ГОСТ 34228-2017. Межгосударственный стандарт. Продукция соковая. Определение консервантов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Актуально на 01.11.2026.
Как цитировать: "ГОСТ 34228-2017. Межгосударственный стандарт. Продукция соковая. Определение консервантов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии". ГОСТ 34228-2017. https://bukva.ai/docs/standart-gost-34228-2017
(введен в действие Приказом Росстандарта от 12.12.2017 № 1921-ст)
Примечание
Документ включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов, а в случае их отсутствия — национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза «Требования безопасности пищевых добавок, ароматизаторов и технологических вспомогательных средств» (ТР ТС 029/2012) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 07.02.2018 № 21). Текст данного документа приведен с учетом поправки, опубликованной в «ИУС», № 9, 2022. Документ введен в действие с 01.01.2019.
Введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 12 декабря 2017 г. № 1921-ст
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНСЕРВАНТОВ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Juice products. Determination of preservatives by high performance liquid chromatography method
67.080.01
Дата введения 1 января 2019 года
Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены в ГОСТ 1.0-2015 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2015 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены».
1 РАЗРАБОТАН Некоммерческой организацией «Российский союз производителей соков» (РСПС) при участии Акционерного общества «Мултон» (АО «Мултон») и Общества с ограниченной ответственностью «ПепсиКо Холдингс» (ООО «ПепсиКо Холдингс»)
2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии
3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 30 ноября 2017 г. № 52-2017)
4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 12 декабря 2017 г. № 1921-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 34228-2017 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2019 г.
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru).
Настоящий стандарт распространяется на соковую продукцию из фруктов и овощей и устанавливает метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для измерения массовой доли консервантов <*>:
<*> Для некоторых ягод (клюква, брусника и др.) характерно природное (естественное) содержание бензойной кислоты в диапазоне 50 — 250 мг/кг. Данное соединение консервантом не является, что следует учитывать при измерении соков и соковой продукции из данных ягод на подлинность и безопасность.
- 4-гидроксибензойной кислоты;
- бензойной кислоты;
- сорбиновой кислоты;
- метил-4-гидроксибензоата;
- этил-4-гидроксибензоата;
- н-пропил-4-гидроксибензоата;
- н-бутил-4-гидроксибензоата.
Диапазон измерений массовой концентрации (массовой доли) консервантов составляет от 10,0 до 320 мг/дм3 (млн-1) без учета разбавления пробы.
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:
ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования
ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности
ГОСТ 12.1.019-79 <**> Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты
<**> В Российской Федерации действует ГОСТ Р 12.1.019-2009.
ГОСТ 61-75 Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия
ГОСТ OIML R 76-1-2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания
ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
ГОСТ 3117-78 Реактивы. Аммоний уксуснокислый. Технические условия
ГОСТ ИСО 5725-6-2003 <***> Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике
<***> В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002.
ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия
ГОСТ ISO 7886-1-2011 Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования
ГОСТ 10521-78 Реактивы. Кислота бензойная. Технические условия
ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия
ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2009 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий
ГОСТ 22967-90 Шприцы медицинские инъекционные многократного применения. Общие технические требования и методы испытаний
ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 26313-2014 Продукты переработки фруктов и овощей. Правила приемки и методы отбора проб
ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования
Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
Метод основан на разделении группы консервантов на аналитических обращенно-фазовых хроматографических колонках, заполненных сорбентом С8 с дополнительными функциональными группами («энд-кэпинг»).
Детектирование разделенных консервантов осуществляют с помощью спектрофотометрического детектора или диодноматричного детектора в диапазоне длин волн 190 — 600 нм.
При необходимости идентификацию консервантов в пробе соковой продукции проводят путем сравнения времен удерживания и спектров поглощения (см. таблицу 1).
4 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы, посуда и материалы
4.1 Хроматограф жидкостный, снабженный спектрофотометрическим детектором, позволяющим проводить измерения в диапазоне длин волн 190 — 600 нм, либо диодно-матричным детектором, позволяющим проводить измерения в диапазоне длин волн 190 — 600 нм, снабженный программным обеспечением для сбора и обработки хроматографических данных. Требования к метрологическим характеристикам хроматографа приведены в таблицах 2 и 3.
Метрологические характеристики хроматографа со спектрофотометрическим детектором
| Относительное среднеквадратичное отклонение выходного сигнала, %, не более | |||
| по площади пика | по высоте пика | по времени удерживания | по площади пика за 8 ч непрерывной работы |
| 3 | 3 | 1,0 | 4 |
Метрологические характеристики хроматографа с диодно-матричным детектором
4.2 Весы с максимальной нагрузкой от 200 до 220 г, с пределом допускаемой погрешности взвешивания +/- 0,0001 г.
4.3 Весы неавтоматического действия по ГОСТ OIML R 76-1, с максимальной нагрузкой от 200 до 220 г, с пределом допускаемой погрешности взвешивания +/- 0,001 г.
4.4 Пипетки градуированные 2-1-2-5, 2-1-2-10 и 2-1-2-25 по ГОСТ 29227.
4.5 Колбы мерные 2-25-2, 2-50-2, 2-100-2, 2-1000-2 по ГОСТ 1770.
4.6 Цилиндры мерные 2-го класса точности любого исполнения вместимостью 1000 см3 по ГОСТ 1770.
4.7 Стаканы любого типа исполнения 1 вместимостью 50, 100 и 1000 см3 по ГОСТ 25336.
4.8 Пробирки для центрифугирования вместимостью 2, 10 и 20 см3.
4.9 Вода глубокой очистки или вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
4.10 Фильтры мембранные с размером пор 0,45 и 0,20 мкм.
4.11 Виалы стеклянные вместимостью 2 см3.
4.12 Микрошприц вместимостью 250 мм3 (для ручного ввода пробы).
4.13 Шприц медицинский вместимостью 5 см3 многократного применения по ГОСТ 22967 или однократного применения по ГОСТ ISO 7886-1.
4.14 Центрифуга, обеспечивающая фактор разделения (g-фактор) не менее 1000.
4.15 Колонка хроматографическая (250 x 4,6 мм), заполненная обращенно-фазовым сорбентом С8 с дополнительно привитыми изопропиловыми группами (-C3H7), снабженная защитной предколонкой.
Примечание — Допускается использование хроматографических колонок других типоразмеров, обеспечивающих разделение определяемых консервантов в соответствии с критериями, приведенными в приложении А.
4.16 Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.
4.17 Кислота сорбиновая с массовой долей основного вещества не менее 99% или калий сорбиновокислый с массовой долей основного вещества не менее 99%.
4.18 Кислота бензойная по ГОСТ 10521, ч. или бензоат натрия с массовой долей основного вещества не менее 99%.
4.19 Кислота 4-гидроксибензойная с массовой долей основного вещества не менее 99%.
4.20 Метил-4-гидроксибензоат с массовой долей основного вещества не менее 99%.
4.21 Этил-4-гидроксибензоат с массовой долей основного вещества не менее 99%.
4.22 н-пропил-4-гидроксибензоат с массовой долей основного вещества не менее 99%.
4.23 н-бутил-4-гидроксибензоат с массовой долей основного вещества не менее 99%.
4.24 Ацетонитрил для высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), оптической плотностью при 200 нм не более 0,012 е. о. п./см.
4.25 Кислота уксусная ледяная по ГОСТ 61, х. ч.
4.26 Аммоний уксуснокислый по ГОСТ 3117, х. ч.
4.27 Мономер (pH-метр) с пределом абсолютной погрешности измерений +/- 0,1 ед. pH.
Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками не ниже вышеуказанных, вспомогательного оборудования, посуды, материалов с техническими характеристиками не ниже вышеуказанных и химических реактивов аналогичной или более высокой квалификации.
Отбор проб соковой продукции проводят по ГОСТ 26313.
6 Подготовка к проведению измерений
6.1 Общие положения
Разделение группы консервантов происходит при температуре окружающей среды в градиентном режиме с использованием следующих подвижных фаз:
Для продления срока службы и более эффективной работы колонки используют систему защиты [in-line-фильтры на выходе из насоса и предколонку, периодическую промывку (не реже одного-двух раз в неделю) колонки смесью ацетонитрил — вода глубокой очистки (объемное соотношение 4:1) или ацетонитрилом (в зависимости от числа проведенных измерений и концентрации органических веществ, прошедших через колонку) в течение 1 — 3 ч с предварительной промывкой всей системы водой. Операции заполнения системы растворителями и промывка отдельных частей и системы в целом выполняют в соответствии с руководствами по эксплуатации оборудования.
6.2 Приготовление рабочих растворов
6.2.1 Приготовление раствора уксуснокислого аммония молярной концентрации 0,01 моль/дм3 с pH 4,2 (Подвижная фаза A)
(0,770 +/- 0,001) г уксуснокислого аммония взвешивают в стакане вместимостью 100 см3, растворяют в приблизительно 80 см3 воды глубокой очистки, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят водой до метки и перемешивают. Раствор переносят в мерный стакан вместимостью 1000 см3 и доводят pH до значения 4,2 ед. pH ледяной уксусной кислотой, регистрируя показания иономером. Полученный раствор дегазируют под вакуумом в течение 15 мин с одновременной фильтрацией через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм (см. 4.10).
Раствор используют в течение трех дней при условии визуального отсутствия нерастворимых веществ. Перед использованием элюента в последующие дни его предварительно дегазируют под вакуумом в течение 15 мин с одновременной фильтрацией через фильтр с диаметром пор 0,20 мкм (см. 4.10).
Подвижную фазу приготавливают в объеме, необходимом для проведения серии измерений.
6.3 Приготовление градуировочных растворов
Градуировочные растворы консервантов готовят в соответствии с таблицей 4.
Раствор № 4 рекомендуется использовать в качестве одного из контрольных растворов при ежедневных измерениях.
Срок хранения раствора № 4 — не более трех дней при температуре (20 +/- 5) °C или не более 1 мес при температуре от 2 до 6 °C.
Растворы № 1, 2, 3, 5 и 6 используют свежеприготовленными.
6.4 Подготовка хроматографа к работе
Включение и подготовку хроматографа к работе, а также выключение хроматографа по окончании работы осуществляют в соответствии с руководством по эксплуатации.
6.5 Условия хроматографического анализа
При проведении хроматографического анализа создают и поддерживают следующие условия:
- температура колонки — температура окружающей среды;
- рабочая длина волны спектрофотометрического детектора — 235 нм или диапазон длин волн для диодно-матричного детектора — 190 — 600 нм;
- объем вводимой пробы — от 5 до 20 мм3;
- режим элюирования — градиентный, скорость потока — 1,0 см3/мин (см. таблицу 5).
| Время, мин | Объемная доля элюента A (см. 6.2.1), % | Объемная доля элюента B (ацетонитрил), % |
|---|---|---|
| 0 | 75 | 25 |
| 8,5 | 75 | 25 |
| 9 | 65 | 35 |
| 16 | 65 | 35 |
| 17 | 55 | 45 |
| 26 | 55 | 45 |
| 27 | 75 | 25 |
| 32 | 75 | 25 |
Мониторинг состояния хроматографической колонки проводят в соответствии с приложением А. Допускается изменение скорости потока и параметров градиентного режима в соответствии с указаниями изготовителя колонки при условии выполнения критериев, приведенных в приложении А.
6.6 Градуировка хроматографа
Градуировку хроматографа проводят в соответствии с руководством по эксплуатации и руководством пользователя программного обеспечения с использованием градуировочных растворов (см. 6.3). Регистрируют по две хроматограммы каждого градуировочного раствора, определяют площадь пиков определяемых компонентов на хроматограммах градуировочных растворов и устанавливают градуировочную характеристику в виде линейной зависимости площади пика соответствующего компонента S, е. о. п.·с <*> и его массовой концентрации c, мг/дм3
где k — градуировочный коэффициент, мг/дм3·(е. о. п.·с)-1.
<*> е. о. п. — единицы оптической плотности.
Градуировочный коэффициент k, мг/дм3, вычисляют с использованием программного обеспечения к хроматографу или по методу наименьших квадратов, принимая свободный член в уравнении регрессии равным нулю, по формуле
k = \frac{\sum (S_{i} \cdot c_{i})}{\sum S_{i}^{2}} , (2)
где Si — площадь пика соответствующего консерванта при измерении i-го градуировочного раствора, е. о. п.·с;
ci — массовая концентрация консерванта при измерении i-го градуировочного раствора, мг/дм3.
Градуировку проводят при смене оборудования, колонок, условий хроматографического анализа или при выявлении несоответствий при оперативном контроле качества измерений или при внутреннем аудите.
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят, используя градуировочные растворы № 4 и 6 перед проведением измерений.
Результаты контроля стабильности градуировочной характеристики признаются удовлетворительными при выполнении условия
|Xизм — Cст| <= 0,01·G·Cст, (3)
где Xизм — результат измерения массовой концентрации консерванта в контрольных растворах, мг/дм3;
Cст — фактическое значение массовой концентрации консерванта в контрольных растворах, мг/дм3;
G — норматив контроля стабильности градуировочной характеристики, %.
Во всем диапазоне градуировочной характеристики G = 4,5%. Если условие (3) не выполняется, градуировочную характеристику устанавливают заново во всем диапазоне измерений.
7.1 Подготовка проб для измерений
7.1.1 Осветленные соки, нектары и сокосодержащие напитки, не содержащие нерастворимых в воде веществ, анализируют при двукратном разбавлении подвижной фазой A (см. 6.2.1). Для этого пипеткой отбирают 25 см3 пробы, помещают в мерную колбу вместимостью 50 см3 и доводят до метки подвижной фазой. Приготовленный раствор перемешивают, после чего через иглу отбирают в медицинский шприц аликвоту раствора, заменяют иглу на дисковый фильтр с размером пор 0,20 мкм и отфильтровывают в виалу 1 — 1,5 см3 приготовленного раствора.
Приготовленный раствор используют для хроматографического анализа (см. 7.2.3).
7.1.2 Соки, нектары и сокосодержащие напитки с мякотью или содержащие нерастворимые в воде вещества разбавляют подвижной фазой A (см. 6.2.1) в два раза, для этого пипеткой отбирают 25 см3 пробы, помещают в мерную колбу вместимостью 50 см3 и доводят до метки подвижной фазой A. Затем пробу центрифугируют со скоростью 9000 об/мин в течение 5 мин или не менее 3000 об/мин в течение 15 мин. После этого аккуратно отбирают в медицинский шприц через иглу ориентировочно 2 см3 полученного раствора, заменяют иглу на дисковый фильтр с размером пор 0,45 мкм и отфильтровывают в виалу 1 см3 этого раствора.
Приготовленный раствор используют для хроматографического анализа (см. 7.2.3).
7.1.3 Концентрированные соки и пюре различных фруктов, ягод и овощей разбавляют раствором элюента в пять раз весовым методом. Для этого в стакане вместимостью 50 см3 взвешивают 5 г пробы концентрированного сока с погрешностью +/- 0,001 г и добавляют приблизительно 20 г элюента также с погрешностью +/- 0,001 г, тщательно перемешивают. Затем пробу центрифугируют со скоростью 9000 об/мин в течение 5 мин или не менее 3000 об/мин в течение 15 мин. После этого аккуратно отбирают в медицинский шприц через иглу примерно 2 см3 полученного раствора, заменяют иглу на дисковый фильтр с размером пор 0,45 мкм и отфильтровывают в виалу 1 см3 этого раствора.
Приготовленный раствор используют для хроматографического анализа (см. 7.2.3).
7.1.4 При подготовке пробы по 7.1.3 результат измерений выражают в единицах массовой доли (млн-1), а при подготовке пробы по 7.1.1, 7.1.2 - в единицах массовой концентрации (мг/дм3).
7.2 Порядок проведения измерений
7.2.1 Включение и вывод хроматографической системы на рабочий режим, включая кондиционирование колонки, проводят в соответствии с руководствами по эксплуатации оборудования, колонки — с учетом 6.1 и 6.5.
7.2.2 Выключение хроматографической системы после выполнения измерений проводят в соответствии с руководством по эксплуатации оборудования и руководством пользователя программно-аппаратным комплексом сбора и обработки данных.
Примеры хроматограмм градуировочных растворов и проб приведены в приложении Б.
7.2.3 Подготовленную по 7.1.1 - 7.1.3 пробу дозируют в хроматограф и регистрируют хроматограмму в тех же условиях, в которых были зарегистрированы хроматограммы градуировочных растворов (см. 6.5, 6.6). На полученных хроматограммах идентифицируют пики определяемых компонентов по спектрам поглощения (см. таблицу 1) и совпадению времен удерживания в градуировочных растворах и пробах при ширине окна идентификации 5%. Используя значения площадей пиков, вычисляют значения массовой концентрации идентифицированных консервантов, используя градуировочные характеристики, установленные по 6.6.
8 Обработка и оформление результатов измерений
8.1 Если подготовку пробы проводили по 7.1.1 или 7.1.2, то массовую концентрацию консервантов в пробе C, мг/дм3, вычисляют по формуле
C = \frac{c_{\text{изм}} \cdot V_{2}}{V_{1}} , (4)
где cизм — измеренное (см. 7.2.3) значение массовой концентрации соответствующего консерванта в пробе, подготовленной по 7.1.1 или 7.1.2, мг/дм3;
V2 — объем мерной колбы, взятой для разбавления пробы, см3;
V1 — объем пробы, отобранный для анализа см3.
За результат измерений массовой концентрации консерванта в пробе принимают среднеарифметическое значение \overline{C} , мг/дм3, результатов двух параллельных определений C1 и C2, мг/дм3, при выполнении условия
100 \cdot \frac{|C_{1} - C_{2}|}{\overline{C}} \leq r_{\text{отн}} , (5)
где rотн — предел повторяемости (см. таблицу 6), %.
8.2 Если подготовку пробы проводили по 7.1.3, то массовую долю консервантов в пробе X, млн-1, вычисляют по формуле
X = \frac{X_{\text{изм}} \cdot m_{\text{общ}}}{m_{X}} , (6)
где Xизм — значение массовой доли соответствующего консерванта в растворе, подготовленном по 7.1.3, принимаемое численно равным измеренному по 7.2.3 значению массовой концентрации, млн-1;
mобщ — масса навески анализируемой пробы с добавкой подвижной фазы (см. 7.1.3), г;
mX — масса анализируемой пробы, г.
За результат измерений массовой доли консервантов в пробе принимают среднеарифметическое значение \overline{X} , млн-1, результатов двух параллельных измерений X1 и X2, млн-1, при выполнении условия
100 \cdot \frac{|X_{1} - X_{2}|}{\overline{X}} \leq r_{\text{отн}} , (7)
где rотн — предел повторяемости (см. таблицу 6), %.
При невыполнении условий (5) и (7) получают еще два результата измерений в соответствии с разделом 7 и затем используют методы проверки приемлемости четырех результатов параллельных измерении и установления результата измерений согласно ГОСТ ИСО 5725-6 (подраздел 5.2).
8.3 При получении результатов измерений в двух лабораториях за результат измерений принимают среднеарифметическое значение результатов измерений, полученных в этих лабораториях \overline{C_{1\text{лаб}}} и \overline{C_{2\text{лаб}}} , мг/дм3, или \overline{X_{1\text{лаб}}} и \overline{X_{2\text{лаб}}} , млн-1, при выполнении условий
200 \cdot |\overline{C_{1\text{лаб}}} - \overline{C_{2\text{лаб}}}| \leq CD_{0,95} \cdot (\overline{C_{1\text{лаб}}} + \overline{C_{2\text{лаб}}}) , (8)
200 \cdot |\overline{X_{1\text{лаб}}} - \overline{X_{2\text{лаб}}}| \leq CD_{0,95} \cdot (\overline{X_{1\text{лаб}}} + \overline{X_{2\text{лаб}}}) , (9)
где CD0,95 — значение предела воспроизводимости.
Значение CD0,95 вычисляют с использованием пределов повторяемости (rотн, %) и воспроизводимости (Rотн, %), приведенных в таблице 6, по формуле
CD_{0,95} = \sqrt{R_{\text{отн}}^{2} - r_{\text{отн}}^{2} \cdot (1 - \frac{1}{2 \cdot n_{1}} - \frac{1}{2 \cdot n_{2}})} , (10)
где n1 и n2 - число параллельных измерений, выполненных в первой и второй лабораториях соответственно.
Пределы повторяемости и воспроизводимости
При невыполнении условия (8) или (9) для проверки приемлемости в условиях воспроизводимости каждая лаборатория должна выполнить процедуры согласно ГОСТ ИСО 5725-6 (пункты 5.3.3, 5.3.4).
8.4 Результаты измерений регистрируют в протоколе испытаний, который оформляют в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО/МЭК 17025. При этом протокол испытаний должен содержать ссылку на настоящий стандарт с указанием метода подготовки пробы.
Результаты измерений массовой концентрации консервантов представляют в виде
\overline{C} \pm \Delta_{C} , (11)
где \overline{C} — результат измерений массовой концентрации консервантов (см. 8.1), мг/дм3;
\Delta_{C} — границы абсолютной погрешности измерений массовой концентрации консервантов при доверительной вероятности P = 0,95, мг/дм3, вычисляемые по формуле
\Delta_{C} = 0,01 \cdot \delta \cdot \overline{C} , (12)
где \delta — границы относительной погрешности измерений массовой концентрации консервантов (см. таблицу 7), %.
Диапазон измерений, относительные значения показателей повторяемости, воспроизводимости, точности методики при доверительной вероятности P = 0,95
| Определяемый консервант | Диапазон измерения массовой концентрации, (массовой доли), мг/дм3 (млн-1) | Относительное стандартное отклонение сходимости (повторяемости) \sigma_{r} , % | Относительное стандартное отклонение воспроизводимости \sigma_{R} , % | Показатель точности измерений (границы относительной погрешности измерений при доверительной вероятности P = 0,95 <*>) \pm \delta , % |
| 4-гидроксибензойная кислота | 10 — 320 | 2 | 4 | 9 |
| Бензойная кислота | ||||
| Сорбиновая кислота | ||||
| Метил-4-гидроксибензоата | ||||
| Этил-4-гидроксибензоата | ||||
| н-пропил-4-гидроксибензоата | ||||
| н-бутил-4-гидроксибензоата | ||||
| <*> Численные значения границ относительной погрешности соответствуют численным значениям расширенной неопределенности (в относительных единицах) Uотн при коэффициенте охвата k = 2. | ||||
Результаты измерений массовой доли консервантов представляют в виде
\overline{X} \pm \Delta_{X} , (13)
где \overline{X} — результат измерений массовой доли консервантов (см. 8.2), млн-1;
\Delta_{X} — границы абсолютной погрешности измерений массовой доли консервантов при доверительной вероятности P = 0,95, млн-1, вычисляемые по формуле
\Delta_{X} = 0,01 \cdot \delta \cdot \overline{X} , (14)
где \delta — границы относительной погрешности измерений массовой доли консервантов (см. таблицу 7), %.
Численное значение результата измерений должно оканчиваться цифрой того же разряда, что и абсолютное значение показателя точности измерений, вычисленное по формуле (12) или (14). Абсолютное значение показателя точности измерений представляют двумя значащими цифрами, если первая цифра не превышает трех. В остальных случаях оставляют одну значащую цифру.
9 Контроль качества результатов измерений
Контроль качества результатов измерений в лаборатории предусматривает проведение контроля стабильности результатов измерений с учетом требований ГОСТ ИСО 5725-6 (раздел 6).
Периодичность контроля и процедуры контроля стабильности результатов измерений регламентируют в руководстве по качеству лаборатории в соответствии с ГОСТ ИСО/МЭК 17025 (пункт 4.2).
10.1 Условия безопасного проведения работ
При проведении измерений следует соблюдать требования:
- пожарной безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004;
- безопасности при работе с вредными веществами в соответствии с ГОСТ 12.1.007;
- электробезопасности — по ГОСТ 12.1.019 и в соответствии с руководствами по эксплуатации используемого оборудования.
10.2 Требования к квалификации операторов
К выполнению испытаний и обработке результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или специальное образование, опыт работы в химической лаборатории и изучившие инструкцию по эксплуатации жидкостного хроматографа. Первое применение метода в лаборатории должно проводиться под руководством специалиста, владеющего теорией высокоэффективной жидкостной хроматографии и имеющего практические навыки в этой области.
МОНИТОРИНГ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК КОЛОНКИ
А.1 Проверку оптимальности хроматографических условий (хроматографических характеристик колонки) проводят по хроматограмме градуировочного раствора № 4 с помощью программного обеспечения или вручную по показателям в соответствии с таблицами А.1 и А.2.
Таблица А.1 <*>
Времена удерживания, число теоретических тарелок и коэффициент асимметрии хроматографических пиков
<*> Значения получены при использовании хроматографической колонки Zorbax SB C 8 фирмы Agilent. Информация является рекомендуемой, приведена для удобства пользователей настоящего стандарта.
Разрешение хроматографических пиков консервантов
А.2 Время удерживания соответствующего компонента определяют непосредственно из хроматограмм двух параллельных измерений одной пробы. В случае обнаружения отклонения времен удерживания более чем на 5% от ранее установленного для любого консерванта проводят контроль стабильности градуировочной характеристики согласно 6.6.
В случае невыполнения условий неравенства (3) заново устанавливают градуировочную характеристику во всем диапазоне измерений. В случае выполнения условий неравенства (3) допускается программное изменение времен удерживания консервантов.
А.3 Число теоретических тарелок рассчитывают по формуле
N = 16 \cdot (\frac{t_{R}}{W_{b}})^{2} = 5,545 \cdot (\frac{t_{R}}{W_{h}})2 , (А.1)
где 16 и 5,545 — множители, вытекающие из свойств кривой нормального распределения;
tR — время удерживания пика, мин;
Wb — ширина пика у основания, мин;
Wh — ширина пика на его полувысоте, мин.
Колонка считается удовлетворительной, если найденное число теоретических тарелок составляет не менее 90% от приведенного в таблице А.1.
А.4 Разрешение Rs вычисляют по формуле
R_{s} = \frac{2(t_{R2} - t_{R1})}{(W_{b1} + W_{b2})} , (А.2)
где tR2, tR1 — времена удерживания разделяемых полностью или критически (не полностью) компонентов, мин;
Wb1, Wb2 — ширина пиков у основания, мин.
По результатам двух параллельных измерений вычисляют средние значения Rs для пары разделяемых полностью или критически (не полностью) компонентов (n, n + 1). Колонка считается удовлетворительной при значениях Rsn, n + 1 >= 1,0.
А.5 Коэффициент асимметрии As вычисляют по формуле
где A — «левый» отрезок, образованный на горизонтальной линии, проведенной на высоте 10% от основания пика и разделенной вертикалью, опущенной из вершины пика, мин;
B — «правый» отрезок, образованный на горизонтальной линии, проведенной на высоте 10% от основания пика и разделенной вертикалью, опущенной из вершины пика, мин.
А.6 Колонку считают удовлетворительной при значении коэффициента асимметрии, не превышающем 2,5.
А.7 Контроль стабильности хроматографической колонки в процессе эксплуатации проводят не реже одного раза в две недели.
Б.1 Примеры хроматограмм приведены на рисунках Б.1 - Б.3.
1 — 4-гидроксибензойная кислота; 2 — бензойная кислота; 3 — сорбиновая кислота; 4 — метил-4-гидроксибензоат; 5 — этил-4-гидроксибензоат; 6 — н-пропил-4-гидроксибензоат; 7 — н-бутил-4-гидроксибензоат
Рисунок Б.1 — Хроматограмма градуировочного раствора консервантов (массовая доля каждого консерванта 40 мг/дм3)
Рисунок Б.2 — Хроматограмма концентрированного яблочного пюре
1 — 4-гидроксибензойная кислота; 2 — бензойная кислота; 3 — сорбиновая кислота; 4 — метил-4-гидроксибензоат; 5 — этил-4-гидроксибензоат; 6 — н-пропил-4-гидроксибензоат; 7 — н-бутил-4-гидроксибензоат
Рисунок Б.3 — Хроматограмма концентрированного яблочного пюре с добавкой смеси консервантов (массовая доля каждого консерванта 40 мг/кг)