — Принципы и методы исследования иммунотоксикологических испытаний медицинских изделий (технические требования).

Токсикокинетика описывает абсорбцию, распределение, метаболизм и выделение чужеродных соединений в живом организме на протяжении времени. Учет стабильности материала(ов) in vivo и определение ожидаемых и случайных продуктов деградации и выщелачивания необходимы для оценки безопасности медицинского изделия. Токсикокинетические исследования могут быть полезны для оценки безопасности материалов, используемых в разработке медицинского изделия, или для выяснения механизма наблюдаемых неблагоприятных реакций. Токсикокинетические исследования также могут быть применимы к медицинским изделиям, содержащим активные ингредиенты. Необходимость и масштаб таких исследований должны быть тщательно рассмотрены, основываясь на характере и длительности контакта изделия с тканями организма (см. приложение A). Существующая научная литература по токсикологии и данные по токсикокинетике могут быть достаточными для этого рассмотрения.

Потенциальная опасность медицинского изделия может быть связана с взаимодействием его компонентов или их метаболитов с биологическими средами. Медицинские изделия могут содержать выщелачиваемые вещества (например, остаточные катализаторы, агенты обработки, остаточные мономеры, наполнители, антиоксиданты, пластификаторы) и/или продукты деструкции, которые мигрируют из материала и потенциально могут стать причиной неблагоприятного воздействия на организм.

Опубликовано большое число статей по использованию токсикокинетических методов для изучения поведения химических веществ в организме (см. библиографию). Методология и подходы, использованные в таких исследованиях, составляют основу рекомендаций настоящего стандарта. Обоснования для использования настоящего стандарта приведены в приложении A.

1 Область применения

Настоящий стандарт устанавливает принципы, в соответствии с которыми планируют и осуществляют исследования токсикокинетики, обусловленной применением медицинских изделий.

В приложении A изложены рекомендации по включению токсикокинетических исследований в оценку биологического действия медицинских изделий.

2 Нормативные ссылки

Следующие нормативные документы необходимы для применения данного стандарта. При датированной ссылке применимо только указанное издание. При ссылке без даты применимо последнее издание указанного документа, включая все поправки:

ISO 10993-1 Biological evaluation of medical devices — Part 1: Evaluation and testing within a risk management process (Оценка биологическая медицинских изделий. Часть 1. Оценка и испытания в рамках процесса менеджмента риска)

ISO 10993-2 Biological evaluation of medical devices — Part 2: Animal welfare requirements (Оценка биологическая медицинских изделий. Часть 2. Требования к охране здоровья животных)

ISO 10993-12 Biological evaluation of medical devices — Part 12: Sample preparation and reference materials (Биологическая оценка медицинских изделий. Часть 12. Приготовление проб и стандартные образцы)

ISO 10993-17 Biological evaluation of medical devices — Part 17: Establishment of allowable limits for leachable substances (Оценка биологическая медицинских изделий. Часть 17. Установление допустимых пределов выщелачиваемых веществ)

ISO 10993-18 Biological evaluation of medical devices — Part 18: Chemical characterization of materials (Оценка биологическая медицинских изделий. Часть 18. Определение химических характеристик материалов)

ISO 14971 Medical devices — Application of risk management to medical devices (Изделия медицинские. Применение менеджмента риска к медицинским изделиям)

3 Термины и определения

В настоящем стандарте применены термины по ISO 10993-1, а также следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 абсорбция: Процесс, в результате которого вещество поступает в кровеносную и (или) лимфатическую систему.

3.2 биологическая доступность: Значение общей абсорбции исходного вещества.

3.3 биодеструкция: Разрушение материала под воздействием биологической среды.

Примечание - Процесс биодеструкции может быть смоделирован исследованиями in vitro.

3.4 биорезорбция: Процесс, в результате которого биоматериал разрушается в физиологической среде, а продукт(ы) получающийся(еся) при этом, выводятся и/или абсорбируются.

3.5 клиренс: Скорость выведения исследуемого вещества из организма или его частей в результате метаболизма и/или экскреции.

3.6 концентрация Cmax: Максимальная концентрация конкретного вещества в плазме, выраженная отношением массы к единице объема.

Примечание - Когда ссылаются на максимальную концентрацию вещества в жидкости или ткани, ей присваивают обозначение (например, Cmax печени) и выражают отношением единиц массы к единицам объема или массы.

3.7 продукт деструкции: Продукт материала, образовавшийся в результате химического распада исходного материала.

3.8 распределение: Процесс, в результате которого абсорбируемое вещество и (или) его метаболиты циркулируют и распределяются внутри организма.

3.9 экскреция: Процесс, посредством которого абсорбируемое вещество и/или его метаболиты удаляются из организма.

3.10 экстракт: Жидкость, которая получается в результате процесса экстракции исследуемого материала или контроль.

3.11 период полувыведения t1/2: Время, необходимое для уменьшения концентрации исследуемого вещества на 50% от его начального количества в той же жидкости или ткани организма.

3.12 выщелачиваемое (вымываемое) вещество: Химическое вещество, которое может мигрировать из изделия или компонента при условиях хранения или применения.

Примечание - Вымываемые вещества (например, добавки, мономерные или олигомерные составные полимерного материала) могут быть экстрагированы в лабораторных условиях, имитирующих нормальные условия воздействия.

3.13 среднее время пребывания: Параметр, связанный с периодом полувыведения, количественно оценивающий продолжительность присутствия конкретного вещества в организме.

3.14 метаболизм: Процесс, посредством которого абсорбированное вещество структурно изменяется в организме в результате химических и/или ферментативных реакций.

Примечание - Продукты первоначального взаимодействия могут впоследствии изменяться путем любых ферментативных или неферментативных реакций перед их экскрецией.

3.15 исследуемое вещество: Продукт деструкции или вымывания, являющийся предметом токсикокинетических исследований.

3.16 время tmax: Время, при котором достигается максимальная концентрация Cmax.

3.17 объем распределения Vd: Показатель для однокамерной модели, описывающий предполагаемый объем, который будет содержать все количество исследуемого вещества при условии его однородного распределения в организме.

4 Принципы планирования токсикокинетических исследований

4.1 Токсикокинетические исследования планируют с учетом каждого конкретного изделия или материала.

4.2 Программу исследований составляют и оформляют до начала экспериментов. При этом в программу включают цель и методики исследований. Подробнее это изложено в подразделах 4.3 - 4.8 и в разделе 5.

4.3 При выборе методов токсикокинетических исследований учитывают результаты изучения процесса вымывания. Кроме того, учитывают информацию о химических и физико-химических свойствах, структуре поверхности материала и биохимических свойствах всех продуктов вымывания.

Примечание - Количество и скорость выделения продуктов, получающихся в результате процесса вымывания, зависят от их концентрации на поверхности материала, скорости их миграции на поверхность в самом материале, их растворимости и скорости движения продуктов в физиологической среде.

4.4 Токсикокинетические исследования рекомендуется проводить с охарактеризованным потенциально токсичным продуктом процессов выщелачивания и деструкции. Проведение токсикокинетических исследований на смесях возможно только при определенных условиях. В отдельных случаях допускается изучение экстрактов в соответствии с ISO 10993-12, а также гранул или порошков из материала или медицинского изделия, но это должно быть обосновано при планировании исследований.

4.5 Выбранные аналитические методы должны обнаруживать и характеризовать все продукты деструкции, выщелачивания, а также их метаболиты в биологических жидкостях и тканях. Для аналитических методов следует использовать другие части ISO 10993 по применимости. Методы должны быть подробно описаны в исследовательских отчетах в соответствии с п. 5.1.11.

Количественные аналитические методы должны быть конкретными, чувствительными, воспроизводимыми и линейными по всему предполагаемому диапазону концентраций исследуемого материала. В отчете должно быть представлено обоснование выбранного метода исследования.

4.6 В плане исследования должна быть указана физиологическая жидкость, ткань или экскрет, в которых будут определены уровни исследуемого вещества.

Примечание - Кровь наиболее доступна для исследования, поэтому ее часто используют для изучения кинетического параметра и абсорбции. При этом необходимо указать, на чем проводят анализ — на цельной крови, сыворотке или плазме, и обосновать этот выбор. Связывание с циркулирующими белками крови или эритроцитами можно определять методами in vitro.

4.7 Исследовательский отчет должен содержать информацию о характере связывания определяемого вещества в пробе (например, степень и характер сродства) и показывать, что это не приводит к недооценке концентрации анализируемого вещества.

4.8 Для определения кинетических параметров должно быть представлено достаточное количество данных с допустимым разбросом. Теоретически они должны составлять несколько периодов полувыведения вещества, на практике в диапазоне определения накладывает чувствительность аналитических методов.

5 Руководство по методам исследований

5.1 Общие положения

5.1.1 Исследования выполняют на животных соответствующего пола и вида. Здоровые молодые и половозрелые животные проходят акклиматизацию в лабораторных условиях в течение по меньшей мере 7 сут. Если при исследовании метаболизма используют индивидуальные клетки, то животных переводят туда для акклиматизации не менее чем за 24 ч. Окружающие условия должны соответствовать рекомендациям по содержанию и использованию животных (см. ISO 10993-2). В течение всего эксперимента животные получают обычный рацион и питьевую воду, если программа исследований не предусматривает каких-либо изменений в режиме их содержания. Отбор животных в группы для каждого периода исследования носит произвольный характер. Группы должны содержать не менее трех мелких животных и не менее двух животных более крупных видов. В заранее запланированное время животных подвергают эвтаназии.

5.1.2 Возможно использование исследуемого вещества, не меченного радиоактивными изотопами, при наличии подходящих утвержденных методов проб данного вещества в соответствующих образцах и полной характеристикой метаболизма исследуемого вещества.

5.1.3 При необходимости исследуемое вещество метят стабильными изотопами. Предпочтительными являются радиохимически чистые (более 97%) 14C или 3H. При использовании изотопа 3H учитывают возможность замещения трития. Меченное радиоизотопами вещество при необходимости разводят веществом, не содержащим радиоизотопов.

5.1.4 При использовании вещества, меченного радиоизотопами, учитывают его специфическую активность и радиохимическую чистоту.

5.1.5 Исследуемое вещество вводят способом, который определяют в зависимости от назначения медицинского изделия. Исследуемое вещество должно быть приготовлено в подходящей экстрагирующей жидкости, учитывая физико-химические свойства исследуемого вещества (продукт выщелачивания или деструкции) и используя соответствующие способы введения и дозы. Необходимо знать и отразить в отчете стабильность образца при условиях, выбранных для введения.

Примечание - Программа исследований может включать в себя разные пути введения вещества для сравнения процента абсорбции.

5.1.6 Для изучения сбалансированности доз животных помещают только в клетки, предназначенные для исследования метаболизма.

5.1.7 Мочу и фекалии сохраняют при низкой температуре или в емкостях, содержащих консерванты, не мешающие проведению анализов, для предотвращения развития постэкскреционных микробиологических процессов и самопроизвольного изменения. Кровь, предназначенную для исследования в виде цельной крови или плазмы крови, сохраняют в присутствии соответствующих антикоагулянтов.

5.1.8 До начала эксперимента, по возможности, у животных отбирают контрольные пробы. В некоторых исследованиях фоновые контрольные пробы (например, ткани) у подопытных животных отобрать невозможно, поэтому их забирают у контрольной группы.

5.1.9 Время отбора проб должно соответствовать типу исследования. Отбор осуществляют по необходимости в течение периодов времени длительностью в несколько минут, часов, суток, недель или даже месяцев. Для исследований, включающих изучение продуктов выделения, обычно используют 24-часовые периоды в течение по меньшей мере 96 ч. В исследованиях, требующих взятия проб крови, кровь забирают по конкретному расписанию с интервалами от нескольких минут до нескольких часов в течение периода до 72 ч.

5.1.10 Токсикокинетические исследования следует проводить в соответствии со стандартами надлежащей лабораторной практики.

5.1.11 Отчет об исследованиях должен включать следующую информацию, если применимо:

a) линию и источник поступления животных, условия содержания, их рацион, возраст и пол;

b) исследуемое вещество и образец, их чистоту, стабильность, химический состав и введенное количество;

c) условия исследований, включая путь введения вещества;

d) методы анализа, экстракции, определения и валидации;

e) материальный баланс исследуемого вещества;

f) индивидуальные результаты на каждом этапе исследования в виде таблицы;

g) заявление о соответствии стандартам качества или требованиям надлежащей лабораторной практики;

h) обсуждение полученных результатов;

i) интерпретацию полученных результатов.

5.2 Руководство по конкретным методам исследований

5.2.1 Основные положения

5.2.1.1 Исследование планируют таким образом, чтобы получить необходимую информацию для оценки только степени риска использования медицинских изделий, так что обычно нет необходимости в рассмотрении всех аспектов.

5.2.1.2 Исследования абсорбции, распределения, метаболизма и экскреции проводят по отдельности, изучая один из перечисленных процессов, или одновременно, рассматривая несколько аспектов в одном исследовании.

5.2.1.3 Количество изучаемых кинетических параметров выбирают в зависимости от программы исследований. Среди них: скорость абсорбции, площадь под кривой «концентрация плазмы — время», площадь под кривой «исходная концентрация плазмы время», объем распределения, Cmax, tmax, период полувыведения, среднее время пребывания, скорость выведения и клиренс.

5.2.1.4 Кинетические параметры могут быть определены только для определенных видов молекул, и, следовательно, методы анализа должны быть конкретными и чувствительными к этим видам молекул. Истинные кинетические параметры соответствующего соединения могут быть определены только при его внутривенном введении. Поэтому при необходимости в программу исследований кинетических параметров включают исследования с ограниченным внутривенным введением. Это позволяет вычислить долю абсорбированной дозы для коррекции результатов, ожидаемых в других исследованиях.

5.2.1.5 Для определения кинетических параметров используют соответствующую кинетическую модель. Существуют специальные компьютерные программы для вычисления этих параметров. Программное обеспечение утверждают до момента его использования и подтверждают это документально. Предположения, введенные в программу, и выбор кинетической модели также отражают в отчете.

5.2.2 Абсорбция

Процесс абсорбции зависит от пути введения исследуемого вещества, его физико-химического состояния и экстрагирующей жидкости. Его оценивают по концентрации данного вещества в крови, в сыворотке, в выделениях и в тканях организма. Также рассматривают необходимость проведения полного исследования биологической доступности этого вещества. Выбор подходящего метода исследования зависит от другой требуемой информации, возможности применения материала, меченного радиоизотопами, и используемого метода анализа. При исследовании кинетических параметров константа скорости процесса абсорбции может быть достоверно вычислена при условии, что в фазе абсорбции взято достаточное число проб.

Примечание - Существуют методы in vitro, которые дают важную информацию о желудочно-кишечной и кожной абсорбции химических веществ.

5.2.3 Распределение

5.2.3.1 Для исследования процесса распределения, как правило, используют меченное радиоизотопами вещество. Исследования могут быть:

• количественными, определяющими уровни содержания вещества в срезах тканей;
• качественными, использующими общую ауторадиографию;
• полуколичественными, использующими выборочную ауторадиографию по стандартным полям.

Обычно при изучении процесса распределения время отбора проб должно быть между tmax = 24 ч и 168 ч или более, в зависимости от времени выведения исследуемого вещества. Отбор проб в промежуточные интервалы времени проводят, когда требуются дополнительные данные. Более частый отбор проб обычно выполняют на ранних фазах абсорбции и выведения. При этом берут как можно больше проб в течение фазы выведения (теоретически три-четыре периода полувыведения) для того, чтобы обеспечить более точные определения кинетических параметров.

Основным решающим фактором часто является чувствительность метода.

5.2.4 Метаболизм и экскреция

5.2.4.1 Клетки для содержания животных при изучении метаболизма должны позволять проводить отдельный сбор мочи и фекалий на всех этапах исследования. При длительности исследований до 14 сут мочу и фекалии собирают отдельно через 24-часовые интервалы до конца эксперимента. Иногда план исследований может предусматривать эвтаназию животных на промежуточных стадиях.

Пробы могут быть отобраны ранее 24 ч, когда есть вероятность быстрого выведения исследуемого вещества или его метаболитов. При длительных исследованиях отбор проб в начальном периоде проводят так же, как для кратковременных исследований. Затем пробы отбирают непрерывно в течение 24 ч на период оценки.

Примечание - Использование клеток для изучения метаболизма при длительных исследованиях может быть вредным для здоровья животных. Поэтому при продолжительном эксперименте для получения достоверных результатов собирают репрезентативные выборочные пробы, и эти результаты экстраполируются, как при непрерывном отборе проб.

5.2.4.2 Трупы животных и/или их органы-мишени сохраняют для исследований, а кровь этих животных забирают для определения концентрации веществ в плазме и цельной крови. После отбора проб в момент эвтаназии клетки для исследований метаболизма моче- и калосборники моют специальными растворителями. Возможны накопление полученных смывов и сохранение репрезентативной части для анализов.

5.2.4.3 Когда используют вещество, помеченное радиоизотопами (см. примечание ниже), полное выведение или расчетное полное выведение исследуемого вещества в идеале должно быть (100 +/- 10) %. Количество исследуемого вещества в каждой фракции анализируют с помощью установленных процедур для каждого меченного или не меченного радиоизотопами соединения в соответствующей среде. При использовании соединений, меченных радиоизотопами, проводят оценку как исходного вещества, так и метаболитов если не используют конкретную пробу. Если вещество, меченное радиоизотопами, не обнаруживают в достаточном количестве в экскрете (фекалиях и/или моче) или в организме подопытного животного, рассматривают необходимость сбора выдыхаемого воздуха.

Примечание - Не во всех случаях достижим указанный диапазон полного выведения вещества. Причины любых отклонений регистрируют и обсуждают в отчете об исследованиях.

5.2.4.4 Уровни радиоактивности в биологической среде определяют, например, методом сцинтилляции жидкости. Однако следует подчеркнуть, что в данном методе используют суммарную концентрацию соединения и его метаболитов, поэтому на ее основе не могут быть определены кинетические параметры. Там, где необходимо отделение метаболитов, используют ряд процедур экстракции и хроматографических методов анализа (например, методы высокоэффективной жидкостной хроматографии, тонкослойной хроматографии, газожидкостной хроматографии), а полученные вещества характеризуют посредством ряда химических и физико-химических методов (например, масс-спектрометрический метод, спектроскопический метод, метод ядерно-магнитного резонанса).

Использование тканей, клеток, гомогенатов и изолированных ферментов для изучения процессов метаболизма in vitro хорошо описаны. Эти методы, в отличие от методов in vivo, позволяют прогнозировать пути метаболизма, когда вещество локализуется в недоступном для исследований месте. Следует отметить, что степени и скорости метаболизма при определении методами in vitro и in vivo часто отличаются.

Приложение A (обязательное)

ОБСТОЯТЕЛЬСТВА, ПРИ КОТОРЫХ ПРОВЕДЕНИЕ ТОКСИКОКИНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ НЕОБХОДИМО

A.1 Использование большинства медицинских изделий связано с потенциальной опасностью. Характеристика химических свойств определяет химические опасности (потенциальные риски) (см. ISO 10993-18 и ISO 14971) и должна предшествовать токсикокинетическим исследованиям. Однако проведение токсикокинетических исследований всех идентифицируемых ожидаемых и случайных продуктов деградации и выщелачивания для всех медицинских изделий не является необходимым или целесообразным.

A.2 Рассматривая необходимость токсикокинетических исследований как части биологической оценки медицинских изделий, принимают во внимание конечный продукт, составляющие его химические вещества, ожидаемые и случайные продукты деструкции и выщелачивания, а также назначение изделия.

Необходимо также учитывать возможное токсикокинетическое взаимодействие между активными ингредиентами и продуктами деструкции и/или выщелачивания.

A.3 Методы in vitro, которые тщательно проверены, обоснованные и практически доступные, надежные и воспроизводимые, должны быть рассмотрены к применению вместо исследований in vivo (см. ISO 10993-1). При возможности, исследования in vitro (например, тканей, гомогенатов или клеток) следует проводить для изучения вероятных, а не возможных продуктов деградации. ISO 10993-2 применим ко всем рассматриваемым исследованиям in vivo.

A.4 Необходимость проведения токсикокинетических исследований рассматривается, если:

a) изделие при применении по назначению должно резорбировать под влиянием биологических факторов;

b) изделие имеет длительный контакт с организмом человека при имплантации, известна или предполагается его биодеградация или существенная коррозия (для изделий из металлов) и (или) из изделия происходит миграция вымываемых веществ;

c) есть сведения или существует возможность образования значительных количеств потенциально токсичных или реакционно-способных продуктов деструкции и выщелачивания, мигрирующих из медицинского изделия в организм человека при клиническом применении;

d) известно или вероятно, что медицинское изделие будет выделять значительные количества активных ингредиентов.

Примечание - Значение термина «значительные количества» зависит от химических свойств вещества, о котором идет речь.

A.5 Проведение токсикокинетических исследований не требуется, если:

a) уже накоплены значительные токсикологические или токсикокинетические данные, относящиеся к продуктам продуктов деструкции и выщелачивания;

b) уже накоплены значительные токсикологические или токсикокинетические данные, относящиеся к активным ингредиентам;

c) достигаемая или предполагаемая скорость выхода продуктов деструкции и выщелачивания из конкретного изделия признана (см. ISO 10993-17) безопасной и демонстрирует безопасные уровни клинического воздействия;

d) многолетний опыт документально подтверждает, что клиническое воздействие продуктов деградации и вымывания является безопасным.

A.6 Миграция продуктов деградации и вымывания из металлов, сплавов и керамики обычно очень незначительна и не является основанием для проведения токсикокинетических исследований.

A.7 Если материалы являются сложными и содержат продукты, которые являются эндогенными или настолько схожи с эндогенными продуктами, что их нельзя аналитически отличить, то проведение токсикокинетических исследований, как правило, невозможно.

Приложение ДА (справочное)

СВЕДЕНИЯ О СООТВЕТСТВИИ ССЫЛОЧНЫХ МЕЖДУНАРОДНЫХ СТАНДАРТОВ МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫМ СТАНДАРТАМ

Библиография