ГОСТ 34146-2017. Межгосударственный стандарт. Добавки пищевые. Методы идентификации и определения массовой доли основного красящего вещества пищевого красителя куркумин E100
(введен в действие Приказом Росстандарта от 19 сентября 2017 № 1171-ст)
Примечание
Документ включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов, а в случае их отсутствия — национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза «Требования безопасности пищевых добавок, ароматизаторов и технологических вспомогательных средств» (ТР ТС 029/2012) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 07.02.2018 № 21). Текст данного документа приведен с учетом поправки, опубликованной в «ИУС», № 9, 2022. Документ введен в действие с 01.01.2019.
Введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 19 сентября 2017 г. № 1171-ст
МЕТОДЫ ИДЕНТИФИКАЦИИ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ МАССОВОЙ ДОЛИ ОСНОВНОГО КРАСЯЩЕГО ВЕЩЕСТВА ПИЩЕВОГО КРАСИТЕЛЯ КУРКУМИН E100
Food additives. Methods for identification and determination of total coloring matter percentage of food colour curcumin E100
Дата введения 1 января 2019 года
Предисловие
Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены в ГОСТ 1.0-2015 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2015 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены»
Сведения о стандарте
1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным научным учреждением «Всероссийский научно-исследовательский институт пищевых добавок» (ФГБНУ ВНИИПД)
2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии
3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 1 июня 2017 г. № 51)
4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 19 сентября 2017 г. № 1171-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 34146-2017 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2019 г.
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)
1 Область применения
Настоящий стандарт распространяется на пищевую добавку куркумин E100, представляющую собой пищевой краситель (далее — краситель), и устанавливает:
- идентификационные тесты на основное красящее вещество красителя;
- хроматографический метод качественного определения (идентификации) основного красящего вещества красителя в тонком слое сорбента;
- спектрофотометрический метод определения массовой доли основного красящего вещества красителя.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:
ГОСТ 12.0.004-2015 Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения
ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования
ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны
ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности
ГОСТ 12.2.007.0-75 Система стандартов безопасности труда. Изделия электротехнические. Общие требования безопасности
ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание
ГОСТ 12.4.021-75 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования
ГОСТ 12.4.103-83 Система стандартов безопасности труда. Одежда специальная защитная, средства индивидуальной защиты ног и рук. Классификация
ГОСТ 427-75 Линейки измерительные металлические. Технические условия
ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-73, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
ГОСТ 3118-77 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия
ГОСТ 3760-79 Реактивы. Аммиак водный. Технические условия
ГОСТ 4204-77 Реактивы. Кислота серная. Технические условия
ГОСТ 5830-79 Реактивы. Спирт изоамиловый. Технические условия
ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия
ГОСТ ISO 7886-1-2011 Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования
ГОСТ 9656-75 Реактивы. Кислота борная. Технические условия
ГОСТ 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия <*>
<*> В Российской Федерации действует ГОСТ Р 55878-2013 «Спирт этиловый технический гидролизный ректификованный. Технические условия».
ГОСТ 21241-89 Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний
ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования
Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
3 Отбор проб
3.1 Пробы для анализа красителя отбирают из каждой упаковочной единицы партии красителя, попавшей в выборку по 3.2.
Партией считают количество красителя, произведенное одним изготовителем по одному нормативному документу за один технологический цикл, в одинаковой упаковке, сопровождаемое товаросопроводительной документацией, обеспечивающей прослеживаемость продукции.
3.2 Выборку упаковочных единиц из партии осуществляют методом случайного отбора в соответствии с таблицей 1.
| Количество упаковочных единиц в партии, шт. | Объем выборки, шт. |
|---|---|
| От 2 до 15 включ. | 2 |
| От 16 до 25 включ. | 3 |
| От 26 до 90 включ. | 5 |
| От 91 до 150 включ. | 8 |
| От 151 до 500 включ. | 13 |
| От 501 до 1200 | 20 |
3.3 Из разных мест каждой упаковочной единицы, попавшей в выборку в соответствии с таблицей 1, отбирают мгновенные пробы пробоотборником (щупом), погружая его не менее чем на 3/4 глубины.
Масса мгновенной пробы должна быть не более 10 г.
Количество и масса мгновенных проб от каждой упаковочной единицы должны быть одинаковыми.
3.4 Составляют суммарную пробу, для этого мгновенные пробы, отобранные по 3.2, помещают в сухую чистую емкость из стекла или полимерных материалов и тщательно перемешивают шпателем.
Рекомендуемая масса суммарной пробы должна быть не менее 50 г.
3.5 Подготовленную суммарную пробу делят на две равные части, которые помещают в чистые, сухие, плотно закрывающиеся стеклянные или полимерные емкости.
Емкость с первой частью суммарной пробы направляют в лабораторию для проведения анализов.
Емкость со второй частью пробы опечатывают, пломбируют и хранят для повторного контроля в случае возникновения разногласий в оценке качества и безопасности красителя. Срок хранения пробы в темном месте при температуре от 5 до 8 °C и относительной влажности не более 60% — до окончания срока годности красителя.
3.6 Емкости с пробами снабжают этикетками, на которых должны быть указаны:
- полное наименование красителя и его E-номер;
- наименование и местонахождение изготовителя;
- номер партии;
- масса нетто партии;
- количество упаковочных единиц в партии;
- дата изготовления;
- дата отбора проб;
- срок хранения пробы;
- фамилии лиц, проводивших отбор данной пробы.
4 Требования безопасности
4.1 При выполнении анализов необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007 и ГОСТ 12.4.103.
4.2 Помещение, в котором проводят анализы, должно быть оборудовано общей приточно-вытяжной вентиляцией по ГОСТ 12.4.021.
4.3 Электробезопасность при работе с электроустановками — по ГОСТ 12.2.007.0.
4.4 Организация обучения работающих безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.
4.5 Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.
4.6 При работе с пищевым красителем контроль воздуха рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005.
5 Условия проведения анализа
При подготовке и проведении анализа должны быть соблюдены следующие условия:
Все операции с реактивами следует проводить в вытяжном шкафу.
6 Требования к квалификации оператора
К выполнению и обработке результатов анализа допускают специалиста, имеющего высшее или среднее специальное химическое образование и опыт работы в химической лаборатории, владеющего техникой выполнения анализов с применением спектрофотометрии и тонкослойной хроматографии, освоившего настоящую методику, прошедшего обучение работе с приборами и инструктаж по технике безопасности.
7 Средства измерений, вспомогательные оборудование и устройства, посуда, реактивы
7.1 Весы утвержденного типа, поверенные в установленном порядке, с пределами допускаемой абсолютной погрешности не более +/- 0,2 мг.
7.2 Спектрофотометр диапазоном измерения в интервале длин волн от 350 до 700 нм, допустимой абсолютной погрешностью коэффициента пропускания не более +/- 1%, укомплектованный компьютером, принтером и соответствующим аттестованным программным обеспечением.
7.3 Кюветы кварцевые с толщиной поглощающего слоя 1 см.
7.4 Линейка 150 (300) с одной шкалой по ГОСТ 427.
7.5 Камера хроматографическая с размерами сторон 24 x 24 x 10 см.
7.6 Пластина для тонкослойной хроматографии (ТСХ) с микрокристаллической целлюлозой толщиной слоя 0,1 мм на полимерной подложке с размерами сторон 20 x 20 см.
7.7 Шприц медицинский инъекционный вместимостью от 10 до 20 см3 по ГОСТ ISO 7886-1.
7.8 Микрошприц вместимостью 10,0 мм3 (10 мкл) с ценой деления не более 0,2 мм3 (0,2 мкл).
7.9 Пинцет медицинский по ГОСТ 21241.
7.10 Облучатель хроматографический ультрафиолетовый с длиной волны 254 — 365 нм.
7.11 Пипетки 1-1-1-1, 1-1-1-2, 1-1-1-10 по ГОСТ 29227.
7.12 Колбы 2-100-1, 2-200-1 по ГОСТ 1770.
7.13 Стакан В-1-50 ТС по ГОСТ 25336.
7.14 Цилиндр 1-50-1 с ценой наименьшего деления 1 см3 по ГОСТ 1770.
7.15 Пробки из пластмассы или стеклянные с конусами 12/21, 14/23 по ГОСТ 1770.
7.16 Палочка стеклянная.
7.17 Колба Кн-1-50-14/23 по ГОСТ 25336.
7.18 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
7.19 Спирт этиловый ректификованный технический высшего сорта по ГОСТ 18300.
7.20 Аммиак водный по ГОСТ 3760, ч.д.а., раствор массовой концентрацией 250 г/дм3.
7.21 Спирт изоамиловый по ГОСТ 5830, ч.д.а.
7.22 Кислота борная по ГОСТ 9656, х.ч.
7.23 Кислота серная по ГОСТ 4204, ч.д.а.
7.24 Кислота соляная по ГОСТ 3118, ч.д.а.
Допускается использование других средств измерений, вспомогательных оборудования и устройств, посуды, не уступающих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающих необходимую точность измерения, а также реактивов по качеству не ниже вышеуказанных.
8 Тесты на куркумин
8.1 Подготовка к анализу
8.1.1 Приготовление раствора анализируемого красителя
В стаканчике вместимостью 50 см3 взвешивают 0,0800 г анализируемого красителя. Отмеряют цилиндром 20 см3 этилового спирта (см. 7.19) и переносят его в стаканчик, перемешивают содержимое стаканчика стеклянной палочкой до полного растворения красителя. Затем раствор переносят количественно в мерную колбу (с пришлифованной пробкой) вместимостью 200 см3, доводят объем раствора в колбе этиловым спиртом (7.19) до метки, закрывают колбу пробкой и тщательно перемешивают содержимое.
8.1.2 В мерную колбу (с пришлифованной пробкой) вместимостью 100 см3 вносят пипеткой (7.11) 1 см3 раствора красителя по 8.1.1 и доводят объем раствора в колбе этиловым спиртом (7.19) до метки, закрывают колбу пробкой и тщательно перемешивают содержимое.
Растворы готовят непосредственно перед анализом.
8.1.3 В стаканчике вместимостью 50 см3 взвешивают 0,50 г борной кислоты по 7.22.
8.2 Тест на флуоресценцию в ультрафиолетовом свете
В стаканчик вместимостью 50 см3 отмеряют цилиндром 20 см3 раствора красителя по 8.1.2 и помещают под хроматографический облучатель (7.10) с длиной волны диапазоном от 254 до 365 нм. Раствор красителя должен флуоресцировать желто-зеленым светом.
8.3 Тест с соляной и борной кислотами
В стаканчик вместимостью 50 см3 отмеряют цилиндром 20 см3 раствора красителя по 8.1.1 и пипеткой добавляют по каплям 3 см3 раствора соляной кислоты (7.24), перемешивая раствор после каждого добавления до появления оранжевого окрашивания раствора. Затем в стаканчик добавляют борную кислоту (8.1.3) и перемешивают. Раствор красителя должен изменить оранжевый цвет на вишнево-красный.
8.4 Тест с серной кислотой
В стаканчик вместимостью 50 см3 отмеряют цилиндром 20 см3 раствора красителя по 8.1.1 и пипеткой добавляют по каплям 3 см3 серной кислоты (7.23). Раствор красителя должен изменить оранжевый цвет на оранжево-красный (креветочный).
При невыполнении условий хотя бы по одному из тестов на куркумин делают заключение о том, что анализируемый краситель не является куркумином.
При выполнении условий по 8.2, 8.3 и 8.4 делают заключение о наличии куркумина в анализируемом образце. После чего проводят испытания анализируемого красителя хроматографическим методом (см. раздел 9).
9 Хроматографический метод качественного определения (идентификации) основного красящего вещества красителя
9.1 Сущность метода
Метод основан на хроматографировании раствора красителя в тонком слое сорбента (ТСХ).
Идентификацию красителя проводят методом вычисления значений Rf (отношения расстояния от центра пятна красителя до линии старта к расстоянию от линии миграции элюента до линии старта) каждого пятна, обнаруженного на хроматографической пластине в видимом и ультрафиолетовом свете. Значения Rf пятен анализируемого красителя должны совпадать с данными, приведенными в таблице 2.
Значения Rf красящих веществ куркумина
| Свет | Значения | Цвет пятна |
| Видимый | От 0,2 до 0,4 | 3 пятна желтого цвета |
| Ультрафиолетовый | От 0,2 до 0,4 | 3 пятна с желтой флуоресценцией |
| От 0,6 до 0,8 | 1 пятно с желтой флуоресценцией | |
| <*> Значения Rf получены при проведении анализа по 9.3.2 с использованием средств измерений, вспомогательных оборудования и устройств, посуды и реактивов, указанных в разделе 7. | ||
9.2 Подготовка к анализу
9.2.1 Приготовление раствора анализируемого красителя
В стаканчике вместимостью 50 см3 взвешивают 0,10 г анализируемого красителя. Затем в стаканчик вносят пипеткой 10 см3 этилового спирта (7.19) и перемешивают стеклянной палочкой до полного растворения.
9.2.2 Приготовление элюента
В колбу (с пришлифованной пробкой) вместимостью 50 см3 (7.17) вносят пипетками (7.11) (индивидуальными для каждого реактива) 8 см3 изоамилового спирта (7.21), 8 см3 этилового спирта (7.19), 2 см3 водного аммиака (7.20) и 4 см3 дистиллированной воды. Колбу закрывают пробкой и тщательно перемешивают содержимое.
Элюент готовят за 1 ч до начала анализа. Не допускается повторное использование элюента.
9.2.3 Подготовка хроматографической камеры
В хроматографическую камеру вносят элюент по 9.2.2 в количестве, необходимом для погружения хроматографической пластины на глубину не более 0,5 см от нижнего края пластины. Камеру плотно закрывают и выдерживают в течение 1 ч.
9.2.4 Подготовка пластин для ТСХ-анализа
На хроматографическую пластину (7.6) карандашом наносят линию старта на расстоянии 1 см от края пластины и линию границы элюента — на расстоянии 15 см от линии старта (параллельно рискам на обратной стороне пластины).
9.3 Проведение анализа и обработка результатов
9.3.1 Идентификация красителя
На хроматографическую пластину, подготовленную по 9.2.4, микрошприцем (7.8) наносят 5,0 мм3 анализируемого раствора красителя по 9.2.1 на линию старта в несколько приемов с промежуточным подсушиванием на воздухе. После нанесения растворов пластину подсушивают в течение 3 — 4 мин и затем пинцетом помещают в хроматографическую камеру, подготовленную по 9.2.3, под углом примерно 45°. Камеру плотно закрывают. Элюирование заканчивают при достижении элюентом линии границы элюента — 15,0 см от линии старта. По окончании элюирования хроматографическую пластину вынимают и подсушивают.
Затем помещают хроматографическую пластину под ультрафиолетовый облучатель с длиной волны от 254 до 365 нм (7.10) и отмечают на пластине карандашом центры флуоресцирующих пятен.
9.3.2 Обработка хроматографических карт красителей
Линейкой (7.4) измеряют расстояния от центра каждого пятна красителя, обнаруженного в видимом и ультрафиолетовом свете, и от линии границы элюента до линии старта.
Значение Rf каждого пятна вычисляют по формуле
R_{f} = \frac{l_{k}}{l_{y}} , (1)
где lk — расстояние до линии старта от центра пятна красителя, см;
ly — расстояние до линии старта от линии границы элюента, см.
Визуально сравнивают значения Rf, рассчитанные по формуле (1), со значениями, приведенными в таблице 2, и при выполнении условий по 9.1 и 9.3.2 (совпадении положения, цвета и флуоресценции пятен, обнаруженных в видимом и ультрафиолетовом свете) идентифицируют анализируемый краситель как куркумин E100.
10 Спектрофотометрический метод определения массовой доли основного красящего вещества красителя
10.1 Сущность метода
Метод основан на определении массовой доли основного красящего вещества красителя по измерению интенсивности окраски его раствора спектрофотометрическим методом при длине волны, соответствующей максимуму светопоглощения (425 +/- 1) нм.
10.2 Подготовка к анализу — по 8.1.
10.3 Проведение анализа
Кювету спектрофотометра (7.3) заполняют приготовленным раствором анализируемого красителя по 8.1.2 и измеряют оптическую плотность при длине волны, соответствующей максимуму светопоглощения относительно оптической плотности этилового спирта (7.19), в соответствии с инструкцией по эксплуатации спектрофотометра.
Измерение оптической плотности следует проводить в свежеприготовленном растворе, без промедления, так как интенсивность цвета зависит от времени его хранения.
Оптическая плотность анализируемого раствора должна находиться в диапазоне от 0,2 до 0,7 ед. опт. пл.
10.4 Обработка результатов анализа
Массовую долю основного красящего вещества в анализируемом красителе X, %, рассчитывают по формуле
X = \frac{AMV_{2}}{E_{1\tilde{n}i}^{1\%}dmV_{1}} , (2)
где A — оптическая плотность раствора анализируемого красителя по 8.1.2, измеренная по 10.3, ед. опт. пл.;
M — масса раствора анализируемого красителя, рассчитанная по формуле
где V — объем раствора анализируемого красителя по 8.1.1; см3; V = 200 см3;
\rho — плотность раствора анализируемого красителя, численно равная плотности дистиллированной воды: \rho = 1\text{г}/\text{см}^{3} ;
V2 — объем раствора анализируемого красителя по 8.1.2, см3; V2 = 100 см3;
E_{1\tilde{n}i}^{1\%} — удельный коэффициент светопоглощения, численно равный оптической плотности раствора красителя, с массовой долей красящего вещества 1% при толщине поглощающего слоя 1 см, ед. опт. пл. %-1·см-1; E_{1\tilde{n}i}^{1\%} = 1607\text{ед}.\text{опт}.\text{пл}. \cdot \%^{- 1} \cdot \text{см}^{- 1} ;
d — толщина поглощающего слоя, см; d = 1 см;
m — масса пробы анализируемого красителя, взятой для анализа, г; m = 0,0800 г по 8.1.1;
V1 — объем раствора анализируемого красителя, взятого на разведение по 8.1.2, см3; V1 = 1 см3.
Вычисления проводят с записью результата до второго десятичного знака.
За окончательный результат анализа принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений \overline{X}(\%) , округленное до первого десятичного знака, если выполняются условия приемлемости по 10.5.1.
10.5 Метрологические характеристики метода
10.5.1 Абсолютное значение разности между результатами двух параллельных определений, полученными в условиях повторяемости при доверительной вероятности P = 95%, не превышает предела повторяемости r по таблице 3.
10.5.2 Абсолютное значение разности между результатами двух параллельных определений, полученными в условиях воспроизводимости при доверительной вероятности P = 95%, не превышает предела воспроизводимости R по таблице 3.
10.5.3 Границы абсолютной погрешности определения массовой доли основного красящего вещества в анализируемом красителе при P = 95% представлены в таблице 3.
10.6 Оформление результатов
Результат определения массовой доли основного красящего вещества в пищевом красителе куркумин E100 представляют в виде (\overline{X} \pm \Delta)\% при P = 95%.
| УДК 663.05:006.034 | МКС 67.220.20 |
| Ключевые слова: пищевые добавки, основное красящее вещество, пищевой краситель куркумин E100, методы идентификации, определение массовой доли | |