---
title: "\"ОФС.1.8.2.0001.15. Общая фармакопейная статья. Иммунодиффузия в геле\""
number: "ОФС.1.8.2.0001.15"
issuer: "Министерство здравоохранения Российской Федерации"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/prikaz-ofs-1-8-2-0001-15"
---

## "ОФС.1.8.2.0001.15. Общая фармакопейная статья. Иммунодиффузия в геле"

# "ОФС.1.8.2.0001.15. Общая фармакопейная статья. Иммунодиффузия в геле"

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)

("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том II")

> [!IMPORTANT]
> В соответствии с Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749 данный документ введен в действие с 01.12.2018.
> Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте http://femb.ru/femb/pharmacopea.ph по состоянию на 01.06.2021.


<div align="center">

<a id="p100001"></a>**МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**

<a id="p100002"></a>**ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ**

</div>



| <a id="p100003"></a>Иммунодиффузия в геле | <a id="p100004"></a>ОФС.1.8.2.0001.15 |
| --- | --- |


<a id="p100005"></a>Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод, используемый для определения подлинности (видоспецифичности) лекарственных препаратов.
<a id="p100006"></a>Принцип метода иммунодиффузии в геле заключается в том, что в результате реакции антигена с антителом, взятых в эквивалентном соотношении, образуется преципитат в виде линий преципитации.
<a id="p100007"></a>Подлинность (видоспецифичность) подтверждается образованием линии преципитации с антигенами сыворотки, содержащей только видоспецифичные белки (например, при подтверждении видоспецифичности препаратов крови человека с сывороткой, преципитирующей белки крови человека).
<a id="p100008"></a>Проведение испытания
<a id="p100009"></a>Обработанную спиртом стеклянную пластину размером 26 x 75 мм или 90 x 120 мм или стеклянную чашку Петри диаметром 100 мм (в соответствии с указаниями нормативной документации) помещают строго горизонтально на предметный столик. Расплавленный агар (температура (50 +/- 5) °C) наносят на стеклянную пластину (или стеклянную чашку Петри) в количестве, достаточном для формирования слоя толщиной 2,4 - 2,6 мм (например, на стекло размером 26 x 75 мм необходимо нанести 5,5 - 6,0 мл). Стеклянную пластину (или стеклянную чашку Петри) на 30 - 40 мин помещают во влажную камеру эксикатора с небольшим количеством воды для застывания агара.
<a id="p100010"></a>В застывшем агаровом геле по трафарету готовят лунки для реагентов [(рис. 1)](#p100012), используя трубки-пробойники, изготовленные из латуни или нержавеющей стали, с заточенным концом со стороны внутреннего диаметра (2 - 3 мм) или используют стандартные штампы. Расстояние между внешними краями лунок должно быть равно 5 - 6 мм. Агаровые пробки из лунок аккуратно удаляют с помощью поперечно-срезанной пастеровской пипетки, не допуская отслаивания геля от стекла.

<a id="p100011"></a> ![рис. 1](https://i.bukva.ai/e3SBMoAW/img_0.png) 

<div align="center">

<a id="p100012"></a>Рисунок 1 - Схема нанесения реагентов

</div>


<a id="p100013"></a>1 - сыворотка, преципитирующая видоспецифичные белки (например, белки крови человека при подтверждении видоспецифичности препаратов крови человека);
<a id="p100014"></a>2 - стандартный реагент (например, контрольная сыворотка крови человека при подтверждении видоспецифичности препаратов крови человека);
<a id="p100015"></a>3, 4, 6 - сыворотки, преципитирующие иные белки (например, белки крови лошади, свиньи, крупного рогатого скота при подтверждении видоспецифичности препаратов крови человека);
<a id="p100016"></a>5 - отрицательный контроль (0,9% раствор натрия хлорида);
<a id="p100017"></a>7 - исследуемый препарат.

<a id="p100018"></a>Лунки заполняют испытуемыми образцами в соответствии со схемой [(рис. 1)](#p100012) в объеме, не превышающем объем лунки (объем вносимых образцов указывают в нормативной документации).
<a id="p100019"></a>Стеклянную пластину (или стеклянную чашку Петри) с агаровым гелем помещают во влажную камеру и выдерживают при комнатной температуре в течение 24 ч или при температуре (5 +/- 3) °C в течение 48 ч.
<a id="p100020"></a>Учет результатов анализа проводят визуально путем выявления линий преципитации. Подтверждением специфичности иммунодиффузии является наличие линии преципитации стандартного реагента и соответствующей сыворотки, преципитирующей видоспецифичные белки. Например, при подтверждении видоспецифичности препаратов крови человека должны выявляться линии преципитации сыворотки, преципитирующей белки крови человека, с исследуемым препаратом и с контрольной сывороткой крови человека [(рис. 2)](#p100022).

<a id="p100021"></a> ![рис. 2](https://i.bukva.ai/e3SBMoAW/img_1.png) 

<div align="center">

<a id="p100022"></a>Рисунок 2 - Учет полученных результатов при подтверждении<br>
видоспецифичности препаратов крови человека

</div>


<a id="p100023"></a>1 - сыворотка, преципитирующая белки крови человека;
<a id="p100024"></a>2 - контрольная сыворотка крови человека (стандартный реагент);
<a id="p100025"></a>3 - сыворотка, преципитирующая белки крови лошади;
<a id="p100026"></a>4 - сыворотка, преципитирующая белки крови свиньи;
<a id="p100027"></a>5 - отрицательный контроль (0,9% раствор натрия хлорида);
<a id="p100028"></a>6 - сыворотка, преципитирующая белки крови крупного рогатого скота;
<a id="p100029"></a>7 - исследуемый препарат.

<a id="p100030"></a>Примечание
1. <a id="p100031"></a>Приготовление агарового геля. В химический стакан вместимостью 1000 мл вносят 12,5 г агара, добавляют 500 мл 0,9% раствора натрия хлорида и оставляют для набухания геля в течение 1 ч при комнатной температуре. Стакан с содержимым помещают в кипящую водяную баню и выдерживают до полного расплавления агара. Объем раствора геля доводят 0,9% раствором натрия хлорида до метки и перемешивают. Раствор агара фильтруют через марлю (2 - 3 слоя) и разливают во флаконы. Расплавленный агар должен быть прозрачным. Срок годности охлажденного агарового геля 1 мес при температуре хранения (5 +/- 3) °C. Допустимо применение агарового геля иного состава в соответствии с указаниями в нормативной документации.



<a id="p100032"></a>

---