Р 1.2.4109-24. 1.2. Гигиена, токсикология, санитария. Комплексный подход к тестированию и оценке способности химических веществ оказывать воздействие на эндокринную систему. Руководство
Актуально на 02.11.2026.
Как цитировать: "Р 1.2.4109-24. 1.2. Гигиена, токсикология, санитария. Комплексный подход к тестированию и оценке способности химических веществ оказывать воздействие на эндокринную систему. Руководство". Р 1.2.4109-24. https://bukva.ai/docs/rukovodstvo-r-1-2-4109-24
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 25.12.2024)
ГОСУДАРСТВЕННОЕ САНИТАРНО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЕ НОРМИРОВАНИЕ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 25 декабря 2024 г.
1.2 ГИГИЕНА, ТОКСИКОЛОГИЯ, САНИТАРИЯ
КОМПЛЕКСНЫЙ ПОДХОД К ТЕСТИРОВАНИЮ И ОЦЕНКЕ СПОСОБНОСТИ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ ОКАЗЫВАТЬ ВОЗДЕЙСТВИЕ НА ЭНДОКРИННУЮ СИСТЕМУ
1. Разработано федеральным бюджетным учреждением науки «Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (С.В. Кузьмин, Х.Х. Хамидулина, А.С. Проскурина, Е.В. Тарасова, И.В. Замкова, Е.В. Дорофеева, И.Н. Арасланов, Ю.Ю. Аниськова, Д.Н. Рабикова, А.К. Назаренко, М.Л. Ластовецкий).
2. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 25 декабря 2024 г.
I. Область применения
1.1. Настоящее Руководство описывает подходы к тестированию и оценке способности химических веществ оказывать воздействие на эндокринную систему.
1.2. Настоящее Руководство применяется для разработки дизайна исследований воздействия химических веществ на эндокринную систему, прогноза эндокринной активности и классификации по степени выраженности и доказанности эффекта.
1.3. Настоящее Руководство предназначено для специалистов органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Министерства природных ресурсов и экологии Российской Федерации, Министерства здравоохранения Российской Федерации, Федерального медико-биологического агентства и научно-исследовательских организаций РАН, а также может быть использовано специалистами других организаций, деятельность которых связана с оценкой безопасности химических веществ.
II. Общие положения
2.1. Под термином «эндокринные разрушители» понимают химические вещества, которые при попадании в организм воздействуют на него подобно гормонам, могут изменять функции гормональной системы, разрушать систему внутренней регуляции организма — гормональную (эндокринную). Вещества, воздействующие на эндокринную систему, используются в различных отраслях промышленности, в том числе в производстве лекарственных средств, парфюмерно-косметических средств, пестицидов, пластмасс и других полимерных материалов, продуктов для личной гигиены и пищевых добавок. Эндокринные разрушители могут быть как природного происхождения, так и попадать в окружающую среду с выбросами и сбросами предприятий, выбросами транспорта, с полигонов твердых бытовых отходов, из сельскохозяйственных отходов, при сжигании и утилизации мусора.
2.2. Установлено наличие связи между воздействием эндокринных разрушителей и состоянием здоровья, включая развитие эндокринно-обусловленных заболеваний (рак молочной железы, щитовидной железы, надпочечников, аденомы простаты, бесплодие, крипторхизм, нарушение фертильности, минерального, углеводного, липидного обменов), маскулинизации женского организма, феминизации мужского организма [7 - 26].
2.3 Критериями отнесения веществ к эндокринным разрушителям являются:
- неблагоприятное воздействие на интактный организм или его потомство, вызывающее изменения морфологии, физиологии, роста, развития, воспроизводства или продолжительности жизни организма, системы или (под)популяции, приводящие к нарушению функциональной способности, способности компенсировать дополнительный стресс или повышению восприимчивости к другим воздействиям;
- эндокринный механизм действия, то есть способность изменять функцию(и) эндокринной системы;
- наличие биологической связи между эндокринной активностью и неблагоприятным действием.
2.4. Для оценки способности химических веществ оказывать воздействие на эндокринную систему разработаны и валидированы тесты [11 - 15]. Универсального теста для оценки всей совокупности эндокринных нарушений не существует. Целесообразным является применение комплексного подхода, который позволяет идентифицировать воздействия вещества на субклеточном, клеточном, органном, организменном уровнях с использованием исследований in silico, in vitro и in vivo на различных тест-объектах.
2.5. Классификация опасности эндокринных разрушителей основана на принципах Согласованной на глобальном уровне системы классификации и маркировки химической продукции (СГС) (англ. Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals, GHS) и производится в зависимости от степени проявления эффекта. Критерии отнесения химических веществ к определенному классу опасности представлены в методических документах <1>.
<1> МР 1.2.0313-22 «Оценка и классификация опасности эндокринных разрушителей», утвержденные руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 30.12.2022 (далее — МР 1.2.0313-22).
III. Этапность и уровни исследования эндокринных разрушителей
3.1. При оценке воздействия эндокринных разрушителей применяется принцип этапности исследований (рис. 3.1).
Рис. 3.1. Этапный подход к оценке опасности эндокринных разрушителей
3.2. На первом этапе до решения вопроса о целесообразности проведения исследований осуществляется оценка всех имеющихся в наличии данных о воздействии химического вещества на человека и животных с использованием официальных источников информации [15, 24 - 25, 27 - 34].
3.2.1. Для сбора информации рекомендуется использовать источники информации (далее — базы данных), представленные в приложении 1 к настоящему Руководству.
3.2.2. Для оценки воздействия вещества на организм, приводящего к возникновению и развитию эндокринно-обусловленных нарушений и заболеваний, используется информация об изменении:
- уровней гормонов;
- структуры и функции щитовидной, паращитовидной, молочной, поджелудочной, шишковидной, предстательной желез, тимуса (вилочковой железы), надпочечников, гипоталамуса, гипофиза, яичников, яичек, семенников;
- обменных процессов (минеральный, белковый, липидный, углеводный);
- полового развития и сексуального поведения.
3.2.3. Особое внимание следует уделять поиску информации о проявлении эндокринно-обусловленных нарушений, заболеваний, выявленных у людей (клинико-диагностические, эпидемиологические исследования).
3.3. На втором этапе проводится оценка данных, полученных на основе анализа близких по химической структуре аналогов, с использованием подхода «структура — свойство» (методы in silico) <2> двойные сноски делать нецелесообразно.
<2> Пособие «Общее пособие по прогнозированию токсических свойств химических веществ» (далее — общее пособие); пособие «Прогнозирование репротоксического действия химических веществ».
3.3.1. Методы in silico являются скрининговыми и предполагают выполнение расчетов с использованием методов математической статистики на основе экспериментальных данных для аналогов и требуют экспертной интерпретации полученных данных.
3.4. На третьем этапе проводятся исследования (испытания) in vitro с целью выявления агонистической и антагонистической активности химических веществ.
3.4.1. Изменения функции эндокринной системы вызваны взаимодействием химического агента с рецепторами гормонов, изменениями уровня гормонов в циркулирующей крови, а также воздействием на синтез гормонов, транспортировку, метаболизм и другие факторы.
3.4.2 Выделяют основные эндокринные механизмы действия:
- эстроген-опосредованный (Э);
- андроген-опосредованный (А);
- опосредованный гормонами щитовидной железы (Щ);
- вмешательство в стероидогенез (С).
Дополнительно рассматриваются исследования, охватывающие воздействие на ювенильные (Ю) и экдистероидные (Эк) гормоны у членистоногих, а также метаболизм ретиноевой кислоты (Р) <3>.
<3> Пересмотренное руководство ОЭСР № 150 по стандартизированным методикам испытаний для оценки химических веществ, вызывающих эндокринные нарушения (англ. Revised Guidance Document 150 on Standardised Test Guidelines for Evaluating Chemicals for Endocrine Disruption, OECD) (далее — Руководство ОЭСР № 150).
3.4.3 Методы in vitro позволяют оценивать:
- сродство связывания с рецепторами эстрогена, андрогена, тиреоидных гормонов;
- транскрипционную активацию рецепторов;
- функцию щитовидной железы;
- ингибирование ароматазы;
- стероидогенез;
- вителлогенин гепатоцитов рыб;
- распознавание (связывание) рецептора арилгидрокарбоната;
- другие эндокринно-обусловленные эффекты.
3.5. На четвертом этапе проводятся исследования (испытания) in vivo с целью выявления эндокринно-обусловленных нарушений на органном и организменном уровнях.
3.5.1. В целях определения органов-мишеней проводятся подострые, субхронические и хронические исследования при различных путях поступления в организм эндокринных разрушителей.
3.5.2. Целесообразно принимать во внимание неопределенности, связанные с различием путей поступления вещества в эксперименте и в реальных условиях.
3.5.3. Целесообразно принимать во внимание неопределенности, возникающие при экстраполяции данных, полученных на животных, на организм человека.
3.5.4. Экстраполяция данных о неблагоприятном воздействии химического вещества на эндокринную систему, полученных на беспозвоночных, на млекопитающих затруднительна ввиду различий их гормональных систем. Подобные вещества являются объектами для дальнейшего изучения на млекопитающих.
3.5.5. В отдельных случаях целесообразно проведение клинико-диагностических и эпидемиологических исследований на людях, подвергающихся воздействию эндокринных разрушителей.
IV. Методы исследования
4.1. Разработана концептуальная модель оценки токсичности химических веществ, воздействующих на эндокринную систему, включающая 5 уровней исследования (табл. 4.1) <4>.
<4> Примечание: полные наименования методов исследования представлены в приложении 2 к настоящему Руководству.
Концептуальная модель оценки токсичности химических веществ, воздействующих на эндокринную систему <5>
4.1.1. Уровень 1 предполагает сбор информации о веществе и его аналогах из открытых источников (физико-химические показатели, параметры (эко)токсичности), а также прогноз опасности с использованием методов in silico.
4.1.1.1. Источниками информации, используемыми для сбора литературных данных о веществе, являются оригинальные статьи, размещенные в научных журналах, монографии, авторефераты диссертационных работ, отечественные и международные базы данных государственных структур и организаций.
4.1.1.2. При анализе литературных данных рекомендуется обращать внимание на полноту представленных результатов (наличие соответствия требованиям надлежащей лабораторной практики (англ. Good Laboratory Practice — GLP), условия проведения эксперимента, пути введения вещества, тест-объекты, статистическая достоверность полученных данных).
4.1.1.3. Одним из методов in silico является прогнозирование с использованием программного обеспечения ОЭСР QSAR Toolbox <6> (далее — программа).
<6> Официальный сайт программного обеспечения «Количественное соотношение структура-свойства» (англ. «Quantitative Structure-Activity Relationship Toolbox») и вспомогательных материалов: qsartoolbox.org (в свободном доступе) (далее — ОЭСР QSAR Toolbox).
Примечание: допускается использование аналогичных или с лучшими характеристиками программных средств для расчета физико-химических и (эко)токсикологических параметров химических веществ и смесей, поиска аналогов, сбора литературных данных, моделирования процессов метаболизма химических веществ, построения моделей.
Программа предназначена для расчета физико-химических и (эко)токсикологических параметров химических веществ и смесей, поиска аналогов, сбора литературных данных, моделирования процессов метаболизма химических веществ, построения моделей (Q)SAR.
4.1.1.4 Расчет показателей (параметров) с использованием программы осуществляется последовательным выполнением 6 шагов:
- ввода данных — в программе задается химическое вещество, для которого будет производиться расчет;
- профилированием — программой по заложенным алгоритмам анализируются структурные и электронные особенности химического вещества;
- поиском литературных данных для химического вещества;
- определением категории — программой с учетом структурных и электронных особенностей химического вещества, возможности образования метаболитов, рассчитываемого показателя (параметра) подбираются аналоги, изучается вопрос о наличии экспериментальных данных для аналогов;
- заполнением пробелов — программой по заложенным алгоритмам рассчитывается показатель (параметр), определяется погрешность определения;
- выводом данных на печать (при необходимости).
4.1.1.5. Программа позволяет прогнозировать значения 3 параметров, характеризующих воздействие химических веществ на эндокринную систему:
- сродство связывания эстрогеновых рецепторов;
- сродство связывания андрогеновых рецепторов;
- ингибирование ароматазы.
4.1.1.6. В программе интегрирована схема пути неблагоприятного исхода <7> (AOP) для воздействия химического вещества на эндокринную систему организма. AOP представляет собой последовательность фактов и событий, вызванных химическим веществом, включая исходное молекулярное событие, воздействие на субклеточном, клеточном, органном, организменном и популяционном уровнях.
<7> Примечание: путь неблагоприятного исхода (англ. Adverse outcome pathway, далее — AOP).
4.1.1.7. Примеры расчетов показателей, характеризующих воздействие химических веществ на эндокринную систему, в том числе с использованием AOP, приведены в приложении 3 к настоящему Руководству.
4.1.1.8. Результаты расчетов сродства связывания эстрогеновых и андрогеновых рецепторов с использованием программного обеспечения ОЭСР QSAR Toolbox представлены в приложении 4 к настоящему Руководству.
4.1.1.9. Другие программные средства, позволяющие оценивать воздействие химических веществ на эндокринную систему организма, приведены в приложении 5 к настоящему Руководству.
4.1.2. Уровень 2 включает методы in vitro, указывающие на эндокринно-обусловленные механизмы воздействия химических веществ.
4.1.3. Уровень 3 включает методы in vivo, указывающие на эндокринно-обусловленные механизмы воздействия химических веществ и в некоторых случаях проявления эффектов.
При интерпретации данных, полученных методами уровня 3 в некоторых случаях, необходимо искать подтверждения наличия (отсутствие) эффекта методами уровня 2 (взаимодействие с рецепторами гормонов) [38].
Например, при интерпретации результатов, полученных в тесте Хершбергера (метод ОЭСР № 441), рекомендуется проводить дополнительные исследования in vitro для определения агонистических или антагонистических эффектов химических веществ (методы ОЭСР № 455, 456, 458).
4.1.4. Уровень 4 включает исследования in vivo, которые представляют информацию о неблагоприятных эндокринно-обусловленных эффектах.
4.1.4.1 Методы уровня 4 включают:
- исследования подострой, субхронической и хронической токсичности при различных путях поступления (пероральный, ингаляционный, накожный);
- комбинированные исследования хронической токсичности и канцерогенной активности;
- оценку токсического действия на пренатальное развитие;
- оценку репродуктивной (эмбриональной) токсичности (скрининговый метод);
- совместное исследования токсичности при повторном воздействии с репродуктивной (эмбриональной) токсичностью (скрининговый метод);
- исследования нейротоксичности в процессе онтогенеза;
- исследования на немлекопитающих (например, простейшие, дафнии, рыбы, земноводные, хирономиды, пресноводные моллюски, почвенные беспозвоночные).
4.1.5. Уровень 5 включает методы in vivo, представляющие расширенную информацию о неблагоприятных эндокринно-обусловленных эффектах, установленных на длительных этапах жизненного цикла организма.
4.1.5.1 Методы уровня 5 включают:
- расширенное изучение репродуктивной токсичности на одном поколении;
- исследования репродуктивной токсичности на двух поколениях;
- исследования на немлекопитающих (простейшие, дафнии, рыбы, хирономиды, птицы).
4.1.5.2. Для изучения эндокринно-обусловленного воздействия химического вещества рекомендуется использовать расширенное изучение репродуктивной токсичности на одном поколении, так как оно позволяет оценить ряд эндокринно-обусловленных нарушений не только у взрослых особей грызунов поколения F1, но и у молодняка, что не рассматривается в исследовании репродуктивной токсичности на двух поколениях.
4.1.5.3. При интерпретации данных о репротоксическом эффекте используются доказательства эндокринного механизма действия.
4.1.5.4. К методам уровня 5 могут быть отнесены клинико-диагностические и эпидемиологические исследования, выполненные на людях.
4.2. Оценка селективности приоритетных методов исследования, позволяющих установить механизмы и оценить эффекты воздействия эндокринных разрушителей, представлены в табл. 4.2. Табл. 4.2 носит информативный характер и не отражает, какие методы исследования являются наиболее актуальными или имеют наибольшее количество ответов на воздействие.
Селективность приоритетных методов исследования по механизму действия <8>
4.4. Назначение (цели, задачи), контрольные точки и ограничения приоритетных методов тестирования эндокринных разрушителей представлены в приложении 6 к настоящему Руководству.
4.5. Обобщенные условия проведения приоритетных методов тестирования эндокринных разрушителей представлены в приложении 7 к настоящему Руководству.
4.6 Нестандартизированные методы исследования рекомендуется относить к одному из уровней по признакам:
4.7. При интерпретации литературных данных рекомендуется сопоставлять исследуемые дозы (концентрации), при воздействии которых наблюдались эндокринно-обусловленные нарушения с параметрами острой токсичности вещества. Результаты, полученные в испытании доз и концентраций, близких к летальным (DL50, CL50), не следует учитывать [36 - 44].
V. Комплексный подход к классификации опасности эндокринных разрушителей
5.1 Классификация опасности предусматривает 3 этапа:
- определение соответствующих данных об опасных свойствах вещества;
- их последующий анализ в целях оценки опасности;
- решение о целесообразности классификации данного вещества в качестве опасного и установление степени опасности путем сопоставления полученных данных с согласованными критериями классификации опасности.
5.2. Отнесение химических веществ к определенному классу опасности производится путем сопоставления имеющихся данных с установленными критериями классификации опасности <9>.
<9> МР 1.2.0275-22 «Классификация токсичности и опасности химических веществ и смесей в соответствии с Согласованной на глобальном уровне системой классификации и маркировки (СГС)», утвержденные руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 15.02.2022.
5.2.1. При классификации опасности воздействия на эндокринную систему химическое вещество может быть отнесено к трем классам опасности (табл. 5.1).
Классификация опасности химических веществ по воздействию на эндокринную систему организма <10>
| Класс, подкласс опасности | Химические вещества |
|---|---|
| 1 | Химические вещества, в отношении которых установлено воздействие на эндокринную систему организма человека. Вещество может быть отнесено к классу 1, если: - оказывает эндокринно-опосредованные неблагоприятные воздействия на людей или связанные с популяцией эндокринно-опосредованные неблагоприятные воздействия на виды животных, обитающих в окружающей среде; - имеются данные экспериментальных исследований (in vivo), подкрепленные другой информацией (например, аналоговые и категориальные подходы), подтверждающей эндокринно-опосредованные неблагоприятные воздействия на людей или на виды животных, обитающих в окружающей среде |
| 1A | Химические вещества, оказывающие вредное воздействие на эндокринную систему человека. К подклассу опасности 1A относят химические вещества на основе данных, полученных на людях (животных), обитающих в окружающей среде (эпидемиологические исследования, описания случаев эндокринно-опосредованных неблагоприятных воздействий у обитателей окружающей среды, полевые исследования обитателей окружающей среды, дополненные другой информацией) |
| 1B | Химические вещества, вероятно оказывающие воздействие на эндокринную систему человека. К подклассу опасности 1B относят химические вещества, опасные свойства которых во многом основаны на результатах экспериментальных исследований in vivo (экспериментальные исследования на животных, дополненные другой информацией) |
| 2 | Химические вещества, оказывающие предполагаемое воздействие на эндокринную систему человека. К классу опасности 2 относят химические вещества, для которых установлены некоторые доказательства эндокринно-опосредованных неблагоприятных воздействий in vivo, но недостаточно убедительные для отнесения вещества к классу 1 (неблагоприятные воздействия с эндокринным механизмом действия, полученные на людях, животных, обитающих в окружающей среде или в экспериментальных исследованиях, дополненных другой информацией). Пробелы в исследованиях не позволяют отнести химическое вещество к классу опасности 1B |
| 3 | Химические вещества, возможно проявляющие эндокринную активность. К классу опасности 3 относят химические вещества, проявляющие эндокринную активность in vitro, и не относящиеся к классам опасности 1 или 2. Явные неблагоприятные эффекты на эндокринную систему, обнаруживаемые у беспозвоночных или рыб, которые не могут быть напрямую экстраполированы на млекопитающих и рекомендуются дополнительные исследования |
5.3. К классу 1A могут быть отнесены химические вещества, для которых имеются результаты тестирования несколькими методами уровня 5 на млекопитающих, в том числе полученных на людях.
5.4. К классу 1A могут быть отнесены химические вещества, для которых имеются результаты тестирования несколькими методами уровня 4 на млекопитающих и одно исследование уровня 5, полученное на людях.
5.5. Примеры классификации опасности приведены в табл. 5.2 - 5.9 <11>.
<11> Примечание: в табл. 5.2 - 5.9 классы опасности и виды нарушений приведены в соответствии с МР 1.2.0313-22.
Классификация опасности 1,2-дибром-3-хлорпропана по воздействию на эндокринную систему
| 1,2-Дибром-3-хлорпропан (CAS <12> 96-12-8) | ||
| Параметры острой токсичности | Уровень тестирования | Результаты тестирования |
| DL50 170 мг/кг, в/ж, крысы; DL50 257 мг/кг, в/ж, мыши; DL50 150 мг/кг, в/ж, морские свинки; DL50 123 мг/кг, в/б, мыши; DL50 1400 мг/кг, н/к, кролики; DL50 100 мг/кг, п/к, крысы | 4 | 350 мг/кг/4 дня (прерывисто), парентерально, крысы — изменение уровня лютеинизирующего гормона, влияние на сперматогенез (морфологию, подвижность и количество сперматозоидов) [[45]](#p102256) |
| 350 мг/кг/4 дня (прерывисто), п/к, крысы — изменение уровней гонадотропинов, андрогенное влияние, влияние на яички, придаток яичка, семявыносящий проток [[46]](#p102257) | ||
| 3 ppm/6 ч/84 недели (прерывисто), инг., крысы — опухоли коры надпочечников [[47]](#p102258) | ||
| 1 ppm ( \approx 10 мг/м3, LOAEC), 0,1 ppm ( \approx 1 мг/м3, NOAEC), 6 ч/5 дней в неделю/14 недель, инг., кролики — атрофия яичек, аномалии сперматозоидов [[48]](#p102259) | ||
| 912,5 мг/кг/26 недель (прерывисто), п/к, крысы — изменения уровня лютеинизирующего гормона, массы яичек [[49]](#p102260) | ||
| 4562 мг/кг/26 недель (прерывисто), п/к, крысы — изменения уровней гонадотропинов, массы простаты [[49]](#p102260) | ||
| 600 ppb/6 ч/76 недель (прерывисто), инг., крысы — опухоли коры надпочечников [[50]](#p102261) | ||
| 15,45 мг/кг/103 недели (прерывисто), в/ж, крысы — опухоли коры надпочечников [[51]](#p102262) | ||
| 15 и 29 мг/кг, в/ж, 5 р/нед, в течение 73 и 64 недель соответственно, крысы — у самок аденокарциномы молочной железы (у 24/50 в группе 15 мг/кг, 31/50 в группе 29 мг/кг) [[52]](#p102263) | ||
| 5 | Клинико-эпидемиологические исследования (на производстве) — нарушение сперматогенеза (морфология, подвижность и количество сперматозоидов, азооспермия, разной степени выраженности олигоспермия) [[53]](#p102264) | |
| Класс опасности 1A | Виды нарушений: - нарушение морфологии и функции надпочечников (опухоли); - нарушение морфологии и функции молочных желез (опухоли); - нарушение морфологии и функции мужских репродуктивных органов (снижение массы яичек и придатков, простаты); - изменение уровней гонадотропинов — нарушение сперматогенеза (снижение количества и подвижности сперматозоидов, азооспермия, олигоспермия) | |
| Примечание: отнесение к классу 1A основано на результатах 9 исследований методов уровня 4, выполненных на различных тест-объектах при различных путях поступления и длительности экспериментов, и на 1 исследовании уровня 5 на людях. Наблюдаются множественные нарушения морфологии и функции нескольких эндокринных органов и систем. | ||
<12> Регистрационный номер химического вещества (англ. Chemical Abstracts Service registry number, далее — CAS).
Классификация опасности бисфенола A по воздействию на эндокринную систему
| Бисфенол A (CAS 80-05-7) | ||
| Параметры острой токсичности | Уровень тестирования | Результаты тестирования |
| DL50 3200 — 5000 мг/кг, в/ж, крысы; DL50 1600 — 4100 мг/кг, в/ж, мыши; DL50 3000 мг/кг, п/к, кролики; DL50 3000 мг/кг, н/к, кролики; DL50 200 — 800 мг/кг, в/б, крысы; DL50 150 — 200 мг/кг, в/б, мыши; DL50 150 мг/кг, в/б, кролики; CL50 1700 мг/кг, инг., 6 ч, крысы | 3 | 100, 300 мг/кг, п/к, овариэктомированные мыши, 7 дней — агонистические и антагонистические эффекты; при 300 мг/кг 2-кратное увеличение массы матки (Метод ОЭСР № 440) [[54]](#p102265) |
| 0,002, 0,02, 0,2, 2, 20, 200, 400, 800 мг/кг/день, в/ж, крысы, 1 день и 3 дня — через 4 часа после однократных доз: 0,002 — 20 мг/кг — отсутствие утеротропного эффекта и транскрипционного эффекта для экспрессии генов матки; 200 — 800 мг/кг — утеротропный эффект, увеличение экспрессии генов и массы матки (Метод ОЭСР № 440) [[55]](#p102266) | ||
| 50, 200 и 600 мг/кг, в/ж, крысы, 10 дней (начиная с 56 послеродового дня) — сомнительные результаты, андроген-агонистическое свойство не установлено (Метод ОЭСР № 441) [[56]](#p102267) | ||
| 0,228 мг/л, Danio rerio, 21 день — увеличение соотношения эстрадиол/тестостерон (Метод ОЭСР № 230) [[57]](#p102268) | ||
| 4 | LOAEL 600 мг/кг/день, в/ж, крысы, 28 дней — увеличение массы щитовидной железы, печени, яичек и надпочечников, изменения морфологии надпочечников, аномальные половые циклы, снижение массы простаты, изменение эстрального цикла (Метод ОЭСР № 407) [[58]](#p102269) | |
| 0,25, 25 мг/кг, в/ж, с питьевой водой в период полового созревания (с 28 по 56 день после рождения), мыши — снижение уровня тироксина, когнитивные нарушения [[59]](#p102270) | ||
| 0,25, 2,5, 25 мг/кг, п/к, с 1 дня после рождения до 10, крысы — изменение работы гипоталамо-гипофизарно-тиреоидную ось у взрослых крыс в эструсе с эффектами на гипофиз и щитовидную железу (снижение уровня тироксина, повышение уровня тиреотропного гормона) [[60]](#p102271) | ||
| 0,002 мг/кг, п/к, с 10 дня беременности до 7 дня лактации, крысы — повышенный уровень кортикотропин-рилизинг-гормона, кортикостерона, гормонов коры надпочечников, влияние на передачу сигналов нейронов, пониженный уровень тестостерона, влияет на сексуальное поведение [[61]](#p102272) | ||
| 11 — 250 мг/кг/день, п/к, 7 дней, крысы — влияние на развитие гипофиза, влияние на развитие матки, изменение массы матки, повышенный уровень пролактина [[62]](#p102273) | ||
| 0,1, 50 мг/кг/день, в/ж, 6 — 21 дни беременности, крысы — изменения в морфологии эндометрия, влияние на экспрессию рецептора эстрогена-альфа, влияние на экспрессию рецептора эстрогена-бета, влияние на морфологию матки [[63]](#p102274) | ||
| 0,0025, 0,25, 1 мг/кг, в/ж, крысы — развитие протоковой гиперплазии и карциномы молочных желез на 50 и 95 день после рождения у крыс, изменения морфологии молочной железы, влияет на аногенитальное расстояние [[64]](#p102275) | ||
| 0,01 мг/кг/день, п/к, 9 — 16 дни беременности, крысы — влияние на метаболизм жирных кислот, нарушение толерантности к глюкозе, повышенный уровень триглицеридов, приводит к ожирению [[65]](#p102276) | ||
| 0,005 — 5 мг/кг/день, через питьевую воду, 8 месяцев, мыши — повышенный уровень холестерина, влияние на биосинтез холестерина, влияние на метаболизм глюкозы; влияние на развитие ожирения и связанных с ним патологий: диабет 2 типа и сердечно-сосудистые заболевания; NOAEL 5000 мг/кг/день [[66]](#p102277) | ||
| 5, 50 мг/кг/день, в/ж, 6,5 — 16,5 дни беременности, крысы — влияние на транспорт кальция, влияет на передачу сигналов кальция [[67]](#p102278) | ||
| 5 | Концентрация вещества в моче и уровни тестостерона, лютеинизирующего гормона и фолликулостимулирующего гормона в сыворотке крови измерялись у мужчин-маляров, работающих с эпоксидной смолой и использующих краску, содержащую от 10% до 30% вещества. Уровни вещества в моче, сывороточного лютеинизирующего гормона и сывороточного фолликулостимулирующего гормона были выше у маляров, чем в контрольной группе. Уровни сывороточного тестостерона были ниже у маляров, чем в контрольной группе [[68]](#p102279) | |
| Класс опасности 1A | Виды нарушений: - нарушение морфологии и функции щитовидной железы (увеличение массы, изменение метаболизма гормонов); - нарушение морфологии и функции мужских репродуктивных органов (увеличение массы яичек, простаты, изменение уровня тестостерона); - нарушение менструального цикла; - нарушение развития плода (изменение аногенитального расстояния); - нарушение морфологии и функции надпочечников (увеличение массы, изменение уровня кортикостерона); - нарушение морфологии тимуса; - изменение уровней кортикотропин-рилизинг-гормона, адренокортикотропного гормона; - влияние на сексуальное поведение; - нарушение оси гипоталамус-гипофиз-яички; - изменение уровней лютеинизирующего, фолликулостимулирующего гормонов; - нарушение морфологии и функции женских репродуктивных органов (гиперплазия молочных желез, матки, яичников); - нарушение углеводного обмена (влияние на метаболизм глюкозы, изменение уровня инсулина, лептина, инсулинорезистентность); - нарушение липидного обмена (ожирение) | |
| Примечание: отнесение к классу 1A основано на результатах 10 исследований методов уровня 4 (одно исследование является стандартизированным), выполненных на низких дозах, различных тест-объектах, при различных путях поступления и длительности экспериментов и на 1 исследовании уровня 5 на людях. В одном исследовании на рыбах установлена эндокринная активность. В исследованиях уровня 3 на грызунах наблюдается корреляция утеротропного эффекта с увеличением экспрессии генов матки. Наблюдаются множественные нарушения морфологии и функции нескольких эндокринных органов и систем. | ||
5.6. К классу 1B могут быть отнесены химические вещества, действие которых на эндокринную систему установлено в методах in vivo уровней 3 и 4.
Классификация опасности резерпина по воздействию на эндокринную систему
| Резерпин (CAS 50-55-5) | ||
| Параметры острой токсичности | Уровень тестирования | Результаты тестирования |
| DL50 420 мг/кг, в/ж, крысы; DL50 > 50 мг/кг, в/ж, мыши; DL50 44 мг/кг, в/б, крысы; DL50 5 мг/кг, в/б, мыши; DL50 25 мг/кг, п/к, крысы; DL50 5,61 мг/кг, п/к, мыши; DL50 15 мг/кг, в/в, крысы; DL50 21 мг/кг, в/в, мыши | 3 | Утеротропный эффект (агонист эстрогена) (Метод ОЭСР № 440) [[69]](#p102280) |
| 0,4 мг/кг/5 дней (прерывисто), п/к, крысы — изменения в уровне гонадотропинов <*> [[70]](#p102281) | ||
| 4 | 384 мг/кг/26 нед (непрерывно), 2,11 мг/кг день, перорально, мыши — влияние на менструальный цикл; изменение со стороны матки, шейки матки, влагалища, изменения массы яичников [[71]](#p102282) | |
| 163,8 мг/кг/39 нед (непрерывно), 0,6 мг/кг день, перорально, мыши — изменения массы почек; изменения массы тимуса [[72]](#p102283) | ||
| 216 мг/кг/2 года (непрерывно), перорально, крысы — опухоли коры надпочечников [[73]](#p102284) | ||
| 340 мг/кг/ 3 года (прерывисто), в/ж, крысы — опухоли желудочно-кишечного тракта, щитовидной железы [[74]](#p102285) | ||
| Класс опасности 1B | Виды нарушений: - нарушение морфологии и функции щитовидной железы (опухоли); - нарушение морфологии и функции надпочечников (опухоли коры); - нарушение морфологии тимуса (изменение массы); - изменение уровней гонадотропинов; - утеротропный эффект | |
| Примечание: отнесение к классу 1B основано на результатах 2 исследований методов уровня 3 и 4 исследований уровня 4. Один из методов уровня 3 (отмечен звездочкой) является нестандартизированным, однако отнесен к уровню 3 на основании выявленных эффектов в краткосрочном эксперименте in vivo. К уровню 4 отнесены 4 исследования на грызунах в длительном эксперименте. Наблюдаются множественные нарушения морфологии и функции нескольких эндокринных органов и систем, в том числе опухоли. Отнесение к классу 1A невозможно ввиду отсутствия данных на людях. | ||
Классификация опасности бутилбензилфталата по воздействию на эндокринную систему
| Бутилбензилфталат (CAS 85-68-7) | ||
| Параметры острой токсичности | Уровень тестирования | Результаты тестирования |
| DL50 2330 мг/кг, в/ж, крысы; DL50 4170 — 6160 мг/кг, в/ж, мыши; DL50 > 10000 мг/кг, н/к, кролики; DL50 6700 мг/кг, н/к, крысы, мыши; CL50 > 6700 мг/м3, инг., 4 ч, крысы | 4 | 70500 мг/кг/141 день (прерывисто), в/ж, крысы — гипофункция щитовидной железы, изменения массы яичников [[75]](#p102286) |
| 10500 мг/кг/21 день (прерывисто), в/ж, крысы — изменения массы печени, почек и щитовидной железы [[75]](#p102286) | ||
| 32000 мг/кг/64 дн (прерывисто), в/ж, крысы — изменения массы печени, почек и щитовидной железы [[75]](#p102286) | ||
| 700 мг/кг/14 дн (прерывисто), в/ж, крысы — изменения массы надпочечников, печеночная микросомальная смешанная оксидаза [[76]](#p102287) | ||
| 250 мг/кг/день, в/ж, 6 нед, крысы — повышенный уровень фолликулостимулирующего гормона, нарушение функции яичников, влияние на популяцию фолликулов яичников [[77]](#p102288) | ||
| 0, 300, 900, 2800, 8300 или 25000 ppm в рационе/0, 30, 60, 180, 550 или 1660 мг/кг/, 26 нед, крысы — при 25000 ppm/1660 мг/кг/ — снижение средней массы тела на 30% меньше; абсолютной массы яичек, хвоста и придатка яичка, простаты; увеличение относительной массы печени и почек; увеличение гипоспермии и атрофии семенных канальцев и гипоспермии в придатке яичка; снижение концентрации спермы в ткани хвоста придатка яичка; NOAEL — 8300 ppm (~ 550 мг/кг массы тела в день) [[78]](#p102289) | ||
| 750 мг/кг, в/ж, с 14 дня беременности по 3 день после рождения, крысы — отсутствие материнской токсичности или снижения размеров помета; уменьшение массы тела детенышей при рождении; у детенышей мужского пола наблюдалось сокращение аногенитального расстояния (около 30%) и снижение массы яичек (около 35%); в младенчестве у самцов наблюдались женские ареолы (соски) — изменения половой дифференциации потомства (антиандроген) [[79]](#p102290) | ||
| 120 мг или 500 мг/кг/день через зонд, с 10 дня беременности до родов, крысы — задержка полового созревания и изменения морфологии молочной железы у потомства (задержку открытия влагалища и изменения в постнатальной молочной железе в течение длительного времени после окончания воздействия, в основном к 35-дневному возрасту) [[80]](#p102291) | ||
| 500 мг/кг/день, в/ж, 9 — 16 дни беременности, мыши — задержка открытия влагалища у самок; у потомства — уменьшение аногенитального расстояния у самцов на 10 и 20 нед; снижение концентрации сывороточного тестостерона у самцов на 20 нед и увеличение концентрации сывороточного тестостерона у самок на 20 нед [[81]](#p102292) | ||
| 5 | Исследование на двух поколениях: 100, 200, 400 мг/кг/день, в/ж, крысы — размягчение яичек, диффузная атрофия семенных канальцев яичек, снижение количества сперматозоидов и (или) остаточных половых клеток в просвете придатка яичка в поколении F1 после доз > 100 мг/кг, снижение массы придатка яичка F1 при дозах > 200 мг/кг, совместно с низкой массой придатка яичка F0, гиперплазией клеток Лейдига, остаточными половыми клетками в просвете придатка яичка и низкой массой семенных пузырьков, маленькими яичками и придатками яичек, частичной аплазией или аплазией придатков яичек и гиперплазией клеток Лейдига в поколении F1 при дозе 400 мг/кг. Репродуктивная способность: родители F1 при 400 мг/кг — сниженный индекса фертильности и задержку препуциального отделения полового члена. У потомства наблюдались снижение массы тела в случае F1 и изменение аногенитального расстояния у самок F1 и самцов F2 при дозах > 100 мг/кг, с низкой массой селезенки при 400 мг/кг в обоих поколениях. У родительских животных NOEL и NOAEL были < 100 мг/кг/день, и никаких серьезных эффектов на репродуктивную способность не было вызвано при дозах менее 200 мг/кг/день. NOEL и NOAEL для роста и развития потомства составляют < 100 мг/кг/день [[82]](#p102293) | |
| Исследование на двух поколениях: 0, 20, 100 и 500 мг/кг, в/ж, крысы — при 500 мг/кг у самцов-отъемышей поколения F — значительное снижение массы яичек и придатков яичек, сопровождающееся повреждением яичек, у самок F1, которым вводили 500 мг/кг — снижение массы яичников и увеличение массы матки. Снижение уровня тестостерона у самцов F0 и F1, которым вводили 500 мг/кг; значительное сокращение аногенитального расстояния (указание на андрогенное действие) у самцов F1 при 500 мг/кг. В поколении F2 к 21-му дню после рождения не наблюдалось никаких существенных эффектов, связанных с воздействием вещества; NOAEL 100 мг/кг для репродуктивной и внутриутробной токсичности; 20 мг/кг — для системной токсичности (Метод ОЭСР № 416) [[83]](#p102294) | ||
| Класс опасности 1B | Виды нарушений: - нарушение морфологии и функции щитовидной железы (гипофункция); - нарушение морфологии надпочечников (изменение массы); - изменение уровня фолликулостимулирующего гормона; - нарушение морфологии и функции женских репродуктивных органов (изменение популяции фолликулов яичников); - нарушение морфологии и функции мужских репродуктивных органов (снижение массы придатков яичек, семенных пузырьков, количества клеток Лейдига, атрофия семенных канальцев); - нарушение сперматогенеза (изменение морфологии, снижение количества сперматозоидов); - нарушение развития плода (изменение аногенитального расстояния, аномалии развития эндокринной системы); - нарушение морфологии и функции молочных желез (опухоли) | |
| Примечание: отнесение к классу 1B основано на результатах 9 исследований нестандартизированных методов уровня 4 и 2 исследований уровня 5 (одно — стандартизированное, второе — нестандартизированное), выполненных на двух поколениях. Наблюдаются множественные нарушения морфологии и функции нескольких эндокринных органов и систем, в том числе опухоли. Отнесение к классу 1A невозможно ввиду отсутствия данных на людях. | ||
5.7. К классу 2 могут быть отнесены химические вещества, действие которых на эндокринную систему установлено в методах in vivo уровней 3 при отсутствии или неполноте данных, полученных методами уровня 4 на млекопитающих.
Классификация опасности бензофенона по воздействию на эндокринную систему
| Бензофенон (CAS 119-61-9) | ||
| Параметры острой токсичности | Уровень тестирования | Результаты тестирования |
| DL50 10000 мг/кг, в/ж, крысы; DL50 2895 мг/кг, в/ж, мыши; DL50 727 мг/кг, в/б, мыши; DL50 3535 мг/кг, н/к, кролики | 1* | 50, 100, 250 мг/кг/день, в/б, 3 дня, крысы — влияние на метаболизм ксенобиотиков [[84]](#p102295) |
| 2 | Установлено ингибирующее действие на активность пероксидазы щитовидной железы in vitro [[85]](#p102296) | |
| 3 | 900 мг/кг/3 дня (прерывисто), в/б, крысы — эстрогенное влияние, изменение массы матки [[86]](#p102297) | |
| 1200 мг/кг/3 дня (прерывисто), в/ж, крысы — эстрогенное влияние, изменение массы матки [[87]](#p102298) | ||
| 5 | 100, 450, 2000 ppm (~ 6 — 9, 29 — 40 и 130 — 179 мг/кг), в/ж, два поколения, крысы — явных признаков воздействия на эндокринную и репродуктивную системы не обнаружено даже при дозе 2000 ppm у родителей F0 или потомства F1 (NOEL); NOEL 450 ppm для поколения F1 и F2 (Метод ОЭСР № 416) [[88]](#p102299) | |
| Класс опасности 2 | Виды нарушений: - нарушение морфологии и функции щитовидной железы (влияние на активность ферментов); - эстрогенное влияние (изменение массы матки) | |
| Примечание: для данного вещества получены результаты исследования по Методу ОЭСР № 416, выполненных на низких дозах в 100 — 1000 раз ниже среднесмертельных, чем объясняется отсутствием признаков воздействия на эндокринную систему. В методах исследования уровня 3 при высоких дозах (1/10 DL50) установлено эстрогенное влияние. Результаты исследования, отмеченного звездочкой, отнесены к уровню 1 ввиду неполноты информации о характере нарушений. Отнесение к классу опасности 2 выполнено на основе одного теста in vitro уровня 2 и 2 тестов in vivo уровня 3. | ||
5.8. К классу опасности 3 могут быть отнесены химические вещества, действие которых на эндокринную систему установлено в тестах любого уровня, выполненных на немлекопитающих. Для данных веществ рекомендуется проведение дополнительных исследований на млекопитающих.
5.9. К классу опасности 3 могут быть отнесены химические вещества, действие которых на эндокринную систему установлено в единичных тестах уровней 3 и 4, выполненных на млекопитающих. Отнесение данных веществ к высокому классу опасности не представляется возможным ввиду недостаточности доказательной базы.
5.10. К классу опасности 3 могут быть отнесены химические вещества, действие которых на эндокринную систему установлено в тестах in vitro.
Классификация опасности 1,4-диаминобензола по воздействию на эндокринную систему
| 1,4-Диаминобензол (CAS 106-50-3) | ||
| Параметры острой токсичности | Уровень тестирования | Результаты тестирования |
| DL50 80 — 133 мг/кг, в/ж, крысы; DL50 145 мг/кг, в/ж, морские свинки; DL50 > 2500 мг/кг, н/к, кролики; DLmin 5000 мг/кг, н/к, кролики; CL50 920 мг/м3, инг., 4 ч, крысы | 4 | 1, 2 и 3 мг/кг/сут, н/к, 90 дн., крысы — при 2 и 3 мг/кг дозозависимые изменения морфологии семенных канальцев, снижение количества сперматозоидов, увеличение количества ненормальных сперматозоидов, снижение массы яичек, окислительный стресс в яичках [[89]](#p102300) |
| Класс опасности 3 | Виды нарушений: - нарушение сперматогенеза (изменение морфологии, снижение количества, увеличение аномальных сперматозоидов); - нарушение морфологии и функции мужских репродуктивных органов (изменение массы яичек, морфологии семенных канальцев, окислительный стресс) | |
| Примечание: для данного вещества выявлены нарушения в единственном нестандартизованном тесте при наименее чувствительном пути поступления. Поскольку отсутствуют доказательства эндокринного механизма действия, то вещество отнесено к классу опасности 3, необходимы дополнительные исследования. | ||
Классификация опасности марганца дихлорида по воздействию на эндокринную систему
| Марганец дихлорид (CAS 7773-01-5) | ||
| Параметры острой токсичности | Уровень тестирования | Результаты тестирования |
| DL50 250 — 425 мг/кг, в/ж, крысы; DL50 450 — 1715 мг/кг, в/ж, мыши; DL50 147 — 180 мг/кг, в/б, крысы; DL50 120 — 140 мг/кг, в/б, мыши | 3 | 50 мг/кг, п/к, 10 дней (прерывисто), мыши — гипогликемия [[90]](#p102301) |
| 4 | 10 мг/кг, п/к, крысы, в течение 30 дней до спаривания — влияние на яички, придаток яичка, семявыносящий проток [[91]](#p102302) | |
| Класс опасности 3 | Виды нарушений: - отрицательное воздействие на мужские репродуктивные органы (яички, придатки яичек, семявыносящие протоки); - нарушение углеводного обмена (гипогликемия) | |
| Примечание: выявлены нарушения при нехарактерном для данного вещества пути поступления в двух нестандартизованных исследованиях уровней 3 и 4. В соответствии с методическими документами <13> марганец и его соединения являются репротоксикантами класса опасности 1. Однако в доступной литературе отсутствует достоверная информация о воздействии марганца дихлорида на репродуктивную систему. Отсутствует доказательная база эндокринного механизма действия, поэтому вещество отнесено к классу опасности 3, необходимы дополнительные исследования. | ||
<13> МР 1.2.0321-23 «Оценка и классификация опасности репродуктивных токсикантов», утвержденные руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 04.04.2023.
Классификация опасности галаксолида по воздействию на эндокринную систему
| Галаксолид (CAS 1222-05-5) | ||
| Параметры острой токсичности | Уровень тестирования | Результаты тестирования |
| DL50 > 3250 мг/кг, в/ж, крысы; DL50 > 5000 мг/кг, н/к, крысы; DL50 > 3250 мг/кг, н/к, кролики | 2 | 25 мкМ, клеточная линия аденокарциномы человека H295R — ингибирование стероидогенеза (выработки прогестерона и кортизола) (Метод ОЭСР № 456) [[92]](#p102303) |
| Danio rerio, in vitro — связывание с рецепторами стероидных гормонов (проявление эстрогенной или антиэстрогенной активностью в зависимости от концентрации; проявление свойств агониста эстрогена в концентрациях, на 6 порядков превышающих концентрацию природного агониста рецепторов эстрогена 17\beta - \text{эстрадиола} (E2) [[93]](#p102304) | ||
| 3 | В анализе метаморфоза земноводных Xenopus laevis in vivo вызывает дисбаланс гормонов щитовидной железы (Метод ОЭСР № 231) [[94]](#p102305) | |
| Класс опасности 3 | Виды нарушений: - влияние на стероидогенез; - нарушение морфологии и функции щитовидной железы (изменение гомеостаза гормонов) | |
| Примечание: скрининговым тестом уровня 2 выявлено ингибирование выработки прогестерона и кортизола. В 2 тестах на рыбах и земноводных установлена эндокринная активность нарушения. Необходимы дополнительные исследования. | ||
ПЕРЕЧЕНЬ РЕКОМЕНДУЕМЫХ ОФИЦИАЛЬНЫХ ИНФОРМАЦИОННЫХ ИСТОЧНИКОВ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ ДЛЯ СБОРА ДАННЫХ О ВОЗДЕЙСТВИИ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ
1. База данных Федерального Регистра потенциально опасных химических и биологических веществ: rpohv.ru (в свободном доступе).
2. База данных по эндокринным разрушителям Управления по надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (англ. Endocrine Disruptor Knowledge Base (EDKB), U.S. Food and Drug Administration): nctr-crs.fda.gov/edkb/Home (в свободном доступе).
3. База данных Европейского химического агентства (англ. European Chemicals Agency's (ECHA) Dissemination portal with information on chemical substances registered under REACH): echa.europa.eu (в свободном доступе).
4. Глобальный портал информации о свойствах химических веществ (англ. The Global Portal to Information on Chemical Substances (eChemportal): echemportal.org (в свободном доступе).
5. База данных по химическим веществам, оказывающим воздействие на эндокринную систему, с токсикологическими профилями (англ. Database of Endocrine Disrupting Chemicals and their Toxicity profiles (DEDuCT): cb.imsc.res.in/deduct (в свободном доступе).
6. База данных по утеротропной биоактивности химических веществ по воздействию на грызунов (англ. A Curated Database of Rodent Uterotrophic Bioactivity). Environmental Health Perspectives, 2015: 124(5), 556 — 562.
7. База данных по ингибиторам ароматазы Министерства здравоохранения и социальных служб США (англ. qHTS assay to identify aromatase inhibitors): pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/bioassay/743139 (в свободном доступе).
8. База данных по прогнозированию токсичности (англ. ToxCast — Toxicity Forecasting): epa.gov/chemical-research/exploring-toxcast-data (в свободном доступе).
9. База данных программы скрининга эндокринных разрушителей в 21 веке (англ. Endocrine Disruptor Screening Program (EDSP) in the 21st Century): epa.gov/endocrine-disruption/endocrine-disruptor-screening-program-edsp-21st-century (в свободном доступе).
10. Р 2.1.10.3968-23 «Руководство по оценке риска здоровью населения при воздействии химических веществ, загрязняющих среду обитания», утвержденное руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 06.09.2023.
11. База данных ОЭСР QSAR Toolbox: qsartoolbox.org (в свободном доступе).
12. Комплексная информационная система по вопросам риска Агентства по охране окружающей среды США (англ. Integrated Risk Information System (IRIS) US EPA): epa.gov/iris (в свободном доступе).
13. Монографии Международного агентства по изучению рака (МАИР) по оценке канцерогенного риска для человека: monographs.iarc.who.int (в свободном доступе).
14. База данных по путям неблагоприятных исходов — схемам AOP (англ. AOP knowledge base): aopkb.oecd.org (в свободном доступе).
15. Применение системы ключевых характеристик для выявления химических веществ потенциально опасных в плане развития рака молочной железы с использованием общедоступных данных in vivo, in vitro и in silico (англ. Application of the Key Characteristics Framework to Identify Potential Breast Carcinogens Using Publicly Available in Vivo, in Vitro, and in Silico Data). Environmental Health Perspectives, 2024: 132(1).
16. База данных свойств химических веществ GESTIS: gestis-database.dguv.de (в свободном доступе).
17. Справочная база данных по токсичности (англ. ToxRefDB — Toxicity Reference Database): epa.gov/system/files/documents/2022-04/281_toxrefdb-2-0-mini-slides-23aug2021_508-final.pdf (в свободном доступе).
18. Регистр токсических эффектов химических веществ (англ. CCOHS RTECS. Canadian Centre Occupational Health and Safety, Registry of Toxic Effects of Chemical Substances): ccohs.ca/products/rtecs (в свободном доступе).
19. Материалы международной некоммерческой организации TEDX по эндокринным разрушителям (The Endocrine Disruption Exchange): tedx.org (в свободном доступе).
20. Отчеты о репродуктивной токсичности и токсичности для развития химических веществ, национальная токсикологическая программа Министерства здравоохранения и социального обеспечения США (англ. Developmental and reproductive toxicity reports (DART Reports): ntp.niehs.nih.gov/publications/reports/dart (в свободном доступе).
21. База данных по экотоксикологии Агентства по охране окружающей среды США (англ. ECOTOX — Ecotoxicology): cfpub.epa.gov/ecotox/ (в свободном доступе).
22. База данных об опасных свойствах химических веществ Национальной медицинской библиотеки США (англ. Hazardous Substances Data Bank (HSDB): pubchem.ncbi.nlm.nih.gov (в свободном доступе).
23. Платформа INCHEM — программа ВОЗ по химической безопасности (англ. International Programme on Chemical Safety (IPCS) WHO): inchem.org (в свободном доступе).
ПРИОРИТЕТНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ СПОСОБНОСТИ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ ВОЗДЕЙСТВОВАТЬ НА ЭНДОКРИННУЮ СИСТЕМУ
1.1. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 455 «Исследование транскрипционной активации, опосредованной стабильно трансфицированным человеческим \alpha - \text{рецептором} эстрогена, для выявления эстроген-агонистической активности веществ» (англ. OECD TG № 455 «Stably Transfected Human Estrogen Receptor - \alpha Transcriptional Activation Assay for Detection of Estrogenic Agonist-Activity of Chemicals»).
1.2. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 456 «H295R in vitro тест на стероидогенез» (англ. OECD TG 456 «Steroidogenesis in vitro»).
1.3. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 458 «Анализ транскрипционной активации стабильно трансфицированного рецептора андрогена человека для определения андрогенной агонистической и антагонистической активности химических веществ» (англ. OECD TG 458 «Stably Transfected Human Androgen Receptor Transcriptional Activation Assay for Detection of Androgenic Agonist and Antagonist Activity of Chemicals»).
1.4. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 493 «Руководство по тестированию рекомбинантных рецепторов эстрогена человека (hrER) in vitro для выявления химических веществ со сродством к связыванию с ER» (англ. OECD TG 493 «Performance-Based Test Guideline for Human Recombinant Estrogen Receptor (hrER) In Vitro Assays to Detect Chemicals with ER Binding Affinity»).
1.5. ISO 19040-1:2018 Качество воды. Определение эстрогенного потенциала воды и сточных вод. Часть 1. Скрининг по эстрогену с использованием штамма дрожжей (Saccharomyces cerevisiae) (англ. ISO 19040-1:2018 «Water quality — Determination of the estrogenic potential of water and waste water» Part 1: Yeast estrogen screen (Saccharomyces cerevisiae)»).
1.6. ISO 19040-2:2018 Качество воды. Определение эстрогенного потенциала воды и сточных вод. Часть 2. Скрининг по эстрогену с использованием штамма дрожжей (A-YES, Arxula adeninivorans) (англ. ISO 19040-2:2018 «Water quality — Determination of the estrogenic potential of water and waste water» Part 2: Yeast estrogen screen (A-YES, Arxula adeninivorans)»).
1.7. ISO 19040-3:2018 Качество воды. Определение эстрогенного потенциала воды и сточных вод. Часть 3. Анализ репортерного гена на основе клеток человека in vitro: описание стандарта и тендеры (англ. ISO 19040-3:2018 «Water quality — Determination of the estrogenic potential of water and waste water» Part 3: In vitro human cell-based reporter gene assay»).
1.8. Руководство по тестированию эндокринных разрушителей. Программа скрининга 890.1150: Связывание рецепторов андрогенов (цитозоль простаты крысы) (англ. Endocrine Disruptor Screening Program Test Guidelines OPPTS 890.1150: Androgen Receptor Binding (Rat Prostate Cytosol).
1.9. Руководство 890.1200: Анализ ароматазы (англ. US EPA OCSPP Guideline 890.1200: Aromatase assay).
2.1. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 229 «Оценка репродуктивной способности рыб» (англ. OECD TG 229 «Fish Short Term Reproduction Assay»).
2.2. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 230 «21-дневное исследование на рыбах» (англ. OECD TG 230 «21-Day Fish Assay»).
2.3. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 231 «Анализ метаморфоза земноводных» (англ. OECD TG 231 «Amphibian Metamorphosis Assay (AMA)»).
2.4. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 440 «Утеротропный биотест на грызунах: краткосрочный скрининг-тест для выявления эстрогенной активности» (англ. Test OECD TG 440 «Uterotrophic assay»).
2.5. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 441 «Тест Хешбергера на крысах: краткосрочное скрининговое исследование для выявления (анти)андрогенных свойств») (англ. Test OECD TG 441 «Hershberger assay»).
2.6. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 148 «Скрининг андрогенизированной самки колюшки» (англ. Test OECD GD 148 «Androgenized female stickleback screen (AFSS)»).
3.1. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 206 «Птицы: репродукционный тест» (англ. Test OECD TG 206 «Avian Reproduction Assay»)/ГОСТ 33035-2014 «Методы испытаний химической продукции, представляющей опасность для окружающей среды. Птицы: репродукционный тест».
3.2. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 210 «Определение токсичности для рыб на ранних стадиях развития» (англ. OECD TG 210 «Fish early life stage (FELS) toxicity test»)/ГОСТ 32294-2013 «Методы испытаний химической продукции, представляющей опасность для окружающей среды. Определение токсичности для рыб на ранних стадиях развития».
3.3. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 234 «Испытания по воздействию на половозрелость рыб» (англ. OECD TG 234 «Fish Sexual Development Test (FSDT)»)/ГОСТ 33638-2015 «Методы испытаний химической продукции, представляющей опасность для окружающей среды. Испытания по воздействию на половозрелость рыб».
3.4. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 241 «Исследование роста и развития личинок земноводных» (англ. OECD TG 241 «Larval Amphibian Growth & Development Assay (LAGDA)»).
3.5. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 242 «Тест на размножение Potamopyrgus antipodarum» (англ. Test OECD TG 242 «Potamopyrgus antipodarum reproduction test»).
3.6. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 243 «Тест на размножение Lymnaea stagnalis» (англ. Test OECD TG 243 «Lymnaea stagnalis reproduction test»).
3.7. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 407 «Изучение пероральной токсичности при повторном воздействии в 28-дневных опытах на грызунах» (англ. OECD TG 407 «Repeated Dose 28-Day Oral Toxicity Study in Rodents»)/ГОСТ 32641-2014 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Определение токсичности при повторном/многократном пероральном поступлении вещества на грызунах. 28-дневный тест».
3.8. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 408 «Изучение пероральной токсичности при повторном воздействии в 90-дневных опытах на грызунах» (англ. OECD TG № 408 «Repeated Dose 90-Day Oral Toxicity Study in Rodents»)/ГОСТ 32637-2020 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Повторное исследование пероральной токсичности на грызунах: 90-дневное».
3.9. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 409 «Изучение пероральной токсичности при повторном воздействии в 90-дневных опытах на негрызунах» (англ. OECD TG № 409 «Repeated Dose 90-Day Oral Toxicity Study in Non-Rodents»)/ГОСТ Р 56697-2015 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Изучение токсичности у негрызунов при пероральном многократном введении в течение 90 дней».
3.10. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 410 «Кожная токсичность повторной дозы: 21/28-дневное исследование» (англ. OECD Test № 410 «Repeated Dose Dermal Toxicity: 21/28-day Study»)/ГОСТ 32642-2014 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Определение токсичности при повторном/многократном накожном поступлении. 28/21-дневный тест».
3.11. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 411 «Субхроническая кожная токсичность: 90-дневное исследование» (англ. OECD Test № 411 «Subchronic Dermal Toxicity: 90-day Study»)/ГОСТ 32639-2014 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Субхроническая кожная токсичность: 90-дневное исследование».
3.12. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 412 «Подострая токсичность при ингаляционном поступлении: 28-дневное исследование» (англ. OECD TG № 412 «Subacute Inhalation Toxicity: 28-Day Study»)/ГОСТ 32643-2020 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Токсичность подострая ингаляционная: 28-дневное исследование».
3.13. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 413 «Подострая токсичность при ингаляционном поступлении: 90-дневное исследование» (англ. OECD TG № 413 «Subchronic Inhalation Toxicity: 90-Day Study»)/ГОСТ 32636-2020 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Субхроническая ингаляционная токсичность: 90-дневное исследование».
3.14. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 414 «Оценка токсического действия на пренатальное развитие» (англ. OECD TG № 414 «Prenatal Developmental Toxicity Study»)/ГОСТ 32380-2020 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Испытания по оценке токсического воздействия на пренатальное развитие».
3.15. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 421 «Оценка репродуктивной/эмбриональной токсичности скрининговым методом» (англ. OECD TG № 421 «Reproduction/Developmental Toxicity Screening Test»)/ГОСТ 32379-2020 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Испытания по оценке репродуктивной/онтогенетической токсичности (скрининговый метод)».
3.16. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 422 «Совместное исследование токсичности при повторном воздействии с репродуктивной/эмбриональной токсичностью (скрининговый метод)» (англ. OECD TG № 422 «Combined Repeated Dose Toxicity Study with the Reproduction/Developmental Toxicity Screening Test»)/ГОСТ 34555-2019 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Определение токсичности при повторном/многократном воздействии с одновременным определением оценки репродуктивной/эмбриональной токсичности скрининговым методом».
3.17. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 426 «Исследование нейротоксичности в процессе онтогенеза» (англ. OECD TG № 426 «Developmental Neurotoxicity Study»)/ГОСТ 34559-2019 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Исследование нейротоксичности в процессе онтогенеза».
3.18. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 451 «Испытания по оценке канцерогенной активности» (англ. OECD TG № 451 «Carcinogenicity Studies»)/ГОСТ 34661-2020 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Испытания по оценке канцерогенной активности».
3.19. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 452 «Исследования хронической токсичности» (англ. OECD TG № 452 «Chronic Toxicity Studies»)/ГОСТ 32437-2013 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Изучение хронической токсичности при накожном поступлении».
3.20. Руководство ОЭСР № 453 «Комбинированные исследования хронической токсичности и канцерогенности» (англ. OECD TG № 453 «Combined Chronic Toxicity/Carcinogenicity Studies»)/ГОСТ 32647-2014 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Комбинированные исследования хронической токсичности и канцерогенности».
3.21. Руководство 890.1450 «Исследование пубертатного развития и функции щитовидной железы у самок крыс в перипубертатном возрасте (анализ самок PP)» (англ. US EPA OPPTS 890.1450 «Pubertal Development and Thyroid Function in Intact Juvenile/Peripubertal Female Rats (PP female assay)»).
3.22. Руководство 890.1500 «Исследование пубертатного развития и функции щитовидной железы у крыс-самцов перипубертатного периода (анализ самцов PP)» (англ. US EPA OPPTS 890.1500 «Pubertal development and thyroid function assay in peripubertal male rats (PP male assay)»).
3.23. Руководящий документ ОЭСР № 201 «Новый руководящий документ по тесту развития и размножения гарпактикоидов с Amphiascus (англ. OECD GD 201 „New guidance document on harpacticoid copepod development and reproduction test with Amphiascus“).»
4.1. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 233 «Испытание токсичности на хирономидах на протяжении цикла развития с использованием обогащенной воды или обогащенного осадка» (англ. Test OECD TG 233 «Sediment-Water Chironomid Life-Cycle Toxicity»)/ГОСТ 33641-2015 «Методы испытаний химической продукции, представляющей опасность для окружающей среды. Испытание токсичности на хирономидах на протяжении цикла развития с использованием обогащенной воды или обогащенного осадка».
4.2. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 240 «Расширенный тест на воспроизводство одного поколения медаки» (англ. Test OECD TG 240 «Medaka Extended One-Generation Reproduction Test»).
4.3. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 416 «Исследование репродуктивной токсичности на двух поколениях» (англ. OECD TG № 416 «Two-Generation Reproduction Toxicity Study»)/ГОСТ 34554-2019 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Испытания по оценке репродуктивной токсичности двух поколений».
4.4. Руководство ОЭСР по тестированию химических веществ № 443 «Расширенное изучение репродуктивной токсичности на одном поколении» (англ. OECD TG № 443 «Extended One-Generation Reproductive Toxicity Study»).
4.5. Руководство 850.1500 «Тест на токсичность для рыб на протяжении жизненного цикла» (англ. US EPA TG OPPTS 850.1500 «Fish Life Cycle Toxicity Test (FLCTT)»).
4.6. Руководство 890.2100/740-C-15-003 «Тест на токсичность двух поколений птиц Coturnix japonica» (англ. US EPA TG OCSPP 890.2100/740-C-15-003 «Avian two-generation toxicity test in the Japanese quail (ATGT)»).
ПРИМЕРЫ РАСЧЕТОВ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ВОЗДЕЙСТВИЯ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ НА ЭНДОКРИННУЮ СИСТЕМУ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПРОГРАММНОГО ОБЕСПЕЧЕНИЯ ОЭСР QSAR TOOLBOX
Сродство связывания эстрогеновых рецепторов
1. В приведенном ниже примере рассматривается прогнозирование связывания эстрогеновых рецепторов с 5,7-дигидрокси-3-(4-гидроксифенил) хромен-4-оном (генистеин) (CAS 446-72-0) <14>.
<14> Примечание: подробная работа с программным обеспечением представлена в общем пособии.
Модуль «Ввод данных» (англ. Input)
1.1. В модуле «Ввод данных» (англ. Input) нажать «CAS#» (рис. П 3.1, этап 1, 2). В появившемся окне в пустом поле ввести для генистеина (CAS 446-72-0) (рис. П 3.1, этап 3). Нажать «Поиск» (англ. Search) (рис. П 3.1, этап 4). Выбрать предложенную структуру с пометкой «Высокая» (англ. High/CS Relation), нажать кнопку «OK» (рис. П 3.1, этап 5). Структура целевого химического вещества с идентификационными данными загрузится в матрицу данных.
Идентифицировать показатель (параметр) для расчета с помощью опции «Определить» (англ. Define). Нажать «Определить» (англ. Define), «Опасности для здоровья человека» (англ. Human Health Hazards), «Репродуктивная токсичность» (англ. Toxicity to Reproduction), «Далее» (англ. Next) (рис. П 3.2, этап 1, 2, 3). В появившемся окне указать параметр расчета (англ. Endpoint) — «Относительное ERBA <15>» (англ. Relative ERBA), «Испытуемые организмы (виды)» (англ. Test organisms (species) — «Крыса» (англ. Rat) (рис. П 3.3, этап 1). Для подтверждения действия нажать «Завершить» (англ. Finish) (рис. П 3.3, этап 2).
<15> Сродство к связыванию рецептора эстрогена (англ. Estrogen Receptor Binding Affinity, далее — ERBA).
В матрице данных ячейка с выбранным параметром расчета будет выделена желтым цветом (рис. П 3.4).
Рис. П 3.1. Модуль «Ввод данных» (англ. Input). Примечание: 1 — кнопка «Ввод данных», 2 — кнопка «CAS#», 3 — поле ввода, 4 — кнопка «Поиск», 5 — кнопка «OK»
Рис. П 3.2. Выбор параметра (показателя) расчета. Примечание: 1 — кнопка «Определить», 2 — «Репродуктивная токсичность», 3 — кнопка «Далее»
Рис. П 3.3. Метаданные параметра (показателя) расчета. Примечание: 1 — выпадающие списки показателей (параметров), 2 — кнопка «Завершить»
Модуль «Профилирование» (англ. Profiling)
1.2. Перейти в модуль «Профилирование» (англ. Profiling) (рис. П 3.5, этап 1). Зеленым цветом выделены профилировщики, подходящие для расчета заданного показателя (параметра), оранжевым цветом — правдоподобные. Для расчета данного показателя рекомендуется использовать следующие профилировщики:
- «Estrogen Receptor Binding»;
- «Aquatic toxicity classification by ECOSAR»;
- «Chemical elements»;
- «Groups of elements»;
- «Lipinski Rule Oasis»;
- «OECD HPV Chemical Categories»;
- «Organic functional groups»;
- «Organic functional groups (nested)»;
- «Organic functional groups (US EPA)»;
- «Organic functional groups, Norbert Haider (checkmol)»;
- «Retinoic Acid Receptor Binding»;
- «rtER Expert System — USEPA»;
- «Structure similarity»;
- «Substance type»;
- «US-EPA New Chemical Categories».
Нажать «Применить» (англ. Apply) (рис. П 3.5, этап 2, 3). Результат профилирования появится в матрице данных (рис. П 3.5, этап 4).
Рис. П 3.4. Матрица данных с показателем «Относительное ERBA» (англ. Relative ERBA)
Рис. П 3.5. Выполнение профилирования в модуле «Профилирование» (англ. Profiling). Примечание: 1 — модуль «Профилирование», 2 — список профилировщиков, 3 — кнопка «Применить», 4 — результат
Модуль «Данные» (англ. Data)
1.3. Перейти в модуль «Данные» (англ. Data) (рис. П 3.6, этап 1). Базы данных, содержащие информацию по запрашиваемому показателю (параметру), выделены зеленым цветом, выбрать одну или несколько баз. Для рассматриваемого примера программа предлагает использовать базу данных, выделенную зеленым цветом, которая содержит 3352 веществ, имеющих экспериментально установленные значения различных показателей. Рекомендуется использовать информацию выделенной базы данных для формирования числа аналогов (рис. П 3.6, этап 2). Нажать «Собрать» (англ. Gather) (рис. П 3.6, этап 3). В появившемся окне выбрать «Репродуктивная токсичность» (англ. Toxicity to Reproduction) (рис. П 3.6, этап 4), нажать кнопку «OK» (рис. П 3.6, этап 5).
Рис. П 3.6. Выполнение поиска данных в модуле «Данные» (англ. Data). Примечание: 1 — модуль «Данные», 2 — список баз данных, 3 — кнопка «Собрать», 4 — «Репродуктивная токсичность», 5 — кнопка «OK»
В рассматриваемом примере появляется окно вставки с сообщением, что для целевого химического вещества в выбранной базе данных найдено 8 экспериментальных результатов (рис. П 3.7): целевое химическое вещество имеет показатель (параметр) «Относительное ERBA» (англ. Relative ERBA) — «0,437%».
Рис. П 3.7. Результат поиска экспериментальных данных для целевого химического вещества
Модуль «Определение категории» (англ. Category Definition)
1.4. Перейти в модуль «Определение категории» (англ. Category Definition) (рис. П 3.8, этап 1).
Для генерирования ряда аналогов выбрать метод группировки с использованием профилировщика, выделенного зеленым цветом: «Estrogen Receptor Binding» (рис. П 3.8, этап 2). Нажать «Определить» (англ. Define), кнопку «OK» (рис. П 3.8, этап 3, 4). Программа идентифицирует 670 химических веществ, которые используются в качестве аналогов для оценки связывания эстрогеновых рецепторов с генистеином (целевое вещество), и выполняет для них поиск доступных экспериментальных данных. В результате проведенных операций для идентифицированных химических веществ найдено 993 экспериментально установленных значения. Матрица данных дополняется столбцами с аналогами и найденными экспериментальными данными (рис. П 3.9).
Рис. П 3.8. Поиск аналогов с использованием модуля «Определение категории» (англ. Category Definition). Примечание: 1 — кнопка «Определение категории», 2 — профилировщик, 3 — кнопка «Определить», 4 — кнопка «OK»
Рис. П 3.9. Матрица данных с аналогами
Модуль «Заполнение пробелов» (англ. Data Gap Filling)
1.5. Выбрать модуль «Заполнение пробелов» (англ. Data Gap Filling) (рис. П 3.10, этап 1). В столбце целевого вещества матрицы данных выделить ячейку, соответствующую показателю «Относительное ERBA» (англ. Relative ERBA) (рис. П 3.10, этап 2).
Нажать «Метод аналогов» (англ. Read across) (рис. П 3.10, этап 3). Появляется новое окно, предупреждающее пользователя о возможной несогласованности данных (рис. П 3.10, этап 4). Несогласованность данных проявляется в том, что экспериментальные значения показателей для аналогов, приведенные в источниках информации, имеют различные единицы измерения. До выполнения расчета программа переводит все данные в одинаковые единицы измерения. Если выполнение операции невозможно для некоторых аналогов, то они исключаются из расчета (рис. П 3.10, этап 4).
Заполнить поле «Выбрать шкалу/единицу измерения» (англ. Select scale/unit to use) для преобразования данных. У данного показателя (параметра) «Относительное ERBA» (англ. Relative ERBA) имеются 2 разные шкалы. В рассматриваемом примере шкала «Относительное сродство связывания (соотношение)» (англ. Relative binding affinity (ratio) включает 255 экспериментальных значений, являющихся исходными для данной шкалы. При выполнении расчета выбрать шкалу «Относительное сродство связывания (соотношение)» (англ. Relative binding affinity (ratio), поскольку она содержит большее количество исходных данных, и нажать кнопку «OK» (рис. П 3.10, этап 5). Программа выполняет расчет искомого показателя (параметра), после чего рекомендуется выполнить субкатегоризацию (дополнительное фильтрование или отбор аналогов).
Рис. П 3.10. Работа модуля «Заполнение пробелов» (англ. Data Gap Filling). Примечание: 1 — кнопка «Заполнение пробелов», 2 — ячейка в матрице данных, 3 — кнопка «Метод аналогов», 4 — окно выбора шкалы (единицы измерения), 5 — кнопка «OK»
На основании проведенного расчета для генистеина прогнозируется показатель (параметр) «Относительное ERBA» (англ. Relative ERBA) — «0,0436%» (рис. П 3.11). В верхней части экрана представлена матрица данных, содержащая структуры целевого вещества и аналогов, а также экспериментальные результаты для аналогов показателя (параметра) «Относительное ERBA» (англ. Relative ERBA). В нижней части экрана представлен график, на котором по оси X отложены значения log Kow для целевого вещества и аналогов, а по оси Y отложены экспериментальные результаты показателя (параметра) «Относительное ERBA» (англ. Relative ERBA). Для подтверждения результата нажать «Принять прогноз» (англ. Accept prediction), кнопку «Yes» (рис. П 3.11, этап 1, 2). Результат расчета отображается в ячейке «Относительное ERBA» (англ. Relative ERBA) целевого вещества в матрице данных (рис. П 3.12).
Рис. П 3.11. Расчет «Относительное ERBA» (англ. Relative ERBA) генистеином. Примечание: 1 — кнопка «Принять прогноз», 2 — кнопка «Yes»
Рис. П 3.12. Результат расчета
Сродство связывания андрогеновых рецепторов
2. В приведенном ниже примере рассматривается прогнозирование связывания андрогеновых рецепторов с 2,4-дихлор-1-(4-нитрофенокси)бензолом (нитрофен) (CAS 1836-75-5).
Модуль «Ввод данных» (англ. Input)
2.1. В модуле «Ввод данных» (англ. Input) нажать «CAS#» (рис. П 3.13, этап 1, 2). В появившемся окне в пустом поле ввести для нитрофена CAS 1836-75-5 (рис. П 3.13, этап 3). Нажать «Поиск» (англ. Search) (рис. П 3.13, этап 4). Выбрать предложенную структуру с пометкой «Высокая» (англ. High/CS Relation), нажать кнопку «OK» (рис. П 3.13, этап 5). Структура целевого химического вещества с идентификационными данными загрузится в матрицу данных.
Идентифицировать показатель (параметр) для расчета с помощью опции «Определить» (англ. Define). Нажать «Определить» (англ. Define), «Опасности для здоровья человека» (англ. Human Health Hazards), «Репродуктивная токсичность» (Toxicity to Reproduction), «Далее» (англ. Next) (рис. П 3.14, этап 1, 2, 3). В появившемся окне указать параметр расчета (англ. Endpoint) — «Относительное ARBA <16>» (англ. Relative ARBA), «Испытуемые организмы (виды)» (англ. Test organisms (species) — «Рекомбинантный андрогеновый рецептор человека» (англ. Recombinant human androgen receptor) (рис. П 3.15, этап 1). Для подтверждения действия нажать «Завершить» (англ. Finish) (рис. П 3.15, этап 2).
<16> Сродство к связыванию рецептора андрогена (англ. Androgen Receptor Binding Affinity, далее — ARBA).
В матрице данных ячейка с выбранным параметром расчета будет выделена желтым цветом (рис. П 3.16).
Рис. П 3.13. Модуль «Ввод данных» (англ. Input). Примечание: 1 — кнопка «Ввод данных», 2 — кнопка «CAS#», 3 — поле ввода, 4 — кнопка «Поиск», 5 — кнопка «OK»
Рис. П 3.14. Выбор параметра (показателя) расчета. Примечание: 1 — кнопка «Определить», 2 — «Репродуктивная токсичность», 3 — кнопка «Далее»
Рис. П 3.15. Метаданные параметра (показателя) расчета. Примечание: 1 — выпадающие списки показателей (параметров), 2 — кнопка «Завершить»
Модуль «Профилирование» (англ. Profiling)
2.2. Перейти в модуль «Профилирование» (англ. Profiling) (рис. П 3.17, этап 1). Зеленым цветом выделены профилировщики, подходящие для расчета заданного показателя (параметра), оранжевым цветом — правдоподобные. Для расчета данного показателя рекомендуется использовать все профилировщики, указанные в п. 1.2 приложения 3 к настоящему Руководству. Нажать «Применить» (англ. Apply) (рис. П 3.17, этап 2, 3), Результат профилирования появится в матрице данных (рис. П 3.17, этап 4).
Рис. П 3.16. Матрица данных с показателем «Относительное ARBA» (англ. Relative ARBA)
Рис. П 3.17. Выполнение профилирования в модуле «Профилирование» (англ. Profiling). Примечание: 1 — модуль «Профилирование», 2 — список профилировщиков, 3 — кнопка «Применить», 4 — результат
Модуль «Данные» (англ. Data)
2.3. Перейти в модуль «Данные» (англ. Data) (рис. П 3.18, этап 1). Базы данных, содержащие информацию по запрашиваемому показателю (параметру), выделены зеленым цветом, выбрать одну или несколько баз. Для рассматриваемого примера программа предлагает использовать базу данных, выделенную зеленым цветом, которая содержит 3352 веществ, имеющих экспериментально установленные значения различных показателей. Рекомендуется использовать информацию выделенной базы данных для формирования числа аналогов (рис. П 3.18, этап 2). Нажать «Собрать» (англ. Gather) (рис. П 3.18, этап 3). В появившемся окне выбрать «Репродуктивная токсичность» (англ. Toxicity to Reproduction) (рис. П 3.18, этап 4), нажать кнопку «OK» (рис. П 3.18, этап 5).
Рис. П 3.18. Выполнение поиска данных в модуле «Данные» (англ. Data). Примечание: 1 — модуль «Данные», 2 — список баз данных, 3 — кнопка «Собрать», 4 — «Репродуктивная токсичность», 5 — кнопка «OK»
В рассматриваемом примере появляется окно вставки с сообщением, что для целевого химического вещества в выбранной базе данных найдено 3 экспериментальных результата (рис. П 3.19): целевое химическое вещество имеет показатель (параметр) «Относительное ARBA» (англ. Relative ARBA) — «0,0673%».
Рис. П 3.19. Результат поиска экспериментальных данных для целевого химического вещества
Модуль «Определение категории» (англ. Category Definition)
2.4. Перейти в модуль «Определение категории» (англ. Category Definition) (рис. П 3.20, этап 1).
Для генерирования ряда аналогов выбрать метод группировки с использованием подходящего профилировщика: «Estrogen Receptor Binding» (рис. П 3.20, этап 2). Нажать «Определить» (англ. Define), кнопку «OK» (рис. П 3.20, этап 3, 4). Программа идентифицирует 1297 химических веществ, которые используются в качестве аналогов для оценки связывания андрогеновых рецепторов с нитрофеном (целевое вещество), и выполняет для них поиск доступных экспериментальных данных. В результате проведенных операций для идентифицированных химических веществ найдено 2062 экспериментально установленных значений. Матрица данных дополняется столбцами с аналогами и найденными экспериментальными данными (рис. П 3.21).
Рис. П 3.20. Поиск аналогов с использованием модуля «Определение категории» (англ. Category Definition). Примечание: 1 — кнопка «Определение категории», 2 — профилировщик, 3 — кнопка «Определить», 4 — кнопка «OK»
Рис. П 3.21. Матрица данных с аналогами
Модуль «Заполнение пробелов» (англ. Data Gap Filling)
2.5. Выбрать модуль «Заполнение пробелов» (англ. Data Gap Filling) (рис. П 3.22, этап 1). В столбце целевого вещества матрицы данных выделить ячейку, соответствующую показателю «Относительное ARBA» (англ. Relative ARBA) (рис. П 3.22, этап 2).
Нажать «Метод аналогов» (англ. Read across) (рис. П 3.22, этап 3). Появляется новое окно, предупреждающее пользователя о возможной несогласованности данных (рис. П 3.22, этап 4). Несогласованность данных проявляется в том, что экспериментальные значения показателей для аналогов, приведенные в источниках информации, имеют различные единицы измерения. До выполнения расчета программа переводит все данные в одинаковые единицы измерения. Если выполнение операции невозможно для некоторых аналогов, то они исключаются из расчета (рис. П 3.22, этап 4).
Заполнить поле «Выбрать шкалу/единицу измерения» (англ. Select scale/unit to use) для преобразования данных. У данного показателя (параметра) «Относительное ARBA» (англ. Relative ARBA) имеется 2 разных шкалы. В рассматриваемом примере шкала «Относительное сродство связывания (соотношение)» (англ. Relative binding affinity (ratio) включает 427 экспериментальных значений, являющихся исходными для данной шкалы. При выполнении расчета выбрать шкалу «Относительное сродство связывания (соотношение)» (англ. Relative binding affinity (ratio), поскольку она содержит большее количество исходных данных, и нажать кнопку «OK» (рис. П 3.22, этап 5). Программа выполняет расчет искомого показателя (параметра), после чего рекомендуется выполнить субкатегоризацию (дополнительное фильтрование или отбор аналогов).
Рис. П 3.22. Работа модуля «Заполнение пробелов» (англ. Data Gap Filling). Примечание: 1 — кнопка «Заполнение пробелов», 2 — ячейка в матрице данных, 3 — кнопка «Метод аналогов», 4 — окно выбора шкалы (единицы измерения), 5 — кнопка «OK»
На основании проведенного расчета для нитрофена прогнозируется показатель (параметр) «Относительное ARBA» (англ. Relative ARBA) — «0%» (рис. П 3.23). В верхней части экрана представлена матрица данных, содержащая структуры целевого вещества и аналогов, а также экспериментальные результаты для аналогов показателя (параметра) «Относительное ARBA» (англ. Relative ARBA). В нижней части экрана представлен график, на котором по оси X отложены значения log Kow для целевого вещества и аналогов, а по оси Y отложены экспериментальные результаты показателя (параметра) «Относительное ARBA» (англ. Relative ARBA). Для подтверждения результата нажать «Принять прогноз» (англ. Accept prediction), кнопки «Yes» и «OK» (рис. П 3.23, этап 1, 2, 3). Результат расчета отображается в ячейке «Относительное ARBA» (англ. Relative ARBA) целевого вещества в матрице данных (рис. П 3.24).
Рис. П 3.23. Расчет «Относительное ARBA» (англ. Relative ARBA) нитрофеном. Примечание: 1 — кнопка «Принять прогноз», 2 — кнопка «Yes», 3 — кнопка «OK»
Рис. П 3.24. Результат расчета
Ингибирование ароматазы
3. В приведенном ниже примере рассматривается прогнозирование эффективности ингибирования ароматазы (IC50) 5,7-дигидрокси-2-(4-гидроксифенил)-4-бензопироном (апигенин) (CAS 520-36-5).
Модуль «Ввод данных» (англ. Input)
3.1. В модуле «Ввод данных» (англ. Input) нажать «CAS#» (рис. П 3.25, этап 1, 2). В появившемся окне в пустом поле ввести для апигенина CAS 520-36-5 (рис. П 32.25, этап 3). Нажать «Поиск» (англ. Search) (рис. П 3.25, этап 4). Выбрать предложенную структуру с пометкой «Высокая» (англ. High/CS Relation), нажать кнопку «OK» (рис. П 3.25, этап 5). Структура целевого химического вещества с идентификационными данными загрузится в матрицу данных.
Идентифицировать показатель (параметр) для расчета с помощью опции «Определить» (англ. Define). Нажать «Определить» (англ. Define), «Опасности для здоровья человека» (англ. Human Health Hazards), «Репродуктивная токсичность» (англ. Toxicity to Reproduction), «Далее» (англ. Next) (рис. П 3.26, этап 1, 2, 3). В появившемся окне указать параметр расчета (англ. Endpoint) — «Эффективность ингибирования ароматазы (IC50)» (англ. Aromatase Inhibition Potency (IC50), «Испытуемые организмы (виды)» (англ. Test organisms (species) — «плацентарная ароматаза человека» (англ. human placental aromatase) (рис. П 3.27, этап 1). Для подтверждения действия нажать «Завершить» (англ. Finish) (рис. П 3.27, этап 2).
В матрице данных ячейка с выбранным параметром расчета будет выделена желтым цветом (рис. П 3.28).
Рис. П 3.25. Модуль «Ввод данных» (англ. Input). Примечание: 1 — кнопка «Ввод данных», 2 — кнопка «CAS#», 3 — поле ввода, 4 — кнопка «Поиск», 5 — кнопка «OK»
Рис. П 3.26. Выбор параметра (показателя) расчета. Примечание: 1 — кнопка «Определить», 2 — «Репродуктивная токсичность», 3 — кнопка «Далее»
Рис. П 3.27. Метаданные параметра (показателя) расчета. Примечание: 1 — выпадающие списки показателей (параметров), 2 — кнопка «Завершить»
Модуль «Профилирование» (англ. Profiling)
3.2. Перейти в модуль «Профилирование» (англ. Profiling) (рис. П 3.29, этап 1). Зеленым цветом выделены профилировщики, подходящие для расчета заданного показателя (параметра), оранжевым цветом — правдоподобные. Для расчета данного показателя рекомендуется использовать все профилировщики, указанные в п. 1.2 приложения 3 к настоящему Руководству. Нажать «Применить» (англ. Apply) (рис. П 3.29, этап 2, 3). Результат профилирования появится в матрице данных (рис. П 3.29, этап 4).
Рис. П 3.28. Матрица данных с показателем «Эффективность ингибирования ароматазы (IC50)» (англ. Aromatase Inhibition Potency (IC50)
Рис. П 3.29. Выполнение профилирования в модуле «Профилирование» (англ. Profiling). Примечание: 1 — модуль «Профилирование», 2 — список профилировщиков, 3 — кнопка «Применить», 4 — результат
Модуль «Данные» (англ. Data)
3.3. Перейти в модуль «Данные» (англ. Data) (рис. П 3.30, этап 1). Базы данных, содержащие информацию по запрашиваемому показателю (параметру), выделены зеленым цветом, выбрать одну или несколько баз. Для рассматриваемого примера программа предлагает использовать базу данных, выделенную зеленым цветом, которая содержит 3352 веществ, имеющих экспериментально установленные значения различных показателей. Рекомендуется использовать информацию выделенной базы данных для формирования числа аналогов (рис. П 3.30, этап 2). Нажать «Собрать» (англ. Gather) (рис. П 3.30, этап 3). В появившемся окне выбрать «Репродуктивная токсичность» (англ. Toxicity to Reproduction) (рис. П 3.30, этап 4), нажать кнопку «OK» (рис. П 3.30, этап 5).
Рис. П 3.30. Выполнение поиска данных в модуле «Данные» (англ. Data). Примечание: 1 — модуль «Данные», 2 — список баз данных, 3 — кнопка «Собрать», 4 — «Репродуктивная токсичность», 5 — кнопка «OK»
В рассматриваемом примере появляется окно вставки с сообщением, что для целевого химического вещества в выбранной базе данных найдено 5 экспериментальных результатов (рис. П 3.31): целевое химическое вещество имеет показатель (параметр) «Эффективность ингибирования ароматазы (IC50)» (англ. Aromatase Inhibition Potency (IC50) — «20000 нмоль» (англ. 20000 nmol).
Рис. П 3.31. Результат поиска экспериментальных данных для целевого химического вещества
Модуль «Определение категории» (англ. Category Definition)
3.4. Перейти в модуль «Определение категории» (англ. Category Definition) (рис. П 3.32, этап 1).
Для генерирования ряда аналогов выбрать метод группировки с использованием подходящего профилировщика: «rtER Expert System — USEPA» (рис. П 3.32, этап 2). Нажать «Определить» (англ. Define), кнопку «OK» (рис. П 3.32, этап 3, 4). Программа идентифицирует 2877 химических веществ, которые используются в качестве аналогов для оценки эффективности ингибирования ароматазы (IC50) апигенином (целевое вещество), и выполняет для них поиск доступных экспериментальных данных. В результате проведенных операций для идентифицированных химических веществ найдено 4456 экспериментально установленных значений. Матрица данных дополняется столбцами с аналогами и найденными экспериментальными данными (рис. П 3.33).
Рис. П 3.32. Поиск аналогов с использованием модуля «Определение категории» (англ. Category Definition). Примечание: 1 — кнопка «Определение категории», 2 — профилировщик, 3 — кнопка «Определить», 4 — кнопка «OK»
Рис. П 3.33. Матрица данных с аналогами
Модуль «Заполнение пробелов» (англ. Data Gap Filling)
3.5. Выбрать модуль «Заполнение пробелов» (англ. Data Gap Filling) (рис. П 3.34, этап 1). В столбце целевого вещества матрицы данных выделить ячейку, соответствующую показателю «Эффективность ингибирования ароматазы (IC50)» (англ. Aromatase Inhibition Potency (IC50) (рис. П 3.34, этап 2).
Нажать «Метод аналогов» (англ. Read across) (рис. П 3.34, этап 3). Появляется новое окно, предупреждающее пользователя о возможной несогласованности данных (рис. П 3.34, этап 4). Несогласованность данных проявляется в том, что экспериментальные значения показателей для аналогов, приведенные в источниках информации, имеют различные единицы измерения. До выполнения расчета программа переводит все данные в одинаковые единицы измерения. Если выполнение операции невозможно для некоторых аналогов, то они исключаются из расчета (рис. П 3.34, этап 4).
Заполнить поле «Выбрать шкалу/единицу измерения» (англ. Select scale/unit to use) для преобразования данных. У данного показателя (параметра) «Эффективность ингибирования ароматазы (IC50)» (англ. Aromatase Inhibition Potency (IC50) имеется 2 разные шкалы. В рассматриваемом примере шкала «нмоль» (англ, nmol) включает 213 экспериментальных значений, являющихся исходными для данной шкалы. При выполнении расчета выбрать шкалу «нмоль» (англ, nmol), поскольку она содержит большее количество исходных данных, и нажать кнопку «OK» (рис. П 3.34, этап 5). Программа выполняет расчет искомого показателя (параметра), после чего рекомендуется выполнить субкатегоризацию (дополнительное фильтрование или отбор аналогов).
Рис. П 3.34. Работа модуля «Заполнение пробелов» (англ. Data Gap Filling). Примечание: 1 — кнопка «Заполнение пробелов», 2 — ячейка в матрице данных, 3 — кнопка «Метод аналогов», 4 — окно выбора шкалы (единицы измерения), 5 — кнопка «OK»
На основании проведенного расчета для апигенина прогнозируется показатель (параметр) «Эффективность ингибирования ароматазы (IC50)» (англ. Aromatase Inhibition Potency (IC50) — «48400 нмоль» (48400 nmol) (рис. П 3.35). В верхней части экрана представлена матрица данных, содержащая структуры целевого вещества и аналогов, а также экспериментальные результаты для аналогов показателя (параметра) «Эффективность ингибирования ароматазы (IC50)» (англ. Aromatase Inhibition Potency (IC50). В нижней части экрана представлен график, на котором по оси X отложены значения log Kow для целевого вещества и аналогов, а по оси Y отложены экспериментальные результаты показателя (параметра) «Эффективность ингибирования ароматазы (IC50)» (англ. Aromatase Inhibition Potency (IC50). Для подтверждения результата нажать «Принять прогноз» (англ. Accept prediction), кнопку «Yes» (рис. П 3.35, этап 1, 2). Результат расчета отображается в ячейке «Эффективность ингибирования ароматазы (IC50)» (англ. Aromatase Inhibition Potency (IC50) целевого вещества в матрице данных (рис. П 3.36).
Рис. П 3.35. Расчет «эффективности ингибирования ароматазы (IC50)» (англ. Aromatase Inhibition Potency (IC50) апигенином. Примечание: 1 — кнопка «Принять прогноз», 2 — кнопка «Yes»
Рис. П 3.36. Результат расчета
Применение AOP для прогнозирования воздействия химического вещества на эндокринную систему
4. Химические соединения могут имитировать или блокировать действие естественных гормонов, изменять уровень гормонов в крови и тканевых жидкостях, что приводит к появлению аномалий развития и нарушению репродуктивной функции человека и животных. AOP представляет собой последовательность фактов и событий, вызванных химическим веществом, включая исходное молекулярное событие, воздействие на субклеточном, клеточном, органном, организменном и популяционном уровнях. Схема AOP позволяет прогнозировать воздействие вещества на эндокринную систему организма на всех уровнях, идентифицировать вещества потенциально опасные в плане развития неблагоприятных эндокринно-опосредованных эффектов и приоритетные для дальнейшего тестирования в условиях in vitro и in vivo.
Схема AOP, интегрированная в программном обеспечении ОЭСР QSAR Toolbox, построена на явлении феминизации мужских особей под действием химических веществ, обладающих свойствами эстрогенов. Данный эффект регистрируется у морских и пресноводных рыб. На молекулярном уровне феминизация самцов рыб проявляется в индукции синтеза специфических белков, имеющих особое значение для организма самок, таких как вителлогенин. Вителлогенин — димерный гликофосфолипопротеид высокой молекулярной массы, предшественник яичного желтка, синтезируется в печени самок рыб под воздействием эстрогенов (эстроген-подобных химических веществ) и транспортируется с кровью в яичники, где поглощается ооцитами в процессе вителлогенеза. Аномальный синтез вителлогенина у самцов и неполовозрелых рыб приводит к появлению интерсексов и индуцировать патологические изменения в семенниках, печени и почках.
Молекулярным инициирующим событием схемы AOP является связывание химическим веществом эстрогеновых рецепторов.
Эстрогены индуцируют, а впоследствии и контролируют, как на уровне транскрипции, так и на уровне трансляции, синтез вителлогенина клетками печени (ключевое событие 1). Экспериментально показано, что вителлогенин является основным белковым компонентом, который биосинтезируется и выделяется в инкубационную среду in vitro печенью животных, получавших эстрогены.
На тканевом (органном) уровне выявляются различные типы гистологических изменений в печени (например, вакуолизация гепатоцитов, наличие базофильных включений в цитоплазме гепатоцитов, кариопикноз и некроз гепатоцитов) и гонадах (например, снижение количества нормальных сперматозоидов, расширение сперматозоидных протоков, интерстициальные изменения, асинхронное развитие и отслойка базальной мембраны) (ключевое событие 2).
На уровне организма наблюдается фенотипическое изменение пола (ключевое событие 3), что на популяционном уровне приводит к изменению соотношения полов (неблагоприятный исход) (рис. П 3.37).
Рис. П 3.37. Схема AOP: МИС — молекулярное инициирующее событие; КС — ключевое событие; НИ — неблагоприятный исход
5. В приведенном ниже примере рассматривается прогнозирование возможных эндокринных нарушений, вызываемых 4-нонилфенолом (CAS 104-40-5).
Модуль «Ввод данных» (англ. Input)
5.1. В модуле «Ввод данных» (англ. Input) нажать «CAS#» (рис. П 3.38, этап 1, 2). В появившемся окне в пустом поле ввести для 4-нонилфенола CAS 104-40-5 (рис. П 3.38, этап 3). Нажать «Поиск» (англ. Search) (рис. П 3.38, этап 4). Выбрать предложенную структуру с пометкой «Высокая» (англ. High/CS Relation), нажать кнопку «OK» (рис. П 3.38, этап 5). Структура целевого химического вещества с идентификационными данными загрузится в матрицу данных (рис. П 3.39, этап 1). Щелкните по синей надписи «AOP» на уровне «Репродуктивная токсичность» (англ. Toxicity to reproduction) правой кнопкой мыши (рис. П 3.39, этап 2). Во всплывающем меню выберите «Активировать AOP» (англ. Activate AOP) (рис. П 3.39, этап 3).
Рис. П 3.38. Модуль «Ввод данных» (англ. Input). Примечание: 1 — кнопка «Ввод данных», 2 — кнопка «CAS#», 3 — поле ввода, 4 — кнопка «Поиск», 5 — кнопка «OK»
Рис. П 3.39. Активация AOP. Примечание: 1 — матрица данных, 2 — раздел «Репродуктивная токсичность» (англ. Toxicity to reproduction), 3 — кнопка «Активировать AOP» (англ. Activate AOP)
Работа с AOP
5.2. Появится рабочее окно AOP (рис. П 3.40, этап 1). Нажмите на узел MIE (рис. П 3.40, этап 2). Перейдите в модуль «Профилирование» (англ. Profiling) (рис. П 3.40, этап 3). Выберите все подходящие профилировщики, выделенные зеленым цветом (рис. П 3.40, этап 4). Нажмите «Применить» (англ. Apply) (рис. П 3.40, этап 5).
Рис. П 3.40. Узел MIE, профилирование. Примечание: 1 — рабочее окно AOP, 2 — узел MIE, 3 — модуль «Профилирование» (англ. Profiling), 4 — профилировщики, 5 — кнопка «Применить» (англ. Apply)
Перейти в модуль «Данные» (англ. Data) (рис. П 3.41, этап 1). Выбрать все подходящие базы данных, выделенные зеленым цветом (рис. П 3.41, этап 2). Нажать «Собрать» (англ. Gather) (рис. П 3.41, этап 3). Выбрать пункт «Все конечные точки» (англ. All endpoints) (рис. П 3.41, этап 4). Нажать «OK» (рис. П 3.41, этап 5). Всплывающее сообщение информирует о количестве собранных данных. Нажать кнопку «OK» (рис. П 3.41, этап 6).
Рис. П 3.41. Узел MIE, поиск данных. Примечание: 1 — модуль «Данные» (англ. Data), 2 — базы данных, 3 — кнопка «Собрать» (англ. Gather), 4 — пункт «Все конечные точки» (англ. All endpoints), 5 — кнопка «OK», 6 — кнопка «OK»
5.3. Щелкнуть узел «KE1: Клеточная реакция: измененные белки» (англ. KE1: Cellular response: Altered proteins) (рис. П 3.42, этап 1). Перейти в модуль «Данные» (англ. Data) (рис. П 3.42, этап 2). Выбрать все подходящие базы данных, выделенные зеленым цветом (рис. П 3.42, этап 3). Нажать «Собрать» (англ. Gather) (рис. П 3.42, этап 4). Выбрать пункт «Все конечные точки» (англ. All endpoints) (рис. П 3.42, этап 5). Нажать кнопку «OK» (рис. П 3.42, этап 6). Всплывающее сообщение информирует о количестве собранных данных. Нажать кнопку «OK» (рис. П 3.42, этап 7).
Рис. П 3.42. Узел KE1, поиск данных. Примечание: 1 — узел KE1, 2 — модуль «Данные» (англ. Data), 3 — базы данных, 4 — кнопка «Собрать» (англ. Gather), 5 — пункт «Все конечные точки» (англ. All endpoints), 6 — кнопка «OK», 7 — кнопка «OK»
Узел KE1 окрашен в красный цвет, поскольку в ECOTOX обнаружены экспериментальные данные для целевого химического вещества (рис. П 3.43). Узлы KE2 и AO также окрашены в красный цвет, поскольку экспериментальные данные для целевого химического вещества находятся в той же базе данных ECOTOX (рис. П 3.43).
В результате пройдены четыре узла AOP (MIE; KE1; KE2 и AO) (то есть, «пройдены» граничные правила, реализованные в узлах).
К целевому химическому веществу применены перенесенные узлы AOP. Каждый узел выполнялся индивидуально. В результате пройдены четыре из пяти узлов AOP (MIE; KE1; KE2 и AO) (рис. П 3.43).
Для целевого химического вещества были обнаружены предупреждения о связывании эстрогеновых рецепторов (ER), связанные с узлом MIE, и экспериментальные данные почти для всех ключевых узлов (KE).
На основании результатов анализов узлов AOP можно сделать вывод, что заданное химическое вещество может вызывать положительный эффект связывания эстрогеновых рецепторов.
Приложение 4
к Р 1.2.4109-24
Расчеты средства связывания химическими веществами эстрогеновых и андрогеновых рецепторов, проведенных с использованием программы
| CAS | Наименование | Подкласс опасности <*> | Связывание эстрогеновых рецепторов <**> | ERBA/Рекомбинантный эстрогенный рецептор человека, %; экспериментальные данные | ERBA/Рекомбинантный эстрогенный рецептор человека, %; расчетные данные | ARBA/Рекомбинантный андрогенный рецептор человека, %; экспериментальные данные | ARBA/Рекомбинантный андрогенный рецептор человека, %; расчетные данные |
| <...>58-18-4 | Метилтестостерон | 1B | + | н/д | 0/0,00796 | 78,8 | 16,4/28,6 |
| <...>50-28-2 | 17\beta - \text{Эстрадиол} | н/д | + | 126 | 16,2/16,2 | 6,6 | 0,0308/0,0811 |
| <...>57-91-0 | 17\alpha - \text{Эстрадиол} | н/д | + | 80,1 | 25,4/26,8 | 0,0885 | 1,33/1,33 |
| <...>57-63-6 | Этинилэстрадиол | 1B | + | 142 | 9,47/42,8 | 0,482 | 0,0681/0,0152 |
| <...>434-22-0 | 19-Нортестостерон | н/д | + | 0,031 | 0,00486/0,00486 | 98,1 | 35,9/35,9 |
| <...>599-64-4 | 4-Кумилфенол | н/д | + | 0,107 | 0,415/0,00405 | 0,00739 | 0,00695/н/д |
| <...>140-66-9 | 4-Терт-октилфенол | 1B | + | 0,124 | 0,362/0,0697 | 0,0125 | 0,0153/0,00448 |
| <...>0-05-7 | 2,2-Бис(4-гидроксифенил)пропан (Бисфенол A) | 1A | + | 0,195 | 0,201/0,201 | 0,03 | 0,0165/0,011 |
| <...>5-68-7 | Бутилбензилфталат | 1B | + | 0,00318 | 0,00429/0,00452 | 0,0168 | 0,00228/0,00228 |
| <...>479-13-0 | Куместрол | 2 | + | 0,264 | 0,186/0,186 | н/д | 0,017/0,014 |
| <...>56-53-1 | Диэтилстильбестрол | 1A | + | 88,9 | 13,4/13,4 | 0,0136 | 0,0157/0,0157 |
| <...>20-47-8 | Этилпарабен | 1B | + | н/д | 0,000564/0,00796 | 0 | 0/н/д |
| <...>446-72-0 | Генистеин | 1B | + | 0,12 | 0,0595/0,0508 | 0 | 0,0548/0,0147 |
| <...>520-18-3 | Кемпферол | н/д | + | 0,029 | 0,0097/0,011 | н/д | 0,0457/0,0136 |
| <...>43-50-0 | Хлордекон | 1B | + | 0,0155 | 0/0 | 0,0186 | 0,000756/0,000756 |
| <...>4-16-2 | мезо-Гексэстрол | н/д | + | 37,6 | 0,194/0,194 | 0,0127 | 0,017/0,017 |
| <...>72-43-5 | Метоксихлор | 1B | + | 0,00238 | 0,00147/н/д | 0,0159 | 0,000856/н/д |
| <...>68-23-5 | Норэтинодрел | н/д | + | 0,282 | 0,0316/0,0316 | 2,36 | 43,1/12,7 |
| <...>1912-24-9 | Атразин | 1B | - | 0 | 0/0 | 0 | 0,00137/0 |
| <...>50-22-6 | Кортикостерон | н/д | - | 0 | 0,0062/0 | 0,299 | 16,3/5,86 |
| <...>55277-42-1 | Кетоконазол | 1B | - | 0 | 0/0 | н/д | 0,0222/0 |
| <...>330-55-2 | Линурон | 2 | - | 0 | 0/0 | 0,0259 | 0,0107/0 |
| <...>50-55-5 | Резерпин | 1B | - | 0 | 0/0 | н/д | 0,0222/0 |
| <...>52-01-7 | Спиронолактон | н/д | - | 0 | 0/0 | 3,08 | 0/0 |
| <...>66575-29-9 | Форсколин | н/д | н/д | н/д | 0,0159/0,00436 | н/д | 36,7/36,5 |
| <...>67747-09-5 | Прохлораз | 1B | н/д | 0 | 0/0 | н/д | 0,0154/0,00553 |
| <...>25-84-8 | Аминоглютетимид | н/д | н/д | н/д | 0,00765/0 | н/д | 0,00882/0,00244 |
| <...>002-61-3 | Гонадотропин | н/д | н/д | н/д | н/д | н/д | н/д |
| <...>61-82-5 | 2-Амино-1,3,4-триазол (Амитрол) | 1B | н/д | 0 | 0/0 | 0 | 0,00806/0 |
| <...>50-32-8 | Бензо(а)пирен | 1B | н/д | 0 | 0,0104/0,0104 | 0,00428 | 0/0,00494 |
| <...>20-92-8 | Бис(4-гидроксифенил)метан (Бисфенол F) | 1B | н/д | 0,0719 | 0,209/0,106 | 0,00692 | 0,0399/0,0468 |
| <...>0-09-1 | Бис(4-гидроксифенил)сульфон (Бисфенол S) | 1B | н/д | 0,0055 | 0,115/0,0837 | 0 | 0,0116/0,0142 |
| <...>478-61-1 | 4-[1,1,1,3,3,3-Гексафтор-2-(4-гидроксифенил)проп-2-ил]фенол (Бисфенол AF) | 1B | н/д | 0,774 | 0,196/0,196 | 0,0442 | 0,0156/0,0217 |
| <...>7-40-7 | 4,4'-(1-Метилпропилиден)бисфенол (Бисфенол B) | 1B | н/д | 0,593 | 0,0919/0,0919 | 0,0208 | 0,0346/0,02 |
| <...>06-99-0 | Бута-1,3-диен | 1B | н/д | н/д | 0/0 | н/д | 0/0 |
| <...>99-76-3 | Метил-4-гидроксибензоат (Метилпарабен) | 1B | н/д | н/д | 0,000249/0,0203 | 0 | 0/н/д |
| <...>4-26-8 | Бутил-4-гидроксибензоат (Бутилпарабен) | 1B | н/д | 0,018 | 0,0114/0,0144 | н/д | 0,0109/н/д |
| <...>20-83-2 | 2,4-Дихлорфенол | 1B | н/д | 0 | 0/0 | 0 | 0/0 |
| <...>7554-50-1 | 2-Октилфенол | 1B | н/д | н/д | 0,0765/0,098 | н/д | 0.00682/0,00682 |
| <...>18-74-1 | Гексахлорбензол | 1B | н/д | н/д | 0,0144/0,000414 | н/д | 0,0393/0,00682 |
| <...>31-57-7 | 2-Гидрокси-4-метоксибензофенон (Бензофенон-3) | 1B | н/д | 0 | 0,0103/0,00278 | 0 | 0,00801/0,0237 |
| <...>03-90-2 | N-(4-Гидроксифенил)ацетамид (Ацетаминофен) | 1B | н/д | 0 | 0,00128/0,00128 | 0 | 0/0 |
| <...>01-77-9 | 4,4'-Диаминодифенилметан | 1B | н/д | 0 | 0,0001/0 | 0 | 0/0 |
| <...>6-12-8 | 1,2-Дибром-3-хлорпропан | 1A | н/д | 0 | 0/0 | 0 | 0/0 |
| <...>83-18-1 | Дибутилоловодихлорид | 1B | н/д | н/д | 0,000932/0,000932 | н/д | 0,0744/0,000932 |
| <...>002-53-5 | Дибутилстаннан | 1B | н/д | н/д | 0/0 | н/д | 0/0 |
| <...>4-74-2 | Дибутилфталат | 1B | н/д | н/д | 0,0009/0,000726 | н/д | 0,00686/0,00336 |
| <...>4-75-3 | Дигексилфталат | 1B | н/д | 0,000918 | 0,000556/0,000556 | 0 | 0,000908/0,000908 |
| <...>4-69-5 | Диизобутилфталат | 1B | н/д | 0,000452 | 0,000814/0,000636 | н/д | 0,00686/0 |
| <...>31-11-3 | 1,2-Диметилбензол-1,2-дикарбонат (Диметилфталат) | 1B | н/д | 0 | 0,000178/0,000726 | н/д | 0,00902/0,00655 |
| <...>17-84-0 | Диоктилфталат | 1B | н/д | н/д | 0,000616/0,00074 | н/д | 0/0 |
| <...>4-61-7 | Дициклогексилфталат | 1B | н/д | 0,00105 | 0,000989/0,000989 | 0,00454 | 0/0 |
| <...>4-66-2 | Диэтилфталат | 1B | н/д | 0 | 0,000726/0,000726 | 0 | 0,00566/0,00336 |
| <...>376-20-9 | Моно(2-этилгексил)фталат | 1B | н/д | 0,00132 | 0/0 | н/д | 0,00686/0,0035 |
| <...>634-04-4 | 2-Метил-2-метоксипропан | 1B | н/д | н/д | 0/0,000142 | н/д | 0/0 |
| Примечание: в числителе расчетные данные с использованием профилировщика «Estrogen Receptor Binding», а в знаменателе — «rtER Expert System — USEPA»; «+» — положительный результат (эффект присутствует); «-» — отрицательный результат (эффект отсутствует); «н/д» — отсутствуют экспериментальные данные или программа не совершила расчет по причине отсутствия достаточного числа аналогов с экспериментальными данными. <*> — подкласс опасности химического вещества по эндокринному эффекту, установленный в соответствии с методическими документами <17>. <**> — Duijndam B., Tedeschi M. et all. Evaluation of an imaging-based in vitro screening platform for estrogenic activity with OECD reference chemicals. Toxicology in Vitro — 2022. — V. 81 (105348). — p. 11. Для целей моделирования набор данных был разделен на пять диапазонов активности по отношению к значениям RBA. Сильные связывающие вещества (RBA > 10%), умеренные (10% > RBA > 0,1%), слабые связывающие вещества (0,1% > RBA > 0,001%), мало связывающие (0,001% > RBA > 0%) и неактивные (не связывающие) химические вещества (RBA 0%) [[95]](#p102306). | |||||||
РЕКОМЕНДУЕМЫЕ ПРОГРАММНЫЕ СРЕДСТВА, ПОЗВОЛЯЮЩИЕ ОЦЕНИВАТЬ ВОЗДЕЙСТВИЕ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ НА ЭНДОКРИННУЮ СИСТЕМУ ОРГАНИЗМА <18>
<18> Примечание: допускается использование аналогичных или с лучшими характеристиками программных средств для расчета физико-химических и (эко)токсикологических параметров химических веществ и смесей, поиска аналогов, сбора литературных данных, моделирования процессов метаболизма химических веществ, построения моделей.
Список рекомендуемых программных средств:
2. Виртуальные модели для оценки свойств химических веществ (англ. Virtual models for property Evaluation of chemicals within a Global Architecture, Vega Qsar): vegahub.eu (в свободном доступе).
3. Количественное соотношение структура-свойства на основе искусственного интеллекта (англ. Artificial Intelligence-based Quantitative Structure-Activity Relationship, aiQSAR): vegahub.eu/portfolio-item/aiqsar (в свободном доступе).
4. Виртуальная среда химического моделирования (англ. Online Chemical Modeling Environment, OCHEM): ochem.eu/home/show.do (в свободном доступе).
5. Программное обеспечение для оценки токсичности (англ. Toxicity Estimation Software Tool (TEST): epa.gov/comptox-tools/toxicity-estimation-software-tool-test (в свободном доступе).
6. «Дерево решений» (англ. Decision Forest): www.fda.gov/science-research/bioinformatics-tools/decision-forest (в свободном доступе).
7. Виртуальная токсикологическая лаборатория (англ. VirtualToxLab): virtualtoxlab.org/ (в свободном доступе).
8. Всеобъемлющий скрининг (англ. PanScreen): panscreen.ch/ (в свободном доступе).
9. Синтелли (англ. Syntelly): syntelly.ru (в свободном доступе).
10. Датская база данных «Количественное соотношение структура-свойства» (англ. Danish (Q)SAR Database): qsarmodels.food.dtu.dk/index.html (в свободном доступе).
11. Метаболизм лекарственных средств (англ. Drug Metabolism, MetaDrug): portal.genego.com (в свободном доступе).
НАЗНАЧЕНИЕ (ЦЕЛИ, ЗАДАЧИ), КОНТРОЛЬНЫЕ ТОЧКИ, ОГРАНИЧЕНИЯ ПРИОРИТЕТНЫХ МЕТОДОВ ТЕСТИРОВАНИЯ ЭНДОКРИННЫХ РАЗРУШИТЕЛЕЙ
ОБОБЩЕННЫЕ УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ ПРИОРИТЕТНЫХ МЕТОДОВ ТЕСТИРОВАНИЯ ЭНДОКРИННЫХ РАЗРУШИТЕЛЕЙ
Метод ОЭСР № 407 «Изучение пероральной токсичности при повторном воздействии в 28-дневных опытах на грызунах»
Метод ОЭСР № 408 «Изучение пероральной токсичности при повторном воздействии в 90-дневных опытах на грызунах»
Метод ОЭСР № 409 «Изучение пероральной токсичности при повторном воздействии в 90-дневных опытах на негрызунах»
Метод ОЭСР № 412 «Оценка подострой токсичности при ингаляционном поступлении в 28-дневном исследовании»
Метод ОЭСР № 413 «Оценка субхронической токсичности при ингаляционном поступлении в 90-дневном исследовании»
Метод ОЭСР № 414 «Оценка токсического действия на пренатальное развитие»
Метод ОЭСР № 416 «Оценка токсического действия на пренатальное развитие»
Метод ОЭСР № 421 «Оценка репродуктивной/эмбриональной токсичности скрининговым методом»
Метод ОЭСР № 422 «Оценка репродуктивной/эмбриональной токсичности скрининговым методом»
Метод ОЭСР № 440 «Утеротропный биотест на грызунах: краткосрочный скрининг-тест для выявления эстрогенной активности»
Метод ОЭСР № 441 «Тест Хешбергера на крысах: краткосрочное скрининговое исследование для выявления (анти)андрогенных свойств»
Метод ОЭСР № 443 «Расширенное изучение репродуктивной токсичности на одном поколении»
Метод ОЭСР № 455 «Исследование транскрипционной активации, опосредованной стабильно трансфицированным человеческим \alpha - \text{рецептором} эстрогена, для выявления эстроген-агонистической активности веществ»
Метод ОЭСР № 456 «H295R in vitro тест на стероидогенез с использованием человеческой клеточной линии адренокарциномы»
Метод ОЭСР № 458 «Анализ транскрипционной активации стабильно трансфицированного рецептора андрогена человека для определения андрогенной агонистической и антагонистической активности химических веществ»
Обзор эталонных стандартов и критериев приемлемости для трех методов определения свойств агонистов
Обзор эталонных стандартов и критериев приемлемости для трех методов определения свойств антагонистов
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ССЫЛКИ
1. Федеральный закон от 30.03.1999 № 52-ФЗ «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения».
2. Р 2.1.10.3968-23 «Руководство по оценке риска здоровью населения при воздействии химических веществ, загрязняющих среду обитания».
3. Р 1.2.3156-13 «Оценка токсичности и опасности химических веществ и их смесей для здоровья человека».
4. МР 1.2.0321-23. «Оценка и классификация опасности репродуктивных токсикантов».
5. МР 1.2.0313-22. «Оценка и классификация опасности эндокринных разрушителей»
6. МР 1.2.0275-22 «Классификация токсичности и опасности химических веществ и смесей в соответствии с Согласованной на глобальном уровне системой классификации и маркировки (СГС)».
7. Пособие «Общее пособие по прогнозированию токсических свойств химических веществ».
8. Пособие «Прогнозирование репротоксического действия химических веществ».
9. Maria E. Street, Karine Audouze, Juliette Legler, Hideko Sone, Paola Palanza. Endocrine Disrupting Chemicals: Current Understanding, New Testing Strategies and Future Research Needs. Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 933.
10. Pötzl B, Kürzinger L, Stopper H, Fassnacht M, Kurlbaum M, Dischinger U. Endocrine Disruptors: Focus on the Adrenal Cortex. Horm Metab Res. 2024 Jan; 56(1): 78 — 90.
11. Modica R, Benevento E, Colao A. Endocrine-disrupting chemicals (EDCs) and cancer: new perspectives on an old relationship. J Endocrinol Invest. 2023 Apr; 46(4): 667 — 677.
12. Wan MLY, Co VA, Ei-Nezami H. Endocrine disrupting chemicals and breast cancer: a systematic review of epidemiological studies. Crit Rev Food Sci Nutr. 2022; 62(24): 6549 — 6576.
13. Macedo S, Teixeira E, Gaspar TB, Boaventura P, Soares MA, Miranda-Alves L, Soares P. Endocrine-disrupting chemicals and endocrine neoplasia: A forty-year systematic review. Environ Res. 2023 Feb 1; 218: 114869.
14. Sharma N, Kumar V, S V, Umesh M, Sharma P, Thazeem B, Kaur K, Thomas J, Pasrija R, Utreja D. Hazard identification of endocrine-disrupting carcinogens (EDCs) in relation to cancers in humans. Environ Toxicol Pharmacol. 2024 Aug; 109: 104480.
15. Changhwan Ahn, Eui-Bae Jeung. Endocrine-Disrupting Chemicals and Disease Endpoints. Int J Mol Sci. 2023 Mar 10; 24(6): 5342.
16. Toledano JM, Puche-Juarez M, Moreno-Fernandez J, Gonzalez-Palacios P, Rivas A, Ochoa JJ, Diaz-Castro J. Implications of Prenatal Exposure to Endocrine-Disrupting Chemicals in Offspring Development: A Narrative Review. Nutrients. 2024 May 21; 16(11): 1556.
17. Hassan S, Thacharodi A, Priya A, Meenatchi R, Hegde TA, R T, Nguyen HT, Pugazhendhi A. Endocrine disruptors: Unravelling the link between chemical exposure and Women's reproductive health. Environ Res. 2024 Jan 15: 241; 117385.
18. Silva ABP, Carreiró F, Ramos F, Sanches-Silva A. The role of endocrine disruptors in female infertility. Mol Biol Rep. 2023 Aug; 50(8): 7069 — 7088.
19. Corti M, Lorenzetti S, Ubaldi A, Zilli R, Marcoccia D. Endocrine Disruptors and Prostate Cancer. Int J Mol Sci. 2022 Jan 21; 23(3): 1216.
20. Kiess W, Haeusler G. Endocrine-disrupting chemicals. Best Pract Res Clin Endocrinol Metab. 2021 Sep; 35(5): 101566.
21. Muñoz JP. The impact of endocrine-disrupting chemicals on stem cells: Mechanisms and implications for human health. J Environ Sci (China). 2025 Jan; 147: 294 — 309.
22. Anelli V, Gatta E, Pirola I, Delbarba A, Rotondi M, Cappelli C. Thyroid impairment and male fertility: a narrative review of literature. Aging Male. 2024 Dec; 27(1): 2310303.
23. Hansel MC, Rosenberg AM, Kinkade CW, Capurro C, Rivera — Núñez Z, Barrett ES. Exposure to Synthetic Endocrine-Disrupting Chemicals in Relation to Maternal and Fetal Sex Steroid Hormones: A Scoping Review. Curr Environ Health Rep. 2024 Sep; 11(3): 356 — 379.
24. Tian X, Qin B, Yang L, Li H, Zhou W. Association of phthalate exposure with reproductive outcomes among infertile couples undergoing in vitro fertilization: A systematic review. Environ Res. 2024 Jul 1; 252 (Pt 2): 118825.
25. Chaichian S, Khodabandehloo F, Haghighi L, Govahi A, Mehdizadeh M, Ajdary M, Varma RS. Toxicological Impact of Bisphenol A on Females' Reproductive System: Review Based on Experimental and Epidemiological Studies. Reprod Sci. 2024 Jul; 31(7): 1781 — 1799.
26. Tian X, Qin B, Yang L, Li H, Zhou W. Association of phthalate exposure with reproductive outcomes among infertile couples undergoing in vitro fertilization: A systematic review. Environ Res. 2024 Jul 1; 252(Pt 2): 118825.
27. Razak MR, Wee SY, Yusoff FM, Yusof ZNB, Aris AZ. Zooplankton-based adverse outcome pathways: A tool for assessing endocrine disrupting compounds in aquatic environments. Environ Res. 2024 Jul 1; 252(Pt 3): 119045.
28. Choi J, Rotter S, Ritz V, Kneuer C, Marx-Stoelting P, de Lourdes Marzo Solano M, Oertel A, Rudzok S, Ziková — Kloas A, Tralau T, Hensel A. Thresholds of adversity for endocrine disrupting substances: a conceptual case study. Arch Toxicol. 2024 Jul; 98(7): 2019 — 2045.
29. Souza DN, Mounteer AH, Arcanjo GS. Estrogenic compounds in drinking water: A systematic review and risk analysis. Chemosphere. 2024 Jul; 360: 142463.
30. Pan K, Xu J, Xu Y, Wang C, Yu J. The association between endocrine disrupting chemicals and nonalcoholic fatty liver disease: A systematic review and meta-analysis. Pharmacol Res. 2024 Jul; 205: 107251.
31. Yang Z, Zhang J, Wang M, Wang X, Liu H, Zhang F, Fan H. Prenatal endocrine-disrupting chemicals exposure and impact on offspring neurodevelopment: A systematic review and meta-analysis. Neurotoxicology. 2024 Jul; 103: 335 — 357.
32. Wiklund L, Pípal M, Weiss J, Beronius A. Exploring a mechanism-based approach for the identification of endocrine disruptors using Adverse Outcome Pathways (AOPs) and New Approach Methodologies (NAMs): A perfluorooctane sulfonic acid case study. Toxicology. 2024 May; 504: 153794.
33. Zhang Y, Wang B, Sun W, Wang G, Liu Z, Zhang X, Ding J, Han Y, Zhang H. Paternal exposures to endocrine-disrupting chemicals induce intergenerational epigenetic influences on offspring: A review. Environ Int. 2024 May; 187: 108689.
34. Pearce EN. Endocrine Disruptors and Thyroid Health. Endocr Pract. 2024 Feb; 30(2): 172 — 176.
35. Mínguez — Alarcón L, Gaskins AJ, Meeker JD, Braun JM, Chavarro JE. Endocrine-disrupting chemicals and male reproductive health. Fertil Steril. 2023 Dec; 120(6): 1138 — 1149.
36. Thacharodi A, Hassan S, Acharya G, Vithlani A, Hoang Le Q, Pugazhendhi A. Endocrine disrupting chemicals and their effects on the reproductive health in men. Environ Res. 2023 Nov 1; 236(Pt 2): 116825.
37. Kang IH, Kim HS, Shin JH, Kim TS, Moon HJ, Kim IY, Choi KS, Kil KS, Park YI, Dong MS, Han SY. Comparison of anti-androgenic activity of flutamide, vinclozolin, procymidone, linuron, and p, p'-DDE in rodent 10-day Hershberger assay. Toxicology. 2004 Jul 1; 199(2-3): 145 — 59.
38. Zhang Y, Yang Y, Tao Y, Guo X, Cui Y, Li Z. Phthalates (PAEs) and reproductive toxicity: Hypothalamic-pituitary-gonadal (HPG) axis aspects. J Hazard Mater. 2023 Oct 5; 459: 132182.
39. Eytcheson SA, Olker JH, Friedman KP, Hornung MW, Degitz SJ. Assessing utility of thyroid in vitro screening assays through comparisons to observed impacts in vivo. Regul Toxicol Pharmacol. 2023 Oct; 144: 105491.
40. Panagopoulos P, Mavrogianni D, Christodoulaki C, Drakaki E, Chrelias G, Panagiotopoulos D, Potiris A, Drakakis P, Stavros S. Effects of endocrine disrupting compounds on female fertility. Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol. 2023 Jun; 88: 102347.
41. Interdonato L, Siracusa R, Fusco R, Cuzzocrea S, Di Paola R. Endocrine Disruptor Compounds in Environment: Focus on Women's Reproductive Health and Endometriosis. Int J Mol Sci. 2023 Mar 16; 24(6): 5682.
42. Ahn C, Jeung EB. Endocrine-Disrupting Chemicals and Disease Endpoints. Int J Mol Sci. 2023 Mar 10; 24(6): 5342.
43. Dutta S, Sengupta P, Bagchi S, Chhikara BS, Pavlík A, Sláma P, Roychoudhury S. Reproductive toxicity of combined effects of endocrine disruptors on human reproduction. Front Cell Dev Biol. 2023 May 12; 11: 1162015.
44. Lahimer M, Abou Diwan M, Montjean D, Cabry R, Bach V, Ajina M, Ben Ali H, Benkhalifa M, Khorsi-Cauet H. Endocrine disrupting chemicals and male fertility: from physiological to molecular effects. Front Public Health. 2023 Oct 10; 11: 1232646.
45. Svingen T, Schwartz CL, Rosenmai AK, Ramhøj L, Johansson HKL, Hass U, Draskau MK, Davidsen N, Christiansen S, Ballegaard AR, Axelstad M. Using alternative test methods to predict endocrine disruption and reproductive adverse outcomes: do we have enough knowledge? Environ Pollut. 2022 Jul 1; 304: 119242.
46. Franssen D, Svingen T, Lopez Rodriguez D, Van Duursen M, Boberg J, Parent AS. A Putative Adverse Outcome Pathway Network for Disrupted Female Pubertal Onset to Improve Testing and Regulation of Endocrine Disrupting Chemicals. Neuroendocrinology. 2022; 112(2): 101 — 114.
47. Pergamon Press Inc., Maxwell House, Fairview Park, Elmsford. Reproductive Toxicology. — 2003. — V. 17. — p. 263.
48. Toxicological Sciences. Oxford University Press, 6277 Sea Harbor Drive, Orlando, FL 32887. — 2003. — V. 76. — p. 418.
49. National Toxicology Program Technical Report Series. Research Triangle Park, NC 27709. — 1982. — V. 76., No. 206 — p. 418.
50. Fundamental and Applied Toxicology. Academic Press, Inc., 1 E. First St., Duluth, MN 55802. — 1982. — V. 2. — p. 241.
51. Biology of Reproduction. Soc. for the Study of Reproduction, 309 W. Clark St., Champaign, IL 61820. — 1984. — V. 31. — p. 454.
52. EVHPAZ EHP, Environmental Health Perspectives. U.S. Government Printing Office, Supt of Documents, Washington, DC 20402. — 1983. — V. 47. — p. 365.
53. Formerly U.S. Clearinghouse for Scientific & Technical Information. National Technical Information Service. Springfield, VA 22161. — V.PB82-225632.
54. Some Halogenated Hydrocarbons. IARC Monographs on the Evaluation of the Carcinogenic Risk of Chemicals to Humans. — 1979. — V. 20.
55. Whorton D, Milby TH, Krauss RM, Stubbs HA. Testicular function in DBCP exposed pesticide workers. J Occup Med. 1979 Mar; 21(3): 161 — 6.
56. Ohta R, Takagi A, Ohmukai H, Marumo H, Ono A, Matsushima Y, Inoue T, Ono H, Kanno J. Ovariectomized mouse uterotrophic assay of 36 chemicals. J Toxicol Sci. 2012; 37(5): 879 — 89.
57. Ashby J, Odum J. Gene expression changes in the immature rat uterus: Effects of uterotrophic and sub-uterotrophic doses of bisphenol A. Toxicological Sciences. — 2004. — V. 82(2). — p. 458 — 467.
58. Yamasaki K, Takeyoshi M, Sawaki M, Imatanaka N, Shinoda K, Takatsuki M. Immature rat uterotrophic assay of 18 chemicals and Hershberger assay of 30 chemicals. Toxicology. 2003 Feb 1; 183(1-3): 93 — 115.
59. Ji K, Seo J, Kho Y, Choi K. Co-exposure to ketoconazole alters effects of bisphenol A in Danio rerio and H295R cells. Chemosphere. 2019 Dec; 237: 124414.
60. Yamasaki K, Sawaki M, Noda S, Imatanaka N, Takatsuki M. Subacute oral toxicity study of ethynylestradiol and bisphenol A, based on the draft protocol for the «Enhanced OECD Test Guideline no. 407». Arch Toxicol. 2002 Mar; 76(2): 65 — 74.
61. Jiang W, Cao L, Wang F, Ge H, Wu PC, Li XW, Chen GH. Accelerated reduction of serum thyroxine and hippocampal histone acetylation links to exacerbation of spatial memory impairment in aged CD-1 mice pubertally exposed to bisphenol-a. Age (Dordr). 2016 Dec; 38(5-6): 405 — 418.
62. Fernandez MO, Bourguignon NS, Arocena P, Rosa M, Libertun C, Lux-Lantos V. Neonatal exposure to bisphenol A alters the hypothalamic-pituitary-thyroid axis in female rats. Toxicol Lett. 2018 Mar 15; 285: 81 — 86.
63. Chen F, Zhou L, Bai Y, Zhou R, Chen L. Sex differences in the adult HPA axis and affective behaviors are altered by perinatal exposure to a low dose of bisphenol A. Brain Res. 2014 Jul 7; 1571: 12 — 24.
64. Goloubkova T, Ribeiro MF, Rodrigues LP, Cecconello AL, Spritzer PM. Effects of xenoestrogen bisphenol A on uterine and pituitary weight, serum prolactin levels and immunoreactive prolactin cells in ovariectomized Wistar rats. Arch Toxicol. 2000 Apr; 74(2): 92 — 8.
65. Schönfelder G, Friedrich K, Paul M, Chahoud I. Developmental effects of prenatal exposure to bisphenol a on the uterus of rat offspring. Neoplasia. 2004 Sep-Oct; 6(5): 584 — 94.
66. Murray TJ, Maffini MV, Ucci AA, Sonnenschein C, Soto AM. Induction of mammary gland ductal hyperplasias and carcinoma in situ following fetal bisphenol A exposure. Reprod Toxicol. 2007 Apr-May; 23(3): 383 — 90.
67. García — Arevalo M, Alonso-Magdalena P, Rebelo Dos Santos J, Quesada I, Carneiro EM, Nadal A. Exposure to bisphenol-A during pregnancy partially mimics the effects of a high-fat diet altering glucose homeostasis and gene expression in adult male mice. PLoS One. 2014 Jun 24; 9(6): el00214.
68. Marmugi A, Lasserre F, Beuzelin D, Ducheix S, Huc L, Polizzi A, Chetivaux M, Pineau T, Martin P, Guillou H, Mselli-Lakhal L. Adverse effects of long-term exposure to bisphenol A during adulthood leading to hyperglycaemia and hypercholesterolemia in mice. Toxicology. 2014 Nov 5; 325: 133 — 43.
69. Kim S, An BS, Yang H, Jeung EB. Effects of octylphenol and bisphenol A on the expression of calcium transport genes in the mouse duodenum and kidney during pregnancy. Toxicology. 2013 Jan 7; 303: 99 — 106.
70. Cha BS, Park JH, Koh SB, Chang SJ, Lee KM & Cha KT. Influence of occupational exposure to bisphenol a on reproductive health of male epoxy resin painters. Molecular & Cellular Toxicology. — 2007. — V. 3(4, Suppl. S). — p. 74.
71. Ohta R, Takagi A, Ohmukai H, Marumo H, Ono A, Matsushima Y, Inoue T, Ono H, Kanno J. Ovariectomized mouse uterotrophic assay of 36 chemicals. J Toxicol Sci. 2012; 37(5): 879 — 89.
72. Journal of Reproduction and Fertility. Biochemical Soc. Book Depot, POB 32, Commerce Way, Colchester, Essex CO2 8HP, UK — 1972. — V. 28. — p. 167.
73. Nihon Dokusei Byori Gakkai. Journal of Toxicologic Pathology. 3-25-8 Nishi-shinbashi, Minato-ku, Tokyo 105, Japan. — 2004. — V. 17. — p. 95.
74. c/o Dr. F.A. de la Iglesia, Warner-Lambert Co., Pharmaceutical Research Div. TOPADD Toxicologic Pathology. — 2004. — V. 32. — p. 192.
75. National Cancer Institute Carcinogenesis Technical Report Series. — 1980. NCI-TR-193.
76. Problems of Oncology. V/O Mezhdunarodnaya Kniga. — 1986. — V. 32(7). — p. 76.
77. Pergamon Press Inc., Maxwell House, Fairview Park, Elmsford. Reproductive Toxicology. — 2000. — V. 14. — p. 513.
78. Pergamon Press Inc., Maxwell House, Fairview Park, Elmsford. Food and Chemical Toxicology. — 2004. — V. 42. — p. 107.
79. Tran DN, Jung EM, Yoo YM, Ahn C, Kang HY, Choi KC, Hyun SH, Dang VH, Pham TN, Jeung EB. Depletion of follicles accelerated by combined exposure to phthalates and 4-vinylcyclohexene diepoxide, leading to premature ovarian failure in rats. Reprod Toxicol. 2018 Sep; 80: 60 — 67.
80. Study report (NTP study carried out to national standards that applied at the time). — 1982.
81. Gray LE Jr, Ostby J, Furr J, Price M, Veeramachaneni DN, Parks L. Perinatal exposure to the phthalates DEHP, BBP, and DINP, but not DEP, DMP, or DOTP, alters sexual differentiation of the male rat. Toxicol Sci. 2000 Dec; 58(2): 350 — 65.
82. Moral R, Santucci-Pereira J, Wang R, Russo IH, Lamartiniere CA, Russo J. In utero exposure to butyl benzyl phthalate induces modifications in the morphology and the gene expression profile of the mammary gland: an experimental study in rats. Environ Health. 2011 Jan 17; 10(1): 5.
83. Schmitt EE, Vellers HL, Porter WW, Lightfoot JT. Environmental Endocrine Disruptor Affects Voluntary Physical Activity in Mice. Med Sci Sports Exerc. 2016 Jul; 48(7): 1251 — 8.
84. Aso S, Ehara H, Miyata K, Hosyuyama S, Shiraishi K, Umano T, Minobe Y. A two-generation reproductive toxicity study of butyl benzyl phthalate in rats. J Toxicol Sci. 2005 Dec; 30 Spec No.: 39 — 58.
85. Nagao T, Ohta R, Marumo H, Shindo T, Yoshimura S, Ono H. Effect of butyl benzyl phthalate in Sprague-Dawley rats after gavage administration: a two-generation reproductive study. Reprod Toxicol. 2000 Nov-Dec; 14(6): 513 — 32.
86. Mikamo E, Harada S, Nishikawa J, Nishihara T. Endocrine disruptors induce cytochrome P450 by affecting transcriptional regulation via pregnane X receptor. Toxicol Appl Pharmacol. 2003 Nov 15; 193(1): 66 — 72.
87. Silano V, Bolognesi C, Castle L, Chipman K, Cravedi JP, Engel KH, Fowler P, Franz R, Grob K, Gürtler R, Husøy T, Kärenlampi S, Milana MR, Pfaff K, Riviere G, Srinivasan J, Tavares Poças MF, Tlustos C, Wölfle D, Zorn H, Benigni R, Binderup ML, Brimer L, Marcon F, Marzin D, Mosesso P, Mulder G, Oskarsson A, Svendsen C, Anastassiadou M, Carfi M, Saarma S, Mennes W. Safety of benzophenone to be used as flavouring. EFSA J. 2017 Nov 14; 15(11): e05013.
88. Toxicology and Applied Pharmacology. (Academic Press, Inc., 1 E. First St., Duluth. MN 55802). — 2005. — V. 203. — p. 9.
89. Archives of Toxicology. Springer. — 2002. — V. 76. — p. 727.
90. Hoshino N., Tani E., Wako Y. & Takahashi K. A two-generation reproductive toxicity study of benzophenone in rats. J Toxicol Sci 30. — 2005. — V. 30. — p. 5 — 20.
91. Bharali MK, Dutta K. Testicular toxicity of para-phenylenediamine after subchronic topical application in rat. Int J Environ Health Res. 2012; 22(3): 270 — 8.
92. Toxicology and Applied Pharmacology. — 2012. — V. 258. — p. 32.
93. JRPFA4 Journal of Reproduction and Fertility. Biochemical Soc. Book Depot. — 1964. — V. 7. — p. 21.
94. Li Z, Yin N, Liu Q, Wang C, Wang T, Wang Y, Qu G, Liu J, Cai Y, Zhou Q, Jiang G. Effects of polycyclic musks HHCB and AHTN on steroidogenesis in H295R cells. Chemosphere. 2013 Jan; 90(3): 1227 — 35.
95. Cavanagh JE, Trought K, Mitchell C, Northcott G, Tremblay LA. Assessment of endocrine disruption and oxidative potential of bisphenol-A, triclosan, nonylphenol, diethylhexyl phthalate, galaxolide, and carbamazepine, common contaminants of municipal biosolids. Toxicol In Vitro. 2018 Apr; 48: 342 — 349.
96. Pablos MV, Jiménez MБ , San Segundo L, Martini F, Beltrán E, Fernández C. Effects of dietary exposure of polycyclic musk HHCB on the metamorphosis of Xenopus laevis. Environ Toxicol Chem. 2016 Jun; 35(6): 1428 — 35.
СПРАВОЧНАЯ ИНФОРМАЦИЯ
В настоящем Руководстве используются следующие термины и определения <19>:
<19> Р 1.2.3156-13 «Оценка токсичности и опасности химических веществ и их смесей для здоровья человека», утвержденные врио руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главного государственного санитарного врача Российской Федерации 27.12.2013.
Агонист — лиганд, который связывается с определенным рецептором и вызывает клеточный ответ (например, активацию транскрипции), подобный действию эндогенного лиганда, связывающегося с тем же самым рецептором.
Андрогенная активность (андрогенность) — способность химического вещества действовать подобно естественному андрогенному гормону (например, тестостерону) в организме.
Андрогены — общее собирательное название группы стероидных мужских половых гормонов, производимых половыми железами (семенниками у мужчин и яичниками у женщин) и корой надпочечников и обладающих свойством в определенных концентрациях вызывать андрогенез, вирилизацию организма — развитие мужских вторичных и третичных половых признаков у обоих полов.
Антагонист — лиганд, который связывается с определенным рецептором, не вызывая биологического ответа, но при этом блокирует или затрудняет действие эндогенного лиганда.
Антиандрогенная активность (антиандрогенность) — способность химического вещества подавлять активность естественных андрогенных гормонов в организме.
Антитироидная активность — способность химического вещества подавлять активность естественных гормонов щитовидной железы в организме.
Антиэстрогенная активность (антиэстрогенность) — способность вещества подавлять действие 17\beta - \text{эстрадиола} , оказываемое через рецепторы эстрогена.
Гипоталамо-гипофизарно-гонадная ось — эндокринный комплекс, включающий в себя гипоталамус, гипофиз и гонадные железы — яичники у женщин и яички у мужчин. Ось регулирует репродуктивную и иммунную системы, контролирует развитие, размножение и старение.
Концентрация полумаксимального ингибирования (IC50) — концентрация тестируемого ингибирующего вещества (антагониста), при которой ингибирование составляет 50% от максимального.
Надежность — мера того, насколько данный метод анализа может воспроизводимо использоваться внутри и между лабораториями в течение долгого времени и при использовании одного и того же протокола. Надежность оценивается путем расчета внутри- и межлабораторной воспроизводимости.
Овариэктомия — хирургическая операция по удалению яичников.
Планшет контроля качества, QC-планшет — 24-луночный планшет, содержащий по две концентрации положительных и отрицательных контролей референсных веществ для мониторинга новой партии клеток или обеспечения положительного контроля при проверке тестируемых веществ.
Референсный стандарт — эталонное вещество, используемое для демонстрации правильности метода анализа. Референсным стандартом для STTA- и BG1Luc ER TA-анализов является 17\beta - \text{эстрадиол} .
Референсный эстроген — (положительный контроль, PC) — 17\beta - estradiol (E2, CAS 50-28-2).
Среднеэффективная концентрация (EC50) — концентрация, вызывающая ответ, равный среднему между базовой линией (MIN) и максимальным ответом (MAX).
Стероидогенез — последовательность биохимических реакций синтеза различных стероидных гормонов из холестерина. Несколько промежуточных продуктов стероидного синтеза, таких как прогестерон и тестостерон, сами по себе являются важными гормонами, но также служат предшественниками синтеза других гормонов.
Тестовый планшет (планшет для тестирования) — 24-луночный планшет, на котором клетки H295R экспонируют с тестируемым веществом. Тестовый планшет содержит контроль растворителя и тестируемое вещество в семи различных концентрациях, в трех повторах каждая.
Тироидная активность — способность химического вещества действовать подобно естественному гормону щитовидной железы (например, T3) в организме млекопитающих.
Уровень воздействия, при котором не наблюдается токсический (неблагоприятный) эффект (англ. No Observed Adverse Effect Level, NOAEL) — наивысшая доза, при которой в экспонируемой популяции по сравнению с соответствующей, не подвергающейся воздействию популяцией, включая сверхчувствительные группы, не наблюдается вредного эффекта.
Утеротропный — термин, используемый для описания положительного влияния на рост тканей матки.
Эндокринные разрушители — химические вещества, которые при попадании в организм воздействуют на него подобно гормонам, могут изменять функции гормональной системы, разрушают систему внутренней регуляции организма.
Эстрогенная активность (эстрогенность) — способность вещества действовать подобно эстрогенным гормонам.