---
title: "\"ГОСТ 34228-2017. Межгосударственный стандарт. Продукция соковая. Определение консервантов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии\""
number: "ГОСТ 34228-2017"
issuer: "Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/standart-gost-34228-2017"
---

## "ГОСТ 34228-2017. Межгосударственный стандарт. Продукция соковая. Определение консервантов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"

# "ГОСТ 34228-2017. Межгосударственный стандарт. Продукция соковая. Определение консервантов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"

(введен в действие Приказом Росстандарта от 12.12.2017 N 1921-ст)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов, а в случае их отсутствия - национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "Требования безопасности пищевых добавок, ароматизаторов и технологических вспомогательных средств" (ТР ТС 029/2012) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 07.02.2018 N 21).
> Текст данного документа приведен с учетом [поправки](https://bukva.ai/docs/popravka-popravki-gost-34228-2017), опубликованной в "ИУС", N 9, 2022.
> Документ [введен](#p100009) в действие с 01.01.2019.


<a id="p100001"></a>Введен в действие
Приказом Федерального
агентства по техническому
регулированию и метрологии
от 12 декабря 2017 г. N 1921-ст

<a id="p100002"></a>**МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ**

<a id="p100003"></a>**ПРОДУКЦИЯ СОКОВАЯ**

<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНСЕРВАНТОВ МЕТОДОМ**
**ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>Juice products. Determination of preservatives
by high performance liquid chromatography method

<a id="p100006"></a>**ГОСТ 34228-2017**

<a id="p100007"></a>Группа Н69

<a id="p100008"></a>МКС 67.080
67.080.01

<a id="p100009"></a>Дата введения
1 января 2019 года

<a id="p100010"></a>Предисловие

<a id="p100011"></a>Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены в [ГОСТ 1.0-2015](https://bukva.ai/docs/gost-1-0-2015) "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и [ГОСТ 1.2-2015](https://bukva.ai/docs/gost-1-2-2015) "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены".

<a id="p100012"></a>Сведения о стандарте

<a id="p100013"></a>1 РАЗРАБОТАН Некоммерческой организацией "Российский союз производителей соков" (РСПС) при участии Акционерного общества "Мултон" (АО "Мултон") и Общества с ограниченной ответственностью "ПепсиКо Холдингс" (ООО "ПепсиКо Холдингс")
<a id="p100014"></a>2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии
<a id="p100015"></a>3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 30 ноября 2017 г. N 52-2017)
<a id="p100016"></a>За принятие проголосовали:


| <a id="p100017"></a>Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97 | <a id="p100018"></a>Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97 | <a id="p100019"></a>Сокращенное наименование национального органа по стандартизации |
| --- | --- | --- |
| <a id="p100020"></a>Армения | <a id="p100021"></a>AM | <a id="p100022"></a>Минэкономики Республики Армения |
| <a id="p100023"></a>Беларусь | <a id="p100024"></a>BY | <a id="p100025"></a>Госстандарт Республики Беларусь |
| <a id="p100489"></a>Казахстан | <a id="p100490"></a>KZ | <a id="p100491"></a>Госстандарт Республики Казахстан |
| <a id="p100026"></a>Киргизия | <a id="p100027"></a>KG | <a id="p100028"></a>Кыргызстандарт |
| <a id="p100029"></a>Россия | <a id="p100030"></a>RU | <a id="p100031"></a>Росстандарт |
| <a id="p100032"></a>Узбекистан | <a id="p100033"></a>UZ | <a id="p100034"></a>Узстандарт |
| <a id="p100035"></a>Украина | <a id="p100036"></a>UA | <a id="p100037"></a>Минэкономразвития Украины |


<a id="p100038"></a>4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 12 декабря 2017 г. N 1921-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 34228-2017 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2019 г.
<a id="p100039"></a>**5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ**

<a id="p100040"></a>Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru).

<a id="p100041"></a>1 Область применения

<a id="p100042"></a>Настоящий стандарт распространяется на соковую продукцию из фруктов и овощей и устанавливает метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для измерения массовой доли консервантов <*>:

<a id="p100043"></a>

---

<a id="p100044"></a><*> Для некоторых ягод (клюква, брусника и др.) характерно природное (естественное) содержание бензойной кислоты в диапазоне 50 - 250 мг/кг. Данное соединение консервантом не является, что следует учитывать при измерении соков и соковой продукции из данных ягод на подлинность и безопасность.

- <a id="p100045"></a>4-гидроксибензойной кислоты;
- <a id="p100046"></a>бензойной кислоты;
- <a id="p100047"></a>сорбиновой кислоты;
- <a id="p100048"></a>метил-4-гидроксибензоата;
- <a id="p100049"></a>этил-4-гидроксибензоата;
- <a id="p100050"></a>н-пропил-4-гидроксибензоата;
- <a id="p100051"></a>н-бутил-4-гидроксибензоата.
<a id="p100052"></a>Диапазон измерений массовой концентрации (массовой доли) консервантов составляет от 10,0 до 320 мг/дм3 (млн-1) без учета разбавления пробы.

<a id="p100053"></a>2 Нормативные ссылки

<a id="p100054"></a>В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:
<a id="p100055"></a>ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования
<a id="p100056"></a>ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности
<a id="p100057"></a>ГОСТ 12.1.019-79 <**> Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

<a id="p100058"></a>

---

<a id="p100059"></a><**> В Российской Федерации действует ГОСТ Р 12.1.019-2009.

<a id="p100060"></a>ГОСТ 61-75 Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия
<a id="p100061"></a>[ГОСТ OIML R 76-1-2011](https://bukva.ai/docs/gost-oiml-r-76-1-2011) Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания
<a id="p100062"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
<a id="p100063"></a>ГОСТ 3117-78 Реактивы. Аммоний уксуснокислый. Технические условия
<a id="p100064"></a>ГОСТ ИСО 5725-6-2003 <***> Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

<a id="p100065"></a>

---

<a id="p100066"></a><***> В Российской Федерации действует [ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-6-2002).

<a id="p100067"></a>ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия
<a id="p100068"></a>[ГОСТ ISO 7886-1-2011](https://bukva.ai/docs/gost-iso-7886-1-2011) Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования
<a id="p100069"></a>[ГОСТ 10521-78](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-10521-78) Реактивы. Кислота бензойная. Технические условия
<a id="p100070"></a>ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия
<a id="p100071"></a>ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2009 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий
<a id="p100072"></a>[ГОСТ 22967-90](https://bukva.ai/docs/standart-gost-22967-90) Шприцы медицинские инъекционные многократного применения. Общие технические требования и методы испытаний
<a id="p100073"></a>ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
<a id="p100074"></a>[ГОСТ 26313-2014](https://bukva.ai/docs/prikaz-gost-26313-2014) Продукты переработки фруктов и овощей. Правила приемки и методы отбора проб
<a id="p100075"></a>[ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования
<a id="p100076"></a>*Примечание* - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

<a id="p100077"></a>3 Сущность метода

<a id="p100078"></a>Метод основан на разделении группы консервантов на аналитических обращенно-фазовых хроматографических колонках, заполненных сорбентом С8 с дополнительными функциональными группами ("энд-кэпинг").
<a id="p100079"></a>Детектирование разделенных консервантов осуществляют с помощью спектрофотометрического детектора или диодноматричного детектора в диапазоне длин волн 190 - 600 нм.
<a id="p100080"></a>При необходимости идентификацию консервантов в пробе соковой продукции проводят путем сравнения времен удерживания и спектров поглощения (см. таблицу 1).

<a id="p100081"></a>Таблица 1


| <a id="p100082"></a>Наименование консерванта | <a id="p100083"></a>Максимум светопоглощения, нм |
| --- | --- |
| <a id="p100084"></a>4-гидроксибензойная кислота | <a id="p100085"></a>252,7 |
| <a id="p100086"></a>Бензойная кислота | <a id="p100087"></a>226,8 |
| <a id="p100088"></a>Сорбиновая кислота | <a id="p100089"></a>259,8 |
| <a id="p100090"></a>Метил-4-гидроксибензоат | <a id="p100091"></a>252,6 |
| <a id="p100092"></a>Этил-4-гидроксибензоат | <a id="p100093"></a>256,2 |
| <a id="p100094"></a>н-пропил-4-гидроксибензоат | <a id="p100095"></a>256,2 |
| <a id="p100096"></a>н-бутил-4-гидроксибензоат | <a id="p100097"></a>256,2 |


<a id="p100098"></a>4 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы, посуда и материалы

<a id="p100099"></a>4.1 Хроматограф жидкостный, снабженный спектрофотометрическим детектором, позволяющим проводить измерения в диапазоне длин волн 190 - 600 нм, либо диодно-матричным детектором, позволяющим проводить измерения в диапазоне длин волн 190 - 600 нм, снабженный программным обеспечением для сбора и обработки хроматографических данных. Требования к метрологическим характеристикам хроматографа приведены в таблицах 2 и [3](#p100112).

<a id="p100100"></a>Таблица 2

<a id="p100101"></a>Метрологические характеристики хроматографа
со спектрофотометрическим детектором


<table>
<colgroup><col width="21%"><col width="21%"><col width="24%"><col width="33%"></colgroup>
<tr><td colspan="4"><a id="p100102"></a>Относительное среднеквадратичное отклонение выходного сигнала, %, не более</td></tr>
<tr><td><a id="p100103"></a>по площади пика</td><td><a id="p100104"></a>по высоте пика</td><td><a id="p100105"></a>по времени удерживания</td><td><a id="p100106"></a>по площади пика за 8 ч непрерывной работы</td></tr>
<tr><td><a id="p100107"></a>3</td><td><a id="p100108"></a>3</td><td><a id="p100109"></a>1,0</td><td><a id="p100110"></a>4</td></tr>
</table>


<a id="p100111"></a>Таблица 3

<a id="p100112"></a>Метрологические характеристики хроматографа
с диодно-матричным детектором


<table>
<colgroup><col width="19%"><col width="16%"><col width="18%"><col width="13%"><col width="19%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100113"></a>Значение уровня флуктуационных шумов нулевого сигнала, е. о. п., не более</td><td rowspan="2"><a id="p100114"></a>Значение дрейфа нулевого сигнала, е. о. п./час, не более</td><td colspan="2"><a id="p100115"></a>Относительное среднеквадратичное отклонение выходных сигналов, %, не более</td><td colspan="2"><a id="p100116"></a>Относительное изменение выходного сигнала за 8 ч непрерывной работы, %, не более</td></tr>
<tr><td><a id="p100117"></a>Время удерживания</td><td><a id="p100118"></a>Площадь пика</td><td><a id="p100119"></a>Время удерживания</td><td><a id="p100120"></a>Площадь пика</td></tr>
<tr><td><a id="p100121"></a>1,5·10-5</td><td><a id="p100122"></a>1,5·10-3</td><td><a id="p100123"></a>0,3</td><td><a id="p100124"></a>1,0</td><td><a id="p100125"></a>2,0</td><td><a id="p100126"></a>2,0</td></tr>
</table>


<a id="p100127"></a>4.2 Весы с максимальной нагрузкой от 200 до 220 г, с пределом допускаемой погрешности взвешивания +/- 0,0001 г.
<a id="p100128"></a>4.3 Весы неавтоматического действия по [ГОСТ OIML R 76-1](https://bukva.ai/docs/gost-oiml-r-76-1-2011), с максимальной нагрузкой от 200 до 220 г, с пределом допускаемой погрешности взвешивания +/- 0,001 г.
<a id="p100129"></a>4.4 Пипетки градуированные 2-1-2-5, 2-1-2-10 и 2-1-2-25 по [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91).
<a id="p100130"></a>4.5 Колбы мерные 2-25-2, 2-50-2, 2-100-2, 2-1000-2 по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100131"></a>4.6 Цилиндры мерные 2-го класса точности любого исполнения вместимостью 1000 см3 по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100132"></a>4.7 Стаканы любого типа исполнения 1 вместимостью 50, 100 и 1000 см3 по ГОСТ 25336.

#### <a id="p100133"></a>4.8 Пробирки для центрифугирования вместимостью 2, 10 и 20 см3.

<a id="p100134"></a>4.9 Вода глубокой очистки или вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

#### <a id="p100135"></a>4.10 Фильтры мембранные с размером пор 0,45 и 0,20 мкм.


#### <a id="p100136"></a>4.11 Виалы стеклянные вместимостью 2 см3.


#### <a id="p100137"></a>4.12 Микрошприц вместимостью 250 мм3 (для ручного ввода пробы).

<a id="p100138"></a>4.13 Шприц медицинский вместимостью 5 см3 многократного применения по [ГОСТ 22967](https://bukva.ai/docs/standart-gost-22967-90) или однократного применения по [ГОСТ ISO 7886-1](https://bukva.ai/docs/gost-iso-7886-1-2011).
<a id="p100139"></a>4.14 Центрифуга, обеспечивающая фактор разделения (g-фактор) не менее 1000.
<a id="p100140"></a>4.15 Колонка хроматографическая (250 x 4,6 мм), заполненная обращенно-фазовым сорбентом С8 с дополнительно привитыми изопропиловыми группами (-C3H7), снабженная защитной предколонкой.
<a id="p100141"></a>Примечание - Допускается использование хроматографических колонок других типоразмеров, обеспечивающих разделение определяемых консервантов в соответствии с критериями, приведенными в [приложении А](#p100403).

<a id="p100142"></a>4.16 Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.
<a id="p100143"></a>4.17 Кислота сорбиновая с массовой долей основного вещества не менее 99% или калий сорбиновокислый с массовой долей основного вещества не менее 99%.
<a id="p100144"></a>4.18 Кислота бензойная по [ГОСТ 10521](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-10521-78), ч. или бензоат натрия с массовой долей основного вещества не менее 99%.
<a id="p100145"></a>4.19 Кислота 4-гидроксибензойная с массовой долей основного вещества не менее 99%.
<a id="p100146"></a>4.20 Метил-4-гидроксибензоат с массовой долей основного вещества не менее 99%.
<a id="p100147"></a>4.21 Этил-4-гидроксибензоат с массовой долей основного вещества не менее 99%.
<a id="p100148"></a>4.22 н-пропил-4-гидроксибензоат с массовой долей основного вещества не менее 99%.
<a id="p100149"></a>4.23 н-бутил-4-гидроксибензоат с массовой долей основного вещества не менее 99%.
<a id="p100150"></a>4.24 Ацетонитрил для высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), оптической плотностью при 200 нм не более 0,012 е. о. п./см.

#### <a id="p100151"></a>4.25 Кислота уксусная ледяная по ГОСТ 61, х. ч.


#### <a id="p100152"></a>4.26 Аммоний уксуснокислый по ГОСТ 3117, х. ч.

<a id="p100153"></a>4.27 Мономер (pH-метр) с пределом абсолютной погрешности измерений +/- 0,1 ед. pH.
<a id="p100154"></a>Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками не ниже вышеуказанных, вспомогательного оборудования, посуды, материалов с техническими характеристиками не ниже вышеуказанных и химических реактивов аналогичной или более высокой квалификации.

<a id="p100155"></a>5 Отбор проб

<a id="p100156"></a>Отбор проб соковой продукции проводят по [ГОСТ 26313](https://bukva.ai/docs/prikaz-gost-26313-2014).

<a id="p100157"></a>6 Подготовка к проведению измерений


#### <a id="p100158"></a>6.1 Общие положения


<a id="p100159"></a>Разделение группы консервантов происходит при температуре окружающей среды в градиентном режиме с использованием следующих подвижных фаз:
- <a id="p100160"></a>раствор уксуснокислого аммония молярной концентрации 0,01 моль/дм3 (pH = 4,2 ед. pH);
- <a id="p100161"></a>ацетонитрил.
<a id="p100162"></a>Для продления срока службы и более эффективной работы колонки используют систему защиты [in-line-фильтры на выходе из насоса и предколонку, периодическую промывку (не реже одного-двух раз в неделю) колонки смесью ацетонитрил - вода глубокой очистки (объемное соотношение 4:1) или ацетонитрилом (в зависимости от числа проведенных измерений и концентрации органических веществ, прошедших через колонку) в течение 1 - 3 ч с предварительной промывкой всей системы водой. Операции заполнения системы растворителями и промывка отдельных частей и системы в целом выполняют в соответствии с руководствами по эксплуатации оборудования.


#### <a id="p100163"></a>6.2 Приготовление рабочих растворов



##### <a id="p100164"></a>6.2.1 Приготовление раствора уксуснокислого аммония молярной концентрации 0,01 моль/дм3 с pH 4,2 (Подвижная фаза A)

<a id="p100165"></a>(0,770 +/- 0,001) г уксуснокислого аммония взвешивают в стакане вместимостью 100 см3, растворяют в приблизительно 80 см3 воды глубокой очистки, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят водой до метки и перемешивают. Раствор переносят в мерный стакан вместимостью 1000 см3 и доводят pH до значения 4,2 ед. pH ледяной уксусной кислотой, регистрируя показания иономером. Полученный раствор дегазируют под вакуумом в течение 15 мин с одновременной фильтрацией через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм (см. [4.10](#p100135)).
<a id="p100166"></a>Раствор используют в течение трех дней при условии визуального отсутствия нерастворимых веществ. Перед использованием элюента в последующие дни его предварительно дегазируют под вакуумом в течение 15 мин с одновременной фильтрацией через фильтр с диаметром пор 0,20 мкм (см. [4.10](#p100135)).
<a id="p100167"></a>Подвижную фазу приготавливают в объеме, необходимом для проведения серии измерений.


#### <a id="p100168"></a>6.3 Приготовление градуировочных растворов


<a id="p100169"></a>Градуировочные растворы консервантов готовят в соответствии с таблицей 4.

<a id="p100170"></a>Таблица 4


<table>
<colgroup><col width="8%"><col width="37%"><col width="10%"><col width="35%"><col width="10%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100171"></a>N градуировочного раствора</td><td><a id="p100172"></a>Компонент</td><td><a id="p100173"></a>Вместимость мерной колбы, см3</td><td><a id="p100174"></a>Способ приготовления</td><td><a id="p100175"></a>Массовая концентрация, мг/дм3</td></tr>
<tr><td rowspan="7"><a id="p100176"></a>6</td><td><a id="p100177"></a>4-гидроксибензойная кислота</td><td rowspan="7"><a id="p100178"></a>100</td><td rowspan="7"><a id="p100179"></a>Взвешивают (0,0320 +/- 0,0001) г каждого из реактивов в стакане вместимостью 100 см3, растворяют в 50 см3 ацетонитрила, количественно переносят в мерную колбу и доводят до 100 см3 водой</td><td rowspan="7"><a id="p100180"></a>320</td></tr>
<tr><td><a id="p100181"></a>Бензойная кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100182"></a>Сорбиновая кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100183"></a>Метил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100184"></a>Этил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100185"></a>н-Пропил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100186"></a>н-Бутил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td rowspan="7"><a id="p100187"></a>5</td><td><a id="p100188"></a>4-гидроксибензойная кислота</td><td rowspan="7"><a id="p100189"></a>50</td><td rowspan="7"><a id="p100190"></a>В мерную колбу приливают 25 см3 раствора N 6, доводят до метки водой и перемешивают</td><td rowspan="7"><a id="p100191"></a>160</td></tr>
<tr><td><a id="p100192"></a>Бензойная кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100193"></a>Сорбиновая кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100194"></a>Метил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100195"></a>Этил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100196"></a>н-Пропил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100197"></a>н-Бутил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td rowspan="7"><a id="p100198"></a>4</td><td><a id="p100199"></a>4-гидроксибензойная кислота</td><td rowspan="7"><a id="p100200"></a>50</td><td rowspan="7"><a id="p100201"></a>В мерную колбу приливают 12,5 см3 раствора N 6, доводят до метки водой и перемешивают</td><td rowspan="7"><a id="p100202"></a>80</td></tr>
<tr><td><a id="p100203"></a>Бензойная кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100204"></a>Сорбиновая кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100205"></a>Метил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100206"></a>Этил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100207"></a>н-Пропил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100208"></a>н-Бутил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td rowspan="7"><a id="p100209"></a>3</td><td><a id="p100210"></a>4-гидроксибензойная кислота</td><td rowspan="7"><a id="p100211"></a>50</td><td rowspan="7"><a id="p100212"></a>В мерную колбу приливают 6,25 см3 раствора N 6, доводят до метки водой и перемешивают</td><td rowspan="7"><a id="p100213"></a>40</td></tr>
<tr><td><a id="p100214"></a>Бензойная кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100215"></a>Сорбиновая кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100216"></a>Метил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100217"></a>Этил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100218"></a>н-Пропил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100219"></a>н-Бутил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td rowspan="7"><a id="p100220"></a>2</td><td><a id="p100221"></a>4-гидроксибензойная кислота</td><td rowspan="7"><a id="p100222"></a>50</td><td rowspan="7"><a id="p100223"></a>В мерную колбу приливают 3,12 см3 раствора N 6, доводят до метки водой и перемешивают</td><td rowspan="7"><a id="p100224"></a>20</td></tr>
<tr><td><a id="p100225"></a>Бензойная кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100226"></a>Сорбиновая кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100227"></a>Метил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100228"></a>Этил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100229"></a>н-Пропил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100230"></a>н-Бутил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td rowspan="7"><a id="p100231"></a>1</td><td><a id="p100232"></a>4-гидроксибензойная кислота</td><td rowspan="7"><a id="p100233"></a>25</td><td rowspan="7"><a id="p100234"></a>В мерную колбу приливают 3,12 см3 раствора N 4, доводят до метки водой и перемешивают</td><td rowspan="7"><a id="p100235"></a>10</td></tr>
<tr><td><a id="p100236"></a>Бензойная кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100237"></a>Сорбиновая кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100238"></a>Метил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100239"></a>Этил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100240"></a>н-Пропил-4-гидроксибензоат</td></tr>
<tr><td><a id="p100241"></a>н-Бутил-4-гидроксибензоат</td></tr>
</table>


<a id="p100242"></a>Раствор N 4 рекомендуется использовать в качестве одного из контрольных растворов при ежедневных измерениях.
<a id="p100243"></a>Срок хранения раствора N 4 - не более трех дней при температуре (20 +/- 5) °C или не более 1 мес при температуре от 2 до 6 °C.
<a id="p100244"></a>Растворы N 1, 2, 3, 5 и 6 используют свежеприготовленными.


#### <a id="p100245"></a>6.4 Подготовка хроматографа к работе


<a id="p100246"></a>Включение и подготовку хроматографа к работе, а также выключение хроматографа по окончании работы осуществляют в соответствии с руководством по эксплуатации.


#### <a id="p100247"></a>6.5 Условия хроматографического анализа


<a id="p100248"></a>При проведении хроматографического анализа создают и поддерживают следующие условия:
- <a id="p100249"></a>температура колонки - температура окружающей среды;
- <a id="p100250"></a>рабочая длина волны спектрофотометрического детектора - 235 нм или диапазон длин волн для диодно-матричного детектора - 190 - 600 нм;
- <a id="p100251"></a>объем вводимой пробы - от 5 до 20 мм3;
- <a id="p100252"></a>режим элюирования - градиентный, скорость потока - 1,0 см3/мин (см. таблицу 5).

<a id="p100253"></a>Таблица 5

<a id="p100254"></a>Параметры градиентного режима


| <a id="p100255"></a>Время, мин | <a id="p100256"></a>Объемная доля элюента A (см. [6.2.1](#p100164)), % | <a id="p100257"></a>Объемная доля элюента B (ацетонитрил), % |
| --- | --- | --- |
| <a id="p100258"></a>0 | <a id="p100259"></a>75 | <a id="p100260"></a>25 |
| <a id="p100261"></a>8,5 | <a id="p100262"></a>75 | <a id="p100263"></a>25 |
| <a id="p100264"></a>9 | <a id="p100265"></a>65 | <a id="p100266"></a>35 |
| <a id="p100267"></a>16 | <a id="p100268"></a>65 | <a id="p100269"></a>35 |
| <a id="p100270"></a>17 | <a id="p100271"></a>55 | <a id="p100272"></a>45 |
| <a id="p100273"></a>26 | <a id="p100274"></a>55 | <a id="p100275"></a>45 |
| <a id="p100276"></a>27 | <a id="p100277"></a>75 | <a id="p100278"></a>25 |
| <a id="p100279"></a>32 | <a id="p100280"></a>75 | <a id="p100281"></a>25 |


<a id="p100282"></a>Мониторинг состояния хроматографической колонки проводят в соответствии с [приложением А](#p100403). Допускается изменение скорости потока и параметров градиентного режима в соответствии с указаниями изготовителя колонки при условии выполнения критериев, приведенных в [приложении А](#p100403).


#### <a id="p100283"></a>6.6 Градуировка хроматографа


<a id="p100284"></a>Градуировку хроматографа проводят в соответствии с руководством по эксплуатации и руководством пользователя программного обеспечения с использованием градуировочных растворов (см. [6.3](#p100168)). Регистрируют по две хроматограммы каждого градуировочного раствора, определяют площадь пиков определяемых компонентов на хроматограммах градуировочных растворов и устанавливают градуировочную характеристику в виде линейной зависимости площади пика соответствующего компонента S, е. о. п.·с [<*>](#p100288) и его массовой концентрации c, мг/дм3

<a id="p100285"></a>c = k·S, (1)

<a id="p100286"></a>где k - градуировочный коэффициент, мг/дм3·(е. о. п.·с)-1.

<a id="p100287"></a>

---

<a id="p100288"></a><*> е. о. п. - единицы оптической плотности.

<a id="p100289"></a>Градуировочный коэффициент k, мг/дм3, вычисляют с использованием программного обеспечения к хроматографу или по методу наименьших квадратов, принимая свободный член в уравнении регрессии равным нулю, по формуле

<a id="p100290"></a> $k = \frac{\sum (S_{i} \cdot c_{i})}{\sum S_{i}^{2}}$ , (2)

<a id="p100291"></a>где Si - площадь пика соответствующего консерванта при измерении i-го градуировочного раствора, е. о. п.·с;
<a id="p100292"></a>ci - массовая концентрация консерванта при измерении i-го градуировочного раствора, мг/дм3.
<a id="p100293"></a>Градуировку проводят при смене оборудования, колонок, условий хроматографического анализа или при выявлении несоответствий при оперативном контроле качества измерений или при внутреннем аудите.
<a id="p100294"></a>Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят, используя градуировочные растворы N 4 и 6 перед проведением измерений.
<a id="p100295"></a>Результаты контроля стабильности градуировочной характеристики признаются удовлетворительными при выполнении условия

<a id="p100296"></a>|Xизм - Cст| <= 0,01·G·Cст, (3)

<a id="p100297"></a>где Xизм - результат измерения массовой концентрации консерванта в контрольных растворах, мг/дм3;
<a id="p100298"></a>Cст - фактическое значение массовой концентрации консерванта в контрольных растворах, мг/дм3;
<a id="p100299"></a>G - норматив контроля стабильности градуировочной характеристики, %.
<a id="p100300"></a>Во всем диапазоне градуировочной характеристики G = 4,5%. Если [условие (3)](#p100296) не выполняется, градуировочную характеристику устанавливают заново во всем диапазоне измерений.

<a id="p100301"></a>7 Проведение измерений


#### <a id="p100302"></a>7.1 Подготовка проб для измерений


<a id="p100303"></a>7.1.1 Осветленные соки, нектары и сокосодержащие напитки, не содержащие нерастворимых в воде веществ, анализируют при двукратном разбавлении подвижной фазой A (см. [6.2.1](#p100164)). Для этого пипеткой отбирают 25 см3 пробы, помещают в мерную колбу вместимостью 50 см3 и доводят до метки подвижной фазой. Приготовленный раствор перемешивают, после чего через иглу отбирают в медицинский шприц аликвоту раствора, заменяют иглу на дисковый фильтр с размером пор 0,20 мкм и отфильтровывают в виалу 1 - 1,5 см3 приготовленного раствора.
<a id="p100304"></a>Приготовленный раствор используют для хроматографического анализа (см. [7.2.3](#p100314)).
<a id="p100305"></a>7.1.2 Соки, нектары и сокосодержащие напитки с мякотью или содержащие нерастворимые в воде вещества разбавляют подвижной фазой A (см. [6.2.1](#p100164)) в два раза, для этого пипеткой отбирают 25 см3 пробы, помещают в мерную колбу вместимостью 50 см3 и доводят до метки подвижной фазой A. Затем пробу центрифугируют со скоростью 9000 об/мин в течение 5 мин или не менее 3000 об/мин в течение 15 мин. После этого аккуратно отбирают в медицинский шприц через иглу ориентировочно 2 см3 полученного раствора, заменяют иглу на дисковый фильтр с размером пор 0,45 мкм и отфильтровывают в виалу 1 см3 этого раствора.
<a id="p100306"></a>Приготовленный раствор используют для хроматографического анализа (см. [7.2.3](#p100314)).
<a id="p100307"></a>7.1.3 Концентрированные соки и пюре различных фруктов, ягод и овощей разбавляют раствором элюента в пять раз весовым методом. Для этого в стакане вместимостью 50 см3 взвешивают 5 г пробы концентрированного сока с погрешностью +/- 0,001 г и добавляют приблизительно 20 г элюента также с погрешностью +/- 0,001 г, тщательно перемешивают. Затем пробу центрифугируют со скоростью 9000 об/мин в течение 5 мин или не менее 3000 об/мин в течение 15 мин. После этого аккуратно отбирают в медицинский шприц через иглу примерно 2 см3 полученного раствора, заменяют иглу на дисковый фильтр с размером пор 0,45 мкм и отфильтровывают в виалу 1 см3 этого раствора.
<a id="p100308"></a>Приготовленный раствор используют для хроматографического анализа (см. [7.2.3](#p100314)).
<a id="p100309"></a>7.1.4 При подготовке пробы по [7.1.3](#p100307) результат измерений выражают в единицах массовой доли (млн-1), а при подготовке пробы по [7.1.1](#p100303), [7.1.2](#p100305) - в единицах массовой концентрации (мг/дм3).


#### <a id="p100310"></a>7.2 Порядок проведения измерений


<a id="p100311"></a>7.2.1 Включение и вывод хроматографической системы на рабочий режим, включая кондиционирование колонки, проводят в соответствии с руководствами по эксплуатации оборудования, колонки - с учетом [6.1](#p100158) и [6.5](#p100247).
<a id="p100312"></a>7.2.2 Выключение хроматографической системы после выполнения измерений проводят в соответствии с руководством по эксплуатации оборудования и руководством пользователя программно-аппаратным комплексом сбора и обработки данных.
<a id="p100313"></a>Примеры хроматограмм градуировочных растворов и проб приведены в [приложении Б](#p100478).
<a id="p100314"></a>7.2.3 Подготовленную по [7.1.1](#p100303) - [7.1.3](#p100307) пробу дозируют в хроматограф и регистрируют хроматограмму в тех же условиях, в которых были зарегистрированы хроматограммы градуировочных растворов (см. [6.5](#p100247), [6.6](#p100283)). На полученных хроматограммах идентифицируют пики определяемых компонентов по спектрам поглощения (см. [таблицу 1](#p100081)) и совпадению времен удерживания в градуировочных растворах и пробах при ширине окна идентификации 5%. Используя значения площадей пиков, вычисляют значения массовой концентрации идентифицированных консервантов, используя градуировочные характеристики, установленные по [6.6](#p100283).

<a id="p100315"></a>8 Обработка и оформление результатов измерений

<a id="p100316"></a>8.1 Если подготовку пробы проводили по [7.1.1](#p100303) или [7.1.2](#p100305), то массовую концентрацию консервантов в пробе C, мг/дм3, вычисляют по формуле

<a id="p100317"></a> $C = \frac{c_{\text{изм}} \cdot V_{2}}{V_{1}}$ , (4)

<a id="p100318"></a>где cизм - измеренное (см. [7.2.3](#p100314)) значение массовой концентрации соответствующего консерванта в пробе, подготовленной по [7.1.1](#p100303) или [7.1.2](#p100305), мг/дм3;
<a id="p100319"></a>V2 - объем мерной колбы, взятой для разбавления пробы, см3;
<a id="p100320"></a>V1 - объем пробы, отобранный для анализа см3.
<a id="p100321"></a>За результат измерений массовой концентрации консерванта в пробе принимают среднеарифметическое значение $\overline{C}$ , мг/дм3, результатов двух параллельных определений C1 и C2, мг/дм3, при выполнении условия

<a id="p100322"></a> $100 \cdot \frac{|C_{1} - C_{2}|}{\overline{C}} \leq r_{\text{отн}}$ , (5)

<a id="p100323"></a>где rотн - предел повторяемости (см. [таблицу 6](#p100342)), %.
<a id="p100324"></a>8.2 Если подготовку пробы проводили по [7.1.3](#p100307), то массовую долю консервантов в пробе X, млн-1, вычисляют по формуле

<a id="p100325"></a> $X = \frac{X_{\text{изм}} \cdot m_{\text{общ}}}{m_{X}}$ , (6)

<a id="p100326"></a>где Xизм - значение массовой доли соответствующего консерванта в растворе, подготовленном по [7.1.3](#p100307), принимаемое численно равным измеренному по [7.2.3](#p100314) значению массовой концентрации, млн-1;
<a id="p100327"></a>mобщ - масса навески анализируемой пробы с добавкой подвижной фазы (см. [7.1.3](#p100307)), г;
<a id="p100328"></a>mX - масса анализируемой пробы, г.
<a id="p100329"></a>За результат измерений массовой доли консервантов в пробе принимают среднеарифметическое значение $\overline{X}$ , млн-1, результатов двух параллельных измерений X1 и X2, млн-1, при выполнении условия

<a id="p100330"></a> $100 \cdot \frac{|X_{1} - X_{2}|}{\overline{X}} \leq r_{\text{отн}}$ , (7)

<a id="p100331"></a>где rотн - предел повторяемости (см. [таблицу 6](#p100342)), %.
<a id="p100332"></a>При невыполнении [условий (5)](#p100322) и [(7)](#p100330) получают еще два результата измерений в соответствии с [разделом 7](#p100301) и затем используют методы проверки приемлемости четырех результатов параллельных измерении и установления результата измерений согласно ГОСТ ИСО 5725-6 (подраздел 5.2).
<a id="p100333"></a>8.3 При получении результатов измерений в двух лабораториях за результат измерений принимают среднеарифметическое значение результатов измерений, полученных в этих лабораториях $\overline{C_{1\text{лаб}}}$ и $\overline{C_{2\text{лаб}}}$ , мг/дм3, или $\overline{X_{1\text{лаб}}}$ и $\overline{X_{2\text{лаб}}}$ , млн-1, при выполнении условий

<a id="p100334"></a> $200 \cdot |\overline{C_{1\text{лаб}}} - \overline{C_{2\text{лаб}}}| \leq CD_{0,95} \cdot (\overline{C_{1\text{лаб}}} + \overline{C_{2\text{лаб}}})$ , (8)

<a id="p100335"></a>или

<a id="p100336"></a> $200 \cdot |\overline{X_{1\text{лаб}}} - \overline{X_{2\text{лаб}}}| \leq CD_{0,95} \cdot (\overline{X_{1\text{лаб}}} + \overline{X_{2\text{лаб}}})$ , (9)

<a id="p100337"></a>где CD0,95 - значение предела воспроизводимости.
<a id="p100338"></a>Значение CD0,95 вычисляют с использованием пределов повторяемости (rотн, %) и воспроизводимости (Rотн, %), приведенных в [таблице 6](#p100342), по формуле

<a id="p100339"></a> $CD_{0,95} = \sqrt{R_{\text{отн}}^{2} - r_{\text{отн}}^{2} \cdot (1 - \frac{1}{2 \cdot n_{1}} - \frac{1}{2 \cdot n_{2}})}$ , (10)

<a id="p100340"></a>где n<sub>1</sub> и n<sub>2</sub> - число параллельных измерений, выполненных в первой и второй лабораториях соответственно.

<a id="p100341"></a>Таблица 6

<a id="p100342"></a>Пределы повторяемости и воспроизводимости


<table>
<colgroup><col width="38%"><col width="17%"><col width="21%"><col width="25%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100343"></a>Определяемый консервант</td><td><a id="p100344"></a>Диапазон измерения массовой концентрации (массовой доли), мг/дм3 (млн-1)</td><td><a id="p100345"></a>Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами параллельных измерений)<br>rотн, %</td><td><a id="p100346"></a>Предел воспроизводимости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами единичных измерений, полученных в двух лабораториях)<br>Rотн, %</td></tr>
<tr><td><a id="p100347"></a>4-гидроксибензойная кислота</td><td rowspan="7"><a id="p100348"></a>10 - 320</td><td rowspan="7"><a id="p100349"></a>5</td><td rowspan="7"><a id="p100350"></a>10</td></tr>
<tr><td><a id="p100351"></a>Бензойная кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100352"></a>Сорбиновая кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100353"></a>Метил-4-гидроксибензоата</td></tr>
<tr><td><a id="p100354"></a>Этил-4-гидроксибензоата</td></tr>
<tr><td><a id="p100355"></a>н-пропил-4-гидроксибензоата</td></tr>
<tr><td><a id="p100356"></a>н-бутил-4-гидроксибензоата</td></tr>
</table>


<a id="p100357"></a>При невыполнении [условия (8)](#p100334) или [(9)](#p100336) для проверки приемлемости в условиях воспроизводимости каждая лаборатория должна выполнить процедуры согласно ГОСТ ИСО 5725-6 (пункты 5.3.3, 5.3.4).
<a id="p100358"></a>8.4 Результаты измерений регистрируют в протоколе испытаний, который оформляют в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО/МЭК 17025. При этом протокол испытаний должен содержать ссылку на настоящий стандарт с указанием метода подготовки пробы.
<a id="p100359"></a>Результаты измерений массовой концентрации консервантов представляют в виде

<a id="p100360"></a> $\overline{C} \pm \Delta_{C}$ , (11)

<a id="p100361"></a>где $\overline{C}$ - результат измерений массовой концентрации консервантов (см. [8.1](#p100316)), мг/дм3;
<a id="p100362"></a> $\Delta_{C}$ - границы абсолютной погрешности измерений массовой концентрации консервантов при доверительной вероятности P = 0,95, мг/дм3, вычисляемые по формуле

<a id="p100363"></a> $\Delta_{C} = 0,01 \cdot \delta \cdot \overline{C}$ , (12)

<a id="p100364"></a>где $\delta$ - границы относительной погрешности измерений массовой концентрации консервантов (см. таблицу 7), %.

<a id="p100365"></a>Таблица 7

<a id="p100366"></a>Диапазон измерений, относительные значения показателей
повторяемости, воспроизводимости, точности методики
при доверительной вероятности P = 0,95


<table>
<colgroup><col width="37%"><col width="15%"><col width="16%"><col width="13%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100367"></a>Определяемый консервант</td><td><a id="p100368"></a>Диапазон измерения массовой концентрации, (массовой доли), мг/дм3<br>(млн-1)</td><td><a id="p100369"></a>Относительное стандартное отклонение сходимости (повторяемости)<br>$\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100370"></a>Относительное стандартное отклонение воспроизводимости<br>$\sigma_{R}$ , %</td><td><a id="p100371"></a>Показатель точности измерений (границы относительной погрешности измерений при доверительной вероятности P = 0,95 <a href="#p100383">&lt;*&gt;</a>)<br>$\pm \delta$ , %</td></tr>
<tr><td><a id="p100372"></a>4-гидроксибензойная кислота</td><td rowspan="7"><a id="p100373"></a>10 - 320</td><td rowspan="7"><a id="p100374"></a>2</td><td rowspan="7"><a id="p100375"></a>4</td><td rowspan="7"><a id="p100376"></a>9</td></tr>
<tr><td><a id="p100377"></a>Бензойная кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100378"></a>Сорбиновая кислота</td></tr>
<tr><td><a id="p100379"></a>Метил-4-гидроксибензоата</td></tr>
<tr><td><a id="p100380"></a>Этил-4-гидроксибензоата</td></tr>
<tr><td><a id="p100381"></a>н-пропил-4-гидроксибензоата</td></tr>
<tr><td><a id="p100382"></a>н-бутил-4-гидроксибензоата</td></tr>
<tr><td colspan="5"><a id="p100383"></a>&lt;*&gt; Численные значения границ относительной погрешности соответствуют численным значениям расширенной неопределенности (в относительных единицах) Uотн при коэффициенте охвата k = 2.</td></tr>
</table>


<a id="p100384"></a>Результаты измерений массовой доли консервантов представляют в виде

<a id="p100385"></a> $\overline{X} \pm \Delta_{X}$ , (13)

<a id="p100386"></a>где $\overline{X}$ - результат измерений массовой доли консервантов (см. [8.2](#p100324)), млн-1;
<a id="p100387"></a> $\Delta_{X}$ - границы абсолютной погрешности измерений массовой доли консервантов при доверительной вероятности P = 0,95, млн-1, вычисляемые по формуле

<a id="p100388"></a> $\Delta_{X} = 0,01 \cdot \delta \cdot \overline{X}$ , (14)

<a id="p100389"></a>где $\delta$ - границы относительной погрешности измерений массовой доли консервантов (см. [таблицу 7](#p100366)), %.
<a id="p100390"></a>Численное значение результата измерений должно оканчиваться цифрой того же разряда, что и абсолютное значение показателя точности измерений, вычисленное по [формуле (12)](#p100363) или [(14)](#p100388). Абсолютное значение показателя точности измерений представляют двумя значащими цифрами, если первая цифра не превышает трех. В остальных случаях оставляют одну значащую цифру.

<a id="p100391"></a>9 Контроль качества результатов измерений

<a id="p100392"></a>Контроль качества результатов измерений в лаборатории предусматривает проведение контроля стабильности результатов измерений с учетом требований ГОСТ ИСО 5725-6 (раздел 6).
<a id="p100393"></a>Периодичность контроля и процедуры контроля стабильности результатов измерений регламентируют в руководстве по качеству лаборатории в соответствии с ГОСТ ИСО/МЭК 17025 (пункт 4.2).

<a id="p100394"></a>10 Требования безопасности


#### <a id="p100395"></a>10.1 Условия безопасного проведения работ


<a id="p100396"></a>При проведении измерений следует соблюдать требования:
- <a id="p100397"></a>пожарной безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004;
- <a id="p100398"></a>безопасности при работе с вредными веществами в соответствии с ГОСТ 12.1.007;
- <a id="p100399"></a>электробезопасности - по ГОСТ 12.1.019 и в соответствии с руководствами по эксплуатации используемого оборудования.


#### <a id="p100400"></a>10.2 Требования к квалификации операторов


<a id="p100401"></a>К выполнению испытаний и обработке результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или специальное образование, опыт работы в химической лаборатории и изучившие инструкцию по эксплуатации жидкостного хроматографа. Первое применение метода в лаборатории должно проводиться под руководством специалиста, владеющего теорией высокоэффективной жидкостной хроматографии и имеющего практические навыки в этой области.





<a id="p100402"></a>Приложение А
(справочное)

<a id="p100403"></a>**МОНИТОРИНГ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК КОЛОНКИ**

<a id="p100404"></a>А.1 Проверку оптимальности хроматографических условий (хроматографических характеристик колонки) проводят по хроматограмме градуировочного раствора N 4 с помощью программного обеспечения или вручную по показателям в соответствии с таблицами А.1 и [А.2](#p100442).

<a id="p100405"></a>Таблица А.1 [<*>](#p100440)

<a id="p100406"></a>Времена удерживания, число теоретических тарелок
и коэффициент асимметрии хроматографических пиков


| <a id="p100407"></a>Компонент | <a id="p100408"></a>Время удерживания, мин | <a id="p100409"></a>Число теоретических тарелок N | <a id="p100410"></a>Коэффициент асимметрии As |
| --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100411"></a>4-гидроксибензойная кислота | <a id="p100412"></a>4,22 +/- 0,30 | <a id="p100413"></a>12 638 | <a id="p100414"></a>1,88 |
| <a id="p100415"></a>Бензойная кислота | <a id="p100416"></a>5,36 +/- 0,25 | <a id="p100417"></a>19 080 | <a id="p100418"></a>1,91 |
| <a id="p100419"></a>Сорбиновая кислота | <a id="p100420"></a>6,04 +/- 0,25 | <a id="p100421"></a>17 358 | <a id="p100422"></a>1,74 |
| <a id="p100423"></a>Метил-4-гидроксибензоата | <a id="p100424"></a>8,07 +/- 0,25 | <a id="p100425"></a>15 471 | <a id="p100426"></a>1,55 |
| <a id="p100427"></a>Этил-4-гидроксибензоата | <a id="p100428"></a>11,45 +/- 0,20 | <a id="p100429"></a>14 071 | <a id="p100430"></a>1,41 |
| <a id="p100431"></a>н-пропил-4-гидроксибензоата | <a id="p100432"></a>18,12 +/- 0,30 | <a id="p100433"></a>12 829 | <a id="p100434"></a>1,28 |
| <a id="p100435"></a>н-бутил-4-гидроксибензоата | <a id="p100436"></a>30,81 +/- 0,45 | <a id="p100437"></a>12 520 | <a id="p100438"></a>1,25 |



<a id="p100439"></a>

---

<a id="p100440"></a><*> Значения получены при использовании хроматографической колонки Zorbax SB C 8 фирмы Agilent. Информация является рекомендуемой, приведена для удобства пользователей настоящего стандарта.

<a id="p100441"></a>Таблица А.2

<a id="p100442"></a>Разрешение хроматографических пиков консервантов


| <a id="p100443"></a>Компоненты | <a id="p100444"></a>Разрешение Rs |
| --- | --- |
| <a id="p100445"></a>4-гидроксибензойная кислота/бензойная кислота | <a id="p100446"></a>6,36 |
| <a id="p100447"></a>Бензойная кислота/сорбиновая кислота | <a id="p100448"></a>3,33 |
| <a id="p100449"></a>Сорбиновая кислота/метил-4-гидроксибензоат | <a id="p100450"></a>3,45 |
| <a id="p100451"></a>Метил-4-гидроксибензоат/этил-4-гидроксибензоат | <a id="p100452"></a>9,88 |
| <a id="p100453"></a>Этил-4-гидроксибензоат/н-пропил-4-гидроксибензоата | <a id="p100454"></a>1,28 |
| <a id="p100455"></a>н-пропил-4-гидроксибензоата/н-бутил-4-гидроксибензоат | <a id="p100456"></a>1,44 |


<a id="p100457"></a>А.2 Время удерживания соответствующего компонента определяют непосредственно из хроматограмм двух параллельных измерений одной пробы. В случае обнаружения отклонения времен удерживания более чем на 5% от ранее установленного для любого консерванта проводят контроль стабильности градуировочной характеристики согласно [6.6](#p100283).
<a id="p100458"></a>В случае невыполнения условий [неравенства (3)](#p100296) заново устанавливают градуировочную характеристику во всем диапазоне измерений. В случае выполнения условий [неравенства (3)](#p100296) допускается программное изменение времен удерживания консервантов.
<a id="p100459"></a>А.3 Число теоретических тарелок рассчитывают по формуле

<a id="p100460"></a> $N = 16 \cdot (\frac{t_{R}}{W_{b}})^{2} = 5,545 \cdot (\frac{t_{R}}{W_{h}})2$ , (А.1)

<a id="p100461"></a>где 16 и 5,545 - множители, вытекающие из свойств кривой нормального распределения;
<a id="p100462"></a>tR - время удерживания пика, мин;
<a id="p100463"></a>Wb - ширина пика у основания, мин;
<a id="p100464"></a>Wh - ширина пика на его полувысоте, мин.
<a id="p100465"></a>Колонка считается удовлетворительной, если найденное число теоретических тарелок составляет не менее 90% от приведенного в [таблице А.1](#p100406).
<a id="p100466"></a>А.4 Разрешение Rs вычисляют по формуле

<a id="p100467"></a> $R_{s} = \frac{2(t_{R2} - t_{R1})}{(W_{b1} + W_{b2})}$ , (А.2)

<a id="p100468"></a>где tR2, tR1 - времена удерживания разделяемых полностью или критически (не полностью) компонентов, мин;
<a id="p100469"></a>Wb1, Wb2 - ширина пиков у основания, мин.
<a id="p100470"></a>По результатам двух параллельных измерений вычисляют средние значения Rs для пары разделяемых полностью или критически (не полностью) компонентов (n, n + 1). Колонка считается удовлетворительной при значениях Rsn, n + 1 >= 1,0.
<a id="p100471"></a>А.5 Коэффициент асимметрии As вычисляют по формуле

<a id="p100472"></a> $A_{s} = \frac{A}{B}$ , (А.3)

<a id="p100473"></a>где A - "левый" отрезок, образованный на горизонтальной линии, проведенной на высоте 10% от основания пика и разделенной вертикалью, опущенной из вершины пика, мин;
<a id="p100474"></a>B - "правый" отрезок, образованный на горизонтальной линии, проведенной на высоте 10% от основания пика и разделенной вертикалью, опущенной из вершины пика, мин.
<a id="p100475"></a>А.6 Колонку считают удовлетворительной при значении коэффициента асимметрии, не превышающем 2,5.
<a id="p100476"></a>А.7 Контроль стабильности хроматографической колонки в процессе эксплуатации проводят не реже одного раза в две недели.





<a id="p100477"></a>Приложение Б
(справочное)

<a id="p100478"></a>**ПРИМЕРЫ ХРОМАТОГРАММ**

<a id="p100479"></a>Б.1 Примеры хроматограмм приведены на рисунках Б.1 - [Б.3](#p100487).

<a id="p100480"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/Ci6K3XJR/img_0.png) 

<a id="p100481"></a>1 - 4-гидроксибензойная кислота; 2 - бензойная кислота;
3 - сорбиновая кислота; 4 - метил-4-гидроксибензоат;
5 - этил-4-гидроксибензоат; 6 - н-пропил-4-гидроксибензоат;
7 - н-бутил-4-гидроксибензоат

<a id="p100482"></a>Рисунок Б.1 - Хроматограмма градуировочного раствора
консервантов (массовая доля каждого консерванта 40 мг/дм3)



<a id="p100483"></a> ![рис. 2](https://i.bukva.ai/Ci6K3XJR/img_1.png) 

<a id="p100484"></a>Рисунок Б.2 - Хроматограмма
концентрированного яблочного пюре



<a id="p100485"></a> ![рис. 3](https://i.bukva.ai/Ci6K3XJR/img_2.png) 

<a id="p100486"></a>1 - 4-гидроксибензойная кислота; 2 - бензойная кислота;
3 - сорбиновая кислота; 4 - метил-4-гидроксибензоат;
5 - этил-4-гидроксибензоат; 6 - н-пропил-4-гидроксибензоат;
7 - н-бутил-4-гидроксибензоат

<a id="p100487"></a>Рисунок Б.3 - Хроматограмма концентрированного яблочного
пюре с добавкой смеси консервантов (массовая доля каждого
консерванта 40 мг/кг)



<a id="p100488"></a>

---