---
title: "\"ГОСТ 20730-75. Государственный стандарт Союза ССР. Питательные среды. Бульон мясо-пептонный (для ветеринарных целей)\""
number: "ГОСТ 20730-75"
issuer: "Государственный комитет СССР по стандартам"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/standart-gost-20730-75"
---

## "ГОСТ 20730-75. Государственный стандарт Союза ССР. Питательные среды. Бульон мясо-пептонный (для ветеринарных целей)"

# "ГОСТ 20730-75. Государственный стандарт Союза ССР. Питательные среды. Бульон мясо-пептонный (для ветеринарных целей)"

(утв. и введен в действие Постановлением Госстандарта СССР от 09.04.1975 N 899)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень стандартов, в результате применения которых на добровольной основе обеспечивается соблюдение требований технического регламента Таможенного союза "О безопасности пищевой продукции" (ТР ТС 021/2011) (Решение Комиссии Таможенного союза от 09.12.2011 N 880).
> С 1 июля 2003 года до вступления в силу технических регламентов акты федеральных органов исполнительной власти в сфере технического регулирования носят рекомендательный характер и подлежат обязательному исполнению только в части, соответствующей целям, указанным в пункте 1 статьи 46 Федерального закона от 27.12.2002 N 184-ФЗ.
> Ограничение срока действия снято по Протоколу N 4-93 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации ("ИУС", N 4, 1994).
> Документ [утрачивает](#p100007) силу с 1 января 1981 года.
> Документ [введен](#p100007) в действие с 1 января 1976 года.


<a id="p100001"></a>Утвержден и введен в действие
Постановлением Государственного комитета
стандартов Совета Министров СССР
от 9 апреля 1975 г. N 899

<a id="p100002"></a>**ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР**

<a id="p100003"></a>**ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ. БУЛЬОН МЯСО-ПЕПТОННЫЙ**
**(ДЛЯ ВЕТЕРИНАРНЫХ ЦЕЛЕЙ)**

<a id="p100004"></a>Nutrient media. Meat-pepton broth (for veterinary)

<a id="p100005"></a>**ГОСТ 20730-75**

<a id="p100006"></a>Группа Р35

<a id="p100007"></a>Постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 9 апреля 1975 г. N 899 срок действия установлен

<a id="p100008"></a>с 1 января 1976 года
до 1 января 1981 года

<a id="p100009"></a>РАЗРАБОТАН Всесоюзным Государственным научно-контрольным институтом ветеринарных препаратов
<a id="p100010"></a>Директор Бойко А.А.
<a id="p100011"></a>Руководитель темы: Простяков А.П.
<a id="p100012"></a>Исполнители темы: Агапова З.А., Цыганкова С.И., Голикова Г.А.
<a id="p100013"></a>ВНЕСЕН Министерством сельского хозяйства СССР
<a id="p100014"></a>Член коллегии Третьяков А.Д.
<a id="p100015"></a>ПОДГОТОВЛЕН К УТВЕРЖДЕНИЮ Всесоюзным научно-исследовательским институтом стандартизации (ВНИИС)
<a id="p100016"></a>Директор Гличев А.В.
<a id="p100017"></a>УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 9 апреля 1975 г. N 899

<a id="p100018"></a>Настоящий стандарт распространяется на мясо-пептонный бульон, представляющий собой питательный раствор, предназначенный для выращивания микроорганизмов.


## 1. <a id="p100019"></a>ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ


<a id="p100020"></a>1.1. Мясо-пептонный бульон должен изготавливаться в соответствии с действующими правилами по ведению технологического процесса, утвержденными в установленном порядке.
<a id="p100021"></a>1.2. Мясо-пептонный бульон по физико-химическим, биохимическим и биологическим показателям должен соответствовать требованиям и нормам, указанным в табл. 1.

<a id="p100022"></a>Таблица 1


| <a id="p100023"></a>Наименования показателей | <a id="p100024"></a>Характеристика и нормы |
| --- | --- |
| <a id="p100025"></a>Внешний вид | <a id="p100026"></a>Прозрачная жидкость |
| <a id="p100027"></a>Цвет | <a id="p100028"></a>Желтый |
| <a id="p100029"></a>Запах | <a id="p100030"></a>Специфический, свежего мясного экстракта и пептона |
| <a id="p100031"></a>Наличие механической примеси, плесени, хлопьев и осадка | <a id="p100032"></a>Не допускается |
| <a id="p100033"></a>Содержание общего азота, %, не менее | <a id="p100034"></a>0,40 |
| <a id="p100035"></a>Содержание азота аминогрупп, аминокислот и низших пептидов, %, не менее | <a id="p100036"></a>0,09 |
| <a id="p100037"></a>Содержание пептонов, %, не менее | <a id="p100038"></a>2,7 |
| <a id="p100039"></a>Содержание сухого вещества, % | <a id="p100040"></a>3,0 - 3,4 |
| <a id="p100041"></a>Содержание белка, %, не более | <a id="p100042"></a>0,5 |
| <a id="p100043"></a>Содержание хлористого натрия, % | <a id="p100044"></a>0,5 |
| <a id="p100045"></a>Концентрация водородных ионов (pH) | <a id="p100046"></a>7,2 - 7,6 |
| <a id="p100047"></a>Стерильность | <a id="p100048"></a>Посев на питательные среды не должен давать роста микрофлоры в течение трех суток в термостате при 37 - 38 °C |
| <a id="p100049"></a>Способность поддерживать рост микробов, оптическая плотность, не менее: |  |
| <a id="p100050"></a>Staphylococcus aureus "Лассманов" | <a id="p100051"></a>0,70 |
| <a id="p100052"></a>Escherichia coli штамм 675 | <a id="p100053"></a>0,75 |
| <a id="p100054"></a>Streptococcus faccalis штамм 6783 | <a id="p100055"></a>0,40 |



## 2. <a id="p100056"></a>ПРАВИЛА ПРИЕМКИ



#### <a id="p100057"></a>2.1 Мясо-пептонный бульон сдают и принимают сериями.

<a id="p100058"></a>2.2. Каждая серия мясо-пептонного бульона на предприятиях биологической промышленности Министерства сельского хозяйства СССР должна быть принята государственным контролером Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов Министерства сельского хозяйства СССР.
<a id="p100059"></a>2.3. Под серией следует понимать любое количество мясо-пептонного бульона, изготовленное за один технологический цикл, в одной емкости (реакторе) и оформленное одним документом о качестве.
<a id="p100060"></a>2.4. Для проверки качества препарата от каждой серии мясо-пептонного бульона более 50 л отбирают 2 л, при объеме менее 50 л - 0,6 л.
<a id="p100061"></a>Если вся серия мясо-пептонного бульона расфасована в бутыли, делают выборку в количестве одной бутыли. Если мясо-пептонный бульон расфасован во флаконы, составляют выборку такого количества флаконов, чтобы объем мясо-пептонного бульона в отобранных флаконах соответствовал указанной выше норме, которая установлена в зависимости от общего объема серии мясо-пептонного бульона.
<a id="p100062"></a>2.5. При получении неудовлетворительных результатов испытаний хотя бы по одному из показателей серию мясо-пептонного бульона считают не соответствующей требованиям настоящего стандарта.
<a id="p100063"></a>2.6. Контрольную проверку образцов по требованию потребителя проводит Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов Министерства сельского хозяйства СССР.


## 3. <a id="p100064"></a>МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ



#### <a id="p100065"></a>3.1 Методы отбора проб

<a id="p100066"></a>3.1.1. Пробу мясо-пептонного бульона в количестве 2 или 0,6 л (в зависимости от объема серии препарата) отбирают из реактора или бутыли стерильно.
<a id="p100067"></a>Пробу объемом 2 л расфасовывают в 10 флаконов по 200 мл. Пять флаконов используют для анализа, а пять - оставляют в архиве государственного контролера.
<a id="p100068"></a>Пробу, отобранную от серии мясо-пептонного бульона объемом менее 50 л, в архиве не оставляют.
<a id="p100069"></a>3.2. Внешний вид, цвет, наличие механической примеси, плесени, хлопьев и осадка устанавливают, просматривая флаконы и бутыли с мясо-пептонным бульоном в проходящем свете, для чего флаконы встряхивают, переворачивая вниз пробками, а бутыли покачивают.

#### <a id="p100070"></a>3.3 Запах мясо-пептонного бульона определяют в пробе органолептически


#### <a id="p100071"></a>3.4 Определение содержания общего азота


##### <a id="p100072"></a>3.4.1 Аппаратура и реактивы

<a id="p100073"></a>Для проведения испытания применяют:
<a id="p100074"></a>весы аналитические;
<a id="p100075"></a>колбу Кьельдаля вместимостью 50 - 100 мл по ГОСТ 10394-63;
<a id="p100076"></a>аппарат микро-Кьельдаль;
<a id="p100077"></a>элемент нагрева (плитку, горелку);
<a id="p100078"></a>пипетки на 1, 2, 5 мл по ГОСТ 1770-64;
<a id="p100079"></a>бюретки по ГОСТ 1770-64;
<a id="p100080"></a>воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72;
<a id="p100081"></a>кислоту серную по ГОСТ 4204-66, концентрированную и 0,1 н. раствор;
<a id="p100082"></a>натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-66, 30 - 33%-ный и 0,1 н. растворы, приготовленные на предварительно прокипяченной дистиллированной воде;
<a id="p100083"></a>перекись водорода по ГОСТ 10929-64;
<a id="p100084"></a>метиловый красный по ГОСТ 5853-51;
<a id="p100085"></a>метиленовую синь;
<a id="p100086"></a>спирт этиловый ректификованный по [ГОСТ 5962-67](https://bukva.ai/docs/gost-5962-67);
<a id="p100087"></a>метиловый оранжевый по ГОСТ 10816-64, 0,1%-ный раствор.

##### <a id="p100088"></a>3.4.2 Проведение испытания

<a id="p100089"></a>Мясо-пептонный бульон в количестве 1 мл помещают в колбу Кьельдаля и прибавляют 2 мл концентрированной серной кислоты. В горло колбы вставляют стеклянный грушевидный баллончик или небольшую воронку с запаянным кончиком и минерализуют пробу сначала на слабом огне, затем степень нагрева усиливают, не допуская выбрасывания кипящей смеси в узкую часть колбы. Минерализацию проводят в присутствии катализатора - перекиси водорода. Катализатор добавляют после начала кипения по 0,5 мл через каждые 15 - 20 мин до полного обесцвечивания раствора.
<a id="p100090"></a>После охлаждения содержимое колбы переносят в колбу для отгона, добавляя 10 - 12 мл дистиллированной воды. Полноту переноса проверяют по индикатору метиловому оранжевому. Последняя порция смывных вод должна остаться желтой.
<a id="p100091"></a>В приемную колбу аппарата Кьельдаля наливают 20 мл 0,1 н. раствора серной кислоты и 2 капли индикатора Таширо. Индикатор Таширо готовят, растворяя 0,4 г метилового красного и 0,2 г метиленовой сини в 200 мл 96%-ного этилового спирта.
<a id="p100092"></a>Отгонную колбу присоединяют к холодильнику и парообразователю. Содержимое отгонной колбы нейтрализуют 30 - 33%-ным раствором гидрата окиси натрия по индикатору метиловому оранжевому. Отгон производят до тех пор, пока в приемной колбе соберется около 70 мл раствора.
<a id="p100093"></a>Содержимое приемной колбы титруют 0,1 н. раствором гидрата окиси натрия до перехода окраски раствора от лилового к зеленому.
<a id="p100094"></a>Одновременно ставят контрольный опыт на реактивы, для чего вместо мясо-пептонного бульона в колбу для минерализации берут 1 мл дистиллированной воды.

##### <a id="p100095"></a>3.4.3 Обработка результатов

<a id="p100096"></a>Содержание общего азота в мясо-пептонном бульоне (X) в процентах вычисляют по формуле

<a id="p100097"></a> $X = \frac{(VK - V_{1}K_{1}) \cdot 0,0014 \cdot 100}{V_{2}}$ ,

<a id="p100098"></a>где V - количество 0,1 н. раствора серной кислоты, налитое в приемную колбу, мл;
<a id="p100099"></a>K - поправочный коэффициент к титру 0,1 н. серной кислоты;
<a id="p100100"></a>V<sub>1</sub> - количество 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия, израсходованное на титрование испытуемой пробы, или в контрольном опыте, мл;
<a id="p100101"></a>K<sub>1</sub> - поправочный коэффициент к титру 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия;
<a id="p100102"></a>V<sub>2</sub> - количество мясо-пептонного бульона, взятое на анализ, мл;
<a id="p100103"></a>0,0014 - количество азота, соответствующее 1 мл 0,1 н. раствора серной кислоты, г.
<a id="p100104"></a>За окончательный результат испытания принимают разность между средними арифметическими двух параллельных определений в опытных и контрольных пробах. Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений не должны превышать +/- 0,5%.

#### <a id="p100105"></a>3.5 Определение содержания азота аминогрупп аминокислот и низших пептидов


##### <a id="p100106"></a>3.5.1 Аппаратура, материалы и реактивы

<a id="p100107"></a>Для проведения испытания применяют:
<a id="p100108"></a>pH-метр;
<a id="p100109"></a>стаканы лабораторные по ГОСТ 10394-63;
<a id="p100110"></a>пипетки, бюретки по ГОСТ 1770-64;
<a id="p100111"></a>формалин технический по ГОСТ 1625-61;
<a id="p100112"></a>натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-66, 0,1 н. раствор;
<a id="p100113"></a>фенолфталеин по ГОСТ 5850-72, 1%-ный спиртовой раствор;
<a id="p100114"></a>воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

##### <a id="p100115"></a>3.5.2 Подготовка к испытанию

<a id="p100116"></a>Непосредственно перед проведением анализа готовят формольную смесь. Для этого к 50 мл формалина добавляют 1 мл 1%-ного раствора фенолфталеина и 0,1 н. раствором гидрата окиси натрия доводят смесь до слаборозового цвета.

##### <a id="p100117"></a>3.5.3 Проведение испытания

<a id="p100118"></a>К 2 мл мясо-пептонного бульона приливают 18 мл дистиллированной воды и доводят 0,1 н. раствором гидрата окиси натрия pH смеси до 7,0. Затем приливают 2 мл формольной смеси и при постоянном перемешивании потенциометрически титруют 0,1 н. раствором гидрата окиси натрия до pH 9,2.
<a id="p100119"></a>Одновременно ставят контрольный опыт на реактивы, для чего вместо 2 мл мясо-пептонного бульона берут 2 мл дистиллированной воды.

##### <a id="p100120"></a>3.5.4 Обработка результатов

<a id="p100121"></a>Содержание азота аминогрупп аминокислот и низших пептидов в мясо-пептонном бульоне (X1) в процентах вычисляют по формуле

<a id="p100122"></a> $X_{1} = \frac{(V - V_{1}) \cdot K \cdot 0,0014 \cdot 100}{2}$ ,

<a id="p100123"></a>где V - количество 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия, израсходованное на титрование испытуемой пробы, мл;
<a id="p100124"></a>V1 - количество 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия, израсходованное на титрование в контрольном опыте, мл;
<a id="p100125"></a>K - поправочный коэффициент к титру 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия;
<a id="p100126"></a>0,0014 - количество азота, соответствующее 1 мл 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия, г;
<a id="p100127"></a>2 - количество мясо-пептонного бульона, взятое на анализ, мл.
<a id="p100128"></a>За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать +/- 0,2%.

#### <a id="p100129"></a>3.6 Определение содержания пептонов


##### <a id="p100130"></a>3.6.1 Аппаратура, материалы и реактивы

<a id="p100131"></a>Для проведения испытания применяют:
<a id="p100132"></a>фотоэлектроколориметр или спектрофотометр;
<a id="p100133"></a>пипетки по ГОСТ 1770-64;
<a id="p100134"></a>пробирки по ГОСТ 10515-63;
<a id="p100135"></a>фильтры бумажные;
<a id="p100136"></a>воронки стеклянные по ГОСТ 8613-64;
<a id="p100137"></a>натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-66, 10%-ный раствор;
<a id="p100138"></a>медь сернокислую по ГОСТ 4165-68, 2%-ный раствор;
<a id="p100139"></a>воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

##### <a id="p100140"></a>3.6.2 Подготовка к испытанию

<a id="p100141"></a>3.6.2.1. При построении градуировочного графика по оси абсцисс откладывают концентрацию истинного пептона в процентах, по оси ординат - оптическую плотность (E) согласно данным, приведенным в табл. 2.

<a id="p100142"></a>Таблица 2


| <a id="p100143"></a>Концентрация истинного пептона, % | <a id="p100144"></a>Оптическая плотность E |
| --- | --- |
| <a id="p100145"></a>0,50 | <a id="p100146"></a>0,550 |
| <a id="p100147"></a>0,25 | <a id="p100148"></a>0,280 |
| <a id="p100149"></a>0,17 | <a id="p100150"></a>0,190 |



##### <a id="p100151"></a>3.6.3 Проведение испытания

<a id="p100152"></a>В пробирку наливают 10 мл мясо-пептонного бульона в разведении 1:10, прибавляют по 1 мл 10%-ного раствора гидрата окиси натрия и 2%-ного раствора сернокислой меди. Смесь после добавления каждого реактива хорошо встряхивают.
<a id="p100153"></a>Одновременно проводят контрольный опыт на реактивы, для чего вместо 10 мл разведенного мясо-пептонного бульона берут 10 мл дистиллированной воды.
<a id="p100154"></a>Через 2 мин смесь фильтруют через бумажные фильтры. Интенсивность окраски измеряют на фотоэлектроколориметре при длине волн 540 - 560 нм или спектрофотометре при 540 нм в кюветах с рабочей длиной 10 мм.

##### <a id="p100155"></a>3.6.4 Обработка результатов

<a id="p100156"></a>Концентрацию истинного пептона в мясо-пептонном бульоне определяет по градуировочному графику.
<a id="p100157"></a>Оптическая плотность (E) мясо-пептонного бульона равна разности оптических плотностей в опыте с испытуемой пробой и в контрольном опыте. Полученную по графику концентрацию истинного пептона умножают на 10 (т.е. на разведение мясо-пептонного бульона).
<a id="p100158"></a>За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать +/- 5%.

#### <a id="p100159"></a>3.7 Определение содержания сухого вещества


##### <a id="p100160"></a>3.7.1 Аппаратура

<a id="p100161"></a>Для проведения испытания применяют:
<a id="p100162"></a>весы аналитические;
<a id="p100163"></a>шкаф сушильный лабораторный по ГОСТ 7365-55;
<a id="p100164"></a>эксикаторы по ГОСТ 6371-64;
<a id="p100165"></a>стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 7148-70;
<a id="p100166"></a>пипетки по ГОСТ 1770-64.

##### <a id="p100167"></a>3.7.2 Проведение испытания

<a id="p100168"></a>В предварительно высушенную до постоянной массы бюксу взвешивают с погрешностью не более 0,0002 г мясо-пептонный бульон в количестве 1,0 - 1,2 г. Затем бюксу с мясо-пептонным бульоном высушивают в сушильном шкафу при температуре 100 - 105 °C до постоянной массы. Высушивание продолжают до тех пор, пока разность между двумя последующими взвешиваниями будет не более 0,0002 г.
<a id="p100169"></a>*Примечание.* Увеличение массы при одном из взвешиваний в процессе высушивания при расчете не учитывают.


##### <a id="p100170"></a>3.7.3 Обработка результатов

<a id="p100171"></a>Содержание сухого вещества в мясо-пептонном бульоне (X2) в процентах вычисляют по формуле

<a id="p100172"></a> $X_{2} = \frac{(m_{2} - m) \cdot 100}{(m_{1} - m)}$ ,

<a id="p100173"></a>где m - масса пустой бюксы с крышкой, г;
<a id="p100174"></a>m1 - масса бюксы с крышкой и с мясо-пептонным бульоном до высушивания, г;
<a id="p100175"></a>m2 - масса бюксы с крышкой и с мясо-пептонным бульоном после высушивания, г.
<a id="p100176"></a>За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,2%.

#### <a id="p100177"></a>3.8 Определение содержания белка (по методу Лоури)


##### <a id="p100178"></a>3.8.1 Аппаратура и реактивы

<a id="p100179"></a>Для проведения испытания применяют:
<a id="p100180"></a>фотоэлектроколориметр;
<a id="p100181"></a>пробирки стеклянные по ГОСТ 10515-63;
<a id="p100182"></a>пипетки по ГОСТ 1770-64;
<a id="p100183"></a>фильтры бумажные;
<a id="p100184"></a>натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-66, 0,1 н. раствор;
<a id="p100185"></a>натрий углекислый по ГОСТ 84-66;
<a id="p100186"></a>натрий виннокислый по ГОСТ 656-73 или калий виннокислый двузамещенный по ГОСТ 3655-71, 1%-ный раствор;
<a id="p100187"></a>медь сернокислую по ГОСТ 4165-68;
<a id="p100188"></a>натрий вольфрамовокислый по ГОСТ 18289-72;
<a id="p100189"></a>натрий молибденовокислый по ГОСТ 10931-64;
<a id="p100190"></a>кислоту ортофосфорную 85%-ную;
<a id="p100191"></a>кислоту соляную по ГОСТ 3118-67;
<a id="p100192"></a>литий сернокислый по ГОСТ 10563-63;
<a id="p100193"></a>бром по ГОСТ 4109-64;
<a id="p100194"></a>воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

##### <a id="p100195"></a>3.8.2 Подготовка к испытанию

<a id="p100196"></a>Приготовление реактива А
<a id="p100197"></a>Навеску углекислого натрия массой 2 г, взвешенную с погрешностью не более 0,02 г, растворяют в 100 мл 0,1 н. раствора гидрата окиси натрия. Если раствор мутный, то перед определением его надо профильтровать.
<a id="p100198"></a>Приготовление реактива В
<a id="p100199"></a>Навеску сернокислой меди массой 0,5 г, взвешенную с погрешностью не более 0,02 г, растворяют в 100 мл 1%-ного раствора двузамещенного виннокислого натрия или калия. Если раствор мутный, то перед определением его надо профильтровать.
<a id="p100200"></a>Приготовление реактива С
<a id="p100201"></a>Реактив С готовят непосредственно перед определением путем смешивания 50 частей реактива А и 1 части реактива В.
<a id="p100202"></a>Приготовление реактива Д
<a id="p100203"></a>Реактив Д (реактив Фолина) готовят в круглодонной на 1 л колбе из огнеупорного стекла с обратным холодильником.
<a id="p100204"></a>В колбу помещают 100 г вольфрамовокислого натрия, 25 г молибденовокислого натрия и 700 мл дистиллированной воды. После полного растворения солей в колбу добавляют 50 мл 85%-ной ортофосфорной кислоты и 100 мл концентрированной соляной кислоты. Содержимое колбы осторожно, но хорошо перемешивают. К колбе присоединяют обратный холодильник и смесь кипятят (не слишком сильно) в течение 10 ч. Кипячение можно вести с перерывом, но учитывают лишь период кипения.
<a id="p100205"></a>После окончания кипячения в смесь добавляют 150 г сернокислого лития, 50 мл дистиллированной воды и 5 капель брома (осторожно). Для удаления излишка брома раствор кипятят 15 мин без холодильника под тягой. После охлаждения готовый раствор доводят в мерной колбе до 1 л, фильтруют через бумажный фильтр и хранят в темной склянке с притертой пробкой в темном месте. Реактив Д должен быть соломенно-желтого цвета без зеленого оттенка, затем в реактиве определяют концентрацию кислоты. Для этого приготовленный реактив разводят дистиллированной водой 1:10 (1 мл реактива и 9 мл воды) и титруют 0,1 н. раствором гидрата окиси натрия по фенолфталеину (3 - 4 капли). Кислотность рассчитывают делением количества миллилитров 0,1 н. щелочи, израсходованного на титрование 1 мл реактива Д, на 10. Реактив Д имеет кислотность 1,6 - 2,3 Н.
<a id="p100206"></a>Приготовление реактива Е
<a id="p100207"></a>Реактив Е является реактивом Д, разведенным до 1 н. раствора. Например, если реактив Д является 2,3 н. раствором кислоты, то для приготовления 1 н. раствора Е надо брать 10 мл реактива Д и 13 мл дистиллированной воды.
<a id="p100208"></a>Построение градуировочного графика для определения белка
<a id="p100209"></a>Готовят ряд растворов с определенным содержанием белка нисходящей концентрации от 0,10 до 0,01%, с которыми ставят цветную реакцию по [п. 3.8.3](#p100211). Для приготовления растворов можно использовать альбумин, миозин, нативную сыворотку. Содержание белка в растворах определяют по Кьельдалю. Интенсивность окраски измеряют на фотоэлектроколориметре против воды. Из оптической плотности растворов белка вычитают оптическую плотность контроля на реактивы и полученную величину откладывают по оси ординат. По оси абсцисс откладывают концентрацию белка в растворе (в процентах или в миллиграммах).
<a id="p100210"></a>Разведение исследуемого образца для постановки цветной реакции выбирают такое, чтобы основное количество замеров по величине оптической плотности лежало в пределах 0,2 - 0,8, где точность измерения наиболее высокая.

##### <a id="p100211"></a>3.8.3 Проведение испытания

<a id="p100212"></a>В пробирку наливают 1 мл разведенного 1:10 мясо-пептонного бульона, добавляют 5 мл реактива С, перемешивают и через 10 мин добавляют 0,5 мл реактива Е. Одновременно ставят контроль на реактивы, для чего вместо мясо-пептонного бульона берут 1 мл дистиллированной воды и добавляют те же реактивы, что и в пробирку с мясо-пептонным бульоном. Смесь хорошо перемешивают и ставят в темное место на 30 - 40 мин.
<a id="p100213"></a>Интенсивность окраски измеряют на фотоэлектроколориметре с красным фильтром (630 - 640 нм) против воды в 5-миллиметровых кюветах. Из величин оптической плотности испытуемого образца вычитают величину оптической плотности контроля на реактивы. По полученным значениям оптической плотности растворов с помощью градуировочного графика определяют содержание белка в пробах. При расчете содержания белка в пробе учитывают кратность разведения перед постановкой цветной реакции.
<a id="p100214"></a>За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать +/- 0,05%.

#### <a id="p100215"></a>3.9 Определение содержания хлорида натрия


##### <a id="p100216"></a>3.9.1 Аппаратура, материалы и реактивы

<a id="p100217"></a>Для проведения испытания применяют:
<a id="p100218"></a>весы аналитические;
<a id="p100219"></a>элемент нагрева (горелку, плитку);
<a id="p100220"></a>пипетки по ГОСТ 1770-64;
<a id="p100221"></a>бюретки по ГОСТ 1770-64;
<a id="p100222"></a>стаканы лабораторные по ГОСТ 10394-63;
<a id="p100223"></a>квасцы железоаммонийные по ГОСТ 4205-68, насыщенный раствор;
<a id="p100224"></a>калий роданистый по ГОСТ 4139-65 или аммоний роданистый по ГОСТ 3768-64, 0,1 н. раствор;
<a id="p100225"></a>кислоту азотную по ГОСТ 4461-67, концентрированную;
<a id="p100226"></a>серебро азотнокислое по ГОСТ 1277-63, 0,1 н. раствор;
<a id="p100227"></a>воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

##### <a id="p100228"></a>3.9.2 Проведение испытания

<a id="p100229"></a>Мясо-пептонный бульон в количестве 20 мл помещают в стакан и добавляют 1 мл концентрированной азотной кислоты и 10 мл 0,1 н. раствора азотнокислого серебра.
<a id="p100230"></a>Полученную смесь нагревают до начала кипения и быстро охлаждают путем погружения стакана в сосуд с водой комнатной температуры. После охлаждения к смеси добавляют 2 мл насыщенного раствора железоаммонийных квасцов и титруют 0,1 н. раствором роданистого калия (или роданистого аммония) до появления желтовато-розового окрашивания.

##### <a id="p100231"></a>3.9.3 Обработка результатов

<a id="p100232"></a>Содержание хлорида натрия в мясо-пептонном бульоне (X3) в процентах вычисляют по формуле

<a id="p100233"></a> $X_{3} = \frac{(V_{K} - V_{1}K_{1}) \cdot 0,005844 \cdot 100}{V}$ ,

<a id="p100234"></a>где V - количество 0,1 н. раствора азотнокислого серебра, взятое в стакан с пробой, мл;
<a id="p100235"></a>K - поправочный коэффициент к титру 0,1 н. раствора азотнокислого серебра;
<a id="p100236"></a>V1 - количество 0,1 н. раствора роданистого калия (или роданистого аммония), израсходованное на титрование испытуемой пробы, мл;
<a id="p100237"></a>K1 - поправочный коэффициент к титру 0,1 н. раствора роданистого калия (или роданистого аммония);
<a id="p100238"></a>0,005844 - количество хлорида натрия, соответствующее 1 мл 0,1 н. раствора азотнокислого серебра;
<a id="p100239"></a>V2 - количество мясо-пептонного бульона, взятое на анализ, мл.
<a id="p100240"></a>За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать +/- 0,01%.

#### <a id="p100241"></a>3.10 Определение концентрации водородных ионов (pH)


##### <a id="p100242"></a>3.10.1 Аппаратура и материалы

<a id="p100243"></a>Для проведения испытания применяют:
<a id="p100244"></a>pH-метр;
<a id="p100245"></a>стаканы лабораторные по ГОСТ 10394-63;
<a id="p100246"></a>воронки стеклянные;
<a id="p100247"></a>фильтры бумажные.

##### <a id="p100248"></a>3.10.2 Проведение испытания

<a id="p100249"></a>Мясо-пептонный бульон фильтруют через бумажный фильтр и в прозрачном фильтрате определяют pH по инструкции, приложенной к pH-метру.

#### <a id="p100250"></a>3.11 Определение стерильности


##### <a id="p100251"></a>3.11.1 Аппаратура, материалы и реактивы

<a id="p100252"></a>Для проведения испытания применяют:
<a id="p100253"></a>термостат с температурой нагрева 37 - 38 °C;
<a id="p100254"></a>автоклав;
<a id="p100255"></a>флаконы вместимостью 200 мл;
<a id="p100256"></a>пипетки по ГОСТ 1770-64;
<a id="p100257"></a>пробирки стеклянные по ГОСТ 10515-63;
<a id="p100258"></a>воронки стеклянные;
<a id="p100259"></a>пробки ватномарлевые;
<a id="p100260"></a>фильтры бумажные;
<a id="p100261"></a>пептон сухой ферментативный по ГОСТ 13805-68;
<a id="p100262"></a>агар микробиологический по ГОСТ 17206-71.

##### <a id="p100263"></a>3.11.2 Подготовка к испытанию

<a id="p100264"></a>Готовят в соответствии с действующей рецептурой, мясо-пептонный бульон (МПБ), мясо-пептонный агар (МПА) и мясо-пептонный-печеночный бульон (МППБ) под маслом (среда Китт-Тароцци). Среды разливают по 8 - 10 мл в пробирки, закрывают ватномарлевыми пробками и пергаментными колпачками и стерилизуют в автоклаве в течение 30 мин при 1,5 кгс/см2.

##### <a id="p100265"></a>3.11.3 Проведение испытания

<a id="p100266"></a>Мясо-пептонный бульон (всю серию) в реакторе или в бутылях выдерживают в течение трех дней при комнатной температуре. Взятую стерильно пробу мясо-пептонного бульона расфасовывают по 100 мл в четыре флакона вместимостью 200 мл. Затем высевают мясо-пептонный бульон в пробирки с МПБ, МПА и МППБ. Посевы производят в 6 - 8 пробирок с каждой средой. Посев производят добавлением в каждую пробирку по 0,2 мл испытываемого мясо-пептонного бульона. Пробирки и флаконы выдерживают в течение трех дней в термостате при температуре 37 - 38 °C. Среды в пробирках и мясо-пептонный бульон во флаконах должны оставаться стерильными.

##### <a id="p100267"></a>3.11.4 Обработка результатов

<a id="p100268"></a>При наличии роста микрофлоры в реакторе или бутылях серия мясо-пептонного бульона бракуется. При наличии роста микрофлоры во всех флаконах и пробирках серия мясо-пептонного бульона также бракуется.
<a id="p100269"></a>При наличии роста микрофлоры в одном флаконе или в одной-двух пробирках контроль на стерильность повторяют на удвоенном количестве флаконов и пробирок. При повторном росте микрофлоры серию мясо-пептонного бульона бракуют.

#### <a id="p100270"></a>3.12 Определение способности поддерживать рост микробов


##### <a id="p100271"></a>3.12.1 Аппаратура, материалы и реактивы

<a id="p100272"></a>Для проведения испытания применяют:
<a id="p100273"></a>весы технические;
<a id="p100274"></a>термостат;
<a id="p100275"></a>автоклав;
<a id="p100276"></a>pH-метр;
<a id="p100277"></a>пипетки по ГОСТ 1770-64;
<a id="p100278"></a>бюретки по ГОСТ 1770-64;
<a id="p100279"></a>пробирки стеклянные по ГОСТ 10515-63;
<a id="p100280"></a>воронки стеклянные;
<a id="p100281"></a>пробки ватномарлевые;
<a id="p100282"></a>фильтры бумажные;
<a id="p100283"></a>пептон сухой ферментативный по ГОСТ 13805-68;
<a id="p100284"></a>агар микробиологический по ГОСТ 17206-71.

##### <a id="p100285"></a>3.12.2 Подготовка к испытанию

<a id="p100286"></a>Готовят согласно действующей рецептуре на основе испытуемого мясо-пептонного бульона мясо-пептонный агар, добавляя к бульону 2% микробиологического агара, и устанавливают pH среды 7,4.
<a id="p100287"></a>Испытуемый мясо-пептонный бульон и приготовленный мясо-пептонный агар разливают по 8 - 10 мл в пробирки, закрывают ватномарлевыми пробками и пергаментными колпачками и стерилизуют в автоклаве в течение 30 мин при 1,5 кгс/см2.

##### <a id="p100288"></a>3.12.3 Проведение испытания

<a id="p100289"></a>Стерильный мясо-пептонный бульон и мясо-пептонный агар засевают суточными культурами: Staphylococcus aureus "Лассманов", Esherichia coli, штамм 675, Streptococcus faccalis, штамм 6783, полученными из Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских препаратов им. Л.А. Тарасевича. Посев каждой культуры производят пастеровской петлей в три пробирки с МПБ и в три пробирки с МПА. Инкубацию проводят в течение 24 ч в термостате при 37 - 38 °C.
<a id="p100290"></a>Рост культуры должен быть типичным и обильным.

##### <a id="p100291"></a>3.12.4 Обработка результатов

<a id="p100292"></a>Типичность роста суточных культур определяют визуально и под микроскопом.
<a id="p100293"></a>Интенсивность роста на МПА оценивают визуально, в МПБ - визуально и на фотоэлектроколориметре при длине волны 620 - 640 нм в кюветах с рабочей длиной 5 мм.


## 4. <a id="p100294"></a>РАСФАСОВКА, УПАКОВКА, МАРКИРОВКА, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ


<a id="p100295"></a>4.1. Мясо-пептонный бульон стерильно расфасовывают в стеклянные бутыли (баллоны) вместимостью 10 +/- 0,5 и 20 +/- 1 л. Допускается более мелкая расфасовка - флаконы вместимостью 200 и 500 мл.
<a id="p100296"></a>4.2. Бутыли закрывают стерильными резиновыми пробками по ГОСТ 7852-65, которые сверху завязывают пергаментной бумагой. Флаконы закрывают резиновыми пробками и закатывают алюминиевыми колпачками.

#### <a id="p100297"></a>4.3 На бутыли и флаконы наклеивают бумажные этикетки с указанием:

<a id="p100298"></a>наименования препарата;
<a id="p100299"></a>количества препарата в л;
<a id="p100300"></a>номера серии препарата;
<a id="p100301"></a>даты изготовления;
<a id="p100302"></a>срока годности;
<a id="p100303"></a>условий хранения;
<a id="p100304"></a>обозначения настоящего стандарта.
<a id="p100305"></a>4.4. Мясо-пептонный бульон хранят в реакторе или в бутылях в чистом, сухом и темном помещении при температуре 4 - 10 °C.
<a id="p100306"></a>4.5. Мясо-пептонный бульон транспортируют всеми видами транспорта при соблюдении условий хранения, указанных в [п. 4.4](#p100305). Допускается транспортирование при более высокой температуре, но не выше 18 °C, при этом срок транспортирования должен быть не более пяти суток.
<a id="p100307"></a>4.6. Срок годности мясо-пептонного бульона 6 месяцев со дня изготовления. По истечении указанного срока мясо-пептонный бульон подвергают испытанию и в случае соответствия требованиям, установленным настоящим стандартом, срок годности может быть продлен еще на 3 месяца.



<a id="p100308"></a>

---