ГОСТ 33777-2016. Межгосударственный стандарт. Вещества поверхностно-активные. Метод определения фитотоксичности на семенах высших растений
(введен в действие Приказом Росстандарта от 30.06.2016 № 760-ст)
Примечание
Текст данного документа приведен с учетом поправки, опубликованной в «ИУС», № 2, 2023. Документ введен в действие с 01.01.2017.
Введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 30 июня 2016 г. № 760-ст
ВЕЩЕСТВА ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫЕ
МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФИТОТОКСИЧНОСТИ НА СЕМЕНАХ ВЫСШИХ РАСТЕНИЙ
Surfase-active agents. Method for determination of phytotoxicity for higher plants
71.100.40
Дата введения 1 января 2017 года
Предисловие
Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены»
Сведения о стандарте
1 РАЗРАБОТАН Обществом с ограниченной ответственностью «Научно-исследовательский институт бытовой химии „Росса“ (ООО „Росса НИИБХ“), Техническим комитетом по стандартизации ТК 354 „Бытовая химия“ и ООО „НПФ ВНИИПАВ и СП“»
2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 354 «Бытовая химия»
3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол № 87-П от 20 апреля 2016 г.)
4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 30 июня 2016 г. № 760-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33777-2016 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2017 г.
Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.
В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге «Межгосударственные стандарты»
1 Область применения
Настоящий стандарт распространяется на анионные, неионогенные, катионные и амфолитные поверхностно-активные вещества (далее — ПАВ) и их смеси и устанавливает метод определения класса фитотоксичности ПАВ.
Сущность метода заключается в графическом определении пороговой массовой концентрации (ПК) испытуемого ПАВ в растворе, при которой среднее значение длин главных корней семян тест-растений равно среднему значению длин корней семян тест-растений в питьевой воде.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:
ГОСТ OIML R 76-1-2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания
ГОСТ OIML R 111-1-2009 Государственная система обеспечения единства измерений. Гири классов E1, E2, F1, F2, M1, M1-2, M2, M2-3 и M3. Часть 1. Метрологические и технические требования
ГОСТ 427-75 Линейки измерительные металлические. Технические условия
ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
ГОСТ 12038-84 Семена сельскохозяйственных культур. Методы определения всхожести
ГОСТ 21241-89 Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний
ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 27025-86 Реактивы. Общие указания по проведению испытаний
ГОСТ 28498-90 Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний
ГОСТ 28950-91 Инструменты чертежные. Общие технические требования и методы испытаний
ГОСТ 29169-91 (ИСО 648-77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой
ГОСТ 32509-2013 Вещества поверхностно-активные. Метод определения биоразлагаемости в водной среде
Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов и классификаторов на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (www.easc.by) или по указателям национальных стандартов, издаваемым в государствах, указанных в предисловии, или на официальных сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации. Если на документ дана недатированная ссылка, то следует использовать документ, действующий на текущий момент, с учетом всех внесенных в него изменений. Если заменен ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, то следует использовать указанную версию этого документа. Если после принятия настоящего стандарта в ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение применяется без учета данного изменения. Если документ отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
3 Термины и определения
В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:
3.1 фитотоксичность: Способность химических веществ (в т.ч. ПАВ), растворенных в воде, угнетать (ингибировать) прорастание семян высших растений.
3.2 область угнетения прорастания семян: Область значений массовых концентраций водных растворов испытуемого ПАВ, в которой средние значения длин главных проросших корней меньше, чем в питьевой воде.
Примечание - Для углеводородных ПАВ область угнетения прорастания семян тест-растений наблюдается в области массовых концентраций ПАВ в водном растворе, обуславливающих появление мицелл (т.н. ККМ), а именно 10 — 300 мг/дм3.
3.3 область стимулирования прорастания семян: Область значений массовых концентраций водных растворов испытуемого ПАВ, в которой средние значения длин главных проросших корней больше, чем в питьевой воде.
Примечание - Для отдельных углеводородных ПАВ область стимулирования наблюдается в области массовых концентраций 2 — 50 мг/дм3 (в области достижения предельной адсорбции молекул ПАВ на границе вода-воздух).
3.4 тест-объект: Семена высших растений (рисунок 1).
Примечание - Для оценки фитотоксичности используют семена двух видов высший растений: одного однодольного и одного двудольного. В качестве однодольного растения используют овес (Avena sativa), в качестве двудольного — редьку масличную (Brassica rapa).
1 — проростки; 2 — корни; 3 — главный корень
3.5 главный корень: Корень максимальной длины.
3.6 пороговая массовая концентрация ПК, мг/дм3: Минимальная массовая концентрация ПАВ в воде замачивания, при которой проявляется фитотоксический эффект.
Примечание - ПК рассчитывают по активному веществу ПАВ (индивидуальных или технических).
3.7 фитотоксический эффект: Угнетение роста корней семян растений в растворе испытуемого ПАВ по сравнению с проращиванием семян тех же растений в питьевой воде.
3.8 коэффициент разбавления КR: Кратность разбавления раствора испытуемого ПАВ с массовой концентрацией 1000 мг/дм3 до значения ПК.
4 Общие указания
4.1 Общие указания по проведению испытаний — по ГОСТ 27025.
4.2 Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками и оборудования с техническими характеристиками не хуже, а также реактивов по качеству не ниже указанных в настоящем стандарте.
4.3 При выполнении испытаний в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:
- температура окружающего воздуха в помещении: (22 +/- 1) °C;
- температура в термостате: (22 +/- 1) °C;
- атмосферное давление: (84 — 106) кПа;
- относительная влажность: 60% — 80%.
5 Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы
Весы неавтоматического действия с неавтоматическим установлением показаний высокого (II) класса точности с действительной ценой деления 0,05 мг и максимальной нагрузкой 200 г по ГОСТ OIML R 76-1.
Набор гирь (1 г — 100 г) F1 по ГОСТ OIML R 111-1.
Термостат, обеспечивающий поддержание температуры в пределах от 20 °C до 30 °C.
Термометр жидкостный стеклянный с диапазоном измерений температуры от 0 °C до 100 °C и ценой деления шкалы 1 °C по ГОСТ 28498.
Колба 2-100-2 по ГОСТ 1770.
Пипетки 2-2-2, 2-2-50 по ГОСТ 29169.
Чашка Петри ЧБН-1-100 по ГОСТ 25336.
Бумага листовая для офисной техники.
Пинцет по ГОСТ 21241.
Кронциркуль разметочный по ГОСТ 28950.
Семена овса, используемые для сыроедения, по действующей технической документации.
Семена редьки масличной по действующей технической документации.
6 Подготовка к выполнению испытаний
6.1 Приготовление растворов испытуемого ПАВ
Необходимые для испытания растворы ПАВ с массовой концентрацией от 1000 мг/дм3 до 1 мг/дм3 (приблизительно) готовят следующим образом: из испытуемого ПАВ готовят раствор с массовой концентрацией 1000 мг/дм3.
Затем пипеткой 2-2-50 отмеряют 50 см3 приготовленный раствор, помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Получают раствор с массовой концентрацией ПАВ 500 мг/дм3.
Пипеткой 2-2-50 вновь отмеряют 50 см3 полученного раствора с массовой концентрацией ПАВ 500 мг/дм3, помещают в следующую колбу вместимостью 100 см3, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Получают раствор с массовой концентрацией 250 мг/дм3.
Аналогичным образом готовят остальные растворы с массовой концентрацией 125,0 мг/дм3; 62,5 мг/дм3; 31,2 мг/дм3; 15,6 мг/дм3; 7,8 мг/дм3; 3,9 мг/дм3; 2,0 мг/дм3; 1,0 мг/дм3.
При расчете массы навески для приготовления растворов учитывают массовую долю основного вещества ПАВ, определяемую в соответствии с нормативным или техническим документом.
Для приготовления растворов используют питьевую воду.
6.2 Подготовка семян
Для испытаний используют неповрежденные, недеформированные, непротравленные семена овса и редьки масличной, имеющие всхожесть не менее 95%.
Семена растений проверяют на всхожесть по ГОСТ 12038.
Отбирают по 120 — 180 семян каждого вида растений, однородных по форме и имеющих разброс по массе +/- 10%.
6.3 Подготовка чашек Петри
Для испытаний используют 12 чашек Петри: одна — контрольная (с питьевой водой) и одиннадцать — с растворами испытуемого ПАВ, приготовленными по 6.1.
Перед каждым испытанием чашки Петри обрабатывают раствором перманганата калия с массовой долей 1% (или хромовой смесью) и промывают питьевой водой.
Примечание - При испытаниях на фитотоксичность средств, содержащих перфтор ПАВ (или ПАВ других элементоорганических соединений), используют одноразовые чашки Петри.
7 Выполнение испытаний
В каждую чашку, покрытую одним слоем бумаги, с помощью пинцета помещают по 10 — 15 отобранных по 6.2 семян овса. Затем в каждую из одиннадцати чашек пипеткой 2-2-2 приливают 2 см3 раствора испытуемого ПАВ определенной концентрации, приготовленного по 6.1, в одну из чашек — питьевую воду (контрольный опыт). Раствор (или вода) должен покрывать только половину каждого семени.
Чашки Петри с увлажненными семенами помещают в термостат (или в помещение) с контролируемой температурой. Испытания проводят при температуре (22,0 +/- 0,5) °C. Длительность испытаний — 3 сут до появления главного корня семени.
По истечении срока экспозиции проросшие семена из чашек Петри помещают на бумагу и измеряют длины (li) главных корней с помощью разметочного кронциркуля и линейки.
Результаты измерений оформляют в виде таблицы 1.
| № чашек с семенами | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 |
| Массовая концентрация раствора испытуемого ПАВ, мг/дм3 (\rho_{i}) | 0 | 1000 | 500 | 250 | 125 | 62,5 | 31,2 | 15,6 | 7,8 | 3,9 | 1,95 | 1 |
| lg(\rho_{i}) | ||||||||||||
| Средняя длина корней (licp) <*>, мм, в конце испытаний (через 72 ч) | l0 | l1 | l2 | l3 | l4 | l5 | l6 | l7 | l8 | l9 | l10 | l11 |
| <*> licp вычисляют по формуле l_{icp} = \frac{\sum l_{i}}{n} , где li — длина главного корня каждого семени в чашке, мм; \sum l_{i} — сумма длин главных корней; n — количество семян в чашке | ||||||||||||
Аналогично проводят испытание с семенами редьки масличной.
8 Обработка результатов испытаний
8.1 Критерии оценки результатов испытаний
Изменения длин главных корней проросших семян тест-растений в контролируемых условиях в водных растворах ПАВ обусловлены адсорбцией молекул ПАВ на поверхностях смачиваемых семян и описываются зависимостями, аналогичными зависимостям адсорбции молекул ПАВ от концентрации ПАВ на границе вода-воздух
где li — длина проросшего корня в водном растворе ПАВ, мм;
\rho_{i} — массовая концентрация водного раствора ПАВ, мг/дм3;
\sigma — поверхностное натяжение водного раствора ПАВ, мДж/м2.
Угнетение прорастания семян наблюдается при концентрациях ПАВ от 0,1 до 0,5 критической концентрации мицеллообразования, т.е. в интервале 10 — 500 мг/дм3.
8.2 Определение пороговой массовой концентрации (ПК)
Пороговую массовую концентрацию (ПК, мг/дм3) определяют графически (рисунок 2). По результатам испытаний (таблица 1) строят зависимость l_{i} = f(lg\rho_{i}) .
1 — зона стимулирования прорастания семян; 2 — зона ингибирования прорастания семян
Параллельно оси (lg\rho) проводят прямую l0 линию контроля.
От точки пересечения li и l0 (по точкам) строят прямую до оси ординат (lg\rho) .
Область пересечения прямых li и l0 соответствует lg (ПК). По значению lg (ПК) вычисляют значение ПК.
По значению ПК и максимальной массовой концентрации (1000 мг/дм3) ПАВ рассчитывают коэффициент разбавления (KR) lg\rho мг/дм3
K_{R} = \frac{1000}{\text{ПК}} .
Результаты испытаний приводят в протоколе испытаний (приложение Б).
По величине KR, с учетом класса биоразлагаемости ПАВ (определяется по ГОСТ 32509) устанавливают класс фитотоксичности ПАВ (приложение А).
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КЛАССА ФИТОТОКСИЧНОСТИ ПАВ
По величине коэффициента разбавления (KR) с учетом биоразлагаемости ПАВ устанавливают класс фитотоксичности ПАВ.
ФОРМА ПРОТОКОЛА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ФИТОТОКСИЧНОСТИ
Испытательный центр АТТЕСТАТ АККРЕДИТАЦИИ ИСПЫТАТЕЛЬНОЙ ЛАБОРАТОРИИ (ЦЕНТРА)
Утверждаю: Руководитель Испытательной лаборатории (центра) «» _____________ 20 г.
ПРОТОКОЛ ИСПЫТАНИЙ N ПАВ по показателям фитотоксичности Срок действия протокола до
1. Производитель (и/или заказчик) и его адрес.
3. Нормативные или технические документы, на соответствие которым производятся испытания.
4. Номер партии (акт отбора образца).
7. Условия проведения испытаний (в соответствии с настоящим стандартом).
Настоящий протокол распространяется на образец, имеющий состав, указанный в паспорте.
При изменении состава продукта или технологии его производства, испытания должны быть проведены заново.
8.1 Показатели фитотоксичности испытуемого ПАВ представлены в таблице Б.1.
| Наименование показателя | Единицы измерения | Результат испытаний | Наименование оборудования и средств измерений |
|---|---|---|---|
| lg (ПК) | |||
| ПК | мг/дм3 | ||
| KR | - |
8.2 Класс фитотоксичности определен на основании приложения А (обязательного) к настоящему ГОСТ.
Результаты определения представлены в таблице Б.2.
| Коэффициент разбавления (KR) | Класс биоразлагаемости | Класс фитотоксичности |
|---|---|---|
Наименование ПАВ; изготовитель; ТУ или НД
- относится к ........... классу фитотоксичности по ГОСТ ...............;
- допускается (не допускается) для обращения на рынке без ограничений (с ограничениями).
| УДК 661.185.543:542:006.354 | МКС | 71.040.40 71.100.40 |
| Ключевые слова: поверхностно-активные вещества, фитотоксичность, фактор разбавления, класс фитотоксичности | ||