ОФС.1.8.2.0011.18. Общая фармакопейная статья. Количественное определение мальтозы методом Хагедорна-Йенсена в препаратах из плазмы крови человека

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том II»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Количественное определение мальтозы методом Хагедорна-Йенсена в препаратах из плазмы крови человека	ОФС.1.8.2.0011.18
	Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для количественного определения мальтозы в лекарственных препаратах из крови, плазмы крови человека методом Хагедорна-Йенсена.

Метод основан на способности мальтозы (C12H22O11) восстанавливать в щелочной среде железо красной кровяной соли K3[Fe(CN)6] (гексацианоферрат (III) калия), превращая ее в желтую кровяную соль K4[Fe(CN)6] (гексацианоферрат (II) калия). Гексацианоферрат (III) калия реагирует с калия иодидом с выделением свободного йода, определяемого титрованием раствором натрия тиосульфата с использованием раствора крахмала в качестве индикатора.

Методика определения

Восстановление гексацианоферрата (III) калия в щелочной среде в гексацианоферрат (II) калия происходит по следующей схеме реакций:

2K3[Fe(CN)6] + 2KI = 2K4[Fe(CN)6] + I2

K_{3}[Fe(CN)_{6}]^{C12H22O11} \rightarrow K_{4}[Fe(CN)_{6}]

I2 + 2Na2S2O3 = 2NaI + Na2S4O6

В 4 стеклянные пробирки вносят по 5 мл 0,45% раствора цинка сульфата, 1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, добавляют в 2 пробирки по 0,1 мл испытуемого образца, в 1 пробирку 0,1 мл воды очищенной (контрольная проба), в 1 пробирку 0,1 мл 10% раствора мальтозы (раствор сравнения). Все пробирки помещают в кипящую водяную баню на 3 мин для осаждения белков. Пробирки охлаждают, содержимое фильтруют через бумажный фильтр. К 1 мл фильтрата добавляют 5 мл 5% раствора красной кровяной соли и помещают в кипящую водяную баню на 15 мин. Пробы охлаждают до комнатной температуры, вносят 3 мл 10% раствора калия иодида, 2 мл 3% раствора уксусной кислоты и перемешивают. Содержимое пробирок переносят в плоскодонные конические колбы вместимостью 100 мл, добавляют 0,1 мл 1% раствора крахмала в насыщенном растворе натрия хлорида и через 15 мин титруют 0,005 М раствором натрия тиосульфата до исчезновения темной окраски.

Определяют объем 0,005 М раствора натрия тиосульфата, пошедший на титрование контрольной пробы испытуемых образцов и 10% раствора мальтозы. Объем, пошедший на титрование 0,005 М раствора тиосульфата натрия, обратно пропорционален содержимому мальтозы в испытуемых образцах. Содержание мальтозы (C) в испытуемом образце в процентах (%) вычисляют по формуле:

C = \frac{V\text{к} - V\text{оп}}{V\text{к} - V\text{рс}} \cdot 10

где:

Vк — объем раствора натрия тиосульфата, пошедший на титрование контрольной пробы, мл;

Vрс — объем раствора натрия тиосульфата, пошедший на титрование раствора сравнения, мл;

Vоп — объем раствора натрия тиосульфата, пошедший на титрование опытной пробы; мл;

10 — коэффициент пересчета содержания мальтозы в растворе сравнения, в %.

Примечания

1. Приготовление 0,45% раствора цинка сульфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл вносят 4,5 г цинка сульфата 7-водного, доводят объем раствора водой очищенной до метки и перемешивают. Раствор хранят при комнатной температуре в течение 10 сут.

2. Приготовление 0,1 Н раствора натрия гидроксида из фиксанала.

Раствор готовят в соответствии с инструкцией по приготовлению фиксанала.

3. Приготовление 5% раствора гексацианоферрата (III) калия. В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 5,0 г гексацианоферрата (III) калия, 5,0 г натрия карбоната, доводят водой очищенной до метки и перемешивают. Раствор хранят при комнатной температуре в течение 2 мес.

4. Приготовление 10% раствора калия иодида. В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 10 г калия иодида, доводят объем раствора водой очищенной до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.

5. Приготовление 3% раствора уксусной кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят небольшое количество воды очищенной, 3,0 мл уксусной кислоты, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.

6. Приготовление насыщенного раствора натрия хлорида. 36 г натрия хлорида растворяют в 64 мл воды очищенной при температуре 20 °C при периодическом встряхивании. Перед использованием раствор декантируют и, при необходимости, отфильтровывают. Раствор хранят при комнатной температуре в течение 1 мес.

7. Приготовление 1% раствора крахмала в насыщенном растворе хлорида натрия. 1 г крахмала растворяют в 100 мл кипящего насыщенного раствора натрия хлорида. При необходимости раствор отфильтровывают через вату. Раствор хранят при температуре от 2 до 8 °C в течение 4 мес.

8. Приготовление 0,005 М раствора натрия тиосульфата.

Приготовление 0,1 Н раствора натрия тиосульфата из фиксанала. Раствор готовят в соответствии с инструкцией по приготовлению фиксанала.

Затем 12,5 мл 0,1 Н раствора натрия тиосульфата переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объем раствора водой очищенной до метки и перемешивают. Раствор хранят при комнатной температуре в течение 1 мес.

9. Приготовление 10% раствора мальтозы (раствора сравнения). 10,00 г (точная навеска) мальтозы, предварительно высушенной до постоянной массы, растворяют в воде очищенной в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Раствор мальтозы используют свежеприготовленным или стерилизуют для хранения пропусканием через мембранный фильтр (диаметр пор 0,22 мкм), либо разливают во флаконы и прогревают 10 ч при температуре 60 °C. Раствор хранят при температуре от 2 до 8 °C в течение 1 года.

---